Lateral intracerebroventricular injection of Apelin-13 inhibits apoptosis after cerebral ischemia/reperfusion injury

Apelin- 13 inhibits neuronal apoptosis caused by hydrogen peroxide, yet apoptosis following cerebral ischemia-reperfusion injury has rarely been studied. In this study, Apelin-13 （0.1 μg/g） was injected into the lateral ventricle of middle cerebral artery occlusion model rats. TTC, TUNEL, and immuno- histochemical staining showed that compared with the cerebral ischemia/reperfusion group, infarct volume and apoptotic cell number at the ischemic penumbra region were decreased in the Apelin-13 treatment group. Additionally, Apelin-13 treatment increased Bcl-2 immtmoreactivity and decreased caspase-3 immunoreactivity, Our findings suggest that Apelin-13 is neuroprotective against cerebral ischemia/reperfusion injury through inhibition of neuronal apoptosis.

黄芪注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤VEGF及VEGFR2表达的影响

目的探讨黄芪注射液对大鼠脑缺血/再灌注损伤后细胞凋亡和血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(VEGFR2)表达的影响。方法应用线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注(MCAO/R)模型,经腹腔注射黄芪注射液(6 m L/kg)干预治疗。Longa法评价大鼠神经行为功能,苏木精-伊红染色观察大脑皮质神经元形态结构,原位末端标记法检测细胞凋亡,免疫组化和蛋白印迹法定性和定量检测VEGF及VEGFR2蛋白表达,荧光定量PCR检测VEGF及VEGFR2基因的表达。结果经黄芪注射液治疗后,大鼠大脑皮质区VEGF及VEGFR2蛋白和VEGF及VEGFR2 mRNA表达较对照组明显增强,细胞凋亡显著减少,动物神经行为功能显著改善。结论黄芪注射液可通过上调VEGF及VEGFR2的表达而抑制细胞凋亡,促进受损的神经细胞修复,改善动物的神经行为功能。

黄芪注射液对脑缺血/再灌注大鼠海马神经元Caspase-3表达的影响

目的观察黄芪注射液对脑缺血/再灌注大鼠海马神经元Caspase-3表达的影响。方法将132只♂SD大鼠随机分为4组:假手术组、模型组、黄芪注射液溶剂对照组及黄芪注射液组。采用四血管阻断法建立大鼠脑缺血/再灌注模型[1],于再灌注后0、0.5、2、6、24、72和120 h断头取脑。采用免疫组织化学法、Western blot法检测大鼠海马组织Caspase-3蛋白的表达,实时荧光PCR法检测Caspase-3 mR-NA的表达。结果模型组除0和0.5 h外,其余各个时间点Caspase-3蛋白及mRNA表达均较假手术组增加(P<0.05);与模型组相比,黄芪注射液组除0和0.5 h外其余各个时间点Caspase-3蛋白及mRNA表达均减少(P<0.05),而黄芪注射液溶剂对照组则无明显变化(P>0.05)。结论黄芪注射液能抑制大鼠海马神经元Caspase-3的表达,从而抑制海马神经元的凋亡,保护神经元。

黄芪注射液对脑缺血/再灌注大鼠海马组织JNK-3表达的影响

目的观察黄芪注射液对脑缺血/再灌注大鼠海马组织JNK3蛋白及其mRNA表达的影响。方法采用4VO法制备脑缺血/再灌注大鼠模型。设假手术组、模型组、黄芪注射液组和黄芪注射液溶剂对照组。除假手术组外,其余各组缺血30 min后再灌注,根据再灌注不同时间点再分为0、0.5、2、6、24、72和120 h 7个亚组。黄芪注射液组于缺血前30 min腹腔注射黄芪注射液[12 g(生药)·kg-1],其中24、72、120 h组手术后每隔24 h追加给药1次,黄芪注射液溶剂对照组腹腔注射与黄芪注射液等量的无菌去离子水。分别采用HE染色观察组织形态学变化;免疫组织化学法和Western blot法检测大鼠海马组织JNK3蛋白表达的变化;RT-PCR方法检测海马组织JNK3 mRNA的表达。结果 HE染色结果显示黄芪注射液可改善脑缺血/再灌注造成的大鼠海马神经元损伤;除120 h外,模型组各时间点海马组织JNK3蛋白及mRNA表达均较假手术组增加(P<0.05);与模型组相比,黄芪注射液组除120 h外各时间点JNK3蛋白及mRNA表达均降低(P<0.05),而黄芪注射液溶剂对照组在各个时间点与模型组相比差异均无显著性(P>0.05)。结论黄芪注射液可抑制脑缺血/再灌注大鼠海马组织JNK3蛋白及其mRNA表达,从而抑制脑缺血/再灌注引起的大鼠海马神经元凋亡。

黄芪注射液拮抗大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用和机制

目的探讨黄芪注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用和机制。方法成年健康雄性Wistar大鼠70只,应用线栓法经左侧颈外-颈内动脉插线建立大脑中动脉阻塞再灌注模型,经腹腔注射1g/L黄芪注射液(3ml/kg)干预治疗。Longa法评价大鼠神经功能缺损程度,氯化三苯基四氮唑(TTC)染色观察脑梗死体积,苏木素-伊红染色观察顶叶皮质区神经元形态结构变化,透射电子显微镜观察神经细胞的超微结构,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blotting检测c-Jun氨基末端激酶3(JNK3)蛋白表达,RT-PCR检测JNK3 mRNA表达。结果经黄芪注射液治疗后,大鼠顶叶皮质区神经元JNK3 mRNA和JNK3蛋白表达较对照组显著减低,凋亡细胞数量显著减少,脑梗死体积显著缩小,神经元形态和超微结构以及动物神经行为功能显著改善。结论黄芪注射液可能通过下调神经元JNK3基因表达而抑制细胞凋亡,缩小脑梗死体积,改善动物的神经行为功能。

黄芪注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤后JNK3基因表达的影响

目的探讨黄芪注射液对大鼠脑缺血/再灌注损伤后细胞凋亡和c-jun氨基末端激酶(JNK3)表达的影响。方法应用线栓法经左侧颈外-颈内动脉插线建立大鼠大脑中动脉阻塞再灌注(MCAO/R)模型,经腹腔注射黄芪注射液(3 mL/kg)干预治疗。Longa法评分标准评价大鼠神经行为功能,流式细胞术检测海马区神经元凋亡,Western blot检测JNK3蛋白表达,RT-PCR检测JNK3 mRNA表达。结果经黄芪注射液治疗后,大鼠海马区神经元JNK3蛋白和JNK3 mRNA表达较对照组显著减低,凋亡细胞数量显著减少,而动物神经行为功能显著改善。结论黄芪注射液可通过下调神经元JNK3基因表达而抑制细胞凋亡,改善动物的神经行为功能。

黄芪注射液对大鼠缺血性脑损伤神经细胞凋亡的影响

目的:观察黄芪注射液对缺血性脑损伤大鼠脑细胞凋亡的影响。方法:30只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和黄芪注射液组,每组10只。采用大脑中动脉局灶性栓塞(MCAO)模型,免疫组化法检测缺血脑组织中Bcl-2表达变化,Tunel法检测缺血灶周围神经细胞凋亡改变。结果:与模型组比较,黄芪注射液可显著降低大鼠脑细胞凋亡,增加Bcl-2蛋白表达(P<0.01)。结论:黄芪注射液对缺血性脑损伤大鼠有抗细胞凋亡作用。

中药对大鼠心肌细胞凋亡影响的Meta分析

目的系统评价中药对心肌细胞凋亡的影响。方法全面检索中国期刊全文数据库(CNKI)、万方数据库2010年1月—2017年1月的相关文献,将符合纳入标准的19篇文献作为Meta分析的研究对象,选择Bcl-2、Bax、caspase-3作为效应指标,采用Cochrane协作网免费提供的RevMan5.3(Review Manager)专用软件进行统计分析。结果 Bcl-2的Western blot法检测MD=0.64(P <0.000 01),95%CI为(0.40,0.88);免疫组化法检测MD=0.12(P <0.000 01),95%CI为(0.04,0.19);mRNA结果 MD=0.08(P <0.000 01),95%CI为(0.06,0.10);Bax的Western blot法检测MD=-0.81(P <0.000 01),95%CI为(-1.40,-0.22);免疫组化法检测MD=-0.11(P <0.000 01),95%CI为(-0.17,-0.04);mRNA结果 MD=-0.07(P <0.000 01),95%CI为(-0.09,-0.05)。caspase-3的Western blot法检测MD=-0.40(P <0.000 01),95%CI为(-0.56,-0.24);免疫组化法检测MD=-0.18(P <0.000 01),95%CI为(-0.20,-0.16)。caspase-3mRNA结果合并效应量MD=-0.30(P <0.000 01),95%CI为(-0.61,0.02)。以上结果均显示中药组与模型组比较,差异有统计学意义。结论现有文献证据表明,中药可有效抑制心肌细胞凋亡。

黄芪注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用研究

目的探讨黄芪注射液对大鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用和机制。方法应用线栓法经左侧颈外-颈内动脉插线建立大鼠大脑中动脉阻塞再灌注(MCAO/R)模型,经腹腔注射黄芪注射液(3 ml/kg)干预治疗。Longa法评价大鼠神经行为功能,氯化三苯基四氮唑(TTC)染色观察脑梗死体积,苏木精-伊红(HE)染色观察海马神经元形态结构,TUNEL法检测细胞凋亡,免疫组化检测c-jun氨基末端激酶(JNK3)蛋白表达水平。结果经黄芪注射液治疗后大鼠海马神经元JNK3蛋白表达水平显著降低,凋亡细胞数量显著减少,神经元形态恢复,脑梗死体积缩小,大鼠神经行为功能显著改善。结论黄芪注射液可通过下调JNK3表达水平而抑制细胞凋亡,缩小脑梗死体积,改善大鼠神经行为功能。

黄芪甲苷对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用和机制研究

目的探讨黄芪甲苷对大鼠脑缺血/再灌注损伤的神经保护作用和机制。方法应用线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞再灌注模型(模型组),建模成功大鼠经腹腔注射黄芪注射液(每毫升含黄芪甲苷1 mg)干预治疗(黄芪治疗组,再随机分为黄芪低剂量组、中剂量组和高剂量组)。另设对照组(插线进入大鼠颈内动脉10 mm后即刻退出)。Longa法评价大鼠神经行为功能,苏木精-伊红染色观察大鼠皮质区神经元形态结构,TUNEL检测细胞凋亡,免疫组化检测脑源性神经营养因子(BDNF)、血管内皮生长因子(VEGF)及血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)蛋白表达。结果经黄芪注射液治疗后,大鼠脑组织BDNF、VEGF、VEGFR2蛋白表达较对照组显著增加,且BDNF主要在海马区表达,VEGF及VEGFR2主要在皮质区表达,脑组织凋亡细胞数量显著减少,大鼠神经行为功能显著改善。结论黄芪注射液可通过增加BDNF、VEGF及VEGFR2的表达而抑制细胞凋亡,刺激神经再生,促进受损神经的修复,改善大鼠的神经行为功能,黄芪中剂量和高剂量作用更为明显。