遮阴对猫爪草光合特性及叶片解剖结构的影响

【目的】探究不同遮阴程度对野生植物猫爪草光合特性和叶片解剖结构的影响,为深入了解其耐阴性以及开展规模化栽植提供理论基础。【方法】采用控制变量法,以盆栽猫爪草为试验材料,设置全光照(CK)、30%遮阴(T_(1))、50%遮阴(T_(2))、70%遮阴(T_(3))和90%遮阴(T_(4))5个处理,对各处理下叶片光合特性及解剖结构进行分析。【结果】(1)随着遮阴程度增加,猫爪草叶面积在T_(3)环境下达到最大值,而株高和茎粗逐渐降低。(2)随遮阴程度增加,叶片表观量子效率(AQE)先升后降,在T_(4)处理下显著低于其他处理,而光饱和点(LSP)、光补偿点(LCP)、暗呼吸速率(R_(d))和最大净光合速率(P_(n,max))逐渐降低;最大荧光(F_(m))、可变荧光(F_(v))、最大化学效率(F_(v)/F_(m))和PSⅡ潜在活性(F_(v)/F_(o))先升后降,初始荧光(F_(o))和热耗散的电子比率(φ_(Do))则先降后升。(3)随着遮阴程度的增加,叶片气孔密度先减后增,并在T3处理达到最小值,上下表皮厚度和海绵组织厚度逐渐降低,组织结构紧密度(CTR)先降后升,组织结构疏松度(SR)先升后降。(4)叶片栅栏组织、海绵组织、叶片厚度及上、下表皮厚度与Rd呈极显著或显著正相关关系;海绵组织厚度、CTR和SR与P_(n,max),以及栅海比(P/S)、SR与AQE均呈显著正相关关系;海绵组织厚度和SR与F_(o)呈显著负相关关系。【结论】猫爪草可以通过降低光合速率和改变叶片结构提高耐阴性,在全光照下生长良好,也能较好地适应30%~70%遮阴环境。

猫爪草固态发酵工艺优化及抗氧化活性研究

该试验以猫爪草(Ranunculus ternatus Thunb.)醇溶性浸出物的得率为评价指标,采用单因素试验及响应面法优化猫爪草固态发酵工艺,并分析发酵前后提取物主要成分含量和抗氧化能力的变化。结果表明,猫爪草粉末固态发酵最佳工艺为球毛壳菌(Chaetomium globosum)∶镰刀菌(Fusarium equiseti)=1∶1(V/V),发酵时间5 d,猫爪草粉末过筛目号40目,水与猫爪草粉末液料比0.7∶1(mL∶g),发酵温度30℃,接种量5%。在此条件下发酵猫爪草醇溶性浸出物得率为46.12%,且发酵后猫爪草水溶性浸出物、多糖含量较发酵前均有所下降,醇溶性浸出物、黄酮、皂苷、多酚、有机酸和总氨基酸的含量较发酵前均有所提高。发酵后醇溶性浸出物清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、2,2'-联氮-二-(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)、羟基自由基(·OH)的半抑制浓度(IC50)分别为4.88 mg/mL、3.29 mg/mL、7.36 mg/mL,较发酵前也均有所下降,表明猫爪草醇提取物发酵后的抗氧化能力有所上升,该研究为后续猫爪草发酵工艺的优化和发酵产品的开发提供理论支持。

猫爪草化学成分及药理作用研究进展

猫爪草(Ranunculus ternatus Thunb.)是20世纪50年代新发现的草药,药用历史较短,但因其具有明显的抗结核和抗肿瘤作用而受到许多学者的关注。随着猫爪草化学成分和药理作用研究的深入,了解到猫爪草具有解毒、消肿散结、祛痰的较好疗效,被广泛应用于甲状腺结节、甲状腺肿、结核、咽炎等疾病的治疗。猫爪草的主要化学成分有多糖类、黄酮类、苷类及有机酸、挥发油,具有抗肿瘤、抗结核等作用。对猫爪草的化学成分、药理作用及新型杂环化合物进行综述,旨在为猫爪草的进一步研究提供参考。

猫爪草灰霉病菌拮抗细菌的分离与筛选

为筛选出对猫爪草灰霉病菌(Botrytis cinerea)具有拮抗作用的细菌,本试验从不同植物根际土壤中分离细菌,通过平板对峙方法测定其对猫爪草灰霉病菌的拮抗作用并对其进行初步鉴定。结果表明:分离纯化的106株细菌,通过初筛,对猫爪草灰霉病菌具有拮抗作用的共有13株,其编号分别是BDYM-1、BDYM-2、BDHS-3、DFYM-1、SQBC-1、SQTS-2、SQBC-8、XJMH-1、NYHS-3、ZKFQ-1、ZKFQ-2、ZKFQ-3和ZKFQ-6;经过复筛,在初筛基础上选定了5株对猫爪草灰霉病病原菌抑菌效果较好的拮抗细菌,分别是BDYM-1、BDHS-3、SQTS-2、SQBC-8、ZKFQ-3;对这5株菌株进行细菌发酵液测定后,其中SQBC-8抑菌效果最好,抑菌率为64.4%,BDHS-3菌株抑菌效果相对稳定。通过形态特征观察进行了初步鉴定,鉴定结果为5种菌株均为革兰氏阳性菌。

ICP-AES法测定猫爪草中常量及微量元素

运用ICP -AES法对河南、新疆产猫爪草中常量及微量元素进行了测定。结果表明猫爪草含K ,Fe ,Ca,Cr,Mg ,Mn ,Zn ,Co,Cu ,Ni,Se ,Sr等多种常量及微量元素,微量元素Pb ,Cd ,As等的含量甚微;研究发现猫爪草块根中Zn/Cu值为3左右,与抗癌中药中微量元素的含量有Zn高Cu低的现象一致。

猫爪草化学成分及抗耐药结核活性研究

目的：研究猫爪草的化学成分及其体外抗耐药结核活性。方法：采用ODS、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶等多种柱色谱进行分离,利用NMR等波谱技术鉴定猫爪草的化学成分,利用绝对浓度法对分离得到的化合物进行抗耐药结核活性评价。结果：从猫爪草的抗耐药结核活性部位中分离得到7个化合物,分别鉴定为2-脱氧-D-核糖酸-1,4-内酯（1）、异麦芽酚-α-D-葡萄糖苷（2）、香草酸4-O-β-D-葡萄糖苷（3）、水杨苷（4）、正丁基-β-D-呋喃果糖苷（5）、3,4-二甲氧基苯甲酸（6）、咖啡酸（7）。结论：其中,化合物1~6为首次从毛茛属植物中分离得到。药敏试验表明,化合物1~4、6、7具有抗耐药结核活性。

猫爪草中黄酮类与苷类化学成分的研究

目的研究猫爪草的化学成分。方法采用溶剂提取和柱色谱分离等方法进行分离和纯化，根据化合物的理化常数和波谱数据鉴定其结构。结果从醋酸乙酯和正丁醇部位分离鉴定了9个化合物，分别鉴定为：粗贝壳杉黄酮-4’-甲醚（Ⅰ）、榧双黄酮（Ⅱ）、罗汉松双黄酮A（Ⅲ）、白果素（Ⅳ）、异银杏素（Ⅴ）、穗花杉双黄酮（Ⅵ）、猫爪草苷[4-氧代-5-（O—β-D-吡喃葡萄糖基）-戊酸-正丁基酯]（Ⅶ）、4-氧代-5-（O-β-D-吡喃葡萄糖基）-戊酸甲酯（Ⅶ）、苯甲醇。O-β-D-吡喃葡萄糖苷（Ⅸ）。结论化合物Ⅰ～Ⅵ为首次从本属植物中分离得到，Ⅶ是新的天然产物，Ⅸ为首次从该植物中分得。

猫爪草有效成份诱生肿瘤坏死因子的作用

就中药提取物对肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）的诱生作用做了一定的探索和研究。建立了用Ｌ－９２９细胞—结晶紫染色法结合Ｓ－１８０细胞～３ＨＴｄＲ同位素掺入法检测ＴＮＦ活性，并以此为筛选指标建立了药物筛选模型。用此筛选模型对３６味中草药进行了初步筛选发现：分属７个科的７味中草药的乙醇提取物对ＴＮＦ有不同程度的诱生作用，其中以毛茛科植物猫爪草效果最好。将猫爪草的乙醇萃取液浓缩后，经溶媒分级分离萃取及柱层析分离，得到单一的有效成份，结构分析证明为软脂酸。诱生出的ＴＮＦ通过单克隆抗体中和试验得到确证。

中药猫爪草氨基酸的测定

用氨基酸自动分析仪对河南、新疆、山东、湖北及安徽等5个产地猫爪草中氨基酸进行了分析。结果表明:猫爪草含15种氨基酸,氨基酸含量分别为9.49%、7.65%、10.7%、9.93%和8.46%。

猫爪草中的脂肪酸及有机酸的GC-MS分析

研究了用GC-MS法测定猫爪草中脂肪酸及有机酸的方法。河南产猫爪草块根粉碎后过20目筛，分别用石油醚（60～90℃）和乙醚回流提取6h，提取液经浓缩后进行甲酯化，并由GC-MS法对其脂肪酸及有机酸的成分进行分析和鉴定。分析结果表明：两种提取剂的提取结果基本一致，猫爪草乙醚提取物中检测出含有23种物质，鉴定出其中的15种脂肪酸和有机酸，包括十四烷酸、十六烷酸、十八烷酸、二十烷酸、二十二烷酸、亚油酸、亚麻酸等，其中不饱和脂肪酸占58.19％，亚油酸占35.68％。

猫爪草化学成分的研究

猫爪草化学成分的研究郭学敏，周卓轮，洪永福（上海第二军医大学药学院中西药研究室２００４３３）猫爪草为毛莨科植物小毛莨（ＲａｎｎｕｃｕｌｕｓｔｅｒｎａｔｕｓＴｈｕｎｂ．）的块根，收载于１９９０年版中国药典一部．猫爪草在中医临床上用于治疗咽喉炎、肺结核、...

超高效液相色谱-四极杆串联飞行时间质谱分析黄酮类化合物及小毛茛茎叶的成分

为了探索液相色谱-质谱联用(LC-MS)技术在快速识别中药及天然产物成分中的应用,以黄酮对照品为研究前体,药用植物小毛茛为研究对象,采用超高效液相色谱/二极管阵列检测器-电喷雾四极杆串联飞行时间质谱(UPLC/DAD-ESI/Q-TOF MS)分析了黄酮类化合物同系物及同分异构体的色谱、质谱特性。结果显示:黄酮氧苷和黄酮碳苷的紫外吸收光谱及二级质谱具有显著性差异,糖苷化位置同保留时间、二级质谱碎片及相对丰度具有相关性。将该方法应用于小毛茛茎叶醇提液的分析,结合其酸水解液的分析,解析了22个黄酮醇糖苷和3个苷元。方法简便,具有可操作性。

栽培密度对猫爪草产量及化学成分的影响

在大田试验条件下,研究了不同栽培密度对猫爪草产量和化学成分的影响。结果表明,M1(45万株/hm2)处理的猫爪草单株块根产量(2.160g)和产量(971.88kg/hm2)最高,M3(30万株/hm2)处理下有利于猫爪草总糖、多糖、黄酮及蛋白质成分的积累。综合产量和化学成分含量因素,M1(45万株/hm2)处理是最佳栽培密度。

猫爪草遗传多样性的ISSR分析

应用ISSR分子标记技术对信阳5种叶型猫爪草进行了ISSR分析,探索不同叶型猫爪草间的遗传多样性。结果表明,11个ISSR引物共扩增出137条带,多态性条带106条,多态性比率为77.37%。引物ISSR12能够区分猫爪草的5种叶型。提示ISSR标记适合于构建猫爪草的DNA指纹图谱、品种鉴定和遗传多样性分析。

不同栽培密度对猫爪草果期光合蒸腾特性的影响

在不同栽培密度条件下,利用CI-340便携式光合系统,对猫爪草果期的净光合速率、蒸腾速率及相关的生理因子(叶温、气孔导度、胞间CO2浓度)和生态因子(光合有效辐射、大气CO2浓度、气温、大气相对湿度)进行了测定分析,结果表明,随着密度的增加,净光合速率和气孔导度先缓慢增加后显著降低,蒸腾速率呈现高-低-高趋势,胞间CO2浓度随密度增加显著升高。经过相关性分析,影响猫爪草光合蒸腾特性的主要因子为大气相对湿度(RH)、大气CO2浓度(Ca)、气孔导度(Gs)和叶温(Tl)。在高密度条件下非气孔因素影响净光合速率(Pn)的变化,在中低栽培密度条件下,气孔因素影响净光合速率(Pn)的变化。

微波-超声波协同一步提取衍生化-气相色谱-质谱联用快速分析中药材猫爪草中的脂肪酸

建立了一种微波-超声波协同一步提取衍生化、气相色谱-质谱联用快速测定中药材猫爪草中低含量脂肪酸的方法。以总脂肪酸的色谱峰面积为响应指标,采用响应曲面法优化了主要工艺参数,其结果为:猫爪草粉末5.0 g,正己烷50.0 mL,微波功率500 W,反应温度50℃,催化剂用量0.30 g,甲醇用量4.0 mL,提取衍生化时间8 min。以内标法定量各个脂肪酸的含量,一步提取衍生化法获得的总脂肪酸峰面积((3.327±0.023)×107,n=3)和总不饱和脂肪酸含量((13.59±0.30)mg/g,n=3)明显高于传统方法((2.410±0.036)×107(n=3)和(12.05±0.34)mg/g(n=3))。该方法简化了复杂的样品处理过程,缩短了反应时间,降低了分析成本,改善了提取和衍生化效率,尤其是减少了不饱和脂肪酸的氧化和分解。该方法具有简单、快速和实用性的特点,是一种极具应用潜力的中药材中低含量脂肪酸的快速分析方法。

猫爪草块根·分株繁殖对产量与化学成分的影响

[目的]研究不同无性繁殖方式对猫爪草产量和化学成分的影响,确定合适的无性繁殖方式。[方法]以信阳野生猫爪草为繁殖材料进行分株繁殖和块根繁殖,测定其产量,采用蒽酮比色法测定总糖和多糖含量,采用差示分光光度法测定黄酮含量。[结果]分株繁殖产量比块根繁殖产量高,处理间差异达到0.05显著水平;分株繁殖总糖和多糖含量比块根繁殖含量低,分株繁殖黄酮含量高于块根繁殖,处理间总糖和黄酮含量差异达到0.05显著水平,多糖含量差异达到0.01显著水平。[结论]分株繁殖和块根繁殖对猫爪草块根外形影响不大。采用分株繁殖,并且适当在每个分株保留部分宿根的方式进行繁殖是目前猫爪草规范化栽培较为合适的方法。

不同肥料处理对猫爪草产量和化学成分的影响

在大田条件下,采用L8(27)三因素一次回归正交设计,研究了不同施肥处理对猫爪草产量和化学成分的影响。结果表明,在供试土壤肥力基础上,各肥料因素与产量呈正相关,氮磷、磷钾之间存在互作,氮磷互作对猫爪草产量的影响大于磷钾互作。每公顷施尿素326.1 kg、过磷酸钙666.6 kg、硫酸钾454.0 kg时,获得最大产量787.334 kg/hm2。肥料因素对各化学成分的影响较为复杂。

超滤法脱除猫爪草粗多糖中蛋白质的工艺研究

研究了超滤法脱除猫爪草粗多糖中蛋白质的工艺.以多糖保留率和蛋白脱除率为评价指标,考察了截留分子量、温度、压力、多糖浓度、时间对超滤效果的影响.当选用截留分子量(MWCO)30 000、温度25℃、压力0.10 MPa、多糖的浓度3.0 mg/m L时,超滤处理100 min,多糖保留率和蛋白脱除率分别为78.2%和77.1%,优于Sevag法和TCA法.超滤法是一种可行的脱除猫爪草粗多糖中蛋白质的方法.

三维全息原子场作用矢量用于猫爪草脂肪酸的构效关系研究

运用三维全息原子场作用矢量(3D-HoVAIF)对猫爪草中18种脂肪酸进行定量构效关系(QSAR)研究。采用逐步回归(stepwise multiple regression,SMR)进行变量筛选,偏最小二乘回归(partial least square regression,PLS)建立定量构效关系模型。所建模型复相关系数(R2cum)、留一法交互校验(CV)复相关系数(Qc2um)分别为0.977和0.946。结果表明,3D-HoVAIF能较好表征猫爪草中脂肪酸的结构信息,且所建模型具有较好稳定性和预测能力。