RASSFIA基因启动子甲基化与乳腺癌相关性研究

目的:研究抑癌基因RASSF1A在乳癌组织中的表达情况及与RASSF1A基因启动子甲基化的关系。方法:运用RT-PCR方法检测40例乳癌组织和6例乳腺良性肿瘤和5例正常乳腺组织中RASSF1A的表达,运用甲基化特异PCR方法检测这些组织中RASSF1A基因启动子的甲基化情况。结果:RASSF1A基因在40例乳腺癌组织中8例(20%)存在表达缺失,差异无统计学意义(P>0.05)。但其表达量明显低于正常乳腺组织(P<0.05)。乳腺癌组织的RASSF1A基因启动子甲基化频率(65%)明显高于正常乳腺组织(20%)和乳腺良性肿瘤(17%)(P<0.05)。结论:乳腺癌组织中RASSF1A基因启动子的高甲基化是引起RASSF1A基因表达下调的重要原因,在肿瘤的发生和发展中起重要的调控作用。

RASSFIA基因对胃癌细胞自噬的影响

目的探讨RASSFIA基因对胃癌细胞自噬的影响情况及其可能的机制。方法通过基因重组技术已构建了高表达RASSF1A基因的人胃癌SGC-7901细胞株,然后采用聚合酶链反应(PCR)技术检测SGC-7901细胞转染RASSF1A基因前后自噬BECLIN-1基因mRNA表达情况,并使用流式细胞仪检测SGC-7901细胞转染RASSF1A基因前后凋亡情况。结果胃癌SGC-7901细胞转染了RASSF1A基因后,凋亡增加,BELINE 1表达下降。结论 RASSFIA基因对胃癌细胞自噬有负调控作用。

RASSFIA基因甲基化和肝细胞癌相关性的Meta分析

目的:Meta分析RASSFIA基因甲基化和肝细胞癌的相关性。方法:检索文献,提取资料,评估文献质量,进行统计学分析。结果:初步检索获取87篇相关文献,采用Endnote X6文献管理软件将重复文献祛除,获取49篇文献;对文题、摘要进行阅读,将不符合主题、会议文章、综述的文献等排除,获取18篇文献;对全文进行进一步阅读,15篇不符合纳入标准,最终将3篇文献纳入;纳入文献NOS评分均在4分及以上。Meta分析显示,肝癌组织中RASSFIA基因甲基化率显著高于正常组织,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:RASSFIA基因甲基化和肝细胞癌呈显著的正相关关系,值得临床充分重视。

RASSF1A基因甲基化对早期乳腺癌的诊断及临床意义

目的探讨早期乳腺癌和乳腺良性疾病的乳管灌洗液细胞学涂片检查与RASSF1A基因甲基化检测敏感性及特异性的差异以及后者在早期乳腺癌中的诊断意义。方法回顾性分析以乳头溢液为表现的已接受手术治疗的乳腺良或恶性肿瘤患者40例,术前均行乳管灌洗液细胞学涂片检查,并运用甲基化特异性PCR方法对40例患者的乳管灌洗液标本进行RASSF1A基因甲基化的检测,分析对比两种检查方法的差异。结果乳管灌洗液的细胞学涂片检查对早期乳腺癌诊断的敏感性为24%,特异性为93.3%。RASSF1A甲基化诊断早期乳腺癌敏感性为80%,特异性为80%。相比细胞学检查RASSF1A甲基化检测对以病理性乳头溢液为表现的乳腺癌敏感性和特异性均较高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论应用甲基化荧光定量PCR检测乳管灌洗液标本RASSF1A的甲基化可作为早期乳腺癌的术前诊断参考依据。

RASSF1A和p16基因甲基化在子宫颈癌组织中的表达及意义

目的:探讨p16和RASSF1A基因异常甲基化在子宫颈癌组织中的表达及意义。方法:用甲基化特异性聚合酶链反应法(methylation-specific PCR,MSP)对40例宫颈癌组织,80例宫颈上皮内瘤样病变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)组织、20例正常宫颈组织作为对照组进行p16和RASSF1A基因异常甲基化检测。结果:p16和RASSF1A甲基化在正常组未见表达。宫颈癌组p16基因甲基化阳性率为40.0%,明显高于CIN组的12.5%,差异有统计学意义(χ2=11.88,P<0.05)。宫颈癌组RASSF1A基因甲基化阳性率为20.0%,高于CIN组的7.5%,差异有统计学意义(χ2=4.04,P<0.05)。宫颈癌组p16和RASSF1A基因甲基化阳性率为55.0%,明显高于宫颈CIN组的17.5%,差异有统计学意义(χ2=17.12,P<0.05)。结论:p16和RASSF1A基因启动子区异常甲基化与宫颈癌的生物学行为相关,可能为宫颈癌的早期辅助诊断和治疗提供帮助。

rassfia和survivin在胃癌中的表达及相互作用

目的检测胃癌组织、癌旁正常组织中rassfia基因和survivin基因的表达情况,探讨两者在胃癌发生、发展中的作用及其相互关系。方法用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测49例胃癌组织、20例癌旁正常组织中的rassfia和survivin mRNA的表达情况。结果rassfia在胃癌组织中的转录表达缺失率为51%(25/49),在正常组织中完全表达,其表达缺失率与胃癌分化程度、淋巴结转移与否及TNM分期相关(P<0.05),但与其组织学类型无相关性。survivin在胃癌组织中转录表达率为65.3%(32/49),在正常组织中无阳性表达,其表达与胃癌分化程度、淋巴结转移与否相关(P<0.05),但与其TNM分期和组织学类型无相关性。结论rassfia基因是胃癌的相关抑癌基因,在胃癌中存在表达缺失;survivin作为癌基因在胃癌组织中表达上调。rassfia的表达缺失和survivn的表达上调具有相关性,两者共同参与了胃癌的发生和发展。

丙戊酸钠协同5-氮-2＇-脱氧胞苷对U266细胞RASSF1A基因表达调控的影响

目的 探讨DNA甲基转移酶抑制剂5-氮-2＇-脱氧胞苷（5-Azs-CdR）联合组蛋白去乙酰化酶抑制剂丙戊酸钠（VPA）对人多发性骨髓瘤细胞株U266细胞中Ras相关区域家族1基因（RASSF1）的表达调控以及对细胞生物学活性的影响.方法 5-Aza-CdR、VPA单独或联合干预U266细胞,甲基化特异性PCR（MS-PCR）法和实时荧光定量-PCR（RQ-PCR）法检测药物干预前后RASSF1A基因甲基化状态和RASSF1A mRNA的表达;MTT法检测细胞增殖活性;流式细胞术分析细胞凋亡及细胞周期的改变.结果 未经药物处理的U266细胞检测到RASSF1A基因启动子区域的高甲基化,RASSF1A基因微弱表达,5-Aza-CdR可逆转RASSF1A基因CpG岛高甲基化.诱导U266细胞RASSF1A基因呈剂量依赖性表达（P〈0.05）,VPA不能诱导U266细胞RASSFlA基因表达,联合用药组U266细胞RASSF1A mRNA的表达明显增强（P〈0.05）;与5-Aza-CdR、VPA单药组相比,联合用药组对细胞增殖的抑制作用更强,细胞凋亡率明显升高（P〈0.05）;与对照组相比,5-Aza-CdR或VPA作用于U266细胞72 h后,细胞阻滞于G0/G1期,联合用药组比单独用药组G0/G1期细胞阻滞作用更明显（P〈0.05）.结论 VPA联合5-Aza-CdR能有效逆转U266细胞RASSF1A基因的异常甲基化,可显著诱导因高甲基化而沉默的RASSF1A基因再表达,并明显增强5-Aza-CdR对U266细胞的增殖抑制及诱导凋亡作用.