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Immunolocalization assessment of metastasis-associated protein I in human and mouse mature testes and its association with spermatogenesis 被引量:3
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作者 Wei Li Xin-Ping Liu +1 位作者 Ruo-Jun Xu Yuan-Qiang Zhang 《Asian Journal of Andrology》 SCIE CAS CSCD 2007年第3期345-352,共8页
Aim: To investigate the stage-specific localization of metastasis-associated protein 1 (MTA1) during spermatogenesis in adult human and mouse testis. Methods: The immunolocalization of MTA1 was studied by immunohi... Aim: To investigate the stage-specific localization of metastasis-associated protein 1 (MTA1) during spermatogenesis in adult human and mouse testis. Methods: The immunolocalization of MTA1 was studied by immunohistochemistry and Western blot analysis. The distribution pattern of MTA1 in mouse testis was confirmed by using quantitative analysis of purified spermatogenic cells. Results: The specificity of polyclonal antibody was confirmed by Western blot analysis. MTA1 was found expressed in the nucleus of germ cells, except elongate spermatids, and in the cytoplasm of Sertoli cells; Leydig cells did not show any specific reactivity. MTA1 possessed different distribution patterns in the two species: in humans, the most intensive staining was found in the nucleus of round spermatids and of primary spermatocytes while in mice, the most intense MTA 1 staining was in the nucleus of leptotene, zygotene and pachytene spermatocytes. In both species the staining exhibited a cyclic pattern. Conclusion: The present communication initially provides new evidence for the potential role of MTA1 in mature testis. In addition, its distinctive expression in germ cells suggests a regulatory role of the peptide during spermatogenesis. 展开更多
关键词 human metastasis-associated proteinl mouse metastasis-associated protein 1 SPERMATOGENESIS nuclear remodeling anddeacetylation complex chromatin remodeling spermiogenesis deacetylation
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羧甲司坦口服溶液联合重组人干扰素α1b治疗小儿急性喘息性支气管炎的效果
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作者 张利敏 张华茹 +1 位作者 王东英 宋静 《河南医学研究》 CAS 2024年第2期352-355,共4页
目的分析急性喘息性支气管炎患儿接受重组人干扰素α1b单药与联合羧甲司坦口服溶液治疗的效果。方法回顾性分析2021年6月至2023年6月医院收治的100例急性喘息性支气管炎患儿资料,按不同治疗方案分为对照组、观察组,各50例。对照组接受... 目的分析急性喘息性支气管炎患儿接受重组人干扰素α1b单药与联合羧甲司坦口服溶液治疗的效果。方法回顾性分析2021年6月至2023年6月医院收治的100例急性喘息性支气管炎患儿资料,按不同治疗方案分为对照组、观察组,各50例。对照组接受重组人干扰素α1b治疗,观察组接受羧甲司坦口服溶液联合重组人干扰素α1b治疗。比较两组临床疗效、主要症状缓解时间、气道炎症相关因子[趋化因子配体3(CCL3)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、α1-酸性糖蛋白(α1-AG)]、T淋巴细胞(CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+))及不良反应。结果观察组临床总有效率高于对照组(P<0.05)。治疗后观察组气促、喘息、咳嗽、肺部音等症状缓解时间降低(P<0.05)。治疗4、7 d后,两组CCL3、HMGB1、α1-AG较治疗前下降,且观察组低于对照组(P<0.05);两组CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)较治疗前升高,且观察组高于对照组(P<0.05)。两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论羧甲司坦口服溶液联合重组人干扰素α1b治疗急性喘息性支气管炎,可抑制气道炎症,调节机体免疫,促进症状缓解,疗效确切,且安全性高。 展开更多
关键词 急性喘息性支气管炎 羧甲司坦口服溶液 重组人干扰素Α1B T淋巴细胞 趋化因子配体3 高迁移率族蛋白B1 Α1-酸性糖蛋白
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Piezo拮抗剂GsMTx4通过激活Yap1/STAT3信号通路促进人视网膜微血管内皮细胞的血管生成 被引量:3
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作者 梁晓茜 陈王灵 陈运信 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2023年第2期94-98,共5页
目的探讨Piezo拮抗剂GsMTx4对人视网膜微血管内皮细胞(hRMECs)血管生成能力的影响与机制。方法体外培养hRMECs,随机分为对照组、GsMTx4组、GsMTx4+维替泊芬(VP)组、GsMTx4+Stattic组。GsMTx4组用2.5μmol·L^(-1)的GsMTx4处理细胞24... 目的探讨Piezo拮抗剂GsMTx4对人视网膜微血管内皮细胞(hRMECs)血管生成能力的影响与机制。方法体外培养hRMECs,随机分为对照组、GsMTx4组、GsMTx4+维替泊芬(VP)组、GsMTx4+Stattic组。GsMTx4组用2.5μmol·L^(-1)的GsMTx4处理细胞24 h,GsMTx4+VP组用GsMTx4联合Yap1的拮抗剂VP(4μmol·L^(-1))处理hRMECs 24 h,GsMTx4+Stattic组则用GsMTx4联合STAT3的拮抗剂Stattic(1.5μmol·L^(-1))处理hRMECs 24 h。CCK-8法检测各组hRMECs的增殖能力。小管形成实验观察各组hRMECs的血管生成能力,记录小管分支数。qRT-PCR和Western blot检测对照组和GsMTx4组hRMECs中Piezo、Yap1、STAT3 mRNA和蛋白的表达水平。使用免疫共沉淀技术检测各组hRMECs中Yap1和STAT3的结合作用。结果与对照组相比,GsMTx4组hRMECs的增殖率和小管分支数均明显增加(均为P<0.05),Piezo蛋白表达下调,而Yap1、STAT3蛋白表达均上调,且Yap1和STAT3的结合作用明显增加(均为P<0.05)。与GsMTx4组相比,GsMTx4+VP组和GsMTx4+Stattic组hRMECs中Yap1和STAT3的蛋白表达均下调,且Yap1和STAT3的结合作用减弱(均为P<0.05)。与GsMTx4组相比,GsMTx4+VP组和GsMTx4+Stattic组hRMECs增殖率和小管分支数均降低(均为P<0.05)。结论Piezo拮抗剂GsMTx4通过激活Yap1/STAT3信号通路促进hRMECs的血管生成。 展开更多
关键词 Piezo拮抗剂GsMTx4 Yap1/STAT3信号通路 人视网膜微血管内皮细胞 血管生成
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血清MIC-1、PAPP-A、β-HCG水平检测联合超声对子宫瘢痕妊娠的诊断价值
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作者 王莉莉 康丽 +3 位作者 张春霞 张浩 张蕾 杨玉侠 《中国性科学》 2023年第10期51-55,共5页
目的 分析血清巨噬细胞抑制因子-1(MIC-1)、妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)、β-人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)水平检测联合超声对子宫瘢痕妊娠患者的诊断价值。方法 回顾性分析2021年2月至2022年2月在张家口市第五医院就诊的80例子宫瘢痕妊... 目的 分析血清巨噬细胞抑制因子-1(MIC-1)、妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)、β-人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)水平检测联合超声对子宫瘢痕妊娠患者的诊断价值。方法 回顾性分析2021年2月至2022年2月在张家口市第五医院就诊的80例子宫瘢痕妊娠患者的临床资料,将其作为观察组,另选取同期同一医院就诊的50例正常孕妇作为对照组。两组均接受血清MIC-1、PAPP-A、β-HCG水平检测和超声检查,比较血清MIC-1、PAPP-A、β-HCG水平检测和超声单独检查与联合检查对子宫瘢痕妊娠的诊断价值。结果 观察组血清MIC-1、PAPP-A、β-HCG水平均低于对照组(P<0.05)。相较于对照组,观察组子宫内膜更厚,附件区包块更大,盆腔积液更深(P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线分析结果显示,相较于单独检查,血清水平检测联合超声检查对子宫瘢痕妊娠的诊断价值更高,差异具有统计学意义(P<0.05)。相较于单独检查,血清MIC-1、PAPP-A、β-HCG水平检测联合超声检查对子宫瘢痕妊娠诊断的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值及准确度均更高(P<0.05)。结论 血清MIC-1、PAPP-A、β-HCG水平检测联合超声检查在子宫瘢痕妊娠诊断中应用价值较高。 展开更多
关键词 子宫瘢痕妊娠 巨噬细胞抑制因子-1 妊娠相关血浆蛋白A Β-人绒毛膜促性腺激素 超声
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rhIGF-1/BP3对新生幼鼠支气管肺发育不良的预防作用
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作者 陈爽 陈信 +1 位作者 瞿色华 董淮富 《贵州医科大学学报》 CAS 2023年第8期925-930,共6页
目的探讨重组人胰岛素样生长因子结合蛋白-3(rhIGF-1/BP3)对新生幼鼠支气管肺发育不良(BPD)的预防作用。方法35只SPF级怀孕Wistar大鼠,10只喂养22 d后剖宫产娩出幼鼠作为对照组(腹腔注射生理盐水1 mg/kg),其余25只大鼠建模成功获得20只... 目的探讨重组人胰岛素样生长因子结合蛋白-3(rhIGF-1/BP3)对新生幼鼠支气管肺发育不良(BPD)的预防作用。方法35只SPF级怀孕Wistar大鼠,10只喂养22 d后剖宫产娩出幼鼠作为对照组(腹腔注射生理盐水1 mg/kg),其余25只大鼠建模成功获得20只BPD模型幼鼠均分为BPD模型组(腹腔注射生理盐水1 mg/kg)及干预组(给予rhIGF-1/BP31 mg/kg);比较干预2周后3组新生幼鼠的体质量及生存率,比较干预前后3组新生幼鼠的肺功能[呼气阻力(Re)、吸气阻力(Ri)、最大通气量(MVV)、肺顺应性(C1)、第0.3秒用力呼气容积占用力肺活量的比值(FEV0.3/FVC)]和肺动脉平均压、心输出量、右心室壁厚度、右心室腔大小,比较干预2周后3组新生幼鼠的肺泡计数水平、肺泡平均截距及肺组织胰岛素样生长因子-1(IGF-1)蛋白相对表达量。结果干预后,模型组新生幼鼠体质量、生存率、MVV、C1、FEV0.3/FVC、心输出量、肺泡计数水平、IGF-1蛋白相对表达量较对照组降低,Re、Ri、肺动脉平均压、右心室壁厚度、右心室腔大小、肺泡平均截距水平较对照组升高(P<0.05);干预组新生幼鼠体质量、生存率、MVV、C1、FEV0.3/FVC、心输出量、肺泡计数水平、IGF-1蛋白相对表达量较模型组升高,Re、Ri、肺动脉平均压、右心室壁厚度、右心室腔大小、肺泡平均截距水平较模型组降低(P<0.05)。结论腹腔注射rhIGF-1/BP3干预后,BPD新生幼鼠生长情况、肺功能、心功能均得到改善,肺功脉平均压降低,其机制可能与IGF-1表达量有关。 展开更多
关键词 支气管肺发育不良 肺动脉高压 重组人胰岛素样生长因子结合蛋白-3 肺功能 胰岛素样生长因子-1 心功能
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人重组骨形态发生蛋白7通过下调半胱氨酸蛋白酶-1/焦孔素D信号通路抑制高糖诱导的近曲小管上皮细胞的焦亡
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作者 魏凯悦 米焱 +3 位作者 王彩丽 吴雅茹 张丁予 高和平 《临床肾脏病杂志》 2023年第5期403-411,共9页
目的 观察人重组骨形态发生蛋白-7(recombinant human bone morphogenetic protein-7,rhBMP-7)对高糖诱导的人肾皮质近曲小管上皮细胞(human kidney-2,HK-2)的焦亡和炎症反应的作用。方法 体外培养高糖(high glucose,HG)刺激的HK-2细胞... 目的 观察人重组骨形态发生蛋白-7(recombinant human bone morphogenetic protein-7,rhBMP-7)对高糖诱导的人肾皮质近曲小管上皮细胞(human kidney-2,HK-2)的焦亡和炎症反应的作用。方法 体外培养高糖(high glucose,HG)刺激的HK-2细胞模拟糖尿病肾病模型。分为正常浓度葡萄糖对照组(Control)、高浓度葡萄糖组(HG)、Control+rhBMP-7组、HG+rhBMP-7组。采用免疫荧光方法检测HK-2细胞中E-钙黏蛋白(E-cadherin)、α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SAM)、焦孔素D(gasderminD, GSDMD)蛋白和焦孔素E(gasderminE, GSDME)蛋白;TUNEL染色检测细胞死亡情况;蛋白质印迹法检测各组HK-2细胞中焦亡相关蛋白半胱氨酸蛋白酶-1(caspase-1)、半胱氨酸蛋白酶-4(caspase-4)、半胱氨酸蛋白酶-5(caspase-5)、 N-GSDMD和GAPDH的表达;酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测各组HK-2细胞培养上清液中炎症因子白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)和白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)的表达。结果 与Control组相比,高糖组HK-2细胞Tunel染色的阳性率明显增加,差异具有统计学意义(P<0.000 1),α-SMA蛋白和α-SMA mRNA表达量也显著增加(P<0.000 1),E-cadherin蛋白和Ecadherin mRNA表达量显著下降(P=0.000 6,P<0.000 1);HG组添加rhBMP-7后α-SMA蛋白和m RNA水平显著下降(P=0.011 7, P=0.002), E-cadherin蛋白和m RNA水平明显升高(P=0.001 5,P<0.000 1)。与对照组比较,HG组HK-2细胞GSDME/GSDMD蛋白的荧光信号明显增强。进而,HG组添加rhBMP-7后GSDME/GSDMD蛋白荧光信号显著减弱。同样,HG组HK-2细胞中焦亡相关蛋白caspase-1、caspase-4、caspase-5以及GSDMD的表达量显著高于对照组,差异明显(均P<0.001)。HG组添加rhBMP-7后焦亡相关蛋白的表达明显下降(分别P<0.001,P=0.002,P<0.001)。与对照组比较,HG组HK-2细胞培养上清液中IL-1β和IL-18蛋白浓度显著增加(均P<0.001)。进而导致rhBMP-7干预后HG组细胞上清液中IL-10和IL-1β蛋白浓度明显减少(P<0.001)。结论 rhBMP-7具有抑制HK-2细胞焦亡的作用,其通过调控caspase-1/GSDMD信号通路减缓高糖诱导的HK-2细胞焦亡。 展开更多
关键词 人肾皮质近曲小管上皮细胞 人重组骨形态发生蛋白-7 细胞焦亡 半胱氨酸蛋白酶-1/焦孔素D
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重组人生长激素对特发性矮小症儿童血清IGF-1/IGFBP-3摩尔比的影响及其临床意义 被引量:4
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作者 张静静 贾媛媛 +1 位作者 胡苗苗 成胜权 《东南大学学报(医学版)》 CAS 2023年第5期681-687,共7页
目的:探讨重组人生长激素(rhGH)对特发性矮小症(ISS)儿童血清胰岛素样生长因子-1(IGF-1)/IGF结合蛋白-3(IGFBP-3)摩尔比的影响及临床意义。方法:收集我院2016年6月至2020年6月收治的132例学龄期ISS儿童的临床和实验室记录进行回顾性分析... 目的:探讨重组人生长激素(rhGH)对特发性矮小症(ISS)儿童血清胰岛素样生长因子-1(IGF-1)/IGF结合蛋白-3(IGFBP-3)摩尔比的影响及临床意义。方法:收集我院2016年6月至2020年6月收治的132例学龄期ISS儿童的临床和实验室记录进行回顾性分析,所有儿童接受至少2年的rhGH治疗。采用化学发光法测定血清IGF-1和IGFBP-3浓度,并计算摩尔比。rhGH治疗前后数据差值(Δ)=治疗后值-治疗前值。rhGH治疗1年后Δ身高标准差分值(SDS)<0.3定义为治疗反应不良,Δ身高SDS≥0.3定义为治疗反应良好。结果:与基线相比,rhGH治疗1年和2年身高SDS、IGF-1 SDS、IGFBP-3 SDS以及IGF-1/IGFBP-3摩尔比SDS均增加(P<0.05)。rhGH治疗反应不良的学龄期ISS儿童基线时的实际年龄、骨龄明显高于反应良好儿童,同时IGF-1/IGFBP-3摩尔比和IGF-1/IGFBP-3摩尔比SDS明显低于反应良好儿童(P<0.05)。经多因素Logistic回归分析,基线时IGF-1/IGFBP-3摩尔比SDS较低是rhGH治疗反应不良的独立危险因素(P<0.001)。rhGH治疗1年或2年后的Δ身高SDS与ΔIGF-1/IGFBP-3摩尔比、ΔIGF-1/IGFBP-3摩尔比SDS呈正相关(P<0.05)。进一步校正作为协变量的基线身高后,治疗2年后Δ身高SDS与ΔIGF-1/IGFBP-3摩尔比SDS呈正相关(P<0.05)。结论:血清IGF-1/IGFBP-3摩尔比SDS与rhGH治疗后身高增加反应相关,可能适合作为预测学龄期ISS儿童接受rhGH治疗后身高反应的生物标志物。 展开更多
关键词 重组人生长激素 特发性矮小症 胰岛素样生长因子-1/胰岛素样生长因子结合蛋白-3摩尔比 身高标准差分值
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KEAP1-NRF2/HO-1通路介导LED红光促高糖诱导下人牙周膜干细胞成骨分化及减轻氧化损伤 被引量:3
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作者 姜冰 冯茂耕 +3 位作者 郑艮子 刘源 李昊 王瑶 《口腔疾病防治》 2023年第6期389-399,共11页
目的探讨Kelch样ECH相关蛋白1-核因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1(Kelch-like ECH associated protein 1-nuclear factor erythroid 2-related factor 2/heme oxygenase-1,KEAP1-NRF2/HO-1)通路介导发光二极管(light-emitting diode,LED... 目的探讨Kelch样ECH相关蛋白1-核因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1(Kelch-like ECH associated protein 1-nuclear factor erythroid 2-related factor 2/heme oxygenase-1,KEAP1-NRF2/HO-1)通路介导发光二极管(light-emitting diode,LED)红光对高糖诱导下人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells,hPDLSCs)成骨分化和氧化损伤的影响,为LED红光在细胞抗氧化损伤中的应用提供依据。方法流式细胞术、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色和茜素红染色鉴定hPDLSCs;高糖预处理hPDLSCs 48 h,用1、3、5 J/cm^(2)LED红光照射细胞,CCK-8实验选择促细胞增殖率高的辐射曝光量进行后续实验。将hPDLSCs分为对照组、高糖组、高糖+光照组;ALP染色、ALP活性检测、茜素红染色和半定量分析检测成骨分化能力,qRT-PCR和Western blot检测细胞成骨相关基因ALP、Runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,RUNX2)、成骨细胞特异性转录因子(osterix,OSX)基因和蛋白表达;qRT-PCR检测相关抗氧化酶基因超氧化物歧化酶2(superoxide dismutase 2,SOD2)、过氧化氢酶(catalase,CAT)表达;荧光显微镜观察和流式细胞术测定细胞内活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)水平;ELISA检测细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)水平。以NRF2特异性抑制剂ML385抑制NRF2通路,ALP染色、ALP活性检测细胞早期成骨分化能力,q RT-PCR检测早期成骨分化标志物ALP、RUNX2、OSX基因表达,Western blot检测细胞KEAP1、NRF2、HO-1蛋白表达水平。结果选择促高糖诱导下hPDLSCs增殖率最高的5 J/cm^(2)辐射曝光量进行后续实验(P<0.05)。5 J/cm^(2)LED红光促进高糖诱导下hPDLSCs的成骨分化(P<0.05),上调ALP、RUNX2、OSX的基因与蛋白表达(P<0.05),上调SOD2、CAT基因表达(P<0.05),降低细胞ROS水平(P<0.05),减少细胞上清液中TNF-α、IL-1β水平(P<0.05)。ML385抑制NRF2通路,细胞ALP活性降低(P<0.05),ALP、RUNX2、OSX基因表达下降(P<0.05),KEAP1蛋白表达上升(P<0.05),NRF2、HO-1蛋白表达下降(P<0.05)。结论LED红光可能通过KEAP1-NRF2/HO-1通路促进高糖诱导下hPDLSCs增殖和成骨分化,减轻氧化损伤。 展开更多
关键词 发光二极管 人牙周膜干细胞 高糖 成骨分化 活性氧簇 抗氧化 Kelch样ECH相关蛋白1 核因子E2相关因子2 血红素加氧酶-1
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急性缺血性脑卒中患者血清IRAK4、ARG1、UCH-L1的表达及其预测价值 被引量:2
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作者 李桂芬 朱色营 葛永翔 《中国疗养医学》 2023年第8期873-877,共5页
目的分析急性缺血性脑卒中患者血清白介素1受体关联激酶4(IRAK4)、重组人精氨酸酶1(ARG1)、泛素羧基末端水解酶L1(UCH-L1)的表达及其预测价值。方法选取2021年7月至2022年7月周口东新医院收治的52例急性缺血性脑卒中患者为研究组,另选... 目的分析急性缺血性脑卒中患者血清白介素1受体关联激酶4(IRAK4)、重组人精氨酸酶1(ARG1)、泛素羧基末端水解酶L1(UCH-L1)的表达及其预测价值。方法选取2021年7月至2022年7月周口东新医院收治的52例急性缺血性脑卒中患者为研究组,另选取同期于周口东新医院进行健康体检的志愿者50例为对照组。检测两组IRAK4、ARG1、UCH-L1水平。结果与对照组相比,研究组IRAK4(310.44±40.36)μg/L VS(360.59±52.88)μg/L、ARG1(80.59±9.01)ng/mL VS(109.58±11.73)ng/mL、UCH-L1(0.90±0.11)μg/L VS(1.62±0.20)μg/L水平较高(P<0.05)。与研究组轻度患者相比,中度、重度患者IRAK4(340.55±48.36)μg/L VS(359.73±50.93)μg/L VS(385.83±53.79)μg/L、ARG1(92.36±10.37)ng/mL VS(106.88±11.50)ng/mL VS(135.52±12.59)ng/mL、UCH-L1(1.21±0.16)μg/L VS(1.60±0.19)μg/L VS(2.14±0.23)μg/L水平较高(P<0.05);与中度患者相比,重度患者IRAK4(359.73±50.93)μg/L VS(385.83±53.79)μg/L、ARG1(106.88±11.50)μg/L VS(135.52±12.59)μg/L、UCH-L1(1.60±0.19)μg/L VS(2.14±0.23)μg/L水平较高(P<0.05)。结论急性缺血性脑卒中患者IRAK4、ARG1、UCH-L1表达较高,且随病情严重程度的加重、预后不良的发生,IRAK4、ARG1、UCH-L1表达水平升高加剧,IRAK4、ARG1、UCH-L1三者联合检测对急性缺血性脑卒中患者预后不良的预测价值较高。 展开更多
关键词 急性缺血性脑卒中 白介素1受体关联激酶4 重组人精氨酸酶1 泛素羧基末端水解酶L1 预后
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血清TSGF、CCL11、DKK-1水平联合检测在分化型甲状腺癌诊断中的效能
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作者 刘红威 《中国民康医学》 2023年第24期140-143,共4页
目的:分析血清肿瘤特异性生长因子(TSGF)、嗜酸性粒细胞趋化因子(CCL11)、重组人Dick-kopfx相关蛋白-1(DKK-1)水平联合检测在分化型甲状腺癌(DCT)诊断中的效能。方法:回顾性分析2021年3月至2023年3月该检验所收治的107例DCT患者的临床资... 目的:分析血清肿瘤特异性生长因子(TSGF)、嗜酸性粒细胞趋化因子(CCL11)、重组人Dick-kopfx相关蛋白-1(DKK-1)水平联合检测在分化型甲状腺癌(DCT)诊断中的效能。方法:回顾性分析2021年3月至2023年3月该检验所收治的107例DCT患者的临床资料,设为恶性组;选取同期107例甲状腺结节患者的临床资料,设为良性组;另选取同期107名健康体检者的临床资料,设为对照组。比较三组及不同病理学参数DCT患者的血清TSGF、CCL11、DKK-1水平,并绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析血清TSGF、CCL11、DKK-1水平单项及联合检测诊断DCT的效能。结果:恶性组血清TSGF、CCL11、DKK-1水平均高于良性组、对照组,且良性组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);不同年龄、肿瘤最大直径、分化程度的DCT患者血清TSGF、CCL11、DKK-1水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);临床分期Ⅲ~Ⅳ期、淋巴结转移、浸润程度T_(3)~T_(4)的DCT患者血清TSGF、CCL11、DKK-1水平均高于临床分期Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移、浸润程度T_(1)~T_(2)的DCT患者,差异有统计学意义(P<0.05);ROC曲线分析结果显示,血清TSGF、CCL11、DKK-1水平单项及联合检测诊断DCT的曲线下面积分别为0.770、0.769、0.821、0.901,均具有一定诊断效能,其中联合检测诊断效能最高。结论:TSGF、CCL11、DKK-1水平联合检测诊断DCT的效能高于三者单项检测诊断效能。 展开更多
关键词 分化型甲状腺癌 肿瘤特异性生长因子 嗜酸性粒细胞趋化因子 重组人dick-kopfx相关蛋白-1 淋巴结转移
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牛妊娠相关糖蛋白1(bPAG1)的真核表达及纯化 被引量:7
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作者 刘长彬 卢春霞 +2 位作者 杨华 张云生 石国庆 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第8期1944-1949,共6页
[目的]本研究旨在构建PCDNA3.1(-)-bPAG1重组表达载体,并在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞细胞中转染表达。[方法]通过基因优化和PCR法扩增得到bPAG1的全基因序列,经T4连接酶将载体PCDNA3.1(-)与酶切bPAG1片段连接,构建PCDNA3.1(-)-bPAG1重组载... [目的]本研究旨在构建PCDNA3.1(-)-bPAG1重组表达载体,并在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞细胞中转染表达。[方法]通过基因优化和PCR法扩增得到bPAG1的全基因序列,经T4连接酶将载体PCDNA3.1(-)与酶切bPAG1片段连接,构建PCDNA3.1(-)-bPAG1重组载体后转染到CHO细胞,经SDS-PAGE和Western Blot检测重组牛妊娠相关糖蛋白1(rbPAG1)的表达效果。[结果]PCR扩增得到1218 bp的bPAG1基因片段,构建的重组质粒PCDNA3.1(-)-bPAG1经双酶切获得约5400和1218 bp的2条片段,与预期相符;对重组载体测序,与优化后的基因序列完全一致;SDS-PAGE和Western Blot鉴定显示,获得相对分子质量约为62 kDa的bPAG1重组蛋白,通过Ni柱亲和层析纯化后,rbPAG1纯度可达88%。[结论]本研究为bPAG抗体的制备和奶牛早孕诊断技术的研发奠定了基础。 展开更多
关键词 牛妊娠相关糖蛋白 重组蛋白 真核表达 PCDNA3.1(-)
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重组人生长激素治疗前后糖尿病足患者血清中IGF-1、IGFBP-3和血浆蛋白水平的变化及其意义 被引量:14
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作者 尚涛 任艳丽 +1 位作者 李静 张英 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期1209-1214,共6页
目的:检测糖尿病足(DF)患者血清中胰岛素样生长因子1(IGF-1)、胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)和血浆蛋白的水平,探讨重组人生长激素(rhGH)对DF患者的治疗作用。方法:选取DF患者(DF组,n=40)、糖尿病患者(DM组,n=40)和健康成年人(正... 目的:检测糖尿病足(DF)患者血清中胰岛素样生长因子1(IGF-1)、胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)和血浆蛋白的水平,探讨重组人生长激素(rhGH)对DF患者的治疗作用。方法:选取DF患者(DF组,n=40)、糖尿病患者(DM组,n=40)和健康成年人(正常对照组,n=40)为研究对象。将DF组患者按照患者意愿分为rhGH治疗组和常规治疗组,每组各20例。rhGH治疗组患者给予0.4IU·kg-1·d-1rhGH注射液,皮下注射,每个疗程15d,2个疗程间隔5d,总计3个疗程;常规治疗组患者给予同等剂量生理盐水皮下注射。比较各组研究对象一般临床资料、治疗前后血清IGF-1和IGFBP-3水平、患者病情分级构成、血浆蛋白总蛋白(TP)、转铁蛋白(TRF)、空腹血糖(FBG)水平及DF组患者和正常对照组研究对象rhGH治疗有效率和创面愈合时间。结果:DF组患者血清IGF-1和IGFBP-3水平明显低于DM组和正常对照组(P<0.01);DM组患者血清IGF-1和IGFBP-3水平明显低于正常对照组(P<0.05)。rhGH治疗组患者治疗后血清IGF-1、IGFBP-3和血浆TP、TRF水平与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05),且均高于常规治疗组治疗后的相应指标(P<0.05);DM组和正常对照组研究对象FBG水平比较差异无统计学意义(P<0.05)。rhGH治疗组患者有效率明显高于常规治疗组(P<0.05)。结论:DF患者经rhGH治疗后有效率提高,适合临床推广。 展开更多
关键词 重组人生长激素 糖尿病足 胰岛素样生长因子1 血浆总蛋白 转铁蛋白
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一种基于HIV-1TAT蛋白质转导结构域细胞内转导系统的成功改建 被引量:8
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作者 郭爱华 刘志锋 +3 位作者 孙学刚 李海玉 邓鹏 姜勇 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期545-548,共4页
目的探索本室构建的pET14b-His-TAT-Flag重组载体表达的融合蛋白在细胞中转导效率低的原因,建立高效的细胞内转导系统。方法通过PCR方法去除原有载体中的Flag序列,在改建正确的pET14b-His-TAT重组载体基础上插入EGFP编码序列,将经酶切、... 目的探索本室构建的pET14b-His-TAT-Flag重组载体表达的融合蛋白在细胞中转导效率低的原因,建立高效的细胞内转导系统。方法通过PCR方法去除原有载体中的Flag序列,在改建正确的pET14b-His-TAT重组载体基础上插入EGFP编码序列,将经酶切、DNA测序鉴定正确的pET14b-His-TAT-EGFP质粒转化E.coliBL21(DE3),经IPTG诱导表达、SDS-PAGE鉴定正确,再经蛋白透析、过滤处理。将His-TAT-EGFP融合蛋白加入ECV304细胞中,用荧光显微镜观察。结果重组质粒pET14b-His-TAT融合表达载体和pET14b-His-TAT-EGFP重组载体经酶切、DNA测序鉴定证实构建成功。表达纯化出了高纯度His-TAT-EGFP融合蛋白并具有较高细胞内转导活性。结论成功改建pET14b-His-TAT-Flag重组载体,正确构建pET14b-His-TAT-EGFP载体,His-TAT-EGFP融合蛋白高效表达,并具有明确的细胞内转导活性。 展开更多
关键词 HIV-1反式激活因子 蛋白质转导结构域 融合蛋白 细胞内转导
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血清胰岛素样生长因子-1、胰岛素样生长因子结合蛋白-3在矮小症儿童诊断和疗效判断中的价值 被引量:22
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作者 谢理玲 柯江维 +5 位作者 杨玉 杨利 李玲芳 周斌 吴限 邹海英 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第20期1604-1606,共3页
目的探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)及其结合蛋白-3(IGFBP-3)在矮小症儿童诊断及疗效判断中的价值。方法1.对124例青春发育前矮小症患儿用精氨酸激发试验和可乐定激发试验检测其血清生长激素(GH)水平,并根据患儿GH峰值分为生长激素缺乏... 目的探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)及其结合蛋白-3(IGFBP-3)在矮小症儿童诊断及疗效判断中的价值。方法1.对124例青春发育前矮小症患儿用精氨酸激发试验和可乐定激发试验检测其血清生长激素(GH)水平,并根据患儿GH峰值分为生长激素缺乏组(GHD组,40例)、特发性矮小组(ISS组,84例)。选取20例健康儿童作为健康对照组。对所有儿童采用酶联免疫吸附法检测血清IGF-1和IGFBP-3。对GHD组、ISS组和健康对照组儿童血清IGF-1和IGFBP-3水平进行两两比较。2.对15例GHD和30例ISS患儿予国产重组人生长激素(rhGH)0.1 IU/(kg.d)治疗6个月,于治疗前及治疗6个月分别测定其身高、体质量、骨龄及血清IGF-1、IGFBP-3,并进行治疗前后的对照。结果1.GHD组和ISS组患儿血清IGF-1和IGFBP-3水平明显低于健康对照组(Pa<0.01),GHD组与ISS组患儿血清IGF-1和IGFBP-3水平比较均有显著差异(Pa<0.01),GHD组患儿治疗前后血清IGF-1、IGFBP-3比较有显著差异(Pa<0.01);诊断GHD,IGF-1的特异性为67.8%,敏感性为75%;IGFBP-3的特异性为88%,敏感性为85%。2.rhGH治疗后身高增长速度明显加快,血清IGF-1、IGFBP-3水平显著升高;治疗前血清IGF-1与治疗6个月生长速度呈显著负相关(r=-0.78 P<0.01);治疗6个月后IGF-1的变化与治疗后生长速度呈显著正相关(r=0.82 P<0.01)。结论IGF-1、IGFBP-3可用于儿童矮小症的诊断及疗效评价。 展开更多
关键词 矮小症 胰岛素样生长因子-1 胰岛素样生长因子结合蛋白-3 重组人生长激素 儿童
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重组腺相关病毒介导RNA干扰抑制EB病毒潜伏膜蛋白1对鼻咽癌细胞影响的动物试验 被引量:4
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作者 刘雄 李刚 +3 位作者 张宝 王路 李晓华 李湘平 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期611-614,618,共5页
目的探讨EB病毒(EBV)潜伏膜蛋白1(LMP-1)对于鼻咽癌细胞在体内增殖及转移能力的影响。方法设计针对EBV-LMP-1的特异性发夹状RNA(shRNA)干扰序列,构建2种重组腺相关病毒(rAAV)载体:(增强型绿色荧光蛋白,EGFP)rAAV-EGFP和rAAV-shRNA-LMP-1... 目的探讨EB病毒(EBV)潜伏膜蛋白1(LMP-1)对于鼻咽癌细胞在体内增殖及转移能力的影响。方法设计针对EBV-LMP-1的特异性发夹状RNA(shRNA)干扰序列,构建2种重组腺相关病毒(rAAV)载体:(增强型绿色荧光蛋白,EGFP)rAAV-EGFP和rAAV-shRNA-LMP-1,以不同滴度rAAV-EGFP转染鼻咽癌C666-1细胞确定最佳转染复数(MOI),rAAV-shRNA-LMP-1按MOI转染C666-1,RT-PCR鉴定抑制效率,将体外转染RNA干扰后的C666-1细胞注入裸鼠肝脏包膜下制作鼻咽癌异位肝种植的肝肺转移模型,观察肝脏成瘤及肝内、肺转移情况,分析LMP-1基因沉默在动物水平对鼻咽癌细胞成瘤及转移能力的影响。结果rAAV-EGFP以5×104v.g(virus genome,病毒基因组数)/细胞转染C666-1细胞,转染效率大于95%,RT-PCR鉴定rAAV-shRNA-LMP-1以5×104v.g/细胞转染C666-1后目的基因抑制效率大于90%,动物试验结果显示rAAV-shRNA-LMP-1组肝脏成瘤体积与对照组rAAV-EGFP无显著差异,但显著减少了种植肿瘤的肝内及肺转移率。结论通过rAAV介导RNA干扰能有效抑制LMP-1基因表达,可在动物水平抑制鼻咽癌细胞转移,但对鼻咽癌细胞生长无显著影响。 展开更多
关键词 鼻咽癌 重组腺相关病毒 RNA干扰 EB病毒潜伏膜蛋白1 转移
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内毒素对重组人成骨蛋白-1诱导人牙髓细胞活性的影响 被引量:4
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作者 苏勤 何国华 +1 位作者 张郁 李强 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期116-118,共3页
目的:研究具核梭杆菌的内毒素(LPS)对重组人成骨蛋白-1(rhOP-1)诱导牙髓细胞增殖、分化的影响。方法:采用噻唑盐比色测定(MTT)、酶动力学方法和放射免疫技术。结果:在较低浓度LPS作用时,可协同增加rhOP... 目的:研究具核梭杆菌的内毒素(LPS)对重组人成骨蛋白-1(rhOP-1)诱导牙髓细胞增殖、分化的影响。方法:采用噻唑盐比色测定(MTT)、酶动力学方法和放射免疫技术。结果:在较低浓度LPS作用时,可协同增加rhOP-1对牙髓细胞增殖和碱性磷酸酶(ALPase)活性,但对骨钙素(BGP)无明显影响,而高浓度LPS则起抑制作用。结论:提示适度的LPS在牙髓对龋病的防御反应过程中起着一定调节作用。 展开更多
关键词 脂多糖 rhOP-1 牙髓细胞 内毒素 龋齿
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人重组骨形成蛋白-1对牙髓细胞生物学效应的研究 被引量:4
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作者 苏勤 何国华 +2 位作者 孙叶芳 陆怀秀 王胜朝 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期300-302,I016,共4页
通过细胞培养技术、噻唑盐比色测定(MTT)、酶动力学方法和放射免疫技术,了解人重组骨形成蛋白-1(rhOP-1)对体外培养的人牙髓细胞增殖、碱性磷酸酶活性及骨钙素表达的影响。结果表明,rhOP-1可促进牙髓细胞增殖,... 通过细胞培养技术、噻唑盐比色测定(MTT)、酶动力学方法和放射免疫技术,了解人重组骨形成蛋白-1(rhOP-1)对体外培养的人牙髓细胞增殖、碱性磷酸酶活性及骨钙素表达的影响。结果表明,rhOP-1可促进牙髓细胞增殖,提高牙髓碱性磷酸酶活性及骨钙素的表达,在本实验剂量范围内呈浓度依赖关系,具有诱导牙髓细胞向成骨方向转化的趋势。 展开更多
关键词 rhOP-1 牙髓细胞 碱性磷酸酶 骨钙素 细胞增殖
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人成骨蛋白-1成熟肽基因5’端的修饰及其在大肠杆菌中的表达 被引量:3
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作者 陈文 史俊南 +3 位作者 付士红 孙叶芳 梁国栋 侯云德 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 1998年第1期3-6,共4页
目的:对人成骨蛋白-1(OP-1)成熟肽基因进行修饰、克隆并在大肠杆菌中表达、检测,为OP-1的进一步纯化、复性、诱骨活性的研究以及未来的临床应用奠定基础。方法:在不改变氨基酸的前提下,用PCR的方法对OP-1的成熟... 目的:对人成骨蛋白-1(OP-1)成熟肽基因进行修饰、克隆并在大肠杆菌中表达、检测,为OP-1的进一步纯化、复性、诱骨活性的研究以及未来的临床应用奠定基础。方法:在不改变氨基酸的前提下,用PCR的方法对OP-1的成熟肽N端序列加以修饰,将编码成熟肽的cDNA3’端0.42kb基因片段克隆于温控型大肠杆菌表达载体pBV220,受控于PLPR启动子。重组子以大肠杆菌DH5α为宿主细胞进行温度诱导表达。用鼠抗牛天然BMPs单抗对表达产物进行ELISA检测和WesternBloting确证。结果:工程菌经42℃、5h诱导后,在SDS-PAGE上出现一条新的蛋白带,分子量在1.6×104u左右,约占菌体总蛋白的19.8%。主要以包涵体形式存在的表达产物经初步纯化后,可获得纯度较高的重组人成骨蛋白-1成熟肽(rhOP-1)。表达产物的ELISA检测和WesternBlotng确证确均呈阳性反应。结论:表达产物即为目的蛋白,使hOP-1成熟肽基因5’端的修饰及其在大肠杆菌中的表达在国内第一次获得成功。 展开更多
关键词 人成骨蛋白-1 DNA重组 基因表达 免疫印迹
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外周血sFIt-1、β-hCG、PAPP-A、AFP的表达与早发型子痫前期的关系 被引量:17
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作者 杜娟 朱一麟 +1 位作者 高雪梅 贺漪 《疑难病杂志》 CAS 2016年第4期394-397,共4页
目的探讨外周血可溶性血管内皮生长因子受体-1(sFIt-1)、人绒毛膜促性腺激素(β—hCG)、孕早期妊娠相关蛋白A(PAPP-A)、甲胎蛋白(AFP)的表达与早发型子痫前期(PE)的相关性。方法选取2014年10月—2015年10月武汉市第一医院收治的PE患者84... 目的探讨外周血可溶性血管内皮生长因子受体-1(sFIt-1)、人绒毛膜促性腺激素(β—hCG)、孕早期妊娠相关蛋白A(PAPP-A)、甲胎蛋白(AFP)的表达与早发型子痫前期(PE)的相关性。方法选取2014年10月—2015年10月武汉市第一医院收治的PE患者84例,其中早发型48例,迟发型36例。选择同期正常妊娠妇女80例为对照组。应用ELISA法测定所有研究对象外周血sFIt-1、β—hCG、PAPP—A、AFP水平,应用受试者特异性曲线(ROC)分析sFIt—1、β-hCG、PAPP-A、AFP对早发型子痫前期的诊断价值。结果早发型组PE患者外周血sFIt—1、β—hCG、PAPP—A、AFP水平均高于对照组(t=9.236、10.422、11.986、14.785,P<0.05),早发型组sFIt—1、PAPP—A、AFP水平高于迟发型组(t=9.236、7.458、10.252,P<0.05),而迟发型组外周血sFIt—1、PAPP-A、AFP与对照组比较差异无统计学意义(t=0.785、0.902、0.525,P>0.05)。早发型组重度PE外周血sFIt-1、β-hCG、PAPP-A、AFP水平均高于轻度患者(t=6.271、31.680、3.449、5.045,P<0.05),而迟发型组重度患者外周血sFIt-1、PAPP—A、AFP水平与轻度患者比较差异无统计学意义(t=0.598、0.230、0.437,P>0.05),而β-hCG比较差异有统计学意义(t=6.043,P<0.05)。经ROC分析可知,sFIt-1+β-hCG+PAPP—A+AFP联合诊断早发型PE的灵敏度及特异度高于单一指标检测。结论外周血sFIt-1、β—hCG、PAPP-A、AFP水平与早发型PE发生发展有密切的关系,早发型与晚发型PE可能存在不同的发病机制。通过联合应用多种指标诊断可提高早发型子痫前期患者诊断灵敏度。 展开更多
关键词 可溶性血管内皮生长因子受体-1 人绒毛膜促性腺激素 孕早期妊娠相关蛋白A 甲胎蛋白 早发型子痫前期
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外源性HMGB1对SLE外周血单个核细胞自噬影响的研究 被引量:4
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作者 付冰冰 孙晓鹏 赵阴环 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期942-945,949,共5页
目的:探讨重组人高迁移率族蛋白B1(High mobility group box1,HMGB1)刺激伴肾脏损害和不伴肾脏损害的系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞后自噬相关蛋白——微管相关蛋白1轻链3(LC3)的两个亚型LC3Ⅱ/Ⅰ的表达情况,以及重组人HMGB1刺激... 目的:探讨重组人高迁移率族蛋白B1(High mobility group box1,HMGB1)刺激伴肾脏损害和不伴肾脏损害的系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞后自噬相关蛋白——微管相关蛋白1轻链3(LC3)的两个亚型LC3Ⅱ/Ⅰ的表达情况,以及重组人HMGB1刺激对SLE患者外周血单个核细胞增殖的影响。方法:Western blot比较1μg/ml重组人HMGB1蛋白刺激伴肾脏损害与不伴肾脏损害的系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞0、6、24、48 h后自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ的表达情况。CCK-8法检测1μg/ml HMGB1刺激72 h对SLE患者外周血单个核细胞增殖的影响。应用SPSS17.0进行数据分析。结果:Western blot结果显示:HMGB1时间依赖性地引起SLE患者外周血单个核细胞中自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ表达上调(P<0.05)。伴肾脏损害组与不伴肾脏损害组相比,自噬水平的增加更为明显。1μg/ml HMGB1明显抑制SLE患者PBMC的增殖(P<0.001)。结论:HMGB1可以使SLE尤其是伴肾脏损害患者外周血单个核细胞发生细胞自噬,参与SLE甚至狼疮肾炎的发病。提示针对HMGB1的单克隆抗体或细胞自噬调节剂可能成为SLE新的治疗靶点。 展开更多
关键词 红斑狼疮 系统性 重组HMBG1 自噬 LC3
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