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The effect of neuropeptides on proliferation of rat bone marrow mesenchymal stem cells
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作者 王钊 《外科研究与新技术》 2011年第2期128-129,共2页
Objective To investigate the effects and mechanism of calcitonin gene-related peptide(CGRP)and substance P (SP) on proliferation of rat bone marrow mesenchymal stem cells.Methods The rBMSCs were isolated using whole b... Objective To investigate the effects and mechanism of calcitonin gene-related peptide(CGRP)and substance P (SP) on proliferation of rat bone marrow mesenchymal stem cells.Methods The rBMSCs were isolated using whole bone marrow 展开更多
关键词 bone SP bmscS The effect of neuropeptides on proliferation of rat bone marrow mesenchymal stem cells stem
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BMSCs移植对大鼠卵巢早衰的修复及TGF-βRⅡ表达的影响 被引量:7
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作者 王永峰 马会明 +5 位作者 相丽 梁蕾 王蒙蒙 王燕蓉 裴秀英 徐仙 《宁夏医科大学学报》 2017年第6期627-630,644,I0001,共6页
目的通过移植鼠源骨髓间充质干细胞(BMSCs)对SD大鼠卵巢早衰(POF)进行治疗,探讨BMSCs移植对卵巢中转化生长因子β受体Ⅱ(TGF-βRⅡ)表达的影响。方法将正常动情周期的SD雌性大鼠48只随机分为对照组、模型组(环磷酰胺致POF)、造模后自然... 目的通过移植鼠源骨髓间充质干细胞(BMSCs)对SD大鼠卵巢早衰(POF)进行治疗,探讨BMSCs移植对卵巢中转化生长因子β受体Ⅱ(TGF-βRⅡ)表达的影响。方法将正常动情周期的SD雌性大鼠48只随机分为对照组、模型组(环磷酰胺致POF)、造模后自然恢复组和BMSCs移植组(尾静脉移植)。分别于建模后、BMSCs移植后取各组卵巢组织,VG染色和HE染色,光镜下观察卵巢组织形态和计数各组卵泡数。免疫组织化学法和Western blot检测各组卵巢组织TGF-βRⅡ的表达情况。结果 HE染色可见对照组有初级卵泡、次级卵泡和成熟卵泡;模型组存在闭锁卵泡,卵巢组织纤维化;自然恢复组可见闭锁卵泡和初级卵泡;BMSCs移植组可见原始卵泡、次级卵泡。BMSC移植组各级卵泡计数均高于模型组和自然恢复组(P<0.05),与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。免疫组化学可见TGF-βRⅡ在模型组与自然恢复组的卵巢组织呈弱表达或未表达,BMSCs移植组卵巢组织TGF-βRⅡ阳性表达增强,Western blot检测也显示TGF-βRⅡ表达高于模型组和自然恢复组(P<0.05),与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论 BMSCs移植可改善由化疗导致卵巢早衰的功能部分恢复,TGF-βRⅡ可能参与了移植BMSCs修复化疗后POF的过程。 展开更多
关键词 SD大鼠 卵巢早衰 骨髓间充质干细胞移植 转化生长因子β受体Ⅱ
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Human adipose-derived mesenchymal stem cells: a better cell source for nervous system regeneration 被引量:20
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作者 Han Chao Zhang Liang +4 位作者 Song Lin Liu Yang Zou Wei Piao Hua Liu Jing 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2014年第2期329-337,共9页
Background In order to suggest an ideal source of adult stem cells for the treatment of nervous system diseases,MSCs from human adipose tissue and bone marrow were isolated and studied to explore the differences with ... Background In order to suggest an ideal source of adult stem cells for the treatment of nervous system diseases,MSCs from human adipose tissue and bone marrow were isolated and studied to explore the differences with regard to cell morphology,surface markers,neuronal differentiation capacity,especially the synapse structure formation and the secretion of neurotrophic factors.Methods The neuronal differentiation capacity of human mesenchymal stem cells from adipose tissue (hADSCs) and bone marrow (hBMSCs) was determined based on nissl body and synapse structure formation,and neural factor secretion function.hADSCs and hBMSCs were isolated and differentiated into neuron-like cells with rat brain-conditioned medium,a potentially rich source of neuronal differentiation promoting signals.Specific neuronal proteins and neural factors were detected by immunohistochemistry and enzyme-linked immunosorbent assay analysis,respectively.Results Flow cytometric analysis showed that both cell types had similar phenotypes.Cell growth curves showed that hADSCs proliferated more quickly than hBMSCs.Both kinds of cells were capable of osteogenic and adipogenic differentiation.The morphology of hADSCs and hBMSCs changed during neuronal differentiation and displayed neuronlike cell appearance after 14 days' differentiation.Both hADSCs and hBMSCs were able to differentiate into neuron-like cells based on their production of neuron specific proteins including β-tubulin-Ⅲ,neuron-specific enolase (NSE),nissl bodies,and their ability to secrete brain derived neurotrophic factor (BDNF) and nerve growth factor (NGF).Assessment of synaptop hysin and growth-associated protein-43 (GAP-43) suggested synapse structure formation in differentiated hADSCs and hBMSCs.Conclusions Our results demonstrate that hADSCs have neuronal differentiation potential similar to hBMSC,but with a higher proliferation capacity than hBMSC.Adipose tissue is abundant,easily available and would be a potential ideal source of adult stem cells for neural-related clinical research and application. 展开更多
关键词 adipose derived stem cells bone marrow mesenchymal stem cells neuronal differentiation rat brain-conditioned medium
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Runx2在白藜芦醇诱导的小鼠BMSCs中的表达及生物信息学分析
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作者 黄燕 霍静 +3 位作者 裴晋红 栗学清 汪军梅 宋丽华 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1006-1012,共7页
为探讨成骨分化的主要调节因子Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)在白藜芦醇(resveratrol,RSVL)诱导小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSCs)向成骨细胞分化中的作用,以及以Runx2... 为探讨成骨分化的主要调节因子Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)在白藜芦醇(resveratrol,RSVL)诱导小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSCs)向成骨细胞分化中的作用,以及以Runx2为研究起点,通过生物信息学分析方法以表明白藜芦醇诱导BMSCs向成骨分化的可能机制。本研究用不同浓度的RSVL(10-9mol/L-10-7mol/L)作用小鼠骨髓间充质干细胞8 d。实时逆转录-聚合酶链反应及Western印记法检测Runx2的mRNA和蛋白质表达水平。生物信息学方法分析及预测鼠Runx2蛋白的性质及特征。结果表明,与对照组相比,10-9mol/L、10-8mol/L、10-7mol/L白藜芦醇诱导Runx2的mRNA表达水平分别增加6%(P> 0. 05)、30%(P<0. 01)、49%(P<0. 01);与对照组相比,10-9mol/L、10-8mol/L、10-7mol/L白藜芦醇诱导Runx2蛋白表达水平分别增加12%(P> 0. 05)、72%(P <0. 01)、94%(P <0. 01)。由此可见,白藜芦醇可显著上调BMSCs中Runx2的mRNA和蛋白质表达水平(P<0. 01),且10-7mol/L的白藜芦醇诱导作用最强。生物信息学预测得知,Runx2属于碱性不稳定蛋白质;二级结构中无规卷曲占主导;存在102个潜在的磷酸化位点、97个潜在O-糖基化位点和8个N-糖基化位点;Runx2具有利于蛋白质间相互作用的结构特点;P1启动子区潜在的转录因子结合位点共28处。疏松的结构特征、丰富的修饰位点及多种转录因子结合位点为探讨白藜芦醇诱导BMSCs的分子机制提供参考。 展开更多
关键词 runt相关转录因子2 白藜芦醇 骨髓间充质干细胞 成骨分化
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基质细胞衍生因子-1_α/CXCR4/CXCR7轴对骨髓间充质干细胞迁移的影响 被引量:10
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作者 王玉兰 何晓梅 +5 位作者 唐薇 顾怡萍 张世春 汤曼 徐铁军 高殿帅 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期639-645,共7页
目的探讨基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)受体CXCR4、CXCR7在骨髓间充质干细胞(BMSCs)中蛋白和mRNA的表达;及SDF-1α/CXCR4/CXCR7轴对BMSCs迁移作用的可能机制。方法体外培养大鼠BMSCs,流式细胞术鉴定细胞表面抗原CD29、CD44和CD34。应用... 目的探讨基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)受体CXCR4、CXCR7在骨髓间充质干细胞(BMSCs)中蛋白和mRNA的表达;及SDF-1α/CXCR4/CXCR7轴对BMSCs迁移作用的可能机制。方法体外培养大鼠BMSCs,流式细胞术鉴定细胞表面抗原CD29、CD44和CD34。应用CXCR4特异性拮抗剂AMD3100及CXCR7中和抗体分别阻断CXCR4及CXCR7,通过Western blotting和RT-PCR分别检测BMSCs蛋白和mRNA的表达变化;Transwell法检测细胞迁移能力。本次实验分为单纯BMSCs组(A)、AMD3100预处理BMSCs组(B)、CXCR7中和抗体预处理BMSCs组(C)及AMD3100+CXCR7中和抗体预处理BMSCs组(D)。结果经鉴定第3代大鼠BMSCs中CD29和CD44均呈阳性表达,而CD34表达阴性。BMSCs中CXCR4、CXCR7蛋白和mRNA均有表达。与A组相比,B组及D组CXCR4及CXCR7蛋白表达明显受到抑制(P<0.05),C组只有CXCR7蛋白表达降低(P<0.05);各组CXCR4 mRNA和CXCR7 mRNA的表达差异均无显著性。SDF-1α可以诱导BMSCs迁移,与0μg/L组相比,10μg/L组和100μg/L组穿膜细胞数均显著增多(P<0.01),与10μg/L组相比,100μg/L组穿膜细胞数亦明显增多(P<0.01);AMD3100和CXCR7中和抗体均能抑制BMSCs的迁移作用(P<0.05),当两者同时作用时,抑制效应更为显著(P<0.05)。结论 BMSCs共表达CXCR4、CXCR7蛋白及mRNA;BMSCs的迁移具有SDF-1α浓度依赖性;SDF-1α/CXCR4/CXCR7轴介导BMSCs的迁移作用,CXCR4受体和CXCR7受体对BMSCs的迁移可能具有协同促进作用。 展开更多
关键词 基质细胞衍生因子-1Α CXCr4 CXCr7 骨髓间充质干细胞 免疫印迹法 大鼠
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GDNF基因修饰的BMSCs对大鼠缺氧复氧神经细胞凋亡的实验研究 被引量:3
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作者 高小青 周玲 +1 位作者 杜杰 杨朝鲜 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第13期1634-1636,F0003,共4页
目的研究腺病毒介导的外源性胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因在大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)中的表达及其对缺氧复氧神经细胞凋亡的影响。方法将GDNF基因重组腺病毒感染大鼠BMSCs,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)技术检测外源性G... 目的研究腺病毒介导的外源性胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因在大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)中的表达及其对缺氧复氧神经细胞凋亡的影响。方法将GDNF基因重组腺病毒感染大鼠BMSCs,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)技术检测外源性GDNF基因在BMSCs中的表达水平;将GDNF基因修饰的BMSCs与缺氧复氧神经元共培养,观察神经细胞的凋亡情况。结果 GDNF基因感染组在感染后3~12 d能稳定表达GDNF蛋白,空质粒载体感染组和未感染组基本上无GDNF蛋白的表达;与BMSCs共培养组相比,BMSCs/GDNF分泌的GDNF能显著降低缺氧复氧神经细胞的凋亡率(复氧12 h至5 d,P〈0.05)。结论腺病毒介导的基因感染技术能够有效地将GDNF基因转至BMSCs中,表达和分泌有生物学活性的GDNF蛋白,这为进一步研究GDNF基因修饰的BMSCs应用于中枢神经系统疾病的治疗研究奠定了基础。 展开更多
关键词 胶质细胞源性神经营养因子 大鼠 骨髓间充质干细胞 神经细胞 缺氧复氧
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MRI活体示踪心肌梗死大鼠骨髓间充质干细胞的移植 被引量:2
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作者 华平 王友于 +4 位作者 杨淞然 刘家良 刘立宝 陶俊 杨艳旗 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2013年第14期2471-2479,共9页
背景:干细胞移植的疗效和安全性评估均需要对体内干细胞的存活、分布、迁徙、增殖及分化进行连续监测。目的:观察MRI示踪超顺磁性氧化铁标记的骨髓间充质干细胞在缺血心肌组织的分布、迁徙情况。方法:直接贴壁法分离和培养大鼠骨髓间充... 背景:干细胞移植的疗效和安全性评估均需要对体内干细胞的存活、分布、迁徙、增殖及分化进行连续监测。目的:观察MRI示踪超顺磁性氧化铁标记的骨髓间充质干细胞在缺血心肌组织的分布、迁徙情况。方法:直接贴壁法分离和培养大鼠骨髓间充质干细胞,获得的细胞进行免疫鉴定。以新型超顺磁性氧化铁标记骨髓间充质干细胞,体外MRI成像确定其体内示踪的可行性。标记后锥虫蓝拒染试验、MTT比色试验分别检测标记细胞的活力、增殖情况。60只SD大鼠随机分为3组,制备大鼠心肌梗死模型2周后再次开胸移植含标记骨髓间充质干细胞的PBS混合液、含未标记骨髓间充质干细胞的PBS混合液和等量PBS。于移植后第1天、第3周行MRI检查,动态观察移植细胞的分布、迁徙,并根据MRI图像定位选择性行CD90免疫组化检查。结果与结论:骨髓间充质干细胞标记后,普鲁士蓝染色见胞浆内蓝色铁颗粒,标记效率为99%,标记细胞与未标记细胞间锥虫蓝拒染率、MTT吸光度差异无显著性意义。体外MRI可检测到标记细胞,并在T2WI及T2W/FFE序列上呈低信号。细胞移植1d后,在T2WI及T2W/FFE序列上可见标记细胞在梗死心肌边缘呈类圆形低信号;移植3周后,移植区域信号边界模糊,范围扩大,对比度降低。CD90免疫组化检测证实移植细胞可由梗死边缘向梗死区域迁徙。结果可见新型超顺磁性氧化铁可成功对大鼠骨髓间充质干细胞进行标记,细胞标记后可被MRI检测。 展开更多
关键词 干细胞 骨髓干细胞 磁共振成像 心肌梗死 骨髓间充质干细胞 干细胞移植 活体 示踪 大鼠 省级基金 干细胞图片文章
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BMSCs的分离培养、纯化与鉴定 被引量:2
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作者 马民 吕志刚 +2 位作者 杜以宽 张桂娟 马义 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第24期3209-3213,共5页
目的建立一种持续、稳定的可多向分化的骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外分离培养体系。方法运用密度梯度离心法从1月龄新西兰兔骨髓中分离培养BMSCs,利用相差显微镜观察其形态及生长情况,扫描电镜观察其细胞结构,运用流式细胞术分析分离细... 目的建立一种持续、稳定的可多向分化的骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外分离培养体系。方法运用密度梯度离心法从1月龄新西兰兔骨髓中分离培养BMSCs,利用相差显微镜观察其形态及生长情况,扫描电镜观察其细胞结构,运用流式细胞术分析分离细胞群所处细胞周期和细胞活力,用MTT比色法绘制细胞生长曲线,并用特定诱导液将分离的BMSCs向成骨细胞和成脂肪细胞定向诱导分化,利用ALP和油红O进行染色鉴定。结果所分离的BMSCs细胞在形态学观察与生长动力学上均符合BMSCs特征,分离培养的BMSCs细胞在第3天进入对数生长期,第10天进入平台期;在成骨、成脂肪的诱导培养条件下,分别出现成骨、成脂肪表型特征,可进一步定向分化,结论所收获的细胞具有BMSCs的特异性。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 分离 成骨分化 成脂分化
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建立ICR小鼠骨髓间充质干细胞的体外分离培养及鉴定方法 被引量:3
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作者 杨玉彦 王录美 +4 位作者 孙铭学 裴志鹏 冯雍炜 赵杰 肖凯 《药学服务与研究》 CAS 2016年第2期90-93,共4页
目的:建立一种简单的高效分离、培养、纯化和鉴定ICR小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs)的方法,初步研究其相关生物学特性。方法:全骨髓贴壁法分离培养BMSCs,用倒置显微镜观察细胞的形态和生长情... 目的:建立一种简单的高效分离、培养、纯化和鉴定ICR小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs)的方法,初步研究其相关生物学特性。方法:全骨髓贴壁法分离培养BMSCs,用倒置显微镜观察细胞的形态和生长情况;用流式细胞仪鉴定细胞表面标记物;诱导细胞定向分化为成脂细胞、成骨细胞,以检测细胞多向诱导分化能力。结果:利用该方法纯化的BMSCs形态均一,多为梭形。第3代BMSCs进行流式检测CD29、CD44均呈阳性表达,表达率分别为97%、90%;CD34、CD45呈阴性表达;且能够成功诱导分化成成骨细胞、成脂细胞。结论:利用全骨髓贴壁法可以高效分离、纯化ICR小鼠的BMSCs,生物学特性稳定。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞(bmscs) ICr小鼠 全骨髓贴壁法
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低氧预处理对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖、凋亡和坏死的影响 被引量:1
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作者 刘红 俞小芳 +4 位作者 滕杰 邹建洲 方艺 刘少鹏 丁小强 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期558-564,共7页
目的探讨低氧预处理对大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow derived mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖、凋亡和坏死的影响及其可能机制。方法采用全骨髓细胞贴壁法分离培养BMSCs,通过细胞成脂、成骨分化诱导及流式细胞仪检测其表面标志... 目的探讨低氧预处理对大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow derived mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖、凋亡和坏死的影响及其可能机制。方法采用全骨髓细胞贴壁法分离培养BMSCs,通过细胞成脂、成骨分化诱导及流式细胞仪检测其表面标志物(CD29、CD90、CD45)鉴定BMSCs;运用siRNA干扰技术沉默低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor,HIF-1α)基因。将细胞分成6组:正常培养组、正常培养+转染阴性对照组、正常培养+HIF-1αRNA干扰组、低氧预处理组、低氧培养+转染阴性对照组及低氧培养+HIF-1αRNA干扰组,分别采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法、流式细胞仪和乳酸脱氢酶(lactic acid dehydrogenase,LDH)活力测定等方法,检测各组BMSCs的增殖、凋亡和坏死情况;Western blot和real-time PCR检测各组BMSCs中HIF-1α、葡萄糖转运子-1(glucose transporter,GLUT-1)及血管内皮生长因子(vascular endothelial growthfactor,VEGF)的mRNA和蛋白的表达。结果培养的BMSCs具有成脂、成骨等多向分化潜能;流式检测呈现CD29和CD90高表达,CD45低表达;低氧预处理可促进BMSCs增殖,减轻坏死,对细胞凋亡无明显影响;低氧预处理组HIF-1α、GLUT-1及VEGF的蛋白及mRNA表达明显高于常氧培养组(P<0.05);给予低氧预处理组siRNA HIF-1α后其HIF-1α、GLUT-1及VEGF的蛋白及mRNA表达均明显低于未干扰前(P<0.05),且细胞增殖受抑制,细胞凋亡和坏死加重(与未干扰前相比,P<0.05)。结论低氧预处理可促进BMSCs的体外增殖,减轻坏死,其机制可能与低氧预处理后HIF-1α表达增加及上调其下游基因GLUT-1和VEGF表达有关。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞(bmscs) 低氧 增殖 凋亡
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SDF-1表达升高促进骨髓间充质干细胞(BMSC)迁移减轻哮喘大鼠气道炎症 被引量:1
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作者 朱慧志 王坤 +2 位作者 朱舜之 王大伟 刘向国 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期213-219,共7页
目的 观察基质细胞衍生因子1(SDF-1)与骨髓间充质干细胞(BMSC)迁移及哮喘大鼠气道炎症的相关性。方法 取24只清洁级SD大鼠,随机均分为正常对照组、模型组、BMSC组;除对照组外,其余两组予卵清蛋白致敏激发制备哮喘模型,BMSC组于造模完成... 目的 观察基质细胞衍生因子1(SDF-1)与骨髓间充质干细胞(BMSC)迁移及哮喘大鼠气道炎症的相关性。方法 取24只清洁级SD大鼠,随机均分为正常对照组、模型组、BMSC组;除对照组外,其余两组予卵清蛋白致敏激发制备哮喘模型,BMSC组于造模完成当天由尾静脉注射1 mL 106个BMSC。采用HE染色观察肺组织病理形态变化;Wright-Giemsa染色,光镜下计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中各种炎细胞数量;ELISA检测BALF中白细胞介素4(IL-4)、IL-5、IL-13、IgE、IgG1、IgG2a含量;反转录PCR检测肺组织中SDF-1、信号转导子与转录激活子6(STAT6)的mRNA表达;免疫荧光细胞化学染色检测支气管上皮细胞中SDF-1的蛋白表达;Western blot法检测肺组织SDF-1、STAT6蛋白水平。结果 与对照组相比,模型组BALF中炎细胞计数及IL-4、IL-5、IL-13、IgE、IgG1、IgG2a含量显著升高;肺组织SDF-1、STAT6 mRNA和蛋白表达量显著升高;支气管上皮细胞SDF-1表达明显升高。与模型组相比,BMSC组BALF中炎细胞数目及炎性细胞因子含量均减少;肺组织STAT6 mRNA和蛋白表达降低,SDF-1基因表达量有所升高;支气管上皮细胞SDF-1蛋白表达增加。结论 哮喘炎症过程中,受损部位的趋化因子SDF-1的表达升高,并促进BMSC向哮喘大鼠肺组织迁移。BMSC通过归巢至受损肺组织发挥调节Th1细胞/Th2细胞免疫失衡的作用,从而抑制哮喘气道炎症。 展开更多
关键词 哮喘 骨髓间充质干细胞(bmsc) 基质细胞衍生因子1(SDF-1) 气道炎症
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BCOR基因敲除促进骨髓间充质干细胞成骨分化的研究 被引量:10
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作者 曹钰 杜娟 范志朋 《北京口腔医学》 CAS 2013年第2期61-64,共4页
目的研究BCL6共抑制因子-BCOR对骨髓间充质干细胞成骨定向分化能力的影响。方法利用慢病毒载体的BCOR shRNA基因敲除BCOR,进行丧失性功能研究。通过检测ALP活性、茜素红染色、钙离子定量分析、成骨分化相关基因的表达,观察骨髓间充质干... 目的研究BCL6共抑制因子-BCOR对骨髓间充质干细胞成骨定向分化能力的影响。方法利用慢病毒载体的BCOR shRNA基因敲除BCOR,进行丧失性功能研究。通过检测ALP活性、茜素红染色、钙离子定量分析、成骨分化相关基因的表达,观察骨髓间充质干细胞体外成骨分化能力。结果 BCOR在牙源性间充质干细胞和骨髓间充质干细胞的表达无明显差异。基因敲除BCOR促进了骨髓间充质干细胞ALP活性、体外矿化能力及成骨分化相关基因骨涎蛋白、骨钙素的表达。结论 BCOR基因表达降低能促进骨髓间充质干细胞成骨分化,证实BCOR是骨髓间充质干细胞成骨分化的抑制基因。 展开更多
关键词 BCOr 骨髓间充质干细胞 成骨分化
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低氧调控大鼠骨髓间充质干细胞OPG/RANKL mRNA的表达 被引量:7
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作者 史新连 胡碧波 +2 位作者 任曼曼 喻文彬 邓辉 《上海口腔医学》 CAS CSCD 2017年第3期258-262,共5页
目的:探讨低氧处理对大鼠骨髓间充质干细胞(rat bone marrow derived mesenchymal stem cells,rBMSCs)骨保护素(osteoprotegerin,OPG)和核因子κb受体活化因子配体(receptor activator of NF-κb ligand,RANKL)mRNA表达的影响。方法:采... 目的:探讨低氧处理对大鼠骨髓间充质干细胞(rat bone marrow derived mesenchymal stem cells,rBMSCs)骨保护素(osteoprotegerin,OPG)和核因子κb受体活化因子配体(receptor activator of NF-κb ligand,RANKL)mRNA表达的影响。方法:采用全骨髓细胞贴壁法分离、培养rBMSCs,应用化学低氧剂氯化钴(CoCl_2)建立低氧模型,分别以0、50、100、200、400μmol/L浓度的CoCl_2孵育细胞,首先采用MTT法检测CoCl_2对细胞增殖的影响;利用实时荧光定量PCR及Western免疫印迹检测低氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)的表达情况。rBMSCs经低氧处理0、12、24、48、72、96 h,实时荧光定量PCR检测OPG、RANKL mRNA的表达。采用SPSS18.0软件包对数据进行统计学分析。结果:与对照组相比,200、400μmol/L的CoCl_2抑制rBMSCs增殖(P<0.05),而50、100μmol/L CoCl_2实验组的增殖并未产生显著影响(P>0.05)。在50、100μmol/L CoCl_2实验组,rBMSCs表达HIF-1α的mRNA和蛋白水平均高于对照组,100μmol/L CoCl_2组较50μmol/L CoCl_2组高。100μmol/L CoCl_2孵育12 h时,低氧组和对照组rBMSCs的OPG、RANKL mRNA的表达无变化(P>0.05);24、48、72、96 h时,与常氧组相比,低氧组OPG mRNA表达水平升高,RANKL mRNA表达水平下降,OPG/RANKL的比值显著升高(P<0.05)。结论:100μmol/L CoCl_2低氧处理可通过调控rBMSCs OPG、RANKL mRNA的表达,从而促进成骨分化。 展开更多
关键词 大鼠骨髓间充质干细胞 低氧 骨保护素 核因子ΚB受体活化因子配体
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髓源性生长因子对糖尿病小鼠BMSCs骨向分化的影响及机制研究 被引量:6
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作者 刘翠 徐晓丽 +4 位作者 李金儒 朱彪 李欢 向光大 郭红延 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期865-869,共5页
目的:探讨髓源性生长因子(MYDGF)对糖尿病小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化的影响及其信号机制。方法:分离、培养糖尿病小鼠BMSCs,碱性磷酸酶(ALP)活性检测BMSCs的成骨活性,茜素红染色观察钙结节,实时荧光定量PCR(qPCR)检测成骨相... 目的:探讨髓源性生长因子(MYDGF)对糖尿病小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化的影响及其信号机制。方法:分离、培养糖尿病小鼠BMSCs,碱性磷酸酶(ALP)活性检测BMSCs的成骨活性,茜素红染色观察钙结节,实时荧光定量PCR(qPCR)检测成骨相关基因Runx2、Osx、ALP和OCN的表达,Western blot检测PI3K、Akt的磷酸化水平。结果:MYDGF呈浓度依赖性地增强ALP活性,促进钙结节形成,显著上调Runx2、Osx和ALP的表达(P<0.05),显著提高PI3K和Akt的磷酸化水平(P<0.05)。结论:MYDGF可通过激活PI3K/Akt信号通路促进糖尿病小鼠BMSCs骨向分化。 展开更多
关键词 髓源性生长因子(MYDGF) PI3K/AKT信号通路 骨髓间充质干细胞(bmscs) 成骨细胞
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动脉移植BMSCs对大鼠缺血再灌注损伤脊髓CNTF和STAT3的影响 被引量:4
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作者 陈珊珊 郭小兵 金华 《中风与神经疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期492-496,共5页
目的探讨肾下腹主动脉移植骨髓间充质干细胞(BMSCs)对大鼠缺血再灌注损伤脊髓CNTF和STAT3的影响及对损伤脊髓功能恢复的作用。方法24只成年SD雌性大鼠随机分为假手术组、对照组及移植组3组,每组8只。术后对大鼠进行后肢神经行为学评... 目的探讨肾下腹主动脉移植骨髓间充质干细胞(BMSCs)对大鼠缺血再灌注损伤脊髓CNTF和STAT3的影响及对损伤脊髓功能恢复的作用。方法24只成年SD雌性大鼠随机分为假手术组、对照组及移植组3组,每组8只。术后对大鼠进行后肢神经行为学评分和运动诱发电位检测,采用RT—PCR、Westernblot检测大鼠缺血节段脊髓内CNTF和STAT3的表达变化。结果与假手术组比较,对照组和移植组BBB评分于术后0d、5d、10d、15d显著降低(P〈0.01),MEP潜伏期延长(P〈0.01)、波幅减小(P〈0.01),脊髓CNTF和STAT3mRNA和蛋白表达增加(P〈0.01);与对照组比较,移植组BBB评分于术后5~15d增高(P〈0.01),MEP潜伏期缩短(P〈0.01)、波幅增加(P〈0.01),CNTF和STAT3mRNA和蛋白表达增加(P〈0.01)。结论肾下腹主动脉移植BMSC可能通过增加损伤脊髓局部CNTF和STAT-3表达促进脊髓缺血再灌注损伤大鼠后肢功能恢复。 展开更多
关键词 脊髓 缺血再灌注 腹主动脉 bmsc 移植 大鼠
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SDF-1促进BMSCs迁移的研究进展 被引量:3
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作者 刘想忠 李章华 许海甲 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期408-415,共8页
骨髓中主要包括两种多能干细胞,即造血干细胞(hematopoietic stem cells,HSCs)和骨髓间充质干细胞(bone marrow derived mesenchymal stem cells,BMSCs)。BMSCs具有多种分化潜能,在一定条件下可向多种细胞方向分化,并且具有免疫调节能... 骨髓中主要包括两种多能干细胞,即造血干细胞(hematopoietic stem cells,HSCs)和骨髓间充质干细胞(bone marrow derived mesenchymal stem cells,BMSCs)。BMSCs具有多种分化潜能,在一定条件下可向多种细胞方向分化,并且具有免疫调节能力。由于取材方便,不会违背伦理问题。因此近年来,其在免疫调节及组织工程学方面的应用有着越来越重要的作用。基质细胞衍生因子-1(stromal cell-derived factor 1,SDF-1)属于趋化因子家族,与其受体CXCR4(C-X-C Chemokine Receptor 4)相互作用后对BMSCs具有明显定向趋化作用,虽然近年来有很多研究对其作用机制进行了探讨,但具体机制仍不十分清楚。本文对近年来SDF-1及其受体对BMSCs的趋化作用机制进行总结,旨在为后续进一步研究提供参考。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 基质细胞衍生因子 迁移
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基于钴60的大鼠BMSCs细胞实验模型的建立 被引量:1
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作者 赵路 贾骏麒 +3 位作者 田磊 靳丹 宗春琳 莫宏兵 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期433-436,共4页
目的:探索基于钴60放射源的γ射线用于建立大鼠骨髓间充质干细胞实验模型的理想加载条件。方法:分别应用γ射线和X射线对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)进行梯度剂量(2~8 Gy)照射,照射后检测各剂量下细胞增殖能力和凋亡程度;并检测照射后... 目的:探索基于钴60放射源的γ射线用于建立大鼠骨髓间充质干细胞实验模型的理想加载条件。方法:分别应用γ射线和X射线对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)进行梯度剂量(2~8 Gy)照射,照射后检测各剂量下细胞增殖能力和凋亡程度;并检测照射后各剂量下活细胞比例和NOX4合成量,进行组间比较。结果:4 Gy以上剂量γ射线可造成细胞形态、增殖能力下降、凋亡增加;4 Gy剂量亚组活细胞明显高于6、8 Gy剂量亚组;相同剂量的γ和X射线在抑制细胞增殖、促细胞凋亡、促NOX4合成等方面无显著性差异。结论:利用钴60放射源的γ射线在4 Gy剂量、2.538 Gy/min剂量率照射条件下可建立大鼠骨髓间充质干细胞实验模型,与同等剂量的X射线具有较好的等效关系。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞(bmscs) Γ射线 X射线 钴60
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黄芩苷通过Wnt/β-catenin信号通路对大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的促进作用 被引量:27
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作者 李晨睿 孟志远 +4 位作者 牛银波 翟远坤 潘亚磊 谢丽 梅其炳 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期919-924,共6页
目的研究黄芩苷(baicalin)对大鼠骨髓间充质干细胞(rat bone marrow derived mesenchymal stem cells,rBMSC)成骨分化过程中Wnt/β-catenin信号通路的影响.方法采用贴壁筛选法体外培养rBMSC,给予黄芩苷3、5、7d后,比较药物处理组与... 目的研究黄芩苷(baicalin)对大鼠骨髓间充质干细胞(rat bone marrow derived mesenchymal stem cells,rBMSC)成骨分化过程中Wnt/β-catenin信号通路的影响.方法采用贴壁筛选法体外培养rBMSC,给予黄芩苷3、5、7d后,比较药物处理组与对照组之间碱性磷酸酶(ALP)的活性.同时检测给予黄芩苷对碱性磷酸酶阳性克隆和矿化结节形成的影响.提取总mRNA和总蛋白,用实时荧光定量PCR检测黄芩苷对Wnt10a、GSK-3β、β-catenin以及LEF1mRNA水平的影响.免疫印迹检测药物处理对β-catenin以及Runx2蛋白表达量的影响.结果黄芩苷明显提高ALP的活性.10μmol·L-1浓度的黄芩苷还可增加碱性磷酸酶克隆数和钙化结节的形成.黄芩苷还可提高Wnt10a、β-catenin、GSK-3β、LEF1以及osteocalcin的mRNA水平,并提高β-catenin和Runx2的蛋白表达量.结论黄芩苷在0.1~50μmol·L^-1的给药浓度下可促进rBMSC的成骨分化成熟,Wnt/β-cate-nin信号可能参与调控rBMSC的成骨分化. 展开更多
关键词 黄芩苷 大鼠骨髓间充质干细胞 成骨分化 WNT/Β-CATENIN信号通路 碱性磷酸酶
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骨髓间充质干细胞表达神经营养因子及对神经干细胞的保护作用 被引量:11
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作者 吴永超 郑启新 +3 位作者 胡东 郝杰 王运涛 刘晓帆 《中国康复理论与实践》 CSCD 2006年第9期780-782,F0003,共4页
目的研究大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)表达脑源性神经营养因子(BDNF)和神经生长因子(NGF)以及BMSC条件培养液对神经干细胞的保护作用。方法取大鼠骨髓培养BMSC,用CD44、CD45和CD71免疫细胞化学染色进行鉴定。提取BMSCmRNA,RTPCR检测BDNF... 目的研究大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)表达脑源性神经营养因子(BDNF)和神经生长因子(NGF)以及BMSC条件培养液对神经干细胞的保护作用。方法取大鼠骨髓培养BMSC,用CD44、CD45和CD71免疫细胞化学染色进行鉴定。提取BMSCmRNA,RTPCR检测BDNF和NGF表达,ELISA检测BMSC培养液中BDNF和NGF的含量。原代取材培养新生大鼠皮质神经干细胞,nestin染色鉴定。用不同比例的BMSC条件培养液培养神经干细胞24h后,热休克诱导凋亡,流式细胞仪检测凋亡细胞比率。结果BMSC贴壁生长,免疫细胞化学染色CD44和CD71阳性表达,CD45阴性表达。BMSC表达BDNF和NGFmRNA,BMSC培养液中含有BDNF和NGF;随培养时间的延长,培养液中BDNF和NGF的浓度增加。BMSC条件培养液可以减少热休克诱导的神经干细胞凋亡比率,并且BMSC条件培养液浓度高者有更好的保护作用。结论BMSC表达神经营养因子BDNF和NGF,对神经干细胞凋亡有保护作用。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞(bmsc) 脑源性神经营养因子(BDNF) 神经生长因子(NGF) 神经干细胞 凋亡 大鼠
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血小板衍生生长因子BB促进SD大鼠骨髓间充质干细胞的增殖 被引量:7
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作者 姜涛 吴硕 +4 位作者 李志强 寿玺 马依热·努尔买卖提 马创 魏琴 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2021年第13期1976-1981,共6页
背景:研究报道小鼠前破骨细胞分泌的血小板衍生生长因子BB可以促进成骨细胞和成血管细胞形成,而应用血小板衍生生长因子BB干预骨髓间充质干细胞的最佳浓度及最佳时间尚不明确。目的:探讨血小板衍生生长因子BB对SD大鼠骨髓间充质干细胞... 背景:研究报道小鼠前破骨细胞分泌的血小板衍生生长因子BB可以促进成骨细胞和成血管细胞形成,而应用血小板衍生生长因子BB干预骨髓间充质干细胞的最佳浓度及最佳时间尚不明确。目的:探讨血小板衍生生长因子BB对SD大鼠骨髓间充质干细胞增殖作用的最佳干预质量浓度及最佳干预时间。方法:体外分离培养SD大鼠骨髓间充质干细胞,第3代细胞经流式鉴定其表面标记物CD45、CD29和CD34,选用纯度较高的骨髓间充质干细胞进行干预实验。将筛选好的细胞接种于96孔培养板中,对照组骨髓间充质干细胞用α-MEM完全培养基培养,其余各组在此基础上加入6.25,12.5,25,50,100μg/L血小板衍生生长因子BB。干预1,3,5,7 d采用CCK-8法检测细胞增殖情况,筛选出血小板衍生生长因子BB干预骨髓间充质干细胞的最佳时间及质量浓度。结果与结论:①经流式鉴定:CD29呈阳性表达(94.6%),CD45呈阴性表达(3.3%),CD34呈阴性表达(0.2%),得到纯度较高的大鼠骨髓间充质干细胞;②采用重复测量方差分析,不同时间点间血小板衍生生长因子BB干预骨髓间充质干细胞的吸光度值改变不同,第3天增殖效果最强,差异有显著性意义(F=27.773,P<0.001),进一步采用LSD法对分组因素进行两两比较,25μg/L血小板衍生生长因子BB组与其他5组比较差异均有显著性意义(P<0.05);③结果表明,25μg/L血小板衍生生长因子BB干预第3天对骨髓间充质干细胞有明显促增殖作用,血小板衍生生长因子BB质量浓度大于50μg/L会促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 干细胞 骨髓间充质干细胞 血小板衍生生长因子 细胞增殖 大鼠 实验
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