川芎中总生物碱、总酚酸和总挥发油对大鼠离体子宫平滑肌收缩活动的抑制作用

目的:考察川芎中总生物碱、总酚酸和总挥发油对大鼠离体子宫平滑肌收缩活动的抑制作用,为阐明川芎活血调经的传统功效提供依据。方法:取大鼠离体子宫平滑肌浸泡于洛氏液中,以二甲基亚砜为空白对照、盐酸维拉帕米为阳性对照,采用Power Lab生理记录仪记录子宫平滑肌收缩曲线,通过观察收缩活动力、收缩张力变化来评价川芎中总生物碱、总酚酸(质量浓度均分别为0.025、0.05、0.1 mg/m L)和总挥发油(0.04、0.08、0.16 mg/m L)对缩宫素致大鼠离体子宫平滑肌收缩的抑制作用,并计算子宫平滑肌收缩活动力抑制率和收缩张力抑制率。结果:加入缩宫素后大鼠离体子宫平滑肌的收缩活动力、收缩张力较加入缩宫素前均显著升高(P<0.05或P<0.01),不同质量浓度3类川芎组分均可显著降低子宫平滑肌的收缩活动力、收缩张力(P<0.05或P<0.01)。与空白对照比较,除0.025 mg/m L总酚酸外,给予其余浓度药物或组分后子宫平滑肌的收缩活动力抑制率和收缩张力抑制率均显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论:川芎中总生物碱、总酚酸和总挥发油对缩宫素致大鼠离体子宫平滑肌收缩均有一定的抑制作用,这为川芎活血调经的用法提供了参考依据。

香附对未孕大鼠离体子宫肌收缩的影响

目的探讨香附对未孕大鼠离体子宫平滑肌条运动的影响及其机制。方法选用Wistar雌性未孕大鼠60只,体重250-300 g,用Biolap410生物机能仪记录正常子宫平滑肌肌条收缩运动,并分别用苯海拉明(2×10-6mol/L)、酚妥拉明(2×10-6mol/L)、异搏定(2×10-7mol/L)、吲哚美辛(2×10-5mol/L)作用于肌条5 min后,加入香附水煎醇沉液(以下简称香附)以及单用香附,观察对离体子宫平滑肌运动的影响并分析作用机制。结果香附减弱未孕大鼠离体子宫平滑肌的收缩运动,收缩波的频率减慢,振幅减小,持续时间缩短。结论香附减弱未孕大鼠离体子宫平滑肌的收缩运动,该作用可能是通过前列腺素的合成与释放,与L-型钙通道、H1受体、α受体无关。

血根碱对大鼠离体子宫平滑肌收缩的影响及其机制研究

试验旨在研究血根碱对大鼠离体子宫平滑肌活动的影响。分离8周龄SD雌性未孕大鼠子宫平滑肌,通过BL-420F生物信号采集系统记录子宫平滑肌收缩频率和收缩幅度,计算子宫平滑肌活力。以硫酸阿托品、盐酸普萘洛尔、盐酸苯海拉明及盐酸雷尼替丁为阻断剂,观察血根碱对子宫平滑肌M、β、H1、H2受体的关系,探讨血根碱对子宫平滑肌的作用机制。结果显示,血根碱组和元胡止痛片组对缩宫素所致大鼠离体子宫平滑肌收缩频率、收缩幅度和活力均有显著的抑制作用(P<0.05);应用H1受体阻断剂苯海拉明和H2受体阻断剂雷尼替丁后,血根碱对子宫平滑肌抑制作用基本被阻断,而应用M受体阻断剂阿托品,β受体阻断剂普萘洛尔后,血根碱对子宫平滑肌收缩仍具有显著的抑制作用(P<0.05)。综上所述,血根碱对大鼠子宫平滑肌活力具有显著的抑制作用,可能是通过抑制H1、H2受体实现,与M、β受体无关。

远志增强未孕大鼠子宫平滑肌运动的机制研究

目的:探讨远志对未孕大鼠子宫平滑肌电活动及离体子宫平滑肌条运动的影响及其机制。方法:在体组随机选取成年未孕大鼠60只分为实验组(n=15)与5个机制组(n=9),实验时腹腔注射1次远志水煎剂溶液(以下简称“远志”),剂量为0.02,0.04,0.08 g·kg-13种浓度,等容量生理盐水作自身对照。腹腔注射1种阻断剂10min后再注射远志0.04 g·kg-1;离体组肌条在1 g的前负荷下温育,远志浓度为2×10-4 g·mL-1,记录30 min;分别使用不同的受体拮抗剂, 5 min后再加入远志。用Biolap 410生物机能仪记录远志对子宫平滑肌电活动及离体子宫平滑肌运动的影响。结果与结论: 远志对未孕大鼠子宫平滑肌的运动有增强作用。远志对未孕大鼠子宫肌电的增强作用可能主要通过L型Ca2+通道,α受体,H1受体发挥作用,与前列腺素合成和释放有关,平滑肌细胞膜上的M受体,并不参与介导其兴奋作用;而其对未孕大鼠离体子宫平滑肌收缩运动的增强作用,可能是通过L型 Ca2+通道、α受体、H1受体发挥作用,与前列腺素合成和释放及M受体无关。

黑顺片总生物碱对番泻叶致小鼠腹泻及大鼠离体小肠平滑肌运动的影响

目的:考察黑顺片总生物碱对番泻叶致小鼠腹泻及大鼠离体小肠平滑肌运动的影响。方法:采用番泻叶致小鼠腹泻模型,以小肠推进率为考察指标,观察黑顺片总生物碱对小鼠腹泻的影响;采用大鼠离体小肠平滑肌实验,以小肠平滑肌收缩的振幅和张力为考察指标,观察黑顺片总生物碱对小肠平滑肌运动的影响及其作用机理;采用HPLC法,分析黑顺片总生物碱中的化学成分。结果:黑顺片总生物碱能显著减慢腹泻小鼠小肠推进运动(P<0.05),并能剂量依赖性降低正常大鼠离体小肠平滑肌收缩的振幅和张力,对氯化乙酰胆碱、甲硫酸新斯的明所兴奋的小肠平滑肌运动均具有一定的抑制作用,但对硫酸阿托品所抑制的小肠平滑肌运动无明显影响。经HPLC分析,苯甲酰新乌头碱、苯甲酰乌头碱及苯甲酰次乌头碱均是黑顺片总生物碱的主要化学成分。结论:黑顺片总生物碱对腹泻小鼠具有一定的止泻作用,其作用机理可能与抑制M胆碱受体有关。

植物性雌激素对子宫肌瘤模型大鼠血清NOS、TNF-α、IL-2水平及子宫平滑肌厚度的影响研究

目的探究植物性雌激素对子宫肌瘤模型大鼠血清NOS、TNF-α、IL-2水平及子宫平滑肌厚度的影响。方法选取74只Wistar大鼠,采用腹腔注射苯甲酸雌二醇建立子宫肌瘤大鼠模型,随机分为2组。实验组36例,灌胃给予植物性雌激素依普黄酮溶液,对照组38例,灌胃给予非植物性雌激素结合雌激素溶液。治疗2周后,检测并比较2组大鼠血清NOS、TNF-α及IL-2水平。结果治疗后,对照组大鼠血清NOS、TNF-α水均较治疗前显著降低(P<0.05),实验组大鼠血清NOS、TNF-α水平较治疗前显著升高(P<0.05),治疗后实验组较对照组显著升高(P<0.05)。治疗后,对照组大鼠IL-2水平较治疗前显著升高(P<0.05);实验组大鼠IL-2水平较治疗前显著下降(P<0.05)。治疗后,对照组大鼠子宫平滑肌厚度较治疗前显著减少(P<0.05);实验组大鼠子宫平滑肌厚度较治疗前显著增加(P<0.05);且实验组大鼠平滑肌厚度显著高于对照组(P<0.05)。结论植物性雌激素可升高子宫肌瘤模型大鼠血清NOS、TNF-α含量、降低血清IL-2水平,对大鼠子宫平滑肌有显著的增厚作用,是加重子宫肌瘤模型大鼠病情的药物,不适用于子宫肌瘤患者的治疗,临床应对该药物的使用进行严格监管。

元胡止痛滴丸镇痛作用配伍合理性体外研究

目的通过观察元胡止痛滴丸及其组成成分对离体子宫收缩及原代子宫平滑肌细胞外钙内流的影响,探讨其配伍的合理性及可能的作用靶点。方法利用离体子宫及原代子宫平滑肌细胞测定元胡止痛滴丸及其组份对缩宫素或前列腺素F_(2α)引起的子宫收缩的影响、对缩宫素或高K^+引起的子宫平滑肌细胞外钙内流的影响。结果元胡止痛滴丸可有效降低缩宫素或前列腺素F_(2α)引起的子宫收缩的活动力,舒张子宫平滑肌,可有效减少缩宫素或高K^+引起的子宫平滑肌细胞外钙内流,可部分拮抗缩宫素或高K^+引起的子宫平滑肌收缩。结论元胡止痛滴丸可有效抑制子宫收缩而具有镇痛作用,作用强度优于组份单用,配伍具有合理性,作用靶点与受体激活的钙通道及电压依赖的钙通道有关。

酶消化法急性分离大鼠主动脉平滑肌细胞及其鉴定

目的探讨采用酶消化法快速分离SD大鼠胸、腹主动脉平滑肌细胞的方法,为膜片钳实验提供大量原代平滑肌细胞。方法取SD大鼠胸、腹主动脉,用酶液Ⅰ(木瓜蛋白酶等)、酶液Ⅱ(胶原酶和透明质酸酶等)酶解分离平滑肌细胞,酶液Ⅰ、Ⅱ的消化时间分别选取10、15、20、25、30 min,并两两组合以确定最佳消化时间。分离的细胞经台盼蓝染色测定其活性并通过平滑肌特异性α-肌动蛋白(α-actin)免疫组化染色鉴定。结果分离的平滑肌细胞在倒置显微镜下计数,酶液Ⅰ、Ⅱ的消化时间分别在30、15 min时平滑肌细胞数量最多为(18.3±1.5)个/低倍视野,与其他各时间点组合相比,差异有统计学意义(P<0.05)。镜下观察典型的平滑肌细胞呈长梭形,细胞膜完整,边缘光滑;台盼蓝染色,90%以上的细胞为活细胞;免疫组化染色鉴定为平滑肌细胞。结论酶消化法分离获取SD大鼠平滑肌细胞方法简单、成本低,采用本法可获得较大量的平滑肌细胞供实验使用。

养血妇康颗粒剂对子宫平滑肌收缩功能的影响

目的 :观察养血妇康颗粒剂对子宫平滑肌收缩功能的影响。方法 :分别采用产仔后 4～ 6日SD品系大鼠在体子宫和剖宫产手术时人体离体子宫观察养血妇康颗粒剂对子宫平滑肌收缩振幅、频率和活力的影响。结果 :养血妇康颗粒剂可显著增强大鼠在体子宫和人体离体子宫平滑肌收缩振幅、频率和活力。结论

王不留行对大鼠子宫平滑肌的影响

目的:观察王不留行(Vaccaria segetalis Garcke,VSG)水煎剂对大鼠子宫平滑肌离体肌条的作用机制。方法:采用恒温灌流浴槽,记录子宫平滑肌离体肌条收缩波的振幅、持续时间、收缩面积和频率,给予VSG(2 mg·L-1,4 mg·L-1,8 mg·L-1,16 mg·L-1,32 mg·L-1)并观察其量效关系(r);将标本分为正常组(NS)、VSG、VSG+异搏定、VSG+酚妥拉明、VSG+苯海拉明、VSG+消炎痛和VSG+阿托品7组,探讨VSG收缩离体肌条的作用机制。结果:VSG能增强肌条收缩波的振幅、持续时间、面积和频率,并有量效依赖性(持续时间:r=0.94,t=5.41,P<0.01;收缩面积:r=0.86,t=3.41,P<0.05;频率r=0.96,t=7.18,P<0.05),而振幅的量效关系不明显(r=0.06,t=0.12,P>0.05)。异搏定和阿托品能抑制VSG收缩子宫肌条的作用,而苯海拉明、消炎痛和酚妥拉明无影响。结论:VSG可能是通过L-钙通道和M型受体,升高胞浆内Ca2+而增强子宫平滑肌的收缩作用。

大鼠肺细小动脉平滑肌细胞培养新方法的建立及血小板衍生因子对其增殖迁移的影响

目的：建立一种操作简单、实验仪器要求低的大鼠肺细小动脉平滑肌细胞（PASMCs）分离和培养的方法，并且探索血小板衍生因子（PDGF）介导的增殖、迁移的情况。方法：向右心注射铁及琼脂糖，利用琼脂糖能同时粘附血管内皮细胞、平滑肌细胞及铁粉，再结合胶原酶I的消化，通过磁力架吸引铁，特异性地分选出带血管的肺组织，经过3～4周左右的培养及纯化，得到肺细小动脉平滑肌细胞。用倒置相差显微镜观察细胞形态，免疫细胞化学法和免疫荧光染色法进行小平滑肌肌动蛋白鉴定。MTT实验和划痕实验检测PDGF诱导的肺动脉细小平滑肌细胞的增殖和迁移。结果：分离后第14天、第21天及传代后进行鉴定，均表明分离培养的细胞为PASMCs。MTr结果表明，与不加PDGF组相比，PDGF增殖明显增加（P〈0．05）。划痕实验结果显示PDGF刺激组比不刺激组迁移显著增多。结论：本方法分离培养大鼠的PASMCs，操作方便，实验仪器要求低。PDGF能够促进肺细小动脉平滑肌细胞的增殖、迁移。

大鼠气管平滑肌细胞的分离及L-钙通道的记录

目的建立一种大鼠气管平滑肌细胞急性酶分离法并在分离的细胞上研究其L型钙通道(L-Ca)特性。方法采用链酶蛋白酶分离大鼠气管平滑肌细胞,用膜片钳单通道记录法记录L-Ca通道电流。结果该方法分离过程简单,所获细胞数量多,形态正常,在这些细胞上容易记录到正常的L-Ca通道电流。结论应用本方法易得到单个活性正常的、形态完整的大鼠支气管平滑肌细胞。

蒲黄对未孕大鼠离体子宫平滑肌运动的影响及机理探讨

目的探讨蒲黄水煎剂对未孕大鼠离体子宫平滑肌运动的影响。方法利用B iolap410生物信号显示与处理软件记录平滑肌条的等长收缩活动。结果蒲黄水煎剂能使子宫平滑肌收缩波的持续时间延长,其作用可被L型Ca2+通道阻断剂异搏定阻断。结论蒲黄能增加子宫平滑肌条收缩活动,其作用可被L型Ca2+通道阻断剂异搏定阻断。

不同针刺刺激量对寒凝证类痛经模型大鼠血清及子宫组织内钙离子的影响

目的:观察不同针刺刺激量诱导动物不同"得气"状态对寒凝证类痛经模型大鼠血清Ca2+及子宫Ca2+的影响,探讨针刺"得气"治疗痛经相关机制。方法:将90只SD雌性大鼠,随机分为4组:盐水对照组18只,寒凝证类痛经模型组(模型组)、刺激量A组(期望"得气"组)与刺激量B组(期望"不得气"组)各24只,采用全身冷冻联合雌激素法建立寒凝类痛经大鼠模型,并用粗针深刺行手法与细针浅刺不行手法干预模型20 min,采用不同检测方法观察血清及子宫组织内钙离子变化情况。结果:1.血清内Ca2+含量:与盐水组比较,模型组及刺激量B组血清内Ca2+含量显著增多(P<0.01);与模型组比较,刺激量A组血清内Ca2+含量显著降低(P<0.01)。2.各组子宫组织内Ca2+含量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。3.4组大鼠子宫平滑肌内Ca2+荧光强度及百分比比较,各组间P1/P2荧光强度无明显变化,但模型组P2百分比显著增多(P<0.01),而刺激量A组能够明显降低P2百分比(P<0.01)。结论:刺激量A组能明显降低痛经模型血清Ca2+浓度及Fluo-3-AM负载细胞子宫Ca2+荧光强度百分比,分析认为不同针刺刺激量诱导的不同"得气"状态治疗痛经的机制是通过调节血清及子宫平滑肌内Ca2+水平实现镇痛。

SD大鼠胃窦平滑肌细胞分离方法的改进

目的改进SD大鼠胃窦平滑肌细胞的分离方法,为胃肠道疾病的研究提供技术平台。方法Ⅱ型胶原酶消化法急性分离SD大鼠胃窦平滑肌细胞,制成细胞悬液,台盼蓝检测细胞活力,显微镜下观察记录细胞收缩长度。结果 1%Ⅱ型胶原酶消化法急性分离可获得细胞膜完整、生物活性状态良好的单个胃窦平滑肌细胞,该细胞符合胃肠道疾病实验研究的要求,可用于相关实验研究。结论酶消化急性分离法是获得单个胃肠道平滑肌细胞的一种简便、高效、易操作的方法。

盐酸益母草碱和盐酸水苏碱对大鼠离体子宫收缩的影响

目的探索2种生物碱对大鼠离体子宫的作用,为益母草相关制剂质量标准中活性质控成分的研究提供实验依据。方法采用大鼠离体子宫实验,依次将盐酸益母草碱和盐酸水苏碱分别作用于未处理大鼠离体子宫及缩宫素致大鼠离体子宫收缩模型,观察子宫收缩幅度及频率的变化。结果作用于缩宫素致离体子宫收缩模型时,0.03、0.06、0.09 mg/mL共3个剂量的盐酸益母草碱均使子宫肌收缩频率明显降低,收缩幅度显著降低(P<0.01);0.12、0.18 mg/mL两个剂量的盐酸水苏碱使收缩频率明显增高,0.18 mg/mL剂量使收缩幅度显著增高(P<0.01)。作用于未处理离体子宫时,2种生物碱单体均未见对子宫肌产生明显收缩作用。结论盐酸益母草碱和盐酸水苏碱对缩宫素致大鼠离体子宫收缩分别呈现出抑制和增强(或协同)作用。

麸煨肉豆蔻不同提取物对大鼠离体肠平滑肌的影响

目的研究麸煨肉豆蔻不同提取物对大鼠离体肠管自发活动的影响。方法采用RM6240B多道生理信号采集处理系统及大鼠离体十二指肠平滑肌进行实验,观察麸煨肉豆蔻不同提取物对离体肠运动功能的影响。结果麸煨肉豆蔻挥发油、醇提物、醇提物的石油醚提取物及乙酸乙酯提取物对离体大鼠十二指肠自主运动有抑制作用,抑制率分别为51.2%、29.2%、47.8%和59.2%(P<0.01);水提物、正丁醇提取物及醇提取物萃取后的水层无抑制作用。结论麸煨肉豆蔻的挥发油、醇提物的石油醚、乙酸乙酯提取物可能为麸煨肉豆蔻止泻的有效部位。

骨髓间充质干细胞移植增强大鼠子宫切口再生修复

目的:探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)移植在大鼠子宫创伤后再生修复中的作用。方法:建立大鼠瘢痕子宫模型。取Ad-GFP标记的大鼠MSCs,于子宫切口内注射进行原位移植,2周后取瘢痕处子宫肌组织,行HE常规染色,血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子-β1(TGF-β1)免疫组织化学染色,α-SMA荧光标记,检测MSCs在切口局部的定向分化情况,并定量检测切口局部肌层的生物力学。结果:瘢痕子宫模型成功建立。MSCs移植后子宫切口的破裂阈值增强(P<0.05),切口局部VEGF表达上调,TGF-β1表达下调(均P<0.01),α-SMA荧光标记提示MSCs在子宫肌层局部出现平滑肌定向分化。结论:MSCs移植增强了子宫切口的再生愈合,提高了切口局部的机械张力,有望减少再次妊娠时子宫破裂的风险。

离体子宫平滑肌测定方法的改进

目的:探索离体子宫平滑肌测定方法中,使用增氧泵通气取代混合氧为离体子宫平滑肌供氧的可行性。方法:采用RM-6240BD多道生理信号采集处理系统,观察营养液内通入混合氧、增氧泵通气及无通气对离体子宫平滑肌活动力的影响。结果:与营养液内通入混合氧相比,离体子宫平滑肌的活动力在混合氧组与增氧泵通气组间无统计学差异(P>0.05),不通气组的频率和活动力均有统计学差异(P<0.05或P<0.01)。结论:可以使用增氧泵通气为离体子宫平滑肌供氧,既满足了供氧,同时也可促进营养液流动,使离体子宫与营养液充分接触。

黄连水煎剂对未孕大鼠子宫平滑肌电活动的作用及其机制研究

目的 :探讨黄连水煎剂对大鼠子宫平滑肌电活动的作用及机制。方法 :在大鼠子宫浆膜层包埋一对微型Ag AgCl电极 ,用Biolop98生物机能系统记录子宫肌电活动 ,观察腹腔注射黄连水煎剂对大鼠子宫平滑肌电活动的作用以及M受体、组胺H1受体、α受体、L型钙通道及前列腺素合成酶分别被阻断或抑制后这种作用受到影响。结果 :黄连水煎剂可以显著增强大鼠子宫平滑肌电活动 ,阻断M受体与H1受体后 ,该作用部分减弱 ;阻断L型钙通道后 ,该作用基本消失 ;阻断α受体及抑制前列腺素合成酶后 ,该作用不受影响。结论 :低、中、高剂量黄连水煎剂均可不同程度增强大鼠子宫平滑肌电活动 ,该作用可能通过M受体、组胺H1受体及L型钙通道发挥作用 ,与α受体及前列腺素的合成。