无机盐、维生素及生长调节剂对卵孢长根菇菌丝的影响

以卵孢长根菇菌株“Chang-202001”为供试菌株,采用平板培养法,在培养基中加入不同种类和质量浓度的无机盐、维生素和生长调节剂,研究了不同无机盐、维生素和生长调节剂对卵孢长根菇菌丝生长的影响,以期为高质量卵孢长根菇菌种的生产提供参考依据。结果表明:供试无机盐中,适量浓度的磷酸二氢钾、硫酸镁对卵孢长根菇菌丝生长有促进作用,而氯化钠、氯化钾、氯化钙、硫酸锌、硫酸锰、硫酸铜抑制卵孢长根菇菌丝的生长。当磷酸二氢钾质量浓度为2.0 g·L^(-1)时,卵孢长根菇菌丝生长速率最大,为5.06 mm·d^(-1)。供试维生素(维生素B1、维生素B_(2)、维生素B6、维生素C、叶酸和烟酸)在一定范围内均促进卵孢长根菇菌丝的生长,其中当烟酸质量浓度为4 mg·L^(-1)时,卵孢长根菇菌丝生长速率最大,为6.97 mm·d^(-1)。供试生长调节剂中,6-BA、2,4-D、GA_(3)抑制卵孢长根菇菌丝的生长,适量浓度的NAA促进卵孢长根菇菌丝的生长,当NAA浓度为1.0 mg·L^(-1)时,卵孢长根菇菌丝生长速率最大,为5.41 mm·d^(-1)。

卵孢长根菇液体发酵培养基配方优化

以卵孢长根菇菌株H1为试材,以菌丝生物量为主要评价指标,在碳氮源单因素试验的基础上,采用Plackett-Burman设计对影响卵孢长根菇液体发酵培养生物量的主效因素进行筛选,通过最陡爬坡试验及Box-Benhnken响应面法对卵孢长根菇液体发酵培养基成分进行优化,以期获取优良液体菌种,为工厂化大规模生产卵孢长根菇提供保障。结果表明,适合卵孢长根菇的最适碳源为玉米粉,最适氮源为豆粕粉。当摇床转速150 r/min、培养温度为25℃时,优化后卵孢长根菇液体发酵培养基成分为葡萄糖25.8 g/L、玉米粉26.0 g/L、KH_(2)PO_(4)1.0 g/L、豆粕粉1.5 g/L、酵母粉1.0 g/L、MgSO_(4)0.4 g/L、维生素B1(VB1)0.01 mg/L,其卵孢长根菇菌丝生物量可达23.2 g/L。与常规培养基对比,培养周期缩短3 d,菌丝活力更高。

卵孢小奥德蘑抗哈茨木霉菌株的筛选研究

以全国收集的26株卵孢小奥德蘑菌株为试材,采用人工抗逆境驯化和原生质体育种方法,研究了卵孢小奥德蘑菌株在逆境下的生长特性,以期为卵孢小奥德蘑优良菌株选育提供参考依据。结果表明:对采集的26株卵孢小奥德蘑菌株,经过(26℃,16 h;30℃,8 h)、(26℃,16 h;32℃,8 h)、(26℃,16 h;34℃,8 h)、(26℃,16 h;36℃,8 h)条件下进行耐高温菌株驯化,筛选出Sgw、H08gw、Lgw、Qgw、H09gw、H01gw等6株耐高温菌株;通过卵孢小奥德蘑菌株与哈茨木霉菌株的对峙试验,筛选出对木霉抗性较强的F2、Sgw、Lgw 3株菌株;以耐高温驯化菌株(Sgw、H08gw)、抗木霉菌株(F2、Sgw、Lgw)为母本进行原生质体融合,并在(26℃,16 h;32℃,8 h)条件下再生,筛选出4株抗逆性较强菌株Y1、Y4、Z1、Z9;经出菇验证,菌株Y4、Y1、Sgw耐高温,产量高,抗木霉污染。经对抗逆性菌株酶活性指标测定、抗性菌株转录组分析,发现抗木霉菌株菌丝细胞代谢能力,催化活性,细胞结构体等功能发生了变化,并通过信号转导、碳水化合物代谢、氨基酸代谢、过氧化物酶体等代谢通路,以达到抵御哈茨木霉侵染和高温胁迫的作用。Y4、Y1、Sgw菌株为该研究筛选的最终优良菌株,可作为生产上进一步优化培育。

不同覆土材料对二孢拟奥德蘑营养成分含量的影响

测定二孢拟奥德蘑子实体中水分、粗脂肪、总糖、粗多糖、粗纤维、蛋白质、总黄酮、总多酚的含量,以研究不同覆土材料对其营养成分含量的影响。结果显示,用红壤土、细黏土和粗黏土覆土出菇的二孢拟奥德蘑水分含量无显著差异(P>0.05)。在100 g干子实体中,3种覆土材料出菇的二孢拟奥德蘑在粗纤维、总黄酮含量上无显著差异;而粗脂肪、总糖、粗多糖、蛋白质、总多酚的含量均是覆粗黏土的最高。营养均衡评分结果显示,营养价值的均衡性按粗黏土、细黏土、红壤土的顺序递减。综上可知二孢拟奥德蘑采用粗黏土覆土出菇效果最好,综合营养成分评分最高,试验结果可为二孢拟奥德蘑的栽培提供参考。

三株黑皮鸡枞菌生物学特性比较

为了比较野生黑皮鸡枞菌(Hymenopellis raphanipes)与其他2个商业菌株的生物学和栽培学特性,对其特性进行了对比研究。筛选3株黑皮鸡枞菌的最适初始pH、培养温度和原种培养基配方,并对其在最适pH、适宜温度和最适培养基上的生长速度进行对比研究。结果表明,3株黑皮鸡枞菌的最适pH均为6;适宜温度为24~27℃;野生黑皮鸡枞菌的最适原种培养基为麦粒,2种商业黑皮鸡枞菌的最适原种培养基为玉米粒;野生黑皮鸡枞菌的菌丝长势和洁白程度均好于2种商业黑皮鸡枞菌,并且野生黑皮鸡枞菌栽培种的生长速度与其他2种商业菌株一致。

一株野生卵孢小奥德蘑菌株的鉴定与驯化栽培

在湖南省长沙市岳麓山采集到1株野生蘑菇,采用组织分离法获得纯培养菌株HCS,以卵孢小奥德蘑(Oudemansiella raphanipes)商业栽培菌株H1为对照,结合形态学和ITS序列分析对其进行鉴定,通过菌丝培养确定HCS菌丝最适生长温度,测定菌丝漆酶与过氧化物酶活性,对其进行覆土栽培驯化,观测其出菇特性与子实体农艺性状。结果表明:通过形态学分析,结合分子鉴定,确定HCS为卵孢小奥德蘑;HCS菌丝最适生长温度为24℃,菌丝漆酶活性为77.55 U/g,过氧化物酶活性为4680.15 U/g,均显著高于H1的,其中过氧化物酶活性是H1的2.56倍;HCS菌丝满袋时间为37 d,覆土后第38天开始出现幼菇;HCS整体菇形健壮,单菇鲜质量14.75 g;子实体菌盖厚度16.30 mm,菌盖直径31.77 mm,菌柄长度54.17 mm,菌柄直径14.07 mm,菌柄基部直径19.87 mm,菌柄颜色为浅褐色;HCS栽培过程中无菌包污染,其抗性强于栽培菌种H1的。综上可知,HCS是一种优异的种质资源,具有进一步开发利用的价值。

黑皮鸡枞的分子鉴定与营养需求研究

为了明确黑皮鸡枞的营养需求,促进其制种工艺的提高。以新疆麦盖提县人工栽培的菌株为试材,采用单因素试验分别对其母种和原种的营养需求进行试验。结果显示,黑皮鸡枞母种培养基中最佳碳源为麦芽糖,最佳氮源为酵母浸粉,加入1%的MgSO_(4)、CaCl_(2)及枣粉均能促进其菌丝生长,而NaCl和KH 2PO_(4)抑制其菌丝生长,菌丝培养最适温度为20~28℃,最适pH为5.5~6.0;原种培养基中将棉籽壳与木屑以7∶3比例混合作为主料使用效果明显。

基于形态特征和多基因联合序列鉴定卵孢长根菇蛛网病病原菌

从感染病害的卵孢长根菇(Oudemansiella raphanipes)子实体中获得1株真菌CG01,采用平板培养观察该菌的菌落及镜检其菌丝、分生孢子梗、分生孢子等形态特征,采用ITS、RPB1、RPB2及TEF序列对其进行系统发育分析,另外通过柯赫氏法则验证其致病性。此外研究不同温度(15、20、25、30、35℃)对该菌生长的影响。结果表明:引起卵孢长根菇蛛网病的病原菌是与Cladobotryum paravirescens及C.asterophorum亲缘关系较近的葡枝霉属(Cladobotryum)真菌,病原菌菌丝体的最适生长温度为25℃,本研究首次鉴定出引起卵孢长根菇蛛网病的病原菌。

双单杂交技术选育长根菇高品质抗病新菌株

【目的】利用双单杂交育种技术选育长根菇新菌株,并建立双单杂交后代的快速准确鉴定方法,以获得活性成分含量高、抗病性强的长根菇优质菌株。【方法】利用双单杂交技术进行长根菇杂交育种,通过拮抗试验、细胞核染色观察和SNP位点分析对双单杂交后代进行鉴别,以液体深层发酵和比色法测定杂合菌株的小奥德蘑酮产量,并通过对峙培养鉴定杂合菌株的木霉抗性。【结果】通过对长根菇亲本菌株OuE进行单孢分离,获得14株单核菌丝后代,编号依次为OuE01~OuE14。将获得的单核菌丝后代与亲本双核体菌株OuC进行双单杂交,经拮抗试验和SNP位点分析共筛选获得14株双单杂交后代。经过与两个亲本菌株(OuC和OuE)比较发现,杂交后代OuCE02、OuCE08和OuCE12的菌丝平均生长速度分别为16.00、16.10和15.30 mm/d,均显著高于两个亲本菌株(P<0.05);杂交后代OuCE03、OuCE05、OuCE08和OuCE10的菌丝发酵液小奥德蘑酮含量较亲本菌株OuC分别提高6.07%、47.66%、4.67%和15.42%;杂交后代OuCE01和OuCE08显示出较亲本菌株更强的木霉抗性。其中,杂交后代OuCE08在菌丝生长速度、小奥德蘑酮产量和木霉抗性方面均优于两个亲本菌株。【结论】双单杂交是一种快速有效获得食用菌新菌株的遗传育种方法,通过该方法筛选出一株高产小奥德蘑酮、高抗木霉的长根菇新菌株OuCE08。长根菇双单杂交后代快速、准确的检测鉴定可先采用拮抗试验作为初筛手段,再利用SNP位点分析进行复筛。

黑皮鸡枞菌多糖超声辅助提取条件优化及抗氧化活性研究

目的优化超声波辅助提取黑皮鸡枞菌(Oudemansiellaraphanipes)多糖的条件,并探究黑皮鸡枞菌多糖的抗氧化活性。方法以黑皮鸡枞菌多糖的提取率为指标,采用超声波辅助法从黑皮鸡枞菌中提取多糖,以超声功率、超声提取时间和碱浓度作为单因素变量,在单因素试验的基础上采用响应面法优化确定超声波辅助提取黑皮鸡枞菌多糖的最佳提取条件。再采用不同浓度的乙醇获得黑皮鸡枞菌分级多糖,并对分级多糖的抗氧化活性进行研究。结果结果表明黑皮鸡枞菌多糖的最佳条件为:超声功率151.8 W、超声时间102.0 min和碱浓度0.05 mol/L,在此条件下,黑皮鸡枞菌多糖提取率最高,为15.40%±0.20%,与响应面预测值16.02%相近,对黑皮鸡枞菌多糖提取率影响的因素由高到低依次为超声波功率、提取时间和碱浓度,5种乙醇分级多糖均具有不同程度的抗氧化活性。结论响应面模型是成功的、可行的,80%以上分级多糖的羟基自由基清除率和还原力最强,80%分级多糖的抗氧化活性最强。

基于HPCE和多基因联合序列鉴定卵孢长根菇的分类研究

以5株卵孢长根菇菌株为试材,采用ITS和nLSU序列的测定并综合分析,结合GenBank中相关物种序列及菌株的形态学特征,进行卵孢长根菇的分子生物学鉴定,并且采用高效毛细管电泳检测,研究了卵孢长根菇的高效毛细管指纹图谱,通过主成分分析、相似度分析和聚类分析,对其进行鉴定和评价,以期探究新的快速准确的鉴定方法解决卵孢长根菇种类繁多,种内分类难度大,命名混乱等问题。结果表明:参试菌株总体亲缘关系较近,均为卵孢长根菇(Oudemansiella raphanipes),Or2、Or5和Or1亲缘关系较近的菌株均不同程度的聚为一支,Or2、Or5和Or1相对于Or4、Or6亲缘关系更近,基于指纹图谱鉴别卵孢长根菇子实体形态的多样性,通过“W”形的三联差异峰作为鉴别卵孢长根菇不同子实体出菇表型的关键指示峰。卵孢长根菇具有丰富的物种多样性,采用HPCE和多基因联合序列的鉴定方法可有效区分不同形态种,为快速筛选优质卵孢长根菇菌株提供参考依据。

卵孢小奥德蘑覆土中有益细菌筛选与鉴定

采用稀释涂布平板法分离培养卵孢小奥德蘑(Oudemansiella raphanipes)覆土中的细菌,通过对峙培养法筛选能够促进卵孢小奥德蘑菌丝生长的细菌,并检测其溶磷、固氮、解钾及产生纤维素酶、生长激素和嗜铁素等生物活性,综合利用形态特征、生理生化特性及分子系统学方法鉴定有益细菌。结果表明:从覆土中分离获得256株细菌,其中8个属的54株细菌能够促进菌丝生长;芽孢杆菌(Bacillus)和假单胞菌(Pseudomonas)为优势属,占比分别为42.59%和25.93%;在54株细菌中,有14、8、6株细菌分别具有溶磷、固氮、解钾活性;有10、9、7株细菌分别能够产生纤维素酶、生长激素、嗜铁素。有益细菌54-14、41-60、57-71和27-17分别鉴定为荧光假单胞菌(P. fluorescens)、恶臭假单胞菌(P.putida)、粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)和枯草芽孢杆菌(B. subtilis)。

3个长根菇新品种的选育报告

云鸡(土从)1号(YJZ01)、云鸡(土从)4号(YJZ04)和云鸡(土从)5号(YJZ05)是由野生长根菇菌株经组织分离、初筛、复筛,系统选育获得的新品种。品种特征差异显著,稳定性好,出菇期短,产量比对照露水鸡(土从)分别增产28.28%、33.10%及36.21%,是品质较优的中高温型抗性品种。YJZ01、YJZ05分别来源于大理州鸡足山、普洱市锦屏镇,抗逆性和适应性强,适于在海拔2000 m以下地区栽培;YJZ04来源于保山市潞江坝,耐热性和抗性好,适宜在海拔1700 m以下地区栽培。

黑皮鸡枞魔芋粉的加工工艺研究

黑皮鸡枞菌肉质脆嫩,味道鲜美,含有丰富的营养物质。本文以黑皮鸡枞菌粉、魔芋精粉、木耳粉、阿斯巴甜、赤藓糖醇、黑芝麻粉和黑米粉为原辅料,感官评分为指标,采用单因素实验及正交实验研究黑皮鸡枞菌粉、阿斯巴甜、黑芝麻粉的添加量对黑皮鸡枞菌魔芋粉感官品质的影响,来确定黑皮鸡枞菌魔芋粉的最佳配方。结果表明,最优配方为黑皮鸡枞菌粉添加量6 g,魔芋精粉添加量6 g,木耳粉添加量2 g,阿斯巴甜添加量0.015 g,赤藓糖醇添加量1.2 g,黑芝麻粉添加量5 g,黑米粉添加量4 g。采用此配方制得的黑皮鸡枞魔芋粉冲调性能好、口感细腻、风味较佳。

豫北地区黑皮鸡(土从)菌生产技术要点

通过到豫北地区的清丰县马庄桥镇、瓦屋头镇等黑皮鸡(土从)菌栽培园区进行数次实地调研,从生产环境、原料选择、栽培技术、包装与运输、病虫害综合防治等方面总结和整理了当地的常规生产经验,旨在为当地菇农提供技术支撑,加快产业标准化生产的发展。

覆土材料对卵孢小奥德蘑出菇和产量的影响

以卵孢小奥德蘑为试材,以壤土、沙土和草炭土为覆土材料,采用覆土材料交叉混配后种植卵孢小奥德蘑的方法,研究了其出菇时间、产量、子实体农艺学性状与营养成分,明确不同覆土材料对卵孢小奥德蘑出菇和产量的影响,以期为卵孢小奥德蘑的科学栽培提供参考依据。结果表明:4种覆土处理卵孢小奥德蘑均能正常出菇,且与纯壤土相比,当覆土材料内添加草炭时,现原基和出菇时间有所提前,生产周期缩短,其中50%草炭混合50%壤土最适宜卵孢小奥德蘑的生长发育,其作为覆土材料时卵孢小奥德蘑现原基早,生产周期短,农艺学性状最好,生物学效率最高,为50.01%,单棒平均产量最高,达275.08 g,可在实际生产中应用。

鸡枞菌锥形削根装置设计

针对鸡枞菌人工锥形削根速度慢、一致性差等问题,设计了锥形削根装置。该装置采用两个对称布置的四连杆机构,连杆刀片运动轨迹呈腰形,两个刀片的直线工作段形成圆锥包络,实现鸡枞菌根部锥形切削。装有摄像头的机械臂识别、抓取并精确控制鸡枞菌进入切削区域的深度,实现精准切削。试验结果表明:两个连杆刀片在0.8s内共进行12次作业,完成锥形切削;装置可在6s内实现1个鸡枞菌的抓取、切削、分级,不仅速度快,且一致性更好。以菇柄直径为12mm的鸡枞菌为例,对比人工削根形成的7棱、6棱、5棱和4棱锥,试验装置削根可分别减少7.5%,9.1%,13.9%,24.4%的根部浪费率。

卵孢小奥德蘑蛛网病菌PCR检测方法的建立与应用

以卵孢小奥德蘑蛛网病菌(异形枝葡霉)为试材,以异形枝葡霉TEF1-α基因为靶标,采用聚合酶链式反应(PCR)方法,设计、合成并筛选出可特异检测异形枝葡霉的PCR引物,基于此建立并应用PCR检测方法,以期为科学防控卵孢小奥德蘑蛛网病提供分子基础。结果表明:利用基于T8F/R引物建立的PCR检测体系对16种枝葡霉属的22个菌株的基因组DNA进行扩增发现,该检测体系特异性强,仅以异形枝葡霉基因组DNA作为模板时,产物呈现出一条467 bp的条带,其它参照菌株及阴性对照均无条带。引物灵敏度验证结果表明,检测体系不受卵孢小奥德蘑组织液的干扰,可检测出最低90 pg·μL^(-1)的异形枝葡霉基因组DNA,土壤中最低检出限为230个孢子·g^(-1)。

卵孢小奥德蘑蛛网病病原菌的鉴定与生物学特性研究

卵孢小奥德蘑Oudemansiella raphanipes是近年来成功驯化栽培的一种食药兼用的珍稀菌类,近年来随着其栽培面积的不断扩大,病害发生也越来越严重。作者在北京某卵孢小奥德蘑种植基地发现疑似蛛网病,为明确其病原菌,对发病子实体进行了病原菌分离,并综合其形态学特征、多基因系统发育分析和柯赫氏法则验证的结果,将卵孢小奥德蘑蛛网病病原菌鉴定为金黄菌寄生Hypomyces aurantius(无性阶段为异形枝葡霉Cladobotryum varium)。该病原菌菌丝生长的最适温度为20℃,最适碳源为木屑,最适氮源为黄豆粉,最适pH为6,光照对菌丝生长有一定的抑制作用;产孢最适温度为20℃,最适pH为8,最适氮源为麸皮,最适碳源为木屑;孢子萌发的最适营养液为0.2%葡萄糖溶液,最适温度为25℃,最适pH为6。研究结果为进一步明确卵孢小奥德蘑蛛网病的发生规律,制定科学的防治策略奠定了基础。

卵孢小奥德蘑的研究进展

卵孢小奥德蘑是新近开发的具有市场潜力的珍稀食用菌之一。通过综述卵孢小奥德蘑在分类学、生物学特性、栽培技术和食(药)用价值等方面的现状及研究进展,对后续研究提出了参考与建议。