Proteome comparisons reveal influence of different dietary proteins on the development of rat jejunum

This study compared proteome profiles and morphological changes of rat jejunum in response to different dietary proteins. Fifty male Sprague-Dawley rats were fed with casein(control), and isolated beef, pork, fish and chicken proteins for 14 days. Proteome analysis,histological observation and PEPT1 quantification of the jejunum were performed. The results indicated that rats fed with chicken proteins had higher PEPT1 mRNA and protein levels(P < 0.05) but lower villus height and ratio of villus height to crypt depth(V/C ratio, P < 0.05) than those fed with casein and pork protein. Label-free LC-MS/MS indicated that, as compared to casein, intake of chicken protein can regulate oligopeptide transport mainly by upregulating PEPT1 protein expression and reducing dipeptidyl-peptidase activity related to biological oxidation, and can reduce oligopeptide absorption capacity by regulating Hippo signaling pathway. Although intake of beef and fish proteins had no significant effect on PEPT1 expression, they altered several signaling pathways.

不同月龄大鼠空肠粘膜上皮细胞的形态、增殖及凋亡

为研究雄性大鼠空肠在发生、发育和衰老过程中上皮细胞增殖与凋亡形态学的变化 ,本实验采用增殖细胞核抗原 (PCNA)免疫细胞化学染色、原位末端标记 (TUNEL)法检测了不同生长发育阶段SD大鼠空肠绒毛粘膜上皮及小肠腺上皮的细胞增殖、凋亡的变化情况 ,并统计测量了不同发育阶段大鼠空肠绒毛的高度、肌层厚度及绒毛杯形细胞、肠腺杯形细胞的数量变化。观察到大鼠空肠肠腺隐窝增殖细胞的阳性着色表达从出生后开始增强 ,到 3月龄时达最高峰 ,12月龄时增殖细胞阳性染色又减弱 ;凋亡细胞主要分布于固有层 ,凋亡阳性细胞数在 3月龄最多 ;大鼠空肠绒毛的高度从初生后开始增加 ,到 3月龄达顶峰 ,而后开始变矮 ;空肠肌层在 3周龄、 12月龄较厚 ;杯形细胞数量于生后 3周迅速增长 ,不同发育阶段的大鼠空肠肠腺隐窝的杯形细胞数量与年龄呈正相关 [动物学报 49(1) :91～ 97,2 0 0 3]。

灵光注射液对失血性休克大鼠胃肠粘膜的保护作用

目的 观察灵光注射液 (复方樟柳碱 )对失血性休克再灌注大鼠胃肠粘膜损伤的影响。方法 将 5 6只雄性Wistar大鼠随机分 4组 ,分别设为假休克组 (8只 )、模型组 (16只 )、灵光注射液低剂量组 (16只 )和高剂量组(16只 ) ,除假休克组外 ,大鼠均经历 4kPa ,70min的失血性休克 ,在休克复苏后 6h和 12h各组分别处死半数动物 ,观察大鼠肠道菌移位情况、病理组织学和超微结构变化。结果 灵光注射液对大鼠失血性休克再灌注引起的肠道细菌移位和胃肠粘膜形态损伤有明显的保护作用 ,其治疗机制可能与改善微循环。

大鼠空肠肌间神经丛NADPH－黄递酶的光镜及电镜观察

用ＮＡＤＰＨ－黄递酶（ＮＤＰ）组织化学染色及电镜技术对正常成年大鼠空肠肌间神经丛的ＮＤＰ分布进行观察。结果显示，ＮＤＰ阳性产物为蓝色，分布于神经元胞浆中，核不着色。电镜下，ＮＤＰ阳性产物为中等电子密度，呈斑块或点状均匀分布或散在于神经元胞浆中，常靠近核膜和粗面内质网，但未发现与特定的细胞器或突触小泡有特殊的定位关系。

脂肪肝大鼠空肠组织内P物质表达的实验研究

目的建立脂肪肝大鼠模型,观察脂肪肝胃肠动力紊乱模型中大鼠空肠组织内P物质(SP)的分布及表达,以探讨SP在脂肪肝胃肠功能紊乱发病机制中的可能作用。方法SD大鼠30只,随机分为正常对照组(n=10)和脂肪肝组(n=20)。采用高脂饮食(主要成分为胆固醇、猪油)制备大鼠脂肪肝模型,复制过程中病理组织切片观察组织成模情况,3个月后采用葡聚糖蓝-2000灌胃,作为胃肠内标志物,观察大鼠肠道传输速度,取正常对照组及模型组大鼠空肠标本,应用免疫组化染色法对SP免疫反应阳性神经纤维进行染色,并应用彩色病理图像分析软件进行分析。结果与正常大鼠相比,脂肪肝大鼠小肠动力明显减弱(P<0.05),空肠SP免疫反应阳性纤维表达减弱(P<0.05)。结论脂肪肝大鼠模型中肠运动功能减退与P物质的减少有一定的相关性。

中药复方对热刺激大鼠空肠热休克蛋白70的影响

为探讨中药复方的抗热应激机理,以大鼠为热应激模型,热应激条件为41℃,2 h。用Real-time PCR和ELISA方法检测了中药复方对热刺激后空肠组织中Hsp70的表达。结果显示,高温刺激后大鼠空肠组织中Hsp70的mRNA和蛋白表达均升高(P<0.01),且中药组Hsp70表达高于热应激组(P<0.01),说明中药复方能通过诱导Hsp70的表达来抵抗高温对机体造成的热刺激。

异亮氨酸对大鼠空肠形态和抗菌肽表达的影响

目的:研究不同浓度的异亮氨酸对大鼠空肠形态和抗菌肽表达的影响;方法:选用40只健康断奶SD大鼠,随机分为四组,分别饲喂含有不同浓度异亮氨酸的饲粮(基础日粮+0%、0.5%、1.0%或1.5%异亮氨酸),试验期为14 d。HE染色观察空肠形态变化,通过荧光定量PCR测定空肠中抗菌肽的表达水平。结果:1)对照组大鼠空肠绒毛整齐,黏膜上皮界限清晰,隐窝较浅,0.5%和1.0%异亮氨酸组大鼠空肠绒毛较对照组排列整齐,绒毛较高,隐窝较浅;与0%、0.5%和1.0%异亮氨酸组相比,1.5%异亮氨酸组大鼠绒毛高度较低,隐窝深度增加。2)与对照组相比,0.5%、1.0%和1.5%异亮氨酸均在不同程度上显著提高了空肠防御素r BD-1的表达,其中0.5%异亮氨酸组大鼠空肠防御素r BD-1表达增加了2.3倍,1.0%异亮氨酸组r BD-1表达量增加了13.1倍,1.5%异亮氨酸组r BD-1表达量增加了14.2倍。结论:添加异亮氨酸可显著增加大鼠空肠防御素基因的表达,适量的异亮氨酸对空肠黏膜形态具有改善作用,过量异亮氨酸可能破坏空肠黏膜形态。

牛乳铁蛋白促进空肠上皮细胞株IEC-6细胞活性的研究

目的探讨牛乳铁蛋白对大鼠空肠上皮细胞株IEC-6的细胞活性、增殖能力的影响。方法体外培养IEC-6细胞,MTT法检测不同浓度牛乳铁蛋白对IEC-6细胞的活性,Brdu标记检测牛乳铁蛋白对细胞增殖能力的影响,流式细胞术检测细胞周期。结果牛乳铁蛋白促进IEC-6细胞活性,且呈浓度依赖效应,牛乳铁蛋白处理浓度为100μg/ml时,IEC-6细胞活性显著上调(P<0.05)。牛乳铁蛋白可通过调节细胞周期促进IEC-6细胞增殖,牛乳铁蛋白在100μg/ml时细胞Brdu增殖活性发生显著性上调(P<0.05),在200μg/ml牛乳铁蛋白处理浓度时增殖能力达到顶峰。牛乳铁蛋白可通过调控IEC-6的细胞周期,从G1期向S期转化。结论牛乳铁蛋白可能通过调控细胞周期从G1期向S期转化,从而促进大鼠空肠上皮细胞株IEC-6细胞活性及增殖能力。

不同浓度腺苷对肥胖症大鼠离体空肠平滑肌活动及肠系膜微循环的影响

目的:探讨腺苷对肥胖症大鼠离体空肠平滑肌活动及肠系膜微循环的影响。方法:实验分为普通饲料喂养大鼠组(A组)和高能量饲料喂养肥胖大鼠模型组(B组)。检测腺苷干预时肥胖症大鼠脂肪/体重比(L/W)?血清甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)水平?空肠平滑肌活动幅度(-dT)?主动张力最大舒张速率(-dT/dt-max)、Lee′s指数以及肠系膜微循环指标的变化。结果:(1)B组大鼠体重?L/W?Lee′s指数?TG、TC及腺苷浓度在200μmol/L时-dT/dtmax均高于A组(P<0.05～0.01)。(2)B组大鼠空肠平滑肌-dT低于A组(P<0.05)。(3)B组大鼠腺苷干预前微血管口径大于A组(P<0.05);血流速度小于A组(P<0.01),腺苷干预(浓度200μmol/L)后血流速度明显大于腺苷干预前(P<0.01),血液流态改善为线流。结论:腺苷可明显改善肥胖症大鼠空肠平滑肌活动和肠系膜微循环。

同种异体大鼠骨髓间充质干细胞移植对放射性空肠损伤的修复作用

目的观察同种异体骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对放射性空肠的修复作用。方法全骨髓贴壁体外培养大鼠MSCs并进行DAPI标记。对大鼠行5 Gy X线全腹部照射,每隔72 h照射1次,共5次,制备放射性空肠损伤动物模型。取40只大鼠,随机分成正常对照组、模型及MSCs治疗组及DAP标记组。激光共聚焦显微镜下观察DAPI标记的MSCs在空肠组织中富集情况。病理学观察MSCs对放射性空肠损伤的修复作用。结果正常大鼠空肠黏膜结构清楚,隐窝深遂,腺体丰富,模型组7 d黏膜上皮细胞坏死脱落,隐窝几乎完全破坏,治疗组7 d黏膜坏死组织较少,黏膜增厚,30 d治疗组核分裂相增加,较模型组增加明显。结论成功建立放射性空肠损伤动物模型,MSCs可以促进空肠再生与修复。

大鼠实验性脾虚证空肠粘膜吸收细胞ATP酶的细胞化学研究

用Ｗｉｓｔａｒ成年雄性大鼠８只，分为对照组、实验性脾虚组、自然恢复组和中药治疗组。四组动物用水合氯醛麻醉后，经心脏灌流固定，取空肠制成５０μｍ厚的振荡切片，按Ｒｏｂｉｎｓｏｎ和Ｋａｒｎｏｖｓｋｙ法显示Ｍｇ２＋－ＡＴＰａｓｅ，然后常规电镜包埋和制片，在Ｈ－７００型电镜下观察。结果显示，在粘膜吸收细胞微绒毛质膜铈离子（Ｃｅ３＋）沉淀呈现为电子密度较高的细密颗粒。脾虚组酶反应强度明显低于对照组；自然恢复组酶反应高于脾虚组而低于对照组；中药治疗组酶反应较高，与对照组相似。本文提示，肠粘膜吸收细胞ＡＴＰ酶活性的降低。

大鼠空肠神经肽Y免疫反应性神经的分布

用免疫组织化学ＰＡＰ法，在光镜水平观察了神经肽Ｙ免疫反应性（ＮＰＹ－ＩＲ）神经纤维和神经元在大鼠空肠壁内的分布。结果显示：ＮＰＹ－ＩＲ神经纤维遍布肠壁各层；位于粘膜固有层内小肠腺之间的神经纤维交织成疏网状。ＮＰＹ－ＩＲ神经元主要分布在粘膜下神经丛和肌间神经丛。粘膜内也可见ＮＰＹ－ＩＲ神经元；紧贴粘膜肌的神经元有突起伸至粘膜肌和肠腺，位于小肠腺之间固有层内的神经元可伸出长突起至肠腺。对ＮＰＹ－ＩＲ神经的起源及其对肠粘膜功能的调节作用进行了讨论。

四君子汤对脾虚大鼠胃肠平滑肌细胞肌球蛋白轻链激酶含量的影响

【目的】观察四君子汤颗粒剂对脾虚大鼠胃肠平滑肌细胞肌球蛋白轻链激酶(MLCK)含量的影响,探求其对大鼠胃肠动力调节的机制。【方法】采用饥饱失常+劳倦+破气耗气方法复制脾虚大鼠模型,将60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、四君子汤组(剂量为6.3 g/kg)、莫沙必利组(剂量为1.35 mg/kg),采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定胃肠平滑肌细胞MLCK含量。【结果】模型组大鼠胃窦及空肠平滑肌细胞MLCK含量显著减少,与正常组比较差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,中药组胃窦和空肠平滑肌细胞MLCK含量显著上升,与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。【结论】四君子汤能促进大鼠胃窦及空肠平滑肌收缩,可能与其提高胃窦及空肠平滑肌细胞MLCK含量有关。

镉对大鼠离体空肠力学特性影响的研究

目的 研究镉对大鼠离体空肠力学特性的影响。方法 大鼠 30只 ,各制 2条离体平滑肌条标本 ,共 6 0个 ,分成 3组。分别以盐水、4个剂量组氯化镉液和氯化钙对肌条作灌注 ,用张力感受器测量离体空肠平滑肌的主动张力(PT)、基础张力 (RT)、主动张力最大收缩速率 (dT/dtmax)和主动张力最大舒张速率 ( -dT/dtmax)、缩短速度 (VCE)、刺激到张力峰值的时程 (TPT)。结果 镉离子浓度在 2 7 5 μmol/L时 ,dT/dtmax和 -dT/dtmax降低 ,RT无明显变化 ,随着镉离子浓度增大 ,观察指标均明显降低 ,当镉离子浓度达 5 5 μmol/L ,有部分标本停止收缩。随着镉离子浓度继续加大 ,停止主动收缩的标本例数亦随之增加。结论 镉离子可直接引起空肠平滑肌收缩力降低 。

复方九里香颗粒对大鼠空肠黏膜P-糖蛋白的影响

目的:观察复方九里香颗粒对P-糖蛋白(P-gp)的调控作用,探讨其对临床联合用药的影响。方法:将20只SD雄性大鼠随机分为4组,每组5只,空白组灌胃给予20mL·kg-1的0.9%氯化钠注射液,实验组灌胃给予复方九里香颗粒20g·kg-1,每日2次。1周后采用体外扩散池法评价复方九里香颗粒对罗丹明123(R123)和荧光素钠(CF)经空肠黏膜透过性的影响,用荧光分光光度法测定R123和CF的浓度,并分析各组表观渗透系数(Papp)差异。结果:与空白组相比,实验组对R123吸收和分泌方向的透过性没有显著性影响,P值分别为0.955和0.843;与空白组相比,实验组对CF吸收和分泌方向透过性也没有显著性影响,P值分别为0.892和0.500。结论:复方九里香颗粒对肠黏膜P-gp无显著影响,对细胞间紧密连接也无显著影响,推测在临床联合用药中,不影响其他P-gp底物药物的吸收转运规律,不需要调整给药剂量。

海洛因依赖大鼠空肠5-羟色胺免疫反应细胞免疫组织化学及形态计量研究

目的:探讨海洛因依赖对大鼠空肠5-羟色胺免疫反应(5-HT-IR)细胞的影响。方法:应用免疫组织化学SABC法、图像分析法及形态计量法,研究海洛因依赖期间大鼠空肠5-HT-IR细胞的免疫组织化学反应、平均灰度值及细胞数量的变化。结果:海洛因依赖组大鼠空肠5-HT-IR细胞的免疫反应较空白组及盐水对照组明显增强,免疫染色加深,以24 d最显著;图像分析表明,海洛因依赖组大鼠空肠5-HT-IR细胞平均灰度值显著降低(P<0.05),以24 d最低;海洛因依赖组大鼠空肠5-HT-IR细胞数量明显增多(P<0.05)。结论:海洛因依赖大鼠空肠5-HT-IR细胞通过增加细胞数量和增强细胞分泌能力,参与了海洛因依赖期间机体的调节过程。

ATP对辐射损伤小鼠空肠肠腺存活率和cGMP含量的影响

[目的 ]探讨核酸前体 (ATP)对辐射损伤空肠的修复作用。[方法 ]选用 2 0只 BAL B/ c雄性小鼠 ,用 115 0c Gy6 0 Coγ线进行腹部照射实验 ,随机分为 4组 ,照后 1h内分别在小鼠后肢肌肉内注入 ATP 0、6、8、12 mg/ kg,第 4d取空肠段进行肠腺存活率和 c GMP含量的测定。 [结果 ]ATP可明显提高受腹部照射小鼠空肠的肠腺存活率和c GMP含量 ;随着药物剂量的增加肠腺存活率和 c GMP含量呈钟型曲线 ,并呈同步改变 ,其最适剂量为 6 mg/ kg。[结论 ]ATP可明显提高辐射损伤小鼠空肠 c GMP含量 。

重症急性胰腺炎大鼠空肠酶组织化学的变化

目的观察重症急性胰腺炎(SAP)时空肠组织酶活性的变化。方法将大鼠随机分为假手术组(SO组,开腹后牵拉十二指肠、胰腺)、SAP组(用逆行胰胆管注射牛磺胆酸钠复制SAP模型)、谷氨酰胺(Gln)治疗组(SAP+Gln组,制作SAP模型后用Gln治疗),于术后24h、48h、72h分批处死动物,用组织化学染色法对空肠组织中碱性磷酸酶(ALP)、ATPase酶、细胞色素C氧化酶(CCO)、琥珀酸脱氢酶(SDH)进行染色,观察比较酶活性变化及其规律。结果SAP组ALP、ATPase、CCO、SDH活性明显降低,且随病程发展呈进行性下降,经过Gln治疗后酶的活性显著恢复。结论SAP时肠道功能随病情进展而下降,谷氨酰胺具有保护肠道功能的作用。

不同月龄大鼠空肠杯形细胞的组织学研究

观察了不同月龄 SD大鼠空肠绒毛粘膜上皮及小肠腺上皮中杯形细胞的分布及数量变化 ,并统计测量了不同月龄大鼠空肠绒毛高度、宽度变化及腺体长短径的变化 .结果发现同一月龄组杯形细胞均由绒毛底部向顶部呈减少的趋势 .不同月龄组之间 ,绒毛体部和底部杯形细胞数量与月龄呈正相关 .大鼠空肠绒毛、腺体的高度从出生后开始增加 ,到 3月龄达最高峰 ,而后开始变矮 ;绒毛。

大、小鼠空肠、肝及肾组织中P型铜转运ATP酶蛋白的表达

目的:检测大、小鼠空肠、肝及肾组织中P型铜转运ATP酶(ATP7B)蛋白的表达。方法:分别取6只SD大鼠和7只昆明小鼠,取空肠、肝及肾组织,常规石蜡切片,采用免疫组化法检测ATP7B蛋白的表达。结果:大、小鼠空肠绒毛上皮的纹状缘和近基底部、小肠腺、肾小管和肝细胞中均有不同程度的ATP7B蛋白表达。大鼠空肠、肝及肾组织ATP7B的积分光密度分别为(224474.380±228536.513)、(94116.484±45821.113)和(118128.741±41046.629),小鼠上述3种组织中ATP7B的积分光密度分别为(129023.602±87570.591)、(150614.511±52981.792)和(118403.634±53656.681),大、小鼠同一组织器官ATP7B的积分光密度相比,差异均无统计学意义(t=1.239、1.355、0.009,P均>0.05)。结论:ATP7B蛋白在大、小鼠空肠、肝及肾组织中均有表达,其表达量的高低与动物种属关系不大。