酶联免疫法测定甘精胰岛素中单链前体残留研究

目的 建立酶联免疫法检测甘精胰岛素中单链前体残留,为甘精胰岛素药物质量控制和安全性评价提供新方法。方法采用双抗夹心酶联免疫法,以甘精胰岛素原为标准品,建立单链前体残留检测方法,验证方法的重复性、准确度、范围和精密度,并应用该方法检测9批甘精胰岛素原料药。结果在0.156~10.00 ng·mL^(-1)浓度范围内,对甘精胰岛素原标准品进行四参数曲线拟合,曲线相关系数R~2大于0.99,方法准确度较高、重复性良好。重复检测3批甘精胰岛素原料药,平均加标回收率在104%~113%范围内,RSD%小于10%,方法精密度良好。9批样品中单链前体残留量均小于1 ng·mg^(-1)。结论建立的酶联免疫法可用于甘精胰岛素及其他重组人胰岛素类似物中单链前体残留量的质量控制和安全性评价。

罗非鱼下脚料酶解制备呈味肽的研究

为了更好地综合利用罗非鱼下脚料,研究了罗非鱼下脚料制备呈味肽的酶解工艺。采用碱性蛋白酶对罗非鱼下脚料进行酶解,确定酶解的最佳条件:温度55℃,pH 7.5,液固比3∶1,加酶量800U/g和酶解时间5h。在最佳条件下,短肽得率达到24.6%。

玉米糖肽的纳滤脱盐工艺

为了去除玉米糖肽溶液中过多的盐分,采用相对分子质量200纳滤膜对具有抗氧化活性的玉米糖肽溶液进行脱盐处理,通过对膜通量以及玉米糖肽溶液的Na;质量分数、脱盐率、电导率、短肽回收率和纳滤后产物自由基清除率和Fe;-螯合率等参数的研究,确定玉米糖肽溶液的纳滤脱盐工艺。结果表明,利用相对分子质量200纳滤膜对玉米糖肽溶液脱盐的工艺条件为:在压力2.0 MPa、温度20℃条件下连续纳滤5次,每次体积浓缩倍数为2。经5次纳滤后,玉米糖肽截留液的电导率降低60.87%,脱盐率和短肽回收率分别为81.60%和96.97%,羟自由基清除率从11.25%提高到15.85%,而1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基清除率和Fe;-螯合率分别降低11.83%和46.07%。同时,相对分子质量200纳滤膜还可以除去糖基化反应体系中55.54%未反应的D-氨基葡萄糖,起到脱盐、脱糖和浓缩的三重作用。