肉制品中鸡肉源成分的Proofman-LMTIA方法检测

为建立一种梯型熔解温度等温扩增技术(ladder-shape melting temperature isothermal amplification,LMTIA)结合Proofman探针(proofreading enzyme-mediated probe cleavage)检测肉制品中的鸡肉,选取鸡细胞核中单拷贝且特异性强的prolactin receptor基因为靶基因,设计LMTIA引物和Proofman探针,优化Proofman-LMTIA反应体系,进行特异性、灵敏度和最低检测限测定。结果表明,Proofman-LMTIA方法特异性强,可在30 min内完成检测,检测灵敏度为1 ng/μL,对人工模拟的混合肉样的最低检测限为0.1%。该方法适用于基层单位对肉制品掺假进行快速检测。

基于NIR高光谱技术快速预测冷鲜鸡肉热杀索丝菌含量

基于NIR高光谱成像技术快速评估鸡肉热杀索丝菌含量。通过采集新鲜鸡肉高光谱图像并提取样本反射光谱信息(900~1699 nm),再采用多元散射校正(Multiplicative Scatter Correction,MSC)、基线校正(Baseline Correction,BC)和标准正态变量校正(Standard Normal Variable Correction,SNV)三种方法预处理原始光谱,分别利用偏最小二乘(Partial Least Squares,PLS)、多元线性回归(Multiple Linear Regression,MLR)挖掘光谱信息与鸡肉热杀索丝菌参考值之间的定量关系。同时采用PLS-β系数法、Stepwise算法和连续投影算法(Successive Projections Algorithm,SPA)筛选最优波长简化全波段模型(F-PLS)提高预测效率。结果显示,经BC预处理的全波段光谱(485个波长)构建的F-PLS模型预测热杀索丝菌效果较好,相关系数RP为0.973,误差RMSEP为0.295 lg CFU/g。基于PLS-β法从BC预处理光谱中筛选出25个最优波长构建的PLS-β-PLS(RP=0.931,RMSEP=0.434 lg CFU/g)模型预测较好。本试验表明,利用近红外高光谱成像技术可潜在实现鸡肉热杀索丝菌含量的快速评估。

快速与慢速肉鸡脂肪生长与肌苷酸含量比较

本试验旨在相同条件下,比不同品种和性别肉鸡的脂肪生长量和肌苷酸含量及其相互关系。比较发现:(1)快速与慢速肉鸡的各项脂肪指标均无显著差异(p>0.05),但慢速鸡的肌肉脂肪、皮下脂肪和腹脂率分别比快速鸡高7%、13%和37%;(2)慢速肉鸡肌苷酸含量比快速高50%,且差异显著(p<0.05);(3)母鸡皮下脂肪(p<0.01)和腹脂率(p<0.05)显著高于公鸡,母鸡肌间和肌肉脂肪也分别高于公鸡6%和12%(p>0.05);(4)肌苷酸与腹脂率存在显著正相关(r=0.61,p<0.05)。

贵州黄鸡快慢羽纯系培育及应用研究

总结了贵州黄鸡快慢羽纯系的培育以及应用快慢羽纯系研制羽速自别雌雄配套杂交肉鸡、制定自然交配下种鸡同雌异雄适宜轮配方案。

高光谱快速预测冷鲜鸡胸肉中乳酸菌

乳酸菌含量是评价冷鲜鸡胸肉品质的重要指标。随着储藏天数的增加,当乳酸菌含量超过10~6 CFU/g,冷鲜鸡胸肉黏度增加,开始腐败变味。本研究通过化学计量学算法挖掘高光谱数据快速预测鸡胸肉中乳酸菌含量。首先,采集119个冷鲜鸡胸肉样品900~1700 nm的高光谱图像,提取肉样图像感兴趣区域(Region of interest,ROI)内的光谱信息,经多元散射校正(Multiplicative Scatter Correction,MSC)等8种方法预处理原始光谱,采用偏最小二乘(Partial Least Squares,PLS)算法挖掘光谱信息,构建全波段PLS预测模型(F-PLS)。然后,选用回归系数法(Regression Coefficient,RC)、逐步回归法(Stepwise)和连续投影算法(Successive Projections Algorithm,SPA)筛选最优波长优化F-PLS模型。结果显示,基于SPA法从基线校正(Baseline Correction,BC)预处理光谱中筛选出21个最优波长(903.8、905.5、912.1、915.4、917.0、920.3、923.6、931.8、941.7、1107.0、1135.9、1157.3、1269.2、1303.7、1320.2、1348.2、1551.1、1676.9、1686.9、1695.1和1698.4 nm)构建的SPA-PLS模型预测最好(r_P=0.949,RMSEP=0.439lg CFU/g,RPD=2.787)。本试验表明,采用近红外高光谱技术快速预测冷鲜鸡胸肉中乳酸菌含量是可行的。

近红外光谱法对鸡肉品种的快速无损鉴别

选取爱拔益加肉鸡（又名AA肉鸡）、京海黄鸡和狼山鸡鸡胸肉各40个肉样,应用便携式近红外光谱仪在1 000~2 500 nm波长条件下分别对鸡肉肉块和肉糜进行光谱扫描,并测定肉样的颜色、蛋白质、脂肪和水分含量。各选择90个肉样作为建模集,采用偏最小二乘判别分析法分别建立了鸡肉肉块和肉糜的品种鉴别模型。所建的两个模型对校正集和验证集样本的鉴别准确率均分别为100%和97.7%,对剩余预测集的各30个肉样进行鉴别分析的鉴别准确率均为90%。

短波近红外光谱快速无损检测生鲜鸡肉胆固醇含量

采用短波近红外光谱对生鲜鸡肉中的胆固醇含量进行检测,使用便携式近红外光谱仪在近红外光谱短波区域采集236份生鲜鸡肉的光谱信息,采用化学计量学法建立鸡肉胆固醇的偏最小二乘法定量预测模型。结果表明:最佳光谱预处理方法为标准化和基线校正,并通过剔除两次异常值对模型进行校正,所建定标模型的校正集相关系数Rc=0.801 1,校正标准差(s_(EC))=6.699 8,验证集相关系数R_p=0.803 4,预测标准差(s_(EP))=7.529 6,主因子数MF=4,s_(EP)/s_(EC)=1.12,说明模型可靠性、稳健性和预测效果较好。

在线近红外光谱系统快速检测整块鸡胸肉菌落总数含量

以整块鸡胸肉为研究对象,利用在线近红外光谱系统采集其900~1650 nm波长范围内的光谱信息,探究光谱信息与细菌菌落总数(Total Viable Count,TVC)之间的定量关系。对采集的原始光谱信息进行高斯滤波平滑(Gaussian Filter Smoothing,GFS)等五种预处理后,建立全波段偏最小二乘(Partial Least Squares,PLS)回归模型。采用回归系数法(Regression Coefficient,RC)和连续投影算法(Successive Projections Algorithm,SPA)筛选最优波长,构建优化的PLS模型和多元线性回归(Multiple Linear Regression,MLR)模型。结果表明,基于全波段GFS光谱构建的GFS-PLS模型预测鸡胸肉TVC效果最佳(rP=0.964,RMSEP=0.806 lg CFU/g)。基于SPA法从GFS光谱中筛选出的25个最优波长(907.0、913.7、923.8、927.2、937.2、947.3、974.0、987.3、997.3、1007.3、1040.4、1080.1、1099.9、1132.9、1155.9、1185.5、1215.0、1241.2、1270.6、1358.2、1380.8、1403.3、1419.3、1578.9和1615.2 nm),建立的SPA-GFS-MLR模型预测性能(rP=0.944,RMSEP=1.022 lg CFU/g)最接近GFS-PLS模型。基于在线近红外光谱系统可实现对大批量整块鸡胸肉细菌总数含量的快速无接触检测。

过氧化物酶法现场快速鉴定病死鸡肉的有效性

目前对病死鸡肉的检验检疫主要依赖于感官性状和病理变化的肉眼判断,有一定的主观性,亟需现场快速鉴定病死鸡肉的技术,以有效支撑基层动物卫生监督执法。本研究针对具有现场快速鉴定潜质的过氧化物酶法,验证了室温、冷藏和冷冻3种温度下,存放不同时间健康鸡肉(120份)和病死鸡肉(60份)样品中过氧化物酶的活性。结果显示:发生积血的病死鸡肉比正常屠宰的健康鸡肉显色更明显,病死鸡肉室温和冷藏状态下,不同时间节点显色时间多集中在4~8 s,而健康鸡肉显色时间多超过35 s或不显色;冷冻条件下,过氧化物酶会发生失活,但病死鸡肉过氧化物酶显色时间总体还是在30 s以内,且3种温度下,存放不同时间的健康鸡肉与病死鸡肉样品的显色时间差异显著(P <0.01)。以显色时间等于或低于30 s作为判定病死鸡肉阳性的时间节点,发现过氧化物酶法对室温和冷藏状态鸡肉鉴定的敏感性均高于95%,特异性也在95%左右,对冷冻状态鸡肉的有效鉴定率也高于80%。可见过氧化物酶法可以用于不同温度、不同存放时间的病死鸡肉样品的现场快速有效鉴定。

蛋鸡场沙门氏菌快速检测方法应用比较

探索蛋鸡场沙门氏菌快速检测方法。经试纸条、分离培养初步确定沙门氏菌阳性菌株后,进行血清学分型和荧光PCR鉴定。在601份鸡棉拭子、粪便、饮水和饲料样品中分离出37株沙门氏菌,其中沙门氏菌D群2株、其他群35株。试纸条、分离培养和荧光PCR方法相比较,快速分离培养结合荧光PCR方法敏感、快速、准确,适合实验室检测;试纸条法快速、简便,适合蛋鸡场的快速初筛和日常监测;传统方法培养时间长,有待改进。

鸡传染性贫血病胶体金快速诊断试纸条的研制——鸡传染性贫血血清抗体的制备、纯化及检测

[目的]为建立鸡传染性贫血病(CIA)诊断方法奠定基础。[方法]对15周龄SPF鸡进行4次免疫后,制备鸡传染性贫血病血清抗体并对其进行纯化,测定抗原最佳包被浓度和血清的最佳稀释度,研究纯化后血清抗体的蛋白含量和效价。[结果]阳性血清和阴性血清的最佳稀释度为1∶100,病毒包被抗原最佳包被浓度为5μg/ml。血清抗体蛋白含量为13.2 mg/ml,血清抗体效价为1∶12 800。[结论]该研究为制备CIA胶体金快速诊断试纸条奠定了基础。

X射线荧光光谱法快速测定鸡粪中的铜、铁、锰、锌、硒

研究建立了应用X射线荧光光谱技术检测鸡粪中的Cu、Fe、Mn、Zn、Se等5种元素含量的快速检测方法。将样品粉碎压片后,利用能量色散型X射线荧光光谱仪采集样品的光谱信息。本研究通过去卷积进行重叠谱的解析,引入Ag康普顿内标和元素背景内标方法来降低基体干扰,从而获得了较好的准确度和精密度。标准样品及未知样品的分析结果证明利用X射线荧光光谱技术对鸡粪样品进行建模分析具有较强的可行性。该方法操作简单,5种元素同时分析,测量时间短,为畜禽粪便中金属元素的快速检测分析提供了新途径。

免疫亲和层析净化荧光光度法快速检测鸡饲料中黄曲霉毒素

基于食品中采用免疫亲和层析净化荧光光度法测定黄曲霉毒素含量,建立了免疫亲和层析净化荧光光度法测定鸡饲料中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2含量。该方法的检出限2.0μg/kg,相对标准偏差低于10%,平均回收率85%～90%。

基于最优光谱信息的冷鲜鸡肉TBA值快速检测

基于最优光谱信息构建PLS模型预测冷鲜鸡肉的2-硫代巴比妥酸(2-Thiobarbituric acid,TBA)值,快速无损评估冷鲜鸡肉的氧化程度。采集冷鲜鸡肉的900~1700 nm范围内高光谱图像,提取并平均图像中感兴趣区域内的反射光谱信息,经移动平均值平滑(MAS)、卷积平滑(SGS)、中值滤波平滑(MFS)、高斯滤波平滑(GFS)、归一化(N)、多元散射校正(MSC)、基线校正(BC)和标准正态变量变换(SNV)8种方法预处理光谱信息后,建立偏最小二乘(PLS)模型预测冷鲜鸡肉中TBA值。同时采用PLS-β系数法、逐步回归法(Stepwise)和连续投影算法(SPA)筛选最优波长优化PLS模型。结果显示,基于PLS-β系数法从GFS光谱筛选的31个最优波长构建的GFS-P-OW-PLS模型预测冷鲜鸡肉TBA值效果最好(rP=0.945,RMSEC=0.053 mg/100 g)。综上,基于最优光谱信息构建PLS模型可实现鸡肉TBA值的快速无接触检测。

荧光标记DNA-磁性氧化石墨烯磁分离技术快速检测鸡肉中沙门氏菌

为达到高灵敏快速检测沙门氏菌的目的,建立一种基于荧光标记DNA-磁性氧化石墨烯磁分离技术快速检测鸡肉中沙门氏菌的新方法。采用该方法对沙门氏菌目标DNA的检测条件进行优化,并对人工模拟污染鸡肉中的沙门氏菌进行检测。结果表明,沙门氏菌目标DNA的最优检测条件为Fe3O4/GO质量浓度3. 2×10^-4g/mL、Fe3O4/GO与沙门氏菌捕获探针反应时间60 min、反应温度37℃、DNA探针杂交时间120 min、富集倍数为5倍,沙门氏菌目标DNA浓度与荧光强度在0. 005~1 pmol/L呈良好的线性关系,检出下限为5 fmol/L(S/N=3)。在最优条件下,对沙门氏菌污染的鸡肉样品进行检测,最低检出限为102CFU/mL(S/N=3)。该方法在整个检测过程仅需5 h,且操作简单、灵敏度高、特异性强、结果准确可靠,能够实现对沙门氏菌的快速检测。该研究可为沙门氏菌及其他致病菌的检测提供一种新思路。

鸡肝酯酶快速检测氰戊菊酯农药的试验研究

采用鸡肝酯酶对不同浓度的氰戊菊酯农药进行了催化水解,并通过pH-stat法优化了水解条件。结果表明,在pH8.0,温度55℃的条件下,酶催化反应速度较大。在该反应条件下,分析了农药浓度(1/x)与酶解反应初速度(1/y)之间的关系,发现在0.05～2.00mg·L-1农药浓度范围内,两者的关系曲线为y=0.0723x+0.1393(R2=0.998),可作为该速测法计算氰戊菊酯农药含量的标准曲线。最后采用该法对购置的农药标品稀释液进行了确认检测,测量结果经t-检验显示,与气相色谱标定的浓度之间无显著性差异。该法简单快速,一次检测完成大约需要10min,和国标的气相色谱法相比,大大缩短了检测时间。

鸡BMPR1B基因克隆、生物信息学及组织表达分析

【目的】探究鸡骨形态发生蛋白受体1B(bone morphogenetic protein receptor type 1B,BMPR1B)基因在家禽卵巢发育中的功能。【方法】利用cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends,RACE)扩增BMPR1B基因cDNA的序列,通过生物信息学软件对其所编码的蛋白理化性质及结构功能进行分析,利用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)技术探究BMPR1B基因在鸡各个组织中的表达情况。【结果】鸡BMPR1B基因存在2种转录本,转录本T1长1925 bp,包含5’UTR 248 bp,编码序列1509 bp,3’UTR 168 bp;转录本T2长度为1754 bp,包含5’UTR 77 bp,编码序列1509 bp,3’UTR 168 bp,编码的蛋白包含502个氨基酸。进化分析表明,鸡BMPR1B基因在进化过程中与火鸡亲缘关系最近,保守性较高。理化性质分析显示,鸡BMPR1B基因编码蛋白属于不稳定、亲水性蛋白。结构域预测发现,该蛋白存在有1段跨膜结构和1个GS保守结构域,整个二级结构主要由无规卷曲组成,预测含有4个磷酸化位点和2个糖基化位点。组织表达分析显示,BMPR1B基因在鸡的心、肝、脾、肺、肾、胸肌、腿肌和卵巢8个组织中均有表达,且在卵巢组织中表达量最高。【结论】该研究结果为后续深入研究BMPR1B基因在鸡卵巢卵泡发育中的作用奠定基础。

检测鸡肉中甲羟孕酮酶联免疫试剂盒的研制

试验旨在利用酶联免疫技术研制一种快速检测鸡肉中甲羟孕酮的试剂盒。经测试,该试剂盒对鸡肉样本的检测限为1μg/kg,批内、批间相对标准偏差均小于10%;稳定性测试结果表明,试剂盒能在4℃保存12个月;交叉反应率结果表明,单克隆抗体特异性良好。该试剂盒的操作时间仅需45min,适合现场大量样本的快速检测。

3种前处理方法提取鸡脯肉中磺胺二甲基嘧啶的方法比较

分别采用磷酸盐缓冲液(PBS)提取法、免疫磁富集法和GB 29694—2013法提取鸡脯肉中的磺胺二甲基嘧啶,比较这3种方法的回收率和稳定性。当偶联液(0.01 mol/L PBS)p H为5.0、抗体偶联量为80μg、捕获时间为45 min、免疫磁珠用量为350μg时,免疫磁富集法的回收率和变异系数分别为98.8%~102.9%和4.7%~6.2%;磷酸盐缓冲液提取法的回收率和变异系数分别为40.5%~78.5%与8.7%~10.4%;GB 29694—2013法的回收率和变异系数分别为90%~107.1%与8.5%~9.8%。磷酸盐缓冲液提取法简便省时,但是其回收率偏低;GB 29694—2013法与免疫磁富集法的回收率均可高达90%,与GB 29694—2013法相比,免疫磁富集法更省时,具有较大的应用前景。

采用嗜热菌酶好氧发酵工艺快速发酵鸡粪的研究

本试验采用嗜热菌酶好氧发酵工艺快速发酵鸡粪,添加1‰的嗜热菌酶发酵剂,温度控制在80℃—90℃,在热酶反应器中快速发酵8 h,在4 h、6 h、8 h分别取样评价其发酵对鸡粪品质的影响。研究结果表明:鸡粪原料经发酵后外观明显改善,刺激性气味明显减少;有机质含量无明显变化,氮磷钾浓度上升至11.02%,较鸡粪原料提升25.8%,实际肥效提高;经8h发酵后,细菌数量明显减少,真菌、放线菌、粪大肠杆菌及蛔虫卵均未检出,说明通过热酶发酵技术去除了鸡粪中的有害生物成分;鸡粪发酵样品进行发芽试验,种子发芽率均在93.33%以上(鸡粪原料为89.33%),表明样品已腐熟完全。从试验结果可以看出,利用嗜热菌酶好氧发酵工艺快速发酵鸡粪原料,可以活化养分,提高实际肥效,并去除鸡粪中的有害生物组分,达到快速腐熟,实现鸡粪的无害化处理。