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耐甲硝唑幽门螺杆菌cagA基因检测与rdxA基因突变研究 被引量:7
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作者 谢国艳 高志生 +3 位作者 胡嘉波 周建华 蔡志昌 黄敏 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期204-206,共3页
目的研究cagA基因、rdxA基因变异与幽门螺杆菌(Hp)甲硝唑耐药的关系。方法收集临床分离Hp 180株,用E-test法检测对甲硝唑的最低抑菌浓度(MIC),PCR扩增cagA、rdxA基因,并对rdxA基因进行测序。结果幽门螺杆菌对甲硝唑的耐药率为43.3%,其... 目的研究cagA基因、rdxA基因变异与幽门螺杆菌(Hp)甲硝唑耐药的关系。方法收集临床分离Hp 180株,用E-test法检测对甲硝唑的最低抑菌浓度(MIC),PCR扩增cagA、rdxA基因,并对rdxA基因进行测序。结果幽门螺杆菌对甲硝唑的耐药率为43.3%,其中甲硝唑高水平耐药菌54株,占69.2%;rdxA基因突变率为56.7%;cagA阳性菌中高耐药菌所占的比例和rdxA基因的突变率均明显高于cagA阴性菌。结论本地区幽门螺杆菌感染以高毒力菌株为主,rdxA基因突变在cagA基因阳性菌对甲硝唑产生高水平耐药可能起一定作用。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 CAGA基因 rdxa基因 突变 耐药性
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幽门螺杆菌rdxA基因突变与耐药性关系的研究 被引量:5
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作者 戴宁 周刚 严杰 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2003年第1期37-40,45,共5页
目的 :探讨幽门螺杆菌 (Hp)临床菌株 rdx A基因变异与甲硝唑耐药性的关系。方法 :从患者胃粘膜活检标本中分离培养 Hp。采用纸片扩散法初筛和二倍平皿稀释法确定 Hp菌株对甲硝唑的耐药性。提取 2 1株 Hp基因组 DNA进行 PCR扩增 ,T- A克... 目的 :探讨幽门螺杆菌 (Hp)临床菌株 rdx A基因变异与甲硝唑耐药性的关系。方法 :从患者胃粘膜活检标本中分离培养 Hp。采用纸片扩散法初筛和二倍平皿稀释法确定 Hp菌株对甲硝唑的耐药性。提取 2 1株 Hp基因组 DNA进行 PCR扩增 ,T- A克隆后测序 ,与文献报道的 Hp 2 6695株及 134株临床分离株 rdx A基因序列进行比较。结果 :76.1% (15 / 2 1)的 Hp菌株对甲硝唑耐药。 PCR可扩增出 886bp的 rdx A基因目的片段。与 Hp 2 6695株rdx A基因序列比较 ,扩增产物核苷酸序列的同源性为 90 .1%~ 95 .1%。甲硝唑耐药菌株 rdx A基因出现碱基插入/缺失及碱基替换而引起的突变。结论 :rdx A基因突变是 Hp对甲硝唑耐药的重要因素。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 rdxa基因 基因突变 甲硝唑 微生物抗药性
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甲硝唑耐药幽门螺杆菌的rdxA基因突变特征与影响因素 被引量:3
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作者 王莉莉 郭嵘 +2 位作者 董全江 于新娟 孙桂荣 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2015年第7期494-497,共4页
目的探讨甲硝唑耐药幽门螺杆菌(Hp)的rdx A基因突变的分子特征,分析疾病及细菌毒力基因变异对耐药的影响。方法从胃窦粘膜标本分离培养Hp,用琼脂稀释法药敏实验检测Hp对甲硝唑的敏感性;用PCR扩增Hp甲硝唑耐药基因rdx A、毒力基因cag A和... 目的探讨甲硝唑耐药幽门螺杆菌(Hp)的rdx A基因突变的分子特征,分析疾病及细菌毒力基因变异对耐药的影响。方法从胃窦粘膜标本分离培养Hp,用琼脂稀释法药敏实验检测Hp对甲硝唑的敏感性;用PCR扩增Hp甲硝唑耐药基因rdx A、毒力基因cag A和vac A,PCR产物直接测序后进行序列比对分析。结果共分离出101株Hp,耐药株占43.6%,胃癌相关Hp菌株甲硝唑耐药率(33.3%)显著低于胃炎相关菌株(55.3%),差异有统计学意义(χ2=4.94,P=0.029);Hp毒力基因分型(cag A+/-、vac A各亚型)在敏感株和耐药株中的分布差异无统计学意义;序列分析表明,95.5%的Hp甲硝唑耐药株由插入/缺失核苷酸序列导致移码突变造成rdx A基因失活,59.1%的插入/缺失突变发生在单核苷酸重复序列位置。结论 rdx A的单核苷酸串联重复序列区域发生插入/缺失是引起基因突变失活,导致Hp甲硝唑耐药的主要机制。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 CAGA基因 VACA基因 rdxa基因 甲硝唑 耐药
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幽门螺杆菌rdxA基因的DNA序列分析 被引量:2
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作者 黄德强 罗凌玉 +5 位作者 丁士刚 吕农华 朱振华 谢勇 廖晚珍 王崇文 《江西医学检验》 CAS 2007年第3期197-200,共4页
目的研究(Hp)耐药菌株与敏感菌株之间rdxA基因的DNA差异。方法取胃镜活检标本,微需氧环境培养,收集Hp菌株。进行甲硝唑药敏试验,筛选出12株耐药菌株(MTZR菌株)和9株敏感菌株(MTZS菌株)。从MTZR菌株、MTZS菌株和Hp11637中扩增rdxA基因;将... 目的研究(Hp)耐药菌株与敏感菌株之间rdxA基因的DNA差异。方法取胃镜活检标本,微需氧环境培养,收集Hp菌株。进行甲硝唑药敏试验,筛选出12株耐药菌株(MTZR菌株)和9株敏感菌株(MTZS菌株)。从MTZR菌株、MTZS菌株和Hp11637中扩增rdxA基因;将PCR产物进行DNA测序,测序结果采用DNA Star和NCBI Blast分析,探讨临床菌株和标准菌株的DNA序列差异。结果临床分离菌株与Hp标准菌株26695比较rdxA基因同源性,MTZR菌株为93.25%±1.93%;MTZS菌株93.79%±1.14%,P>0.05;Hp MTZR菌株的rdxA基因突变数高于MTZS菌株;Hp MTZR菌株与MTZS菌株之间点突变的形式没有显著性差异,也缺乏明确的突变规律和突变热点,MTZR菌株与MTZS菌株之间的突变形式无统计学意义。结论rdxA基因突变(改变)以点突变为主,rdxA基因点突变与Hp耐药有关,但具体的rdxA点突变形式与耐药表型的关系尚有待进一步研究。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 耐药基因 rdxa
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幽门螺杆菌对甲硝唑耐药与rdxA基因分型及cagA基因的关系 被引量:6
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作者 罗昭逊 张姝 +5 位作者 孙朝琴 张然 姚昕 莫非 张婉颖 袁昌增 《中国医院药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期689-694,共6页
目的:研究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori H.pylori)甲硝唑耐药菌株相关基因的突变与甲硝唑耐药性的关系。方法:将贵阳医学院附属医院胃镜室分离H.pylori采用E-Test法对甲硝唑进行药敏试验后,PCR扩增rdxA、frxA、fdxB和cagA并对该基因... 目的:研究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori H.pylori)甲硝唑耐药菌株相关基因的突变与甲硝唑耐药性的关系。方法:将贵阳医学院附属医院胃镜室分离H.pylori采用E-Test法对甲硝唑进行药敏试验后,PCR扩增rdxA、frxA、fdxB和cagA并对该基因进行测序。采用限制性内切酶片段长度多态性分型方法(RFLP)对rdxA基因进行分型。结果:313株H.pylori对甲硝唑耐药率为87.2%。其与NCBI已登录的国际标准菌株H.pylori 26695相应基因序列比对,cagA基因阳性率为100%,cagA基因在某些位点存在共同突变,还存在大量其他位点的随机散在突变,rdxA基因除了存在4个位点共同突变外,还有其他位点的散在突变。rdxA基因可分为两型,Ⅰ型与Ⅱ型的比例为293∶20,Ⅰ型耐药率为86.3%,Ⅱ型耐药率为100%。同时发现fdxB、frxA基因突变呈现出一定的规律性,具有碱基替换、插入和缺失3种类型的突变。结论:我院幽门螺杆菌甲硝唑耐药率较高,rdxA基因以Ⅰ型为主,而rdxA基因Ⅱ型的H.pylori均产生甲硝唑耐药,与H.pylori甲硝唑耐药性密切相关。rdxA基因突变及cagA基因阳性是耐甲硝唑的主要原因。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 甲硝唑 耐药性 rdxa基因 CAGA基因
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幽门螺杆菌rdxA和cagA基因突变与甲硝唑耐药的相关性研究 被引量:3
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作者 张姝 莫非 +5 位作者 张然 孙朝琴 王莹 李寅 罗昭逊 夏曙华 《中国药房》 CAS CSCD 2012年第1期23-25,共3页
目的:研究幽门螺杆菌(Hp)编码基因(rdxA)和细胞毒素相关基因A(cagA)突变与Hp对甲硝唑耐药的关系。方法:从贵阳某医院60例消化内科患者胃黏膜标本中分离出Hp临床分离株11株,体外微需氧条件下培养,用E试验(E-test)检测各株Hp临床分离株对... 目的:研究幽门螺杆菌(Hp)编码基因(rdxA)和细胞毒素相关基因A(cagA)突变与Hp对甲硝唑耐药的关系。方法:从贵阳某医院60例消化内科患者胃黏膜标本中分离出Hp临床分离株11株,体外微需氧条件下培养,用E试验(E-test)检测各株Hp临床分离株对甲硝唑的最低抑菌浓度(MIC),聚合酶链式反应(PCR)方法扩增Hp的rdxA和cagA基因并测序,再将耐药株与标准株Hp26695PCR产物进行碱基序列分析。结果:11株Hp临床分离株的MIC均≥256μg·mL-1,rdxA和cagA基因的扩增率均为100%。与标准株Hp26695相应基因序列对比,11株临床分离株的rdxA基因同源性为95%~98%,cagA基因同源性低于94%,rdxA、cagA基因分别有4、10个规律性突变点。结论:贵阳地区Hp对甲硝唑的耐药性可能与rdxA和cagA基因突变有关,其中高耐药性可能与cagA基因有关。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 甲硝唑 rdxa基因 CAGA基因 基因突变 耐药性
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对甲硝唑耐药幽门螺杆菌中rdxA基因的表达 被引量:4
7
作者 林辉 彭孝纬 +1 位作者 何利平 潘秀珍 《中华消化内镜杂志》 2004年第1期28-31,共4页
目的 探讨对甲硝唑耐药幽门螺杆菌(Hp)株中rdxA基因表达的差异。方法 随机收集51例快速尿素酶试验阳性患者的胃窦部黏膜,体外微需氧培养。甲硝唑耐药率检测分别用E试验和临界点药敏法。选取对甲硝唑高度耐药菌株(MIC值>256 mg/L),在... 目的 探讨对甲硝唑耐药幽门螺杆菌(Hp)株中rdxA基因表达的差异。方法 随机收集51例快速尿素酶试验阳性患者的胃窦部黏膜,体外微需氧培养。甲硝唑耐药率检测分别用E试验和临界点药敏法。选取对甲硝唑高度耐药菌株(MIC值>256 mg/L),在含16 mr/L甲硝唑及不含甲硝唑培养基中分组培养,半定量RT-PCR法检测rdxA基因的表达,用galE基因作外参照。结果 共分离出Hp临床分离菌47株。E试验法甲硝唑耐药率为34%(16/47),临界点药敏法为32%(15/47),其中15株(包括5株高度耐药菌株)2种方法均耐药。5株高度耐药菌中rdxA基因在甲硝唑存在的情况下表达量减少,而参照galE基因表达均不变。结论rdxA基因的表达减少在Hp对甲硝唑高度耐药形成中起了一定的作用。 展开更多
关键词 甲硝唑 耐药性 幽门螺杆菌 rdxa基因 基因表达 HP
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rdxA基因在幽门螺杆菌对甲硝唑耐药机制中的作用 被引量:3
8
作者 林辉 彭孝纬 +1 位作者 何利平 潘秀珍 《中华消化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期340-343,共4页
目的 探讨rdxA基因变异与幽门螺杆菌 (Hp)对甲硝唑耐药之间的关系。 方法 随机收集快速尿素酶试验 (RUT)阳性的病人 (5 1例 ) ,取胃窦部黏膜 1块 ,在体外微需氧培养。甲硝唑耐药率检测分别用E试验和临界点药敏法。PCR扩增Hp的rdxA基... 目的 探讨rdxA基因变异与幽门螺杆菌 (Hp)对甲硝唑耐药之间的关系。 方法 随机收集快速尿素酶试验 (RUT)阳性的病人 (5 1例 ) ,取胃窦部黏膜 1块 ,在体外微需氧培养。甲硝唑耐药率检测分别用E试验和临界点药敏法。PCR扩增Hp的rdxA基因片断 (886bp)并测序。对耐药株和敏感株的rdxA基因序列与标准菌株Hp2 6 6 95相应序列进行同源性分析。 结果 共分离出Hp临床分离菌 4 7株。甲硝唑用E试验法检测耐药率为 34% (16 /47) ,临界点药敏法为 31.9% (15 /47) ,其中 15株两种方法均耐药。测序 15株Hp耐药株和 8株敏感株的rdxA基因片断 ,与标准菌株Hp2 6 6 95相应序列对比 ,15株耐药株 (MtzR)的rdxA基因核酸序列相似性范围在 90 %~ 95 %之间 ,平均为 92 .5 % ,而 8株敏感株 (MtzS)相似性范围在 94 %~ 95 %之间 ,平均为 94 .5 %。大多数耐药株rdxA基因的变异为点变异、单个碱基插入或缺失 ,未发现大片段序列的插入和缺失 ,且突变位点是不固定的。结论 在耐甲硝唑的大多数Hp临床分离株中 ,rdxA基因发生多处点变异 ,单个碱基插入或缺失 ,但未发现大片段序列的插入和缺失 ,且变异位点是不固定的。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 甲硝唑 耐药性 rdxa基因
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rdxA基因突变与幽门螺杆菌对甲硝唑耐药关系研究 被引量:2
9
作者 李晓燕 张学英 柴晓文 《中华实用诊断与治疗杂志》 2010年第3期258-260,共3页
目的:探讨幽门螺杆菌对甲硝唑的耐药机制。方法:体外诱导甲硝唑耐药株,PCR扩增rdxA基因使其突变,应用双向凝胶电泳分离敏感株和耐药株蛋白质,寻找其差异性蛋白质。结果:利用倍比稀释试验构建幽门螺杆菌对甲硝唑的耐药株,其最低抑菌浓度... 目的:探讨幽门螺杆菌对甲硝唑的耐药机制。方法:体外诱导甲硝唑耐药株,PCR扩增rdxA基因使其突变,应用双向凝胶电泳分离敏感株和耐药株蛋白质,寻找其差异性蛋白质。结果:利用倍比稀释试验构建幽门螺杆菌对甲硝唑的耐药株,其最低抑菌浓度为敏感株64倍。扫描蛋白表达图谱,共得到差异性蛋白质斑点55个。结论:运用双向电泳技术获得幽门螺杆菌敏感株与甲硝唑耐药株的差异蛋白,从蛋白质水平为研究幽门螺杆菌对甲硝唑耐药提供依据。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 rdxa 甲硝唑 耐药
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幽门螺旋杆菌对甲硝唑的耐药机制及研究进展 被引量:1
10
作者 李爱芳 王尧杰 杜季梅 《检验医学教育》 2006年第4期37-39,共3页
幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)是上消化道溃疡的主要致病菌。随着甲硝唑的广泛运用,H.pylori的耐药成迅速上升。H.pylori对甲硝唑耐药主要与rdxA基因突变及其调节基因突变有关,还与frxA基因失活、甲硝唑还原产物诱变、环... 幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)是上消化道溃疡的主要致病菌。随着甲硝唑的广泛运用,H.pylori的耐药成迅速上升。H.pylori对甲硝唑耐药主要与rdxA基因突变及其调节基因突变有关,还与frxA基因失活、甲硝唑还原产物诱变、环境氧浓度等有关。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 甲硝唑 耐药机制 rdxa基因 frxA基因
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Aspirin increases susceptibility of Helicobacter pylori to metronidazole by augmenting endocellular concentrations of antimicrobials 被引量:5
11
作者 Xiao-Ping Zhang Wei-Hong Wang Yu Tian Wen Gao Jiang Li 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2009年第8期919-926,共8页
AIM: To investigate the increasing the susceptibility pylon) to metronidazole. mechanisms of aspirin of Helicobacter pylori (H METHODS: Hpylori reference strain 26695 and two metronidazole-resistant isolates of H ... AIM: To investigate the increasing the susceptibility pylon) to metronidazole. mechanisms of aspirin of Helicobacter pylori (H METHODS: Hpylori reference strain 26695 and two metronidazole-resistant isolates of H pylori were included in this study. Strains were incubated in Brucella broth with or without aspirin (1 mmol/L). The rdxA gene of Hpylori was amplified by PCR and sequenced. The permeability of Hpylori to antimicrobials was determined by analyzing the endocellular radioactivity of the cells after incubated with [7-^3H]-tetracycline. The outer membrane proteins (OMPs) of Hpylori 26695 were depurated and analyzed by SDS-PAGE. The expression of 5 porins (hopA, hopB, hopC, hopD and hopE) and the putative RND efflux system (hefABC) of H pylori were analyzed using real-time quantitative PCR. RESULTS: The mutations in rdxA gene did not change in metronidazole resistant isolates treated with aspirin. The radioactivity of H pylori increased when treated with aspirin, indicating that aspirin improved the permeability of the outer membrane of H pylori. However, the expression of two OMP bands between 55 kDa and 72 kDa altered in the presence of aspirin.The expression of the mRNA of hopA, hopB, hopC, hopD, hopE and herA, hefB, hefC of H pylori did not change when treated with aspirin. CONCLUSION: Although aspirin increases the susceptibility of H pylori to metronidazole, it has no effect on the mutations of rdxA gene of Hpylori. Aspirin increases endocellular concentrations of antimicrobials probably by altering the OMP expression. 展开更多
关键词 Helicobacter pylori ASPIRIN METRONIDAZOLE Resistance Minimum inhibitory concentrations
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幽门螺杆菌耐甲硝唑基因分型与序列分析 被引量:3
12
作者 叶嗣颖 田拥军 +5 位作者 刘南植 胡国平 王南下 廖芳 黄庆华 张正茂 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期447-450,共4页
目的 探讨幽门螺杆菌 (Helicobacterpylori,Hp)rdxA基因型及其与甲硝唑耐药性的关系及耐药的分子机制。方法 对 5 4例包括胃炎、消化性溃疡、胃癌患者的Hp分离株进行甲硝唑敏感实验 ,得到敏感株和耐药株 ;提取Hp基因组DNA ,PCR扩增rdx... 目的 探讨幽门螺杆菌 (Helicobacterpylori,Hp)rdxA基因型及其与甲硝唑耐药性的关系及耐药的分子机制。方法 对 5 4例包括胃炎、消化性溃疡、胃癌患者的Hp分离株进行甲硝唑敏感实验 ,得到敏感株和耐药株 ;提取Hp基因组DNA ,PCR扩增rdxA基因 ,并进行限制性片段长度多态性(RFLP)分型 ;统计学分析基因型和耐药性关系 ;对 1株敏感株和 2株耐药株rdxA基因测序分析突变情况。结果 rdxA基因可分为两型 :Ⅰ型和Ⅱ型。Ⅰ型中的敏感株和耐药株所占比例为 5 6 %和44 %,Ⅱ型中的敏感株占 16 %,耐药株占 84%。经统计学分析 ,rdxA基因Ⅱ型与耐药性有相关性。rdxA基因测序分析显示耐药株存在编码区碱基置换及插入造成的移码突变 ;非编码区亦存在单个碱基缺失及置换突变。结论 rdxA基因Ⅱ型与Hp的甲硝唑耐药性密切相关 ,耐甲硝唑株主要表现为Ⅱ型。rdxA基因突变是耐甲硝唑的主要原因。 展开更多
关键词 序列分析 幽门螺杆菌 耐药性 PCR-RFLP技术 甲硝唑 基因型
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