不同检测技术在肺结核中的诊断效能分析

目的探究外周血结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)、实时荧光核酸恒温扩增检测技术(SAT)及血清结核抗体(TB-Ab)检测对肺结核患者的诊断效能。方法选择本院2019年1月~2022年4月收治的155例疑似肺结核患者,按照不同年龄段将研究对象分为<60岁组和≥60岁组,以临床诊断为标准,分析T-SPOT.TB、SAT及TB-Ab检测在肺结核中的诊断效能。结果与临床诊断相比,单项检测中T-SPOT.TB对肺结核诊断效能最高,敏感度、特异度、准确度分别为84.47%、73.08%、80.65%,Kappa=0.570;联合检测中T-SPOT.TB+SAT+TB-Ab对肺结核诊断效能最高,敏感度、特异度、准确度为99.03%、63.46%、87.10%,Kappa=0.683。单项检测中T-SPOT.TB对<60岁、≥60岁的肺结核患者均具有中度诊断一致性,敏感度、特异度、准确度分别为84.34%、85.00%,75.00%、68.75%,81.51%、77.78%,Kappa=0.575、0.544;联合检测中T-SPOT.TB+SAT+TB-Ab对<60岁、≥60岁的肺结核患者均具有中度诊断一致性,敏感度、特异度、准确度分别为100.00%、95.00%,66.67%、56.25%,89.92%、77.78%,Kappa=0.736、0.532。结论联合检测可以提高早期肺结核的辅助诊断效能,T-SPOT.TB+SAT+TB-Ab效能最高,且对于<60岁的肺结核患者具有较好诊断价值。

基于微流控芯片巢氏等温扩增核酸检测仪设计

针对呼吸道病原体检测需要依靠实验室内固定设备和专业技术人员,难以实现现场快速即时检测的问题和多种病原体同时检测的需求,开发了一种基于微流控芯片和重组聚合酶(RPA)等温扩增技术的便携式巢式等温扩增核酸检测仪。使用微流控芯片完成核酸纯化和扩增;模糊PID算法控制RPA需要的37℃等温扩增环境;读取扩增室的荧光值与判断阈值比较,定性检测核酸扩增结果;使用触摸屏进行人机交互操作,打印检测结果。通过对甲型H1N1流感病毒DNA质粒进行等温扩增和荧光检测,证明该仪器能够用于呼吸道病原核酸扩增检测,是一种理想的便携式现场核酸检测设备。

6种结核分枝杆菌检测方法在不典型肾结核早期诊断中的应用价值比较

目的评估6种结核分枝杆菌检测方法对不典型肾结核的早期诊断价值,为临床诊断提供参考。方法收集河北省胸科医院泌尿外科2015年10月至2020年12月诊治的不典型肾结核患者46例(结核组)、非结核肾病患者53例(对照组),分别采用结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)、结核菌素试验(PPD试验)、涂片抗酸杆菌染色镜检(AFB镜检法)、BACTEC MGIT960液体培养(简称液体培养法)、结核分枝杆菌脱氧核糖核酸实时荧光定量PCR(TB-DNA FQ-PCR)、利福平耐药实时荧光定量核酸扩增技术(GeneXpert MTB/RIF),以结核菌培养及病理结果为金标准,比较不同检测方法在不典型肾结核临床诊断中的价值。结果T-SPOT.TB灵敏度(95.65%)高于PPD试验(73.91%),差异有统计学意义(McNemar检验:P=0.002);GeneXpert MTB/RIF的灵敏度为84.78%,高于AFB镜检法(4.35%)、液体培养法(28.26%)和TB-DNA FQ-PCR(58.70%),差异有统计学意义(McNemar检验:P均<0.001),GeneXpert MTB/RIF与三者的特异性无统计学差异(McNemar检验:P=1.000、0.500和0.250)。结论T-SPOT.TB与GeneXpert MTB/RIF在不典型肾结核的筛查和病原学诊断中有较高的灵敏度和应用价值,推荐应用。

核酸检测在血液HBV筛查中的应用研究

目的:了解沈阳地区乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)阴性献血者中乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染状况,探讨HBV核酸扩增检测(nucleic acid amplification testing,NAT)技术应用于血液筛查的意义。方法:在酶联免疫法(enzyme immunoassay,EIA)检测的基础上,应用TaqMan实时荧光聚合酶链式反应(PCR)方法对HBsAg EIA阴性血液标本进行HBV DNA的NAT检测。对NAT阳性标本进一步做乙型肝炎病毒血清标志物(HBV Marker,HBV-M)及核酸定量检测。结果:共检测了105,152例HBsAg阴性的血液标本,检出HBV DNA阳性标本15例,阳性率0.014%。Abbott酶联免疫试剂检测发现,15例标本中有6例标本的HBV-M五项指标检测全部阴性,9例为HBsAg阴性但其它标志物阳性。其中10例HBV DNA阳性标本再经Roche试剂进行核酸定量检测,HBV DNA核酸含量最高为149 IU/ml。结论:在HBsAg ELA阴性献血者中仍有极少数的HBV感染者;核酸扩增检测和酶联免疫检测互补,能够缩短血液筛查中HBV检测窗口期,特别是对提高HBsAg阴性血液标本中HBV感染检出率具有重要价值。

核酸扩增技术在病原体检测中的应用

传统的病原体检测方法在检测敏感性、特异性、应用范围等方面存在许多不足。PCR技术已被用于感染早期的病原体检测，但在应用过程中也面临不少问题。近年来出现的新的核酸扩增技术可弥补普通PCR技术的缺点。此文就其中依赖核酸序列的扩增技术、PCR-胶体金免疫层析技术和多重荧光实时PCR技术进行综述。

RNA恒温扩增技术在非淋球菌性尿道炎病原体检测中的临床评估

目的探讨不同核酸检测方法在非淋球菌性尿道炎病原体检测中的临床价值。方法对173例疑似非淋球菌性尿道炎感染患者尿液以及尿道分泌物样本运用RNA恒温扩增技术(RNA-SAT)和实时荧光定量PCR技术(FQ-PCR)分别进行解脲支原体(Uu)和沙眼衣原体(Ct)检测,并对结果统计分析。结果 2种方法检测,尿道分泌物样本的Uu阳性率均高于尿液样本,差异有统计学意义(χ~2=4.011,P<0.05),而Ct阳性率经χ~2检验比较差异无统计学意义(χ~2=0.25,P>0.05)。Uu-尿液检测的敏感度(100.0%)高于Uu-尿道拭子(88.0%),差异有统计学意义(χ~2=9.049,P<0.01)。Ct-尿液和Ct-尿道拭子,二者敏感度差异无统计学意义(χ~2=0.642,P>0.05)。结论 RNA-SAT法既具备了FQ-PCR的高敏感度和特异度,又能很好地判断预后效果,同时可采用尿液作为待检样本,具有取样方便、耗时短、污染小及结果准确等优点,可用于临床实验室检测与疗效监测。