大鼠脑组织中一氧化氮合酶测定

在含有一氧化氮合酶（ＮＯＳ）底物左族精氨酸（Ｌ－Ａｒｇ），辅助因子还原性辅酶Ⅱ（ＮＡＤＰＨ）、四氢生物蝶呤（ＢＨ４）、黄素单核苷酸（ＦＭＮ），黄素腺嘌呤二核苷酸（ＦＡＤ）以及Ｃａ２＋、钙调蛋白等溶液中加入大鼠脑组织匀浆离心上清液，组成酶反应体系．３７℃温育８０ｍｉｎ，应用Ｎ－（１－萘基）－乙二胺、对氨基苯磺酸的重氮、偶氮反应测定酶反应体系中一定时间内ＮＯ代谢产物ＮＯ－２浓度变化，建立一种简便的ＮＯＳ活性测定方法．反应体系最佳ｐＨ为７．４，Ｋｍ＝０．１ｍｍｏｌ／Ｌ，体系内ＮＯ－２生成量与加入样品量之间有良好线性关系（ｒ＝０．９９８）．此方法简单、方便、重复性好，批内ＣＶ为３．６９％，批间ＣＶ为５．１６％．１０只健康大鼠脑组织中ＮＯＳ活性为（３９．６１±７．６４）ｎｍｏｌ／（ｍｉｎ·ｇ）