影响林蛙卵油提取率工艺参数的研究

以林蛙卵为原料进行林蛙卵油提取的研究。对影响林蛙卵油提取率的因素，如提取溶剂的选择、提取温度、提取时间及提取料液比等条件进行研究，并进行了正交试验。确定了获得最大提取率的条件。即：以石油醚（60～90）作提取剂；提取温度65℃；提取时间为5h；提取料液比为1：10。并对提制的林蛙卵粗油进行精制，得到透明浅黄棕色。

林蛙卵油的提取研究

利用林蛙卵提取林蛙卵油，并对影响林蛙卵油提取率的因素，如提取溶剂的选择、提取温度、提取时间及提取料液比等条件进行研究，通过正交试验确定获得最大林蛙卵油产率的条件。即：以石油醚（30～60）作为提取剂；提取温度65℃；提取时间为4h；提取料液比为1：9。并对提制的林蛙卵粗油进行精制。得到具有透明黄色，鱼腥味道的林蛙卵油。

超临界CO_2流体萃取林蛙卵油的工艺研究

根据超临界流体萃取的基本原理,分析了超临界CO2流体萃取林蛙卵油的主要因素,探讨了萃取压力、温度、时间、CO2流量及水分含量对萃取得率的影响。通过正交实验和单因素试验,研究了萃取得率与各因素之间的关系,并得到了最佳萃取工艺:萃取压力35MPa、萃取温度40℃、萃取时间2.0h,林蛙卵水分含量应低于10%。

林蛙油提取物对过氧化氢诱导MC3T3-E1损伤的保护

目的研究林蛙油提取物(ranaoilextract,ROE)对过氧化氢致小鼠成骨细胞(MC3T3-E1)损伤的保护作用。方法采用MTT方法检测细胞活力,筛选林蛙油提取物促MC3T3-E1细胞生长的最佳给药浓度和时间,Western blotting法检测骨形态发生蛋白-2(BMP2)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)、骨钙素(osteocalcin)、Runt相关转录因子2(Runx2)蛋白表达。应用逆转录-聚合酶链反应(reversetranscription-polymerasechain reaction, RT-PCR)检测骨生长相关基因的表达。结果经过MTT法筛选, 400μg/mL、24 h为ROE的最佳给药浓度及时间,与空白对照组比较,模型对照组MC3T3-E1细胞ALP蛋白表达水平降低(P<0.05), Runx2、BMP2、Osteocalcin表达明显降低(P<0.01)。与模型对照组比较, ROE给药组中ALP、BMP2蛋白表达水平升高(P<0.05)Osteocalcin、Runx2蛋白表达水平明显升高(P<0.01),与空白组比较,模型组ALP、Runx2、BMP2基因表达均下调(P<0.05),Osteocalcin显著下调(P<0.01);与模型组比较,ROE给药组ALP、Runx2基因表达均上调(P<0.05), BMP2、Osteocalcin基因表达显著下调(P<0.01)。结论 ROE可以调控骨代谢基因和蛋白的表达水平,对H2O2损伤的MC3T3-E1老年型骨质疏松模型有一定的保护作用。

林蛙卵油的提取、成分分析及抗氧化活性研究

以林蛙卵为原料,采用超临界CO2提取法提取林蛙卵中的林蛙卵油,研究其成分含量和抗氧化活性。采用气相色谱-质谱法(GC-MS)联用对林蛙卵油的成分进行检测分析,确定成分及含量,并进行DPPH自由基清除能力试验、羟基自由基清除试验和超氧阴离子自由基清除试验确定林蛙卵油的抗氧化能力。通过单因素实验和正交试验确定最佳提取工艺为提取压力35 MPa,提取温度60℃,CO2流量10 L/h,提取时间150 min,此时林蛙卵油的提取率为34.26%。GC-MS结果显示林蛙卵油中含有34种脂肪酸,其中饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸相对含量分别为31.95%和68.05%。体外抗氧化试验结果表明林蛙卵油对DPPH自由基的IC50值为0.897 mg/mL,对羟基自由基的IC50值为1.392 mg/mL,对超氧阴离子的IC50值为1.687 mg/mL。林蛙卵油具有较强的体外抗氧化活性,在天然抗氧化剂和保健食品中有一定的开发利用价值。

基于配方配伍药效学及正交试验优选复方哈蟆油片配方组成及工艺参数

目的优选复方哈蟆油片配方及提取工艺。方法设黄芪-红景天(A)、黄芪-哈蟆油(B)、黄芪-红景天-哈蟆油(C)3个药物配伍组,每组分别设3个亚组和空白对照组,给不同剂量及配方的提取物30 d后,观察各组小鼠体质量和负重游泳时间。优选出复方哈蟆油片的最佳配方:采用L9(34)正交试验设计,以黄芪甲苷及红景天苷为考察指标,优选出最佳提取工艺条件。结果黄芪+红景天+哈蟆油中剂量组小鼠的游泳时间明显长于对照组(P<0.05)。复方哈蟆油片最佳水提工艺为加入8倍量水,煎煮3次,每次1.5 h。结论黄芪+红景天+哈蟆油配方具有显著缓解小鼠体力疲劳的作用。优选的提取工艺对各功效成分提取率均较高,可以为制剂大生产提供依据。

微波辅助提取林蛙卵油的工艺优化及脂肪酸组成分析

以林蛙卵为原料,以无水乙醇为提取剂,研究微波法对林蛙卵油提取率的影响。在单因素试验的基础上,进行响应面优化试验,研究料液比、浸泡时间、微波功率对林蛙卵油提取的影响。结果表明,提取最佳工艺条件为料液比1∶9.82(g/mL)、浸泡时间3.33 h、微波时间30 min、微波功率600 W;林蛙卵油的提取率可达到(20±0.67)%。与其他林蛙卵油提取方法比较,微波法辅助提取林蛙卵油具有得率高的优点。对得到的林蛙卵油采用气相色谱-质谱分析检测出27种脂肪酸,不饱和脂肪酸质量分数54.98%,其中以亚油酸、二十碳二烯酸、二十碳三烯酸、二十碳四烯酸、亚麻酸、棕榈反油酸、二十二碳五烯酸含量较高。