Ras超家族亚群A/Rho关联含卷曲螺旋结合蛋白激酶1在无机磷酸盐中诱导大鼠瓣膜间质细胞成骨分化的作用机制

目的探讨Ras超家族亚群A(RhoA)/Rho关联含卷曲螺旋结合蛋白激酶1(Rock-1)在无机磷酸盐中诱导大鼠瓣膜间质细胞(VICs)成骨分化的作用机制。方法取8只雄性大鼠(购自上海西普尔必凯动物实验有限公司)的主动脉瓣膜消化培养至第3代后免疫荧光鉴定。小干扰RNA(siRNA)-RhoA转染VICs后用无机磷酸盐成骨培养基(IP-OIM)分别诱导转染组(RNAi),阴性对照组(NC)及空白对照组(CON)的成骨分化,并通过蛋白质印迹法(Western blot)与聚合酶链反应(PCR)评估转染后RhoA、Rock-1、Runt相关转录因子2(Runx-2)及骨钙素(OST)的变化;7 d行碱性磷酸酶(ALP)活性相关检测,14 d行钙含量相关检测评估其早期与晚期成骨分化趋势。用IP-OIM刺激转染后的VICs 60 min,并通过Western blot检测SMAD1/5/9的磷酸化变化。采用单因素方差分析。结果鉴定后的VICs转染siRNA-RhoA并用IP-OIM培养,经过Western blot及PCR检测后可知RNAi的RhoA(Western blot:0.330±0.020;PCR:0.357±0.060)及Rock-1(Western blot:0.366±0.020;PCR:0.383±0.040)比CON均出现表达下调(RhoA Western blot:t=36.680,P<0.05 PCR:t=10.610,P<0.05;Rock-1 Western blot:t=31.240,P<0.05 PCR:t=13.210,P<0.05),差异有统计学意义,RNAi的OST(Western blot:0.520±0.030;PCR:0.510±0.070)和Runx-2(Western blot:0.573±0.020;PCR:0.57±0.060)比CON也出现了下降(OST Western blot:t=16.630,P<0.05;PCR:t=6.970,P<0.05;Runx-2 Western blot:t=21.040,P<0.05;PCR:t=6.710,P<0.05),差异有统计学意义。在7 d的ALP染色中RNAi的颜色最浅,ALP活性检测中RNAi[(1.005±0.101)U/mg]活性比较NC[(2.042±0.116)U/mg]和CON[(1.931±0.136)U/mg]明显下降(t=10.570,P<0.05;t=9.400,P<0.05),差异有统计学意义。在14 d的相对钙含量测定中RNAi[(22.290±1.981)ng/L]钙含量比较NC[(41.100±2.440)ng/L]和CON[(41.760±1.215)ng/L]明显下降(t=10.530,P<0.05;t=14.510,P<0.05),差异有统计学意义;同样茜素红钙沉积染色中,也是RNAi颜色最浅。经IP-OIM分别刺激60 min,RNAi的SMAD1/5/9的磷酸化水平(0.337±0.030)比CON明显下降(t=25.480,P<0.05),差异有统计学意义。结论无机磷酸盐可通过RhoA/Rock-1引起瓣膜间质细胞的成骨分化,SMAD1/5/9的磷酸化在此过程中起重要作用。

Rab家族及其在囊泡运输中的作用

Rab蛋白家族是Ras超家族中最大的亚家族,为小GTP结合蛋白。目前发现的Rab家族成 员已达60多种,各成员之间有相似的结构。除少数特异表达于某一细胞或组织,大多数Rab蛋白广泛 存在于组织细胞中,Rab蛋白是囊泡运输重要的调节因子。Rab突变或表达异常引起囊泡运输异常,从 而导致一些疾病产生。

RhoGTPase家族在乳腺癌发病的作用

目的RhoGTPase是Ras超家族的成员之一,这些小分子量G蛋白具有GTP酶活性。Rho蛋白家族与肿瘤细胞信号传导通路、周期调控及凋亡,肿瘤细胞发生、侵袭与转移均有密切的关系,参与包括乳腺癌在内的多种肿瘤的发生发展过程,提示其可能成为一种新的肿瘤标志物,是很有前景的肿瘤治疗靶点。

Rho亚家族与肿瘤关系的研究进展

小分子G蛋白Rho（Pros-homologous，Ras同源物）主要包括Rho、Rac和Cde42三个亚家族，属于Ras超家族，是重要的细胞内信号转导分子，主要参与张力丝和粘着斑的形成，在肌动蛋白骨架的构建、增殖、黏附变形、游走、细胞周期调控及包括基因转录在内的许多基础生命活动中起关键作用。近年来研究发现，Rho基因家族的异常表达在肿瘤的发生发展中扮演重要角色，尤其是Rho亚家族及其下游的效应分子。

超微脑得健对脑缺血大鼠脑内Rho表达的影响

目的探讨超微脑得健对脑缺血大鼠脑内Rho的影响,揭示其可能作用机制。方法采用脑中动脉阻塞法复制大鼠局灶性脑缺血模型,将动物随机分为假手术组、模型组、补阳还五汤组、脑得健原方组、超微脑得健全量组,超微脑得健1/3剂量组。采用RT-PCR法检测大鼠脑组织Rho mRNA表达。结果假手术组脑内有一定水平Rho mRNA表达,模型组Rho mRNA表达至7 d达到高峰。给药3d后各治疗组动物脑组织Rho mRNA含量较同时段模型组比较明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论超微脑得健能抑制脑缺血后Rho表达,可能为其促进脑缺血后神经功能恢复作用机制之一。

新城疫病毒与胶质瘤的研究进展

1胶质瘤的流行病学脑胶质瘤是最常见的神经系统原发性肿瘤，2008年全球癌症评估原发恶性中枢神经系统肿瘤，男性发病率3.8／100，000，女性发病率3.1／100，000，发达国家（男：5.8／100，000，女：4.4／l00，000）发病率高于发展中国家（男：3.2／100，000，女：2.8／l00，000）[1]．胶质瘤呈浸润性生长，与正常脑组织没有明显界限，侵袭至功能区使手术难以切除或根本不能手术，易复发，这就使胶质瘤患者预后很差，

Rabex-5及其激活物Rab5的研究进展

细胞的吞噬作用是细胞维持正常生理功能的关键，小分子GTP激酶在其中扮演了至关重要的角色。在Ras超家族中，已证实有超过50种小分子GTP激酶，其中Rab家族在调控细胞吞噬和囊泡运输中的作用，近年备受关注。

新的肿瘤抑制基因-ARLTS1

小分子GTP蛋白涉及肿瘤发生中多条信号通路的改变。类核糖基化因子肿瘤抑制基因1（ADP-ribosylation factor-like tumor suppressorgene1，ARLTS1），是小分子GTP蛋白Ras超家族中ARF家族的成员之一。该基因是低显性基因，可因启动子超甲基化而失调。有两种ARLTSl的多态性与肿瘤的家族风险相关。ARLTS1表达下调与部分肿瘤发生有重要关系，而恢复其表达则会诱导caspase依赖的细胞凋亡发生，并减少肿瘤的体内生长。通过基因微阵列实验发现，转导ARLTS1基因诱导细胞凋亡过程中众多涉及细胞存活、增殖和发育的信号通路。