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Globular adiponectin induces differentiation and fusion of skeletal muscle cells 被引量:2
1
作者 Tania Fiaschi Domenico Cirelli +4 位作者 Giuseppina Comito Stefania Gelmini Giampietro Ramponi Mario Serio Paola Chiarugi 《Cell Research》 SCIE CAS CSCD 2009年第5期584-597,共14页
The growing interest in skeletal muscle regeneration is associated with the opening of new therapeutic strategies for muscle injury after trauma, as well as several muscular degenerative pathologies, including dystrop... The growing interest in skeletal muscle regeneration is associated with the opening of new therapeutic strategies for muscle injury after trauma, as well as several muscular degenerative pathologies, including dystrophies, muscu- lar atrophy, and cachexia. Studies focused on the ability of extracellular factors to promote myogenesis are therefore highly promising. We now report that an adipocyte-derived factor, globular adiponectin (gAd), is able to induce mus- cle gene expression and cell differentiation, gAd, besides its well-known ability to regulate several metabolic func- tions in muscle, including glucose uptake and consumption and fatty acid catabolism, is able to block cell cycle entry of myoblasts, to induce the expression of specific skeletal muscle markers such as myosin heavy chain or caveolin-3, as well as to provoke cell fusion into multinucleated syncytia and, finally, muscle fibre formation, gAd exerts its pro- differentiative activity through redox-dependent activation of p38, Akt and 5'-AMP-activated protein kinase path- ways. Interestingly, differentiating myoblasts are autocrine for adiponectin, and the mimicking of pro-inflammatory settings or exposure to oxidative stress strongly increases the production of the hormone from differentiating cells. These data suggest a novel function of adiponectin, directly coordinating the myogenic differentiation program and serving an autocrine function during skeletal myogenesis. 展开更多
关键词 globular adiponectin reactive oxygen species MYOGENESIS
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Adiponectin真核表达质粒的构建与表达研究
2
作者 敬小梅 文艳君 +4 位作者 贾永喜 王永生 李炯 阚兵 邓洪新 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期531-534,共4页
目的构建重组鼠adiponectin真核表达质粒,为进一步研究adiponectin的功能提供实验基础。方法提取鼠脂肪组织总RNA,运用RT-PCR方法扩增鼠adiponectincDNA完全编码区,将扩增产物连接至pCDNA3.1(+)载体,对重组质粒进行测序验证,并检测其体... 目的构建重组鼠adiponectin真核表达质粒,为进一步研究adiponectin的功能提供实验基础。方法提取鼠脂肪组织总RNA,运用RT-PCR方法扩增鼠adiponectincDNA完全编码区,将扩增产物连接至pCDNA3.1(+)载体,对重组质粒进行测序验证,并检测其体外表达和对小鼠乳腺癌细胞4T1的增殖抑制作用。结果重组真核表达质粒经PCR扩增后获得一744bp片段,并经测序证实,Western-blot检测到其体外表达。在体外的细胞学实验中,将重组质粒转染入小鼠乳腺癌细胞4T148h后,与对照组相比,可以观察到明显的细胞形态学改变,细胞体积变小皱缩,4T1细胞生长明显抑制。流式细胞术检测到该组细胞中凋亡细胞所占比例明显高于对照组。结论成功构建了鼠重组adiponectin真核表达质粒,该质粒对小鼠乳腺癌细胞4T1的增殖有明显的抑制作用。 展开更多
关键词 adiponectin 重组 质粒 乳腺癌
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球状脂联素上调脂联素受体1抑制晚期糖基化终产物诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的初步研究 被引量:3
3
作者 赵宏宇 郑强 张锦 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期690-694,共5页
目的:观察球状脂联素(gAd)对晚期糖基化终产物(AGEs)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡时脂联素受体1(AdipoR1)表达的影响。方法:体外培养HUVECs,用不同浓度AGEs作用HUVECs,以及预处理gAd后再联合AGEs作用HUVECs。MTT比色法测定细胞活性... 目的:观察球状脂联素(gAd)对晚期糖基化终产物(AGEs)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡时脂联素受体1(AdipoR1)表达的影响。方法:体外培养HUVECs,用不同浓度AGEs作用HUVECs,以及预处理gAd后再联合AGEs作用HUVECs。MTT比色法测定细胞活性、Annexin V-FITC/PI双染标记流式细胞仪检测细胞凋亡、实时定量RT-PCR检测内皮细胞AdipoR1 mRNA的表达。结果:AGEs作用HUVECs,细胞凋亡具有AGEs浓度依赖性(P<0.05)。相同浓度AGEs作用HUVECs,有和无gAd预处理的2组比较,用gAd预处理组明显拮抗HUVECs凋亡(P<0.01)。实时定量RT-PCR检测发现,gAd具有上调AdipoR1 mRNA表达的作用,与相同浓度AGEs作用的无gAd预处理组比较,差异显著(P<0.01)。结论:gAd可能通过上调AdipoR1表达拮抗AGEs诱导HUVECs的凋亡。 展开更多
关键词 球状脂联素 受体 脂联素 糖基化终产物 高级 细胞凋亡
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球状脂联素抑制波动性高血糖诱导人脐静脉内皮细胞凋亡与脂联素受体1有关 被引量:4
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作者 赵宏宇 伊桐凝 张锦 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期523-526,共4页
目的探讨球状脂联素在抑制波动性高血糖诱导人脐静脉内皮细胞凋亡中的机制。方法不同条件下体外培养人脐静脉内皮细胞5天。实验分为对照组(葡萄糖5.5 mmol/L)、高糖组(葡萄糖25 mmol/L)、葡萄糖交替组(葡萄糖5.5/25 mmol/L,每8 h更换培... 目的探讨球状脂联素在抑制波动性高血糖诱导人脐静脉内皮细胞凋亡中的机制。方法不同条件下体外培养人脐静脉内皮细胞5天。实验分为对照组(葡萄糖5.5 mmol/L)、高糖组(葡萄糖25 mmol/L)、葡萄糖交替组(葡萄糖5.5/25 mmol/L,每8 h更换培养液一次)、高渗组(甘露醇25 mmol/L)和高渗交替组(甘露醇5.5/25 mmol/L,每8 h更换培养液一次)。葡萄糖交替组中部分细胞用不同浓度(0、0.5、1.0和3 mg/L)球状脂联素干预,用脂联素受体1特异性小干扰RNA作用内皮细胞。采用流式细胞仪检测细胞凋亡及RT-PCR检测脂联素受体1和受体2的mRNA表达。结果与对照组比较,高糖组和葡萄糖交替组细胞凋亡明显增加,脂联素受体1 mRNA的表达显著降低(P<0.01)。与高糖组比较,葡萄糖交替组细胞凋亡显著增加,脂联素受体1 mRNA的表达显著降低(P<0.01)。不同浓度(0、0.5、1.0和3 mg/L)球状脂联素作用内皮细胞,发现3 mg/L球状脂联素能显著抑制内皮细胞凋亡(P<0.01),并能显著拮抗波动性高血糖诱导的脂联素受体1 mRNA表达的下降(P<0.01)。不同组间内皮细胞脂联素受体2 mRNA表达差异无显著性。siRNA作用内皮细胞后球状脂联素这种抑制凋亡作用显著减弱(P<0.01)。结论与持续性高血糖条件比较,波动性高血糖显著降低人脐静脉内皮细胞脂联素受体1 mRNA的表达,而对脂联素受体2 mRNA的表达无影响。球状脂联素可能通过脂联素受体1拮抗波动性高血糖诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡。 展开更多
关键词 细胞凋亡 人脐静脉内皮细胞 脂联素受体1 波动性高血糖 球状脂联素
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重组人生长激素对生长激素缺乏儿童脂代谢和脂联素水平的影响 被引量:5
5
作者 林君红 梁黎 +3 位作者 邹朝春 王春林 蒋优君 董关萍 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第20期1377-1378,1384,共3页
目的研究重组人生长激素(rhGH)对生长激素缺乏症(GHD)患儿脂代谢和脂联素水平的影响。方法对53例GHD患儿及33例年龄、性别相匹配的正常对照儿童,及接受rhGH治疗时间达1年以上的23例GHD患儿检测血三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、胰岛素样... 目的研究重组人生长激素(rhGH)对生长激素缺乏症(GHD)患儿脂代谢和脂联素水平的影响。方法对53例GHD患儿及33例年龄、性别相匹配的正常对照儿童,及接受rhGH治疗时间达1年以上的23例GHD患儿检测血三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)和脂联素水平,比较GHD组与正常对照组及rhGH治疗前后血脂和脂联素水平变化。结果GHD患儿53例中高脂血症22例(41.5%),GHD与对照组血TG、TC分别为(1.6±1.6)vs(1.1±0.4)mmol/L、(4.5±0.8)vs(4.1±0.6)mmol/L,两组比较有显著差异(P均<0.05);经rhGH治疗后,GHD患儿TG、TC均明显下降,而IGF-1明显升高,治疗前后比较均有显著差异(P<0.01,0.05);治疗后脂联素水平略上升,但治疗前后比较无显著差异。多元回归分析显示,IGF-1与年龄呈正相关,与其他因素无关;脂联素与TG呈负相关。结论GH可能直接参与GHD患儿血脂的调节,脂联素可能部分参与TG的代谢。 展开更多
关键词 重组人生长激素 脂代谢 脂联素 生长激素缺乏症 儿童
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球形脂联素对糖尿病心肌病大鼠心脏保护作用的研究 被引量:3
6
作者 武鸿儒 李兴 +2 位作者 高晓芳 韩雪鸿 刘晶 《中西医结合心脑血管病杂志》 2017年第11期1319-1324,共6页
目的观察球形脂联素(gAd)对糖尿病心肌病(DCM)的影响,并探讨其可能作用机制。方法 30只雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠选取10只作为正常对照组(A组),余20只建造糖尿病心肌病模型,造模成功后大鼠随机分为阳性对照组(B组)、球形脂联素治疗组(... 目的观察球形脂联素(gAd)对糖尿病心肌病(DCM)的影响,并探讨其可能作用机制。方法 30只雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠选取10只作为正常对照组(A组),余20只建造糖尿病心肌病模型,造模成功后大鼠随机分为阳性对照组(B组)、球形脂联素治疗组(C组)。C组大鼠每日给予球形脂联素治疗。治疗8周后,采用苏木素伊红(HE)染色法观察大鼠心肌组织大体形态,免疫组化法检测大鼠心肌组织中Ⅰ型胶原蛋白、转化生长因子-β_1(TGF-β_1)、Smad3、Smad7含量,原位末端标记法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡。结果 HE染色示:B组大鼠心肌细胞排列紊乱;C组大鼠心肌细胞排列较B组整齐。免疫组化结果示:Ⅰ型胶原蛋白、TGF-β_1、Smad3蛋白表达较A组、C组增多(P<0.05);Smad7蛋白表达较A组、C组减少(P<0.05)。TUNEL结果:B组凋亡细胞数较A组、C组增加(P<0.05)。结论 gAd可能通过降低心肌间质纤维化和减少心肌细胞凋亡两方面保护心肌组织。 展开更多
关键词 糖尿病心肌病 球形脂联素 转化生长因子-Β1 纤维化 凋亡
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球状脂联素对卵巢微血管内皮细胞增殖、迁移及管状结构形成的影响 被引量:1
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作者 陈雷 卢小圣 +3 位作者 李雅兰 毛周飞 肖銮娟 禹艳红 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期614-621,共8页
目的分离并鉴定小鼠卵巢微血管内皮细胞,并利用卵巢微血管内皮细胞研究球状脂联素对小鼠卵巢血管新生的影响。方法采用Percoll密度梯度离心法分离纯化小鼠卵巢微血管内皮细胞,并采用免疫荧光检测细胞表面的卵泡刺激素受体、黄体生成素... 目的分离并鉴定小鼠卵巢微血管内皮细胞,并利用卵巢微血管内皮细胞研究球状脂联素对小鼠卵巢血管新生的影响。方法采用Percoll密度梯度离心法分离纯化小鼠卵巢微血管内皮细胞,并采用免疫荧光检测细胞表面的卵泡刺激素受体、黄体生成素受体以及血管内皮细胞标记v WF;通过血管生成因子(VEGFA)处理检测卵巢微血管内皮细胞在Matrigel上的毛细管形成特性。重组的球状脂联素蛋白处理卵巢微血管内皮细胞,通过MTS检测细胞增殖;细胞划痕愈合法检测细胞迁移;Matrigel基质胶的血管形成,Western blot检测单磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)磷酸化激活。结果分离出的细胞表现为卵泡刺激素受体阴性,黄体生成素受体阳性,v WF阳性,且VEGFA能够促进血管生长,具有卵巢特异的血管内皮生长特性。高剂量浓度(1μg/m L和3μg/m L)的重组的脂联素球状结构域蛋白处理后卵巢微血管内皮细胞数量分别增加(158.72±14.50)%和(186.50±4.20)%,促进细胞增殖(P<0.01);高剂量浓度(1μg/m L和3μg/m L)的重组的脂联素球状结构域蛋白处理后卵巢微血管划痕愈合率分别为(49.43±3.43)%(P<0.05)和(69.67±1.2)%(P<0.01);3μg/m L的脂联素处理卵巢微血管内皮细胞形成的毛细管状长度为对照组的7.63±0.66倍(P<0.01)。3μg/m L的球状脂联素蛋白处理饥饿处理后的卵巢微血管内皮细胞培养15 min后p AMPK/AMPK、30 min后p AMPK/AMPK显著高于未加入蛋白处理的对照(P<0.01)。Compound C抑制了球状脂联素促进的卵巢微血管内皮细胞的管状结构形成及AMPK磷酸化激活。结论成功分离了卵巢微血管内皮细胞,球状脂联素蛋白能够通过激活AMPK信号途径促进卵巢微血管内皮细胞的血管新生。 展开更多
关键词 球状脂联素 卵巢 血管新生 血管内皮细胞 AMPK
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重组人生长激素对SW872脂肪细胞脂联素及其受体基因表达和蛋白分泌的影响 被引量:1
8
作者 包忠宪 张龙江 +2 位作者 邓惠玲 林汉华 王宏伟 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期465-466,484,共3页
目的 观察重组人生长激素(rhGH)对脂肪细胞脂联素及其受体mRNA表达及蛋白分泌的影响,探讨GH诱导胰岛素抵抗的机制。方法体外培养、油酸诱导SW872前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞,加入rhGH干预;RT-PCR方法检测脂联素、脂联素受体1和2... 目的 观察重组人生长激素(rhGH)对脂肪细胞脂联素及其受体mRNA表达及蛋白分泌的影响,探讨GH诱导胰岛素抵抗的机制。方法体外培养、油酸诱导SW872前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞,加入rhGH干预;RT-PCR方法检测脂联素、脂联素受体1和2(AdipoR1,2)mRNA水平,ELISA方法检测细胞培养上清中脂联素蛋白含量。结果rhGH100~1000μg/L作用24h不同程度的降低SW872脂肪细胞脂联素及AdipoR1 mRNA的表达及脂联素的分泌,且rhGH浓度越高抑制作用越强;500μg/L rhGH作用4h,对脂联素及AdipoR1基因表达及脂联素的分泌无影响;随作用时间的延长,rhGH抑制脂联素及AdipoR1 mRNA的表达和脂联素的分泌;rhGH对AdipoR2基因表达无影响。结论rhGH以剂量和时间相关的方式抑制SW872脂肪细胞脂联素及AdipoR1 mRNA的表达和脂联素蛋白的分泌。 展开更多
关键词 SW872脂细胞 重组人生长激素 脂联素 脂联素受体
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球状脂联素在波动性高血糖诱导人脐静脉内皮细胞凋亡中的作用 被引量:2
9
作者 赵宏宇 郑强 张锦 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2010年第5期448-452,共5页
目的球状脂联素在波动性高血糖诱导人脐静脉内皮细胞凋亡中的作用。方法在不同条件下体外培养人脐静脉内皮细胞,分别或联合加入球状脂联素(gAD)、单磷酸腺苷激活蛋白激酶(AMPK)的激活剂AICAR和AMPK的阻滞剂araA。采用MTT比色法测定细胞... 目的球状脂联素在波动性高血糖诱导人脐静脉内皮细胞凋亡中的作用。方法在不同条件下体外培养人脐静脉内皮细胞,分别或联合加入球状脂联素(gAD)、单磷酸腺苷激活蛋白激酶(AMPK)的激活剂AICAR和AMPK的阻滞剂araA。采用MTT比色法测定细胞活性,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blot检测AMPKα和磷酸化AMPKα蛋白表达。结果分别与对照组和恒定高血糖组比较,波动性高血糖显著抑制细胞活性和增加细胞凋亡率。gAD明显抑制波动性高血糖诱导的细胞凋亡。AICAR和gAD可明显激活AMPK的表达。araA可明显抑制gAD诱导的AMPK蛋白表达。结论波动性高血糖比恒定性高血糖更易促进内皮细胞凋亡,gAD明显抑制波动性高血糖诱导内皮细胞凋亡,其机制可能与激活AMPK有关。 展开更多
关键词 球状脂联素 波动性高血糖 脐静脉内皮细胞 凋亡 单磷酸腺苷激活蛋白激酶
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重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白对中重度银屑病患者血清脂肪因子水平的影响:前瞻性非随机对照试验 被引量:6
10
作者 乔菊 李峰 +2 位作者 何春霞 吴超 晋红中 《协和医学杂志》 CSCD 2019年第3期243-248,共6页
目的分析注射用重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白对中重度斑块型银屑病患者血清脂联素(adiponectin,APN)、视黄醇结合蛋白4 (retinol binding protein 4,RBP4)、瘦素(leptin,LEP) 3种脂肪因子水平的影响。方法选取2016年11月至2... 目的分析注射用重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白对中重度斑块型银屑病患者血清脂联素(adiponectin,APN)、视黄醇结合蛋白4 (retinol binding protein 4,RBP4)、瘦素(leptin,LEP) 3种脂肪因子水平的影响。方法选取2016年11月至2018年5月在北京协和医院皮肤科就诊的30例中重度斑块型银屑病患者作为治疗组,同时选取在本院健康医学部进行体检的25名健康人作为健康对照组。治疗组均给予重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白50 mg皮下注射,每周1次,共12次。检测健康对照组及治疗组治疗前(基线)和治疗后12周血清APN、RBP4、LEP的浓度;分析两组之间以及治疗组治疗前后血清脂肪因子水平是否存在差异,并采用Spearman相关分析法评估治疗组基线血清APN、RBP4、LEP表达水平与银屑病皮损面积和严重程度指数(psoriasis area and severity index,PASI)之间有无线性相关关系。结果治疗组基线APN水平[9. 73(6. 69,12. 37)比(14. 25 (10. 53,23. 28),P <0. 001]、LEP水平[0. 42 (0. 17,2. 60)比3. 90 (1. 38,7. 20),P=0. 002]较健康对照组降低, RBP4较健康对照组升高[12. 29 (10. 62, 21. 33)比9. 13 (7. 36,15. 78),P=0. 024];治疗组治疗后APN水平[11. 95 (8. 12,15. 26)比9. 73 (6. 69, 12. 37), P=0. 027]、LEP水平[2. 84 (1. 04,9. 34)比0. 42 (0. 17,2. 60),P<0. 001]较治疗前明显升高,而RBP4水平较治疗前差异无统计学意义(P=0. 125);基线APN、RBP4、LEP浓度均与PASI无线性相关关系。结论脂肪因子可能参与了银屑病的慢性炎症过程,抗肿瘤坏死因子α治疗可能改善银屑病的炎症状态。 展开更多
关键词 银屑病 脂联素 视黄醇结合蛋白4 瘦素 重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白
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脂联素抑制t-BHP诱导的内皮细胞凋亡作用及其可能机制探讨 被引量:1
11
作者 吴莉 刘鲁豫 +5 位作者 官滨斌 王林曦 刘小莺 陈闽 陈洲 刘礼斌 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2016年第6期540-544,共5页
目的:探讨重组脂联素对第三丁基过氧化氢(t-BHP)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡的影响及其相关的分子机制。方法:以HUVECs作为研究对象,给予t-BHP处理,模拟体外HUVECs氧化损伤细胞凋亡模型。在此基础上,用携带重组脂联素基因的腺... 目的:探讨重组脂联素对第三丁基过氧化氢(t-BHP)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡的影响及其相关的分子机制。方法:以HUVECs作为研究对象,给予t-BHP处理,模拟体外HUVECs氧化损伤细胞凋亡模型。在此基础上,用携带重组脂联素基因的腺病毒转染HUVECs,观察重组脂联素对t-BHP诱导的HUVECs凋亡的影响。用MTT法检测细胞增殖活力。Hochest/PI荧光染色检测细胞凋亡率。Western blot检测细胞凋亡相关蛋白p-JNK、JNK和Caspase 3表达水平的变化。结果:100μmol/L的t-BHP作用8 h可诱导HUVECs发生凋亡。与对照组相比,t-BHP组p-JNK、active caspase 3表达增多(P<0.01)。HUVECs高表达重组脂联素基因后,可明显抑制t-BHP诱导的HUVECs凋亡(P<0.01),下调t-BHP诱导的p-JNK、active caspase 3表达。结论:持续t-BHP氧化损伤可诱导HUVECs发生凋亡。重组脂联素可有效抑制t-BHP诱导的HUVECs凋亡,其机制与p-JNK、active caspase3的表达下调有关。 展开更多
关键词 重组脂联素 第三丁基过氧化氢 氧化应激 细胞凋亡 人脐静脉内皮细胞
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益气宁心汤联合重组人脑利钠肽治疗急性心肌梗死伴心力衰竭的临床研究 被引量:12
12
作者 纪焕春 姚福梅 +3 位作者 王霞 彭威 杨龙 李村淑 《中西医结合心脑血管病杂志》 2022年第1期95-99,共5页
目的观察益气宁心汤联合重组人脑利钠肽(rhBNP)治疗急性心肌梗死(AMI)伴心力衰竭(HF)的临床疗效。方法选取大连市第二人民医院2019年3月—2021年2月收治的AMI伴HF病人113例为研究对象,通过抽签法随机分为联合组(57例)和对照组(56例),两... 目的观察益气宁心汤联合重组人脑利钠肽(rhBNP)治疗急性心肌梗死(AMI)伴心力衰竭(HF)的临床疗效。方法选取大连市第二人民医院2019年3月—2021年2月收治的AMI伴HF病人113例为研究对象,通过抽签法随机分为联合组(57例)和对照组(56例),两组病人均给予常规药物治疗,在此基础上,对照组给予rhBNP治疗,联合组在对照组基础上加用益气宁心汤治疗,比较两组临床疗效、心功能[左室射血分数(LVEF)、左室舒张末期容积(LVEDV)、左室收缩末期容积(LVESV)及舒张早期二尖瓣血流速度与舒张晚期二尖瓣血流速度(E/A)比值]、血管内皮功能[一氧化氮(NO)、血管内皮素-1(ET-1)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)和血栓素B_(2)(TXB_(2))]及血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、脂联素(APN)和肌钙蛋白I(cTnI)水平。结果治疗后,联合组总有效率为96.49%,明显高于对照组的83.93%(P<0.05)。治疗后,两组LVEF、E/A比值、NO、APN水平均较治疗前明显升高(P<0.05),LVEDV、LVESV、ET-1、hs-CRP、TXB_(2)、CK-MB和cTnI水平均较治疗前明显降低(P<0.05);联合组治疗后LVEF、E/A比值、NO、APN水平均高于对照组(P<0.05),LVEDV、LVESV、ET-1、hs-CRP、TXB_(2)、CK-MB和cTnI水平均低于对照组(P<0.05)。结论益气宁心汤联合rhBNP治疗AMI伴HF病人,可明显提高心功能和血管内皮功能,改善血清CK-MB、APN和cTnI水平,提高临床疗效。 展开更多
关键词 急性心肌梗死 心力衰竭 益气宁心汤 重组人脑利钠肽 心功能 血管内皮功能 肌酸激酶同工酶 脂联素 肌钙蛋白I
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脂联素通过减轻氧化应激治疗动脉粥样硬化的研究 被引量:6
13
作者 王雪梅 蒲红伟 +6 位作者 姜涛 魏琴 张春 段明军 寿玺 张建龙 杨毅宁 《生物医学工程研究》 2014年第2期103-107,112,共6页
观察不同滴度的脂联素腺病毒载体对高脂饮食载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化模型的影响,以探讨脂联素抗动脉粥样硬化(AS)是否与减轻氧化应激有关。将48只健康成年12周龄载脂蛋白E基因敲除小鼠随机分为4组,对照组,模型组,低剂量脂联素... 观察不同滴度的脂联素腺病毒载体对高脂饮食载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化模型的影响,以探讨脂联素抗动脉粥样硬化(AS)是否与减轻氧化应激有关。将48只健康成年12周龄载脂蛋白E基因敲除小鼠随机分为4组,对照组,模型组,低剂量脂联素组,高剂量脂联素组。对照组给予正常饮食8周;模型组给予高脂饮食8周;低剂量脂联素组每两周经尾静脉注射脂联素腺病毒载体1.0×108p.f.u,实验期间高脂饮食;高剂量脂联素组每两周经尾静脉注射脂联素腺病毒载体5.0×108p.f.u.实验期间高脂饮食。实验结束后,摘眼球采血取血清,测定总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),低密度脂蛋白(LDL-C),高密度脂蛋白(HDL-C),以及血清脂联素(APN)含量,超氧化物歧化酶(SOD)活性,丙二醛(,MDA)含量,取小鼠主动脉血管。实时荧光定量扩增法(RT-PCR)测定小鼠主动脉血管APN,内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的表达。与模型组比较,外源性的脂联素降低了血清TG,TC,LDL-C,MDA的含量,血清SOD活性增加,上调动脉血管中APN和eNOS的表达。AS损伤面积明显减少,分别降低了26%和31%(P<0.05),脂纹区的脂滴直径降低极显著(P<0.01),随着APN剂量的增加,AS损伤逐步减轻,但是低剂量脂联素组和高剂量脂联素组的差异没有统计学意义。减轻氧化应激是脂联素抑制动脉粥样硬化的一种保护机制和途径。 展开更多
关键词 脂联素腺病毒载体 动脉粥样硬化 氧化应激 超氧化物歧化酶 一氧化氮合酶
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人脂联素基因在L-02细胞中表达及其功能检测 被引量:1
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作者 杜春红 刘德敏 《天津医药》 CAS 北大核心 2008年第4期246-248,共3页
目的:在人正常肝细胞株L-02中表达外源人脂联素蛋白,并观察其生物学活性。方法:采用脂质体法将成功构建的人脂联素真核表达质粒pcDNA3.1/CT-GFP-TOPO-Adiponectin转染L-02细胞;免疫组织化学定位观察脂联素的表达;Western blot检测培养... 目的:在人正常肝细胞株L-02中表达外源人脂联素蛋白,并观察其生物学活性。方法:采用脂质体法将成功构建的人脂联素真核表达质粒pcDNA3.1/CT-GFP-TOPO-Adiponectin转染L-02细胞;免疫组织化学定位观察脂联素的表达;Western blot检测培养上清及细胞沉淀中脂联素水平;酶联免疫法测定培养基血糖。结果:构建的真核表达质粒能有效转染L-02细胞,并在培养上清及细胞沉淀中检测到脂联素蛋白,该重组蛋白能够降低高糖处理的L-02细胞的血糖水平。结论:重组人脂联素蛋白能在L-02中有效表达,该蛋白定位在细胞质,并且能分泌到胞外,表达产物经体外实验证实具有生物学活性。 展开更多
关键词 脂联素 基因表达 基因转移技术 遗传载体 重组蛋白 脂质体
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gAd对3T3-L1脂肪细胞葡萄糖分解代谢关键酶表达的影响
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作者 王彦 廉如 +4 位作者 陈思思 高婷婷 吴彬 陈显久 杨静 《生物医学工程与临床》 CAS 2013年第1期77-81,共5页
目的通过检测3T3-L1脂肪细胞内糖酵解关键酶的表达情况,探讨课题组前期制备的脂联素球状结构域(gAd)对3T3-L1脂肪细胞葡萄糖分解代谢的影响。方法用课题组前期制备的gAd(质量浓度依次为10、50、100、300、1 000 ng/mL)干预分化成熟的3T3... 目的通过检测3T3-L1脂肪细胞内糖酵解关键酶的表达情况,探讨课题组前期制备的脂联素球状结构域(gAd)对3T3-L1脂肪细胞葡萄糖分解代谢的影响。方法用课题组前期制备的gAd(质量浓度依次为10、50、100、300、1 000 ng/mL)干预分化成熟的3T3-L1脂肪细胞,干预结束后以实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)法检测各组细胞糖酵解关键酶包括己糖激酶、6-磷酸果糖激酶-1及丙酮酸激酶转录表达情况,以Western blot法检测各组细胞丙酮酸激酶翻译表达情况。结果gAd干预组(5个浓度)己糖激酶的转录表达[(2.02±0.16)、(3.47±0.29)、(4.22±0.33)、(5.83±0.45)、(6.65±0.51)倍]显著高于对照组(1.00±0.00)(F=125.789,P<0.001),6-磷酸果糖激酶-1和丙酮酸激酶的转录表达也显著高于对照组(F分别为85.399和113.661,P均<0.001),同时丙酮酸激酶的翻译表达(12.430%±0.800%、1.700%±3.010%、26.570%±1.114%、52.600%±2.910%、71.130%±10.600%)也显著高于对照组(8.000%±1.610%)(F=161.007,P<0.01)。结论 gAd促进3T3-L1脂肪细胞摄取胞外葡萄糖的同时,激活了细胞内葡萄糖的分解供能代谢途径。 展开更多
关键词 脂联素球状结构域 脂肪细胞 葡萄糖分解
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球状脂联素抑制晚期糖基化终产物诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的机制研究
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作者 赵宏宇 伊桐凝 张锦 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第16期2434-2438,共5页
目的观察球状脂联素(globular adiponectin,gAd)是否抑制晚期糖基化终产物(advanced glycation end products,AGEs)诱导人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endo thelial cells,HUVECs)凋亡,并探讨其相关的机制。方法用不同浓度(100... 目的观察球状脂联素(globular adiponectin,gAd)是否抑制晚期糖基化终产物(advanced glycation end products,AGEs)诱导人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endo thelial cells,HUVECs)凋亡,并探讨其相关的机制。方法用不同浓度(100、200和400mg/L)AGEs培养HUVECs24h或48h,其中一组预先用3mg/LgAd处理24h。MTT比色法测定细胞活性,Annexin V-FITC/PI双染标记流式细胞仪检测细胞凋亡,免疫印记检测phospho-αAMPK和αAMPK蛋白表达,以及RT-PCR检测内皮细胞脂联素受体1(adiponectin receptor 1,AdipoR 1)mRNA的表达。结果与对照组比较,随着AGEs浓度的增加,细胞活性显著下降(P<0.01),细胞凋亡率显著增加(P<0.01)。与200mg/LAGEs组比较,经gAd预处理后的200mg/LAGEs组细胞活性显著增加(P<0.01),细胞凋亡率显著下降(P<0.01),p-αAMPK/αAMPK蛋白表达显著增加(P<0.01),AdipoR 1 mRNA表达显著增加(P<0.01)。结论 gAd可能通过激活AMPK/AdipoR 1通路抑制AGEs诱导HUVECs发生凋亡。 展开更多
关键词 球状脂联素 单磷酸腺苷激活蛋白激酶 脂联素受体1 晚期糖基化终产物 凋亡
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猪脂联素球状结构域gAd蛋白在重组乳酸乳球菌中表达条件的优化
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作者 杨虹坤 刘霭莎 +3 位作者 胡文锋 李岩 吴同山 王进军 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期28-33,共6页
为获得含猪脂联素球状结构域gAd基因的重组乳酸乳球菌的高效表达,对其表达条件和培养基配方进行了优化。首先采用单因素分析法确定重组乳球菌最佳诱导剂浓度、诱导时间点(OD600)和诱导后培养温度,以及培养基中的乳糖浓度、氮源浓度、Na2... 为获得含猪脂联素球状结构域gAd基因的重组乳酸乳球菌的高效表达,对其表达条件和培养基配方进行了优化。首先采用单因素分析法确定重组乳球菌最佳诱导剂浓度、诱导时间点(OD600)和诱导后培养温度,以及培养基中的乳糖浓度、氮源浓度、Na2HPO4浓度和MgSO4浓度对表达量的影响;之后通过正交试验,确定重组乳酸乳球菌的最佳表达条件。结果显示,其最佳诱导剂nisin浓度为30ng/mL、诱导的时间点是OD600≈0.4、诱导后培养温度为25℃;最佳培养基配方是:乳糖添加量为7%、大豆蛋白胨为2.7%、酵母膏为1.3%、Na2HPO4浓度为0.25%、MgSO4浓度为0.02%。优化后,脂联素的表达量为29.4%的总蛋白含量。 展开更多
关键词 脂联素 球状结构域 乳酸乳球菌 正交试验 表达优化
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人脂联素球状域-胰升糖素样肽-1类似肽融合蛋白表达载体的构建
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作者 赵同峰 詹宇红 谷卫 《重庆医学》 CAS CSCD 2006年第14期1251-1254,共4页
目的获得含人脂联素球状域-胰升糖素样肽-1类似肽融合蛋白的表达载体。方法构建含人脂联素球状域-胰升糖素样肽-1类似肽融合基因的原核表达载体,其中人脂联素球状域-胰升糖素样肽-1类似肽融合基因由接头序列连接而成,该接头序列编码产... 目的获得含人脂联素球状域-胰升糖素样肽-1类似肽融合蛋白的表达载体。方法构建含人脂联素球状域-胰升糖素样肽-1类似肽融合基因的原核表达载体,其中人脂联素球状域-胰升糖素样肽-1类似肽融合基因由接头序列连接而成,该接头序列编码产物为富含甘氨酸的短肽。结果通过基因的扩增、重组等构建了人脂联素球状域-胰升糖素样肽-1类似肽融合基因的原核表达载体。结论获得了人脂联素球状域-胰升糖素样肽-1类似肽融合蛋白的原核表达载体,为进一步进行脂联素球状域-胰升糖素样肽-1类似肽融合蛋白的表达及纯化,建立表达具有生物活性的脂联素球状域-胰升糖素样肽-1类似肽融合蛋白的方法,提供前期研究。 展开更多
关键词 脂联素球状域 胰升糖素样肽-1类似肽 脂联素球状域-胰升糖素样肽-1类似肽融合蛋白
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球状脂联素对晚期糖基化终产物诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的蛋白表达影响
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作者 赵宏宇 曹翠平 +3 位作者 张锦 赵敏 郑强 李凤春 《陕西医学杂志》 CAS 2010年第11期1448-1451,共4页
目的:研究球状脂联素(gAd)抑制晚期糖基化终产物(AGEs)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡的相关蛋白表达。方法:体外用AGEs培养HUVECs,经四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)测定细胞活性,Annexin V-FITC/PI双染标记法检测细胞凋亡,免疫印记法检... 目的:研究球状脂联素(gAd)抑制晚期糖基化终产物(AGEs)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡的相关蛋白表达。方法:体外用AGEs培养HUVECs,经四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)测定细胞活性,Annexin V-FITC/PI双染标记法检测细胞凋亡,免疫印记法检测Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果:AGEs作用HUVECs,经MTT和流式细胞仪检测,细胞凋亡具有AGEs浓度依赖性。相同浓度AGEs作用HUVECs时,gAd预处理组与非预处理组比较,明显抑制HUVECs凋亡。免疫印记结果显示gAd预处理组与非预处理组比较,gAd可明显抑制Bax蛋白表达,增强Bcl-2蛋白表达。结论:gAd可通过激活Bcl-2、抑制Bax蛋白表达,拮抗AGEs诱导HUVECs凋亡。 展开更多
关键词 内皮 血管/病理生理学 细胞凋亡 @球状脂联素 糖基化终产物 高级 BCL-2 BAX
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人脂联素基因的原核表达、纯化及活性检测
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作者 刘德敏 杨莉丽 +2 位作者 丁玉静 孙颖 于德民 《天津医药》 CAS 北大核心 2007年第9期644-646,共3页
目的:在大肠杆菌中表达具有活性的重组人脂联素蛋白。方法:利用PCR技术扩增人脂联素基因完全编码序列,选用Gateway原核表达体系,经过BP反应、LR反应两步反应,将PCR产物克隆入pET-DEST42质粒,构建融合表达载体pET-DEST42/attB-adiponect... 目的:在大肠杆菌中表达具有活性的重组人脂联素蛋白。方法:利用PCR技术扩增人脂联素基因完全编码序列,选用Gateway原核表达体系,经过BP反应、LR反应两步反应,将PCR产物克隆入pET-DEST42质粒,构建融合表达载体pET-DEST42/attB-adiponectin,转化大肠杆菌BL21(DE3),以异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达脂联素融合蛋白,经镍柱亲和层析纯化,NDSB201高效复性后,使重组蛋白作用于体外培养的肝细胞,RT-PCR法检测重组脂联素对肝细胞葡萄糖-6-磷酸酶转录水平的影响。结果:成功构建了表达载体pET-DEST42/attB-adiponectin,DNA序列测定结果与预期一致。IPTG诱导表达的融合蛋白经纯化后Western Blot鉴定具有人脂联素抗原性,并可使培养的肝细胞中葡萄糖-6-磷酸酶转录水平下降。结论:获得具有生物学活性的重组人脂联素为进一步研究脂联素的生理机制奠定了基础。 展开更多
关键词 脂联素 克隆 分子 基因表达 肝细胞 重组蛋白质类 葡糖-6-磷酸酶 大肠杆菌
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