液相色谱-质谱联用法同时测定人血浆中雷米普利和雷米普利拉的浓度

目的：建立同时测定人血浆中雷米普利和雷米普利拉浓度的液相色谱一质谱方法。方法：以喹那普利为内标，血浆样品经固相萃取小柱提取后，采用HPLC-MS（TOF）联用技术，以电喷雾（GSI）作为接口技术，以宽的m/z为数据采集范围检测后，选择准分子离子[M＋H]^＋作为检测离子，进行滤过、积分的方式检测，同时测定人血浆中雷米普利和雷米普利拉的浓度。结果：雷米普利和雷米普利拉的线性范围分别为1～80μg·L^-1和0．5～40pμg·L^-1，日内精密度与日间RSD均小于10％。结论：该测定方法具有灵敏、专一和快速的优点，可满足雷米普利在人体内药动学研究的要求。

LC-MS法测定人血浆中雷米普利及其活性代谢产物雷米普利拉的浓度

目的 建立LC-MS-MS法测定人血浆中雷米普利及其活性代谢产物雷米普利拉的浓度.方法 以依那普利为内标,采用甲醇-0.1%甲酸溶液（75∶25）为流动相,以Waters Atlantis C18色谱柱为分析柱,通过电喷雾电离源（ESI）,以选择离子反应监测（SRM）方式进行检测.用于定量分析的离子反应分别为m/z 417.3→234.3（雷米普利）、m/z 389.3→206.2（雷米普利拉）和m/z 377.3→234.2（依那普利）.结果 雷米普利和雷米普利拉分别在0.103～102.7 ng·mL-1和0.106～106.4 ng·mL^-1浓度范围内线性良好.最低检测限分别为0.05 ng·mL^-1和0.10 ng·mL^-1（S/N=5）.雷米普利和雷米普利拉的日内、日间精密度（RSD）均小于9%,低、中、高3个浓度的方法回收率均大于90%.结论 本法专属性强,样品处理方便,灵敏度高,适用于雷米普利临床药物动力学研究.

雷米普利片在健康人体的药代动力学和相对生物利用度

目的研究样机国产与进口雷米普利片在健康人体的药代动力学和相对生物利用度。方法 30例健康受试者随机分为试验组和对照组,分别服用国产雷米普利片和进口分装雷米普利片,剂量均为10 mg。血样经预处理后采用高效液相色谱(HPLC-MS)法测定。结果在药代动力学各个参数上,国产与进口制剂药物间均无显著性差异(P>0.05)。国产制剂的平均相对生物利用度雷米普利为(104.77±21.63)%,雷米普利拉为(102.57±22.54)%。结论国产和进口雷米普利片在药代动力学上无显著差异。

雷米普利胶囊在健康人体内的药动学研究

采用单剂量交叉实验设计,考察24名健康受试者口服雷米普利胶囊(受试制剂)及其片剂(参比制剂)5mg后的药物动力学。建立了LC-MS法测定血浆中代谢物雷米普利拉的浓度。采用C18柱,贝那普利为内标,以多反应监测(MRM)模式监测。两种制剂的cmax和tmax分别为(6.42±3.18)、(6.48±3.31)ng/ml和(3.31±1.47)、(3.04±1.14)h。受试制剂的相对生物利用度为(101.72±18.34)%。两者在人体的吸收速度和吸收程度无显著差异,表明两者生物等效。

雷米普利胶囊人体生物等效性研究

目的评价国产雷米普利胶囊与已上市的雷米普利片的人体生物等效性。方法18名男性健康志愿者随机交叉po雷米普利受试制剂和参比制剂各10 mg,采用液相色谱-质谱法同时测定雷米普利及其活性代谢物雷米普利拉的药物浓度。结果参比制剂及受试制剂的雷米普利的tmax分别为(0.53±0.14)和(0.58±0.17)h,ρmax分别为(42.34±13.37)和(43.84±13.65)μg.L-1,AUC0-72分别为(41.70±13.62)和(42.57±11.54)μg.h.L-1,t1/2(ke)分别为(2.55±1.55)和(2.40±0.85)h,雷米普利拉的tmax分别为(2.44±0.62)和(2.50±0.51)h,ρmax分别为(43.28±13.83)和(39.75±13.73)μg.L-1,AUC0-72分别为(311.34±99.34)和(312.34±97.74)μg.h.L-1,t1/2(ke)分别为(18.80±6.82)和(17.99±5.94)h,国产雷米普利胶囊相对生物利用度以雷米普利计为(104.44±13.07)%,以雷米普利拉计为(101.62±14.56)%。结论方差分析和双单侧t检验结果表明,两种制剂生物等效。

固相萃取HPLC-MS(TOF)法测定人血浆中雷米普利拉的浓度

目的:建立测定人血浆中雷米普利拉的 HPLC-MS(TOF)法。方法:以喹那普利为内标,血浆样品经固相萃取小柱提取后,采用 HPLC-MS(TOF)联用技术,以电喷雾(ESI)作为接口技术,选择雷米普利拉的准分子离子([M+H]^+,m/z 389)和内标喹那普利的准分子离子([M+H]^+,m/z 439)作为测定离子,测定人血浆中雷米普利拉的浓度。结果:雷米普利拉的线性范围为0.5～40ng·mL^(-1),日内精密度与日间精密度均小于10%。结论:该测定方法具有灵敏、专一和快速的优点,可满足雷米普利在人体内药代动力学研究的要求。

拉米普利酸对氧化型低密度脂蛋白损伤血管内皮细胞的保护作用

体外培养人脐静脉内皮细胞，观察拉米普利酸对由Cu2+、内皮细胞氧化修饰的LDL损伤内皮细胞的保护作用及与NO、cGMP的关系。结果发现：OLDL损伤内皮细胞，使MDA升高，NO、cGMP下降。拉米普利酸能有效对抗OLDL损伤内皮细胞的作用，降低MDA，升高NO、cGMP。一氧化氮合成酶拮抗剂硝基左旋精氨酸（N-L-Arg）能加强OLDL的损伤效应，且能部分拮抗拉米普利酸的保护作用。结果提示：拉米普利酸对OLDL损伤血管内皮细胞的保护作用与其促进内皮细胞NO合成和释放有关。

HPLC-MS测定人血浆中雷米普利和雷米普利拉浓度及其生物等效性研究

目的研究雷米普利片在健康人体内的相对生物利用度,并且进行生物等效性评价。方法采用随机交叉、自身对照试验设计,18名健康男性受试者随机等分成2组,先后单剂量口服2×5 mg雷米普利片受试制剂或参比制剂后,在设计时间点取静脉血,采用HPLC-MS法测定雷米普利及其活性代谢产物雷米普利拉的血浆浓度,计算主要药物代谢动力学参数。以方差分析方法对主要药物代谢动力学参数进行均数的差别检验,以双单侧t检验进行生物等效性判定。结果受试者分别口服受试制剂和参比制剂后,雷米普利的主要药物代谢动力学参数如下:AUC0～12、AUC0～∞、tmax、Cmax、t1/2分别为(73.5±46.9)μg.h.L-1和(76.9±44.5)μg.h.L-1、(80.5±47.3)μg.h.L-1和(84.8±47.2)μg.h.L-1、(0.7±0.2)h和(0.7±0.2)h、(41.67±26.02)μg.L-1和(42.48±27.88)μg.L-1、(5.0±1.7)h和(4.5±1.9)h。以雷米普利计算受试制剂对参比制剂的相对生物利用度为(95.55±17.36)%。雷米普利拉的主要药物动力学参数如下:AUC0～72、AUC0～∞、tmax、Cmax、t1/2分别为(146.7±43.8)μg.h.L-1和(148.2±42.2)μg.h.L-1、(160.5±49.2)μg.h.L-1和(159.0±45.4)μg.h.L-1、(1.7±0.7)h和(1.5±0.4)h、(13.34±6.86)μg.L-1和(15.01±9.13)μg.L-1、(22.7±5.2)h和(19.2±4.5)h。以雷米普利拉计算受试制剂对参比制剂的相对生物利用度为(99.03±13.75)%。结论受试制剂与参比制剂的主要药动学参数之间无统计学差异,受试制剂与参比制剂为生物等效制剂。

用DPPH自由基损伤血管内皮细胞功能的新方法

本研究在兔胸主动脉环模型上观察了二苯三硝基苯肼（ＤＰＰＨ）自由基对乙酰胆碱（ＡＣｈ）诱导的血管内在依赖性舒张（ＥＤＲ）反应的影响。结果显示：０．２５μｍｏｌ·Ｌ－１ＤＰＰＨ与血管环孵育１０ｍｉｎ，显著抑制了ＡＣｈ诱导的血管ＥＤＲ反应。此种抑制作用为可逆性。拉米普利和缓激肽能显著保护ＤＰＰＨ损伤的血管ＥＤＲ反应。用ＤＰＰＨ建立自由基损伤模型的方法具有简单、方便、可靠、重复性好等优点。

国产和进口雷米普利片的药动学和生物等效性

目的研究单剂量口服国产和进口雷米普利片在健康受试者体内的药动学特征,评价其是否具有生物等效性。方法采用随机、双交叉试验设计,24名健康男性受试者分别单次口服雷米普利片10 mg(2片)后血浆中雷米普利和雷米普利拉的浓度采用LC-MS/MS法测定,药动学参数用3P97程序进行计算。结果国产与进口制剂中雷米普利的ρmax分别为:(28.26±12.54)(、28.71±12.84)μg.L-1;tmax分别为:(0.61±0.54)、(0.51±0.10)h;AUC0→t分别为:(24.52±13.21)(、22.94±10.93)μg.h.L-1,其主要代谢产物雷米普利拉的ρmax分别为:(24.37±13.65)、(23.65±11.51)μg.L-1;tmax分别为:(2.21±0.81)(、1.96±0.67)h;AUC0→t分别为:(127.21±63.04)(、118.72±56.50)μg.h.L-1。国产及进口制剂的ρmax、AUC0→t、AUC0→∞等药动学参数经对数转换后的统计学处理(方差分析及双单侧t检验),国产与进口制剂药物间差异均无统计学意义(P>0.05)。国产制剂的相对生物利用度雷米普利为(105.42±22.23)%,雷米普利拉为(107.29±20.40)%(n=24)。结论国产与进口雷米普利片具有生物等效性。

雷米普利酸对内外源性自由基所致离体血管内皮依赖性舒张功能影响

目的:探讨雷米普利酸(Ramiprilat)对内外源性自由基所致家兔离体胸主动脉内皮依赖性舒张功能损伤的保护作用及其作用机制。方法:采用DPPH(0.25μmol/L)或通过次黄嘌呤(HX 0.06μmol/L)和黄嘌呤氧化酶(XO 2U/L)孵育家兔离体血管环10 min,诱导血管内皮依赖性舒张功能损伤。结果:DPPH和HX+XO诱导产生氧自由基超氧阴离子(O-.2),能明显抑制胸主动脉环对乙酰胆碱(Ach)诱导的血管内皮依赖性舒张反应。用雷米普利酸(5μmol/L)预孵育血管环20 min,可明显改善DPPH和HX+XO所致血管内皮依赖性舒张反应的抑制。而预先用选择性缓激肽B2受体阻断剂HOE140(10μmol/L)孵育血管10 min,可明显抑制雷米普利酸对DPPH和HX+XO所致血管内皮依赖性舒张反应的损伤保护作用。结论:雷米普利酸对DPPH和HX+XO所致血管内皮依赖性舒张反应的损伤具有保护作用,其机制至少部分是通过激活缓激肽B2受体所介导的。

雷米普利拉和氯沙坦单用及联用对小鼠心肌缺血-再灌注损伤的心肌保护作用比较

目的:观察血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)雷米普利拉与血管紧张素Ⅱ受体拮抗药(ARB)氯沙坦单用及联用对心肌缺血-再灌注损伤模型小鼠心肌的保护作用。方法:将32只C57BL/6小鼠随机均分成4组,包括对照组(生理盐水)、氯沙坦(8mg·kg-1)组、雷米普利拉(50μg·kg-1)组和氯沙坦+雷米普利拉(8mg·kg-1+50μg·kg-1)组,建立心肌缺血-再灌注损伤模型,于再灌注前5min静脉推注给药。术中监测相关指标如动脉血压、左室重量/体重(LVW/BW)、危险区域/左室重量比(AR/LV)、心率等,之后处死小鼠,对组织进行染色观察,以心肌梗死面积/危险区域(IS/AR)值作为保护心肌组织的检测指标。结果:各组小鼠动脉血压、LVW/BW、AR/LV和心率等无显著性差异;雷米普利拉和氯沙坦单用及联用组IS/AR值分别为(21.8±2.3)%、(20.8±3.2)%和(18.4±2.4)%,与对照组(39.6±2.0)%相比具有显著性差异(P<0.05),但单用组与联用组比较未见统计学差异。结论:雷米普利拉和氯沙坦均对小鼠心肌缺血-再灌注损伤具有心肌保护作用,但2药联用作用并不优于2药单用。