川乌抗肿瘤作用研究进展及可行性分析

川乌对肺癌、结肠癌、宫颈癌、乳腺癌等多种肿瘤细胞具有抑制生长或转移作用,其同时具有镇痛、增强免疫、逆转肿瘤细胞耐药的优势,故可起到多方位综合治疗作用。查阅国内外关于川乌抗肿瘤作用相关文献并进行汇总、综述,并分析其作为一种潜力抗肿瘤药物应用于临床的可行性,以期为未来中药川乌抗癌新药物研发提供有益参考。

生川乌与不同比例生半夏配伍对大鼠肝细胞超微结构的影响

摘要目的：观察生川乌与不同比例生半夏配伍对大鼠肝细胞超微结构的影响。方法：SD大鼠随机分为正常对照组、生川乌组、生川乌配生半夏组。电镜下观察肝细胞超微结构变化。结果：生川乌组肝细胞形态不规则，胞质溶解，粗面内质网明显减少，线粒体肿胀，溶酶体增多；生川乌配生半夏（1：0．Z5）组，肝细胞肿胀，核不规则，异染色质增多，胞质溶解减轻，粗面内质网较生川乌组增多，线粒体肿胀，溶酶体增多；生川乌配生半夏（1：0．5）组，肝细胞肿胀减轻，核异染色质较少、边集，粗面内质网增多，线粒体肿胀，次级溶酶体明显增多；生川乌配生半夏（1：1）组，肝细胞肿胀明显减轻，核接近正常，粗面内质网增多，线粒体肿胀减轻，糖原较少，溶酶体减少。结论：生川乌可明显损伤大鼠肝超微结构，与生半夏配伍后可减轻其损伤作用，配伍比例与损伤程度呈反比。

生川乌水浸液对大鼠肾超微结构的影响及其与配伍生半夏比例的关系

目的：观察生川乌、生半夏与生川乌不同配伍比例对大鼠肾组织超微结构的影响。方法：SD大鼠，随机分为正常对照组、生川乌组、生川乌配不同生半夏组（1∶0.25组、1∶0.5组、1∶1组）。各给药组生川乌给药剂量均为0.8g/kg，连续灌胃4周，电镜下观察肾细胞超微结构变化。结果：生川乌组肾小管上皮胞质明显溶解，细胞膜内褶断裂，线粒体外膜破裂，嵴不规则或溶解；肾小球毛细血管内皮、线粒体肿胀，基膜不均，部分足突融合。生川乌配生半夏1∶0.25组肾小管上皮细胞质溶解略减轻，线粒体外膜断裂，嵴密集；肾小球毛细血管内皮轻度肿胀，基膜较均匀，部分足突融合。生川乌配生半夏1∶0.5组肾小管上皮细胞膜模糊，细胞质溶解减轻，细胞膜内褶、线粒体嵴仍有局部断裂或溶解现象；肾小球毛细血管内皮轻度肿胀，基膜较均匀，少量足突融合。生川乌配生半夏1∶1组肾小管上皮细胞质溶解明显减轻，细胞膜内褶多正常，内褶间线粒体排列不甚规则；肾小球毛细血管内皮肿胀、足突融合明显减轻，基膜厚度较均匀。结论：生川乌水浸液灌胃可导致大鼠肾超微结构损伤，生半夏与生川乌不同配伍比例水浸液灌胃可减轻损伤，其减轻程度随配伍比例增高而升高。

某三级甲等中医医院近10年毒性中药使用分析

目的了解本院毒性中药的使用情况,探讨其用药规律,为科学有效、合理使用毒性中药提供临床实践依据。方法通过医院HIS医疗信息管理系统,抽取2005~2014年本院使用含毒性中药处方,采用Excel 2010软件对有毒中药用量和含有毒中药的处方进行统计分析,研究临床用药趋势。结果含毒性中药处方中以生半夏的使用量最大,占全部毒性中药使用量的78.09%,其次是生天南星,占16.09%。使用有毒中药的71 898例处方的临床科室中以肿瘤科最多,占75.09%,其后依次为骨科、内分泌科、名中医室、皮肤科、脑病科、血液科,分别占比为9.25%、6.26%、3.07%、3.95%、1.82%、1.96%、0.08%。结论本院毒性中药使用基本合理,建议严格控制其使用剂量使其科学合理,充分有效发挥中医所提倡利用有毒中药＂药以治病,因毒为能＂的作用。

卢尚岭大剂量用药经验总结与思考

卢尚岭教授临证常重用益母草、土茯苓、丹参、葶苈子、石菖蒲、附子、川乌、枳实、生地黄、麦冬、蜈蚣等药物,每取佳效。其用药主要以长期临床实践经验为依据,同时也因病位高下、病性虚实、病势急缓而异。单味药治病,也常取大剂奏效。从卢老的用药经验可知,大剂量用药需熟谙药性,有胆有识。人体生理功能的改变、疾病病情的需要、药物性状的古今差异可能是增加大剂量用药需求的影响因素。

生附片与炮天雄煎煮过程中生物碱溶出行为研究

目的 探讨生附片和炮天雄在不同时间煎煮过程中酯型生物碱的含量动态变化规律。方法 采用Agilent Eclipse XDB C_(18)(250 mm×4.6 mm, 5μm)色谱柱,流动相C为乙腈-四氢呋喃混合溶液,体积比为25∶15,流动相D为0.1 mol·L^(-1)醋酸铵溶液(每100 mL加0.05 mL冰醋酸),梯度洗脱,检测6种单、双酯型生物碱的含量;采用滴定法测定总生物碱的含量。结果 两种药材中双酯型生物碱均在2 h内分解完全,生附片与炮天雄残渣中单酯型生物碱含量呈递减趋势。生附片可检测出3种单酯型生物碱与2种双酯型生物碱,炮天雄可检测出2种单酯型生物碱与1种双酯型生物碱,生附片中双酯型生物碱显著高于炮天雄水煎液。经过24 h煎煮,生附片与炮天雄粉末总生物碱溶出率分别为44.38%和52.24%。结论 附子与炮天雄煎煮后均能降低有毒成分含量,最佳煎煮时间为2 h。

生川乌配伍不同比例生半夏对大鼠心肌毒性的影响

目的观察不同比例配伍的生川乌和生半夏对心脏的毒性作用。方法 50只SD大鼠随机分为正常对照组、1∶0配伍组、1∶0.25配伍组、1∶0.5配伍组、1∶1配伍组各10只,各配伍组给予相应浓度药物0.4ml/100g,正常对照组给予等体积生理盐水,连续灌胃4周,停药2周。分别于给药4周及停药2周,计算体质量增长率、心脏系数,生化法和免疫组化法测定相关心肌酶。结果各组大鼠给药4周及停药2周时体质量增长率差异均无统计学意义(P>0.05)。给药4周各配伍组大鼠心脏系数显著高于正常对照组(P<0.05或P<0.01);停药2周1∶0配伍组及1∶0.5配伍组心脏系数显著高于正常对照组(P<0.05)。给药4周和停药2周,各配伍组心肌酶含量不同程度高于正常对照组(P<0.05或P<0.01);并且1∶0.25配伍组、1∶0.5配伍组、1∶1配伍组部分心肌酶含量均较1∶0配伍组低(P<0.05或P<0.01)。结论生川乌对大鼠心脏有明显的毒性,生川乌与生半夏配伍对心脏的毒性则明显降低,且配伍生半夏的比例越高,对心脏的毒性越低。

“半蒌贝蔹及攻乌”反药配伍组合的急性毒性研究

目的通过对“半蒌贝蔹及攻乌”中各单味药、反药组合进行急性毒性实验，研究“半蒌贝蔹及攻乌”反药配伍组合的毒性变化规律。方法以“半蒌贝蔹及攻乌”中各单味药乙醇提取物的半数致死量（LD50）或最大耐受量（MTD）评价各单昧药的急性毒性；各药对组合中生川乌的剂量固定为LD50,另一单味药的给药剂量随配伍比例的变化而逐渐增加，以小鼠死亡率为评价指标，考察反药组合毒性的变化规律。结果生川乌的LD50为4．4g／kg，生半夏、瓜蒌、浙贝母、白蔹、白及的MTD分别为300、37．8、272、167、180g／kg；生川乌配伍生半夏无相反现象；生川乌与瓜蒌配伍比例在4：1～8：1时相反，在2：1～1：6时不反；生川乌与浙贝母配伍比例在6：1～16：1时相反，在1：1～1：13时不反；生川鸟与白蔹配伍比例在3．5：1～16：1时相反，在1：1～1：13时不反；白及与生川乌配伍比例没有明显的毒性变化规律。结论生川乌乙醇提取物急性毒性明显；生半夏、瓜蒌、浙贝母、白蔹、白及醇提取物急性毒性不明显；反药组合的配伍比例对“半蒌贝蔹及攻乌”相关药物急性毒性的变化具有重要影响。

生川乌配不同比例生半夏对乳鼠心肌细胞的毒性作用

目的:以半数抑制浓度及细胞搏动频率为指标,评价生川乌与生半夏合用对原代乳鼠心肌细胞的毒性影响及与生半夏比例的关系。方法:分离出生3 d内的SD乳鼠心肌细胞进行原代培养。生川乌组(Ⅰ组),生川乌配生半夏1∶0.25(Ⅱ组),1∶0.5(Ⅲ组),1∶1(Ⅳ组)分别以生川乌终质量浓度0,0.016,0.078,0.235,0.392,0.548,0.705,0.861,1.018 g.mL-1(高效液相色谱法测得乌头碱含量分别为0,1,5,15,25,35,45,55,65 mg.L-1)染毒心肌细胞,分别培养1,2,4,12 h,观察各时间点细胞搏动频率,以MTT法检测培养12 h时细胞存活率,应用概率单位法计算半数抑制浓度(IC50)。结果:①染毒12 h,生川乌组抑制率(CI)显著高于其他配伍组(P<0.01),且随着生半夏比例的提高,抑制率降低。②Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ组的IC50分别为0.446,0.460,0.530,0.575 g.mL-1。③在生川乌终质量浓度0.016～0.078 g.mL-1内,1～2 h细胞搏动频率增高,4～12 h搏动频率降低。在0.235～0.861 g.mL-1内,1 h时细胞搏动频率降低,2 h时搏动频率高于1 h,但低于正常水平,4～12 h频率低于1 h。给药1.018 g.mL-1,细胞立即停搏。结论:生半夏配伍生川乌降低了生川乌的毒性,且有明显的剂量依赖关系。

基于TRPV1通道分析诃子制草乌减轻H9c2心肌细胞毒性的作用机制

目的:探究瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)通道在诃子制草乌减轻心肌细胞毒性中的作用机制。方法:以体外培养的H9c2心肌细胞为模型,采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测心肌细胞中TRPV1 mRNA的表达水平;酶联免疫吸附测定试验(ELISA)检测细胞中乳酸脱氢酶(LDH)漏出率,细胞核,活性氧(ROS),线粒体膜电位及钙离子(Ca^(2+))含量的变化。结果:与空白组比较,当质量浓度≥0.5 g·L^(-1)时,生草乌、诃子制草乌均可显著降低细胞活力(P<0.01),细胞中LDH漏出率,ROS及Ca^(2+)释放量增加,线粒体膜电位降低,细胞核固缩甚至是破碎。当质量浓度≥0.5 g·L^(-1)时,与同质量浓度生草乌组相比,诃子制草乌组细胞活力显著上升(P<0.01),细胞中LDH漏出率,ROS及Ca^(2+)释放量减少,线粒体膜电位升高,细胞核形态有所改善。与作用于未经处理的H9c2心肌细胞比较,同质量浓度的生草乌作用于TRPV1抑制剂BCTC预处理后的H9c2心肌细胞后,其细胞活力明显上升,细胞中LDH漏出率,ROS及Ca^(2+)释放量减少,线粒体膜电位升高,细胞核固缩程度得到改善;而同质量浓度的诃子制草乌作用于BCTC预处理后的H9c2心肌细胞,其细胞活力下降,细胞中LDH漏出率,ROS及Ca^(2+)释放量增加,线粒体膜电位降低。Real-time PCR结果表明,草乌和辅料诃子汤均能使心肌细胞中TRPV1 mRNA表达量增多,且呈现浓度依赖性。结论:生草乌可通过激活TRPV1通道诱导心肌细胞凋亡,引发心脏毒性;而诃子制草乌可通过TRPV1通道介导起到减毒作用,其减毒作用的发挥可能与诃子中的酸性成分和草乌中的生物碱协同作用于TRPV1通道有关。