Bone marrow mesenchymal stem cell transplantation is an effective treatment for neonatal hy- poxic-ischemic brain damage. However, the in vivo transplantation effects are poor and their survival, colonization and diff...Bone marrow mesenchymal stem cell transplantation is an effective treatment for neonatal hy- poxic-ischemic brain damage. However, the in vivo transplantation effects are poor and their survival, colonization and differentiation efficiencies are relatively low. Red or near-infrared light from 600-1,000 nm promotes cellular migration and prevents apoptosis. Thus, we hypothesized that the combination of red light with bone marrow mesenchymal stem cell transplantation would be effective for the treatment of hypoxic-ischemic brain damage. In this study, the migra- tion and colonization of cultured bone marrow mesenchymal stem cells on primary neurons after oxygen-glucose deprivation were detected using Transwell assay. The results showed that, after a 40-hour irradiation under red light-emitting diodes at 660 nm and 60 mW/cmz, an increasing number of green fluorescence-labeled bone marrow mesenchymal stem cells migrated towards hypoxic-ischemic damaged primary neurons. Meanwhile, neonatal rats with hypoxic-ischemic brain damage were given an intraperitoneal injection of 1 x 106 bone marrow mesenchymal stem cells, followed by irradiation under red light-emitting diodes at 660 nm and 60 mW/cm2 for 7 successive days. Shuttle box test results showed that, after phototherapy and bone marrow mesenchymal stem cell transplantation, the active avoidance response rate of hypoxic-ischemic brain damage rats was significantly increased, which was higher than that after bone marrow mesenchymal stem cell transplantation alone. Experimental findings indicate that 660 nm red light emitting diode irradiation promotes cells, thereby enhancing the contribution ic-ischemic brain damage. the migration of bone marrow mesenchymal stem of cell transplantation in the treatment of hypox-展开更多
目的探讨炎症条件的动物输注贮存红细胞对巨噬细胞(BMDMs)的调节作用以及贮存红细胞输注与细菌感染引发炎症反应的关系。方法将6~8周龄成年雄性C57BL/6小鼠[(18~22)g/只]40只随机均分为实验组和实验对照组(对照组),均通过动物尾静脉注...目的探讨炎症条件的动物输注贮存红细胞对巨噬细胞(BMDMs)的调节作用以及贮存红细胞输注与细菌感染引发炎症反应的关系。方法将6~8周龄成年雄性C57BL/6小鼠[(18~22)g/只]40只随机均分为实验组和实验对照组(对照组),均通过动物尾静脉注射铜绿假单胞菌200μL/只,并使用吸入式麻醉剂异氟烷(1%~3%)麻醉后,通过小鼠眼后静脉丛,实验组输注鼠源贮存悬浮红细胞(>14 d)400μL/只、对照组每只输注等量新鲜悬浮红细胞(贮存<24 h);于输注后2、4、8 h脱就猝死各结束2组小鼠生命5只,摘取鼠肝,体外培养铜绿假单胞菌感染(200μL/只)小鼠的股骨、胫骨骨髓来源的BMDMs,流式细胞术检测BMDMs中分化簇86(CD86)、分化簇197(CD197)[巨噬细胞1型(M1)基因特异性标志物]、分化簇209(CD209)[巨噬细胞2型(M2)基因特异性标记]表达水平,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测小鼠肝脏F4/80、M1、M2基因表达水平,并使用SPSS17.0统计学软件分析数据。结果实验组与对照组BMDMs中CD86和CD197的表达(%)分别为8688±1.01 vs 79.24±2.65、38.59±3.73 vs 25.95±0.86(P<0.05),CD209(%)为23.88±2.23 vs 21.91±3.58(P>0.05)。输注红细胞后2、4 h,小鼠肝F4/80基因表达水平实验组和对照组分别为1.83±0.11 vs 0.75±0.06、0.46±0.06 vs 0.33±0.06(P<0.05),8 h后分别为0.33±0.03 vs 0.35±0.05(P>0.05);输注红细胞2、4、8 h,小鼠肝M1基因中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因表达水平实验组和对照组分别为3.44±0.20 vs 2.46±0.08、9.25±0.55 vs 2.67±0.12、2.80±0.08 vs 2.39±0.01,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)分别为1.69±0.22 vs 1.13±0.03、1.44±0.24 vs 0.96±0.09、1.31±0.05 vs 0.96±0.06,单核细胞趋化蛋白1(MCP1)分别为4.96±0.08 vs 4.28±0.27、4.63±0.04 vs 2.07±0.09、2.28±0.19 vs 1.33±0.03(P<0.05);M2基因中精氨酸1(Arg1)基因表达水平实验组和对照组分别为0.81±0.21 vs 0.82±0.18、0.66±0.11 vs 0.58±0.09、0.39±0.17 vs 0.37±0.15,甘露糖受体C型2(Mrc2)分别为0.99±0.91 vs 0.97±0.08、0.98±0.12 vs 1.02±0.11、0.59±0.19 vs 0.57±0.08,重组蛋白163(CD163)分别为1.75±0.20 vs 1.69±0.18、0.22±0.02 vs 0.21±0.01、0.04±0.01 vs 0.03±0.01(P>0.05)。结论实验小鼠输注贮存红细胞明显促进其肝脏组织巨噬细胞朝向M1表型的极化。展开更多
目的探讨重组人胰岛素样生长因子-1(recom b inan t hum an insu lin-like grow th factor 1,rh IGF-1)/珊瑚羟基磷灰石(cora lline hydroxyapatite,CHA)/自体红骨髓(au togeneous red bone m arrow,ARBM)复合构建重组人工骨修复骨缺损...目的探讨重组人胰岛素样生长因子-1(recom b inan t hum an insu lin-like grow th factor 1,rh IGF-1)/珊瑚羟基磷灰石(cora lline hydroxyapatite,CHA)/自体红骨髓(au togeneous red bone m arrow,ARBM)复合构建重组人工骨修复骨缺损的能力。方法成年中国家兔54只,随机分为3组,每组18只。制成双侧桡骨干11 mm骨-骨膜全层缺损模型,每组动物双侧缺损分别随机植入两种不同材料,形成自体对照的实验组和对照组。1组:实验组(A组,植入CHA/ARBM/rh IGF-1)和对照组(B组,植入CHA/ARBM);2组:实验组(C组,植入CHA/rh IGF-1)和对照组(D组,植入CHA);3组:实验组(E组,植入取自对侧相应缺损骨段的自体骨)和对照组(F组,缺损旷置)。于术后2、4、8和12周行X线片观察、计算机图像分析、组织学观察和生物力学检测,比较各组修复骨缺损能力。结果A组在各时间点X线片及计算机图像分析均优于其它各组,差异有统计学意义(P<0.01)。组织学观察A组12周时可形成均匀致密的板层骨,整个过程与自体骨移植后组织形态学变化基本相似。12周抗弯生物力学测试,A组和E组间差异无统计学意义(P>0.05),但显著优于其它各组(P<0.01);C组和D组各时间点差异无统计学意义(P>0.05),成骨效果低于A、B和E组。12周时F组缺损未修复。结论CHA/ARBM/rh IGF-1重组后可协同实现骨再生、骨传导和骨诱导三重促成骨功效,可替代自体骨移植,成为一种新型的复合活性人工骨。展开更多
目的研究带蒂筋膜瓣作为膜材料应用于膜引导性骨再生技术修复骨缺损的过程中血管化进程及成骨效果方法24只5月龄新西兰大白兔雌雄不限,制备双侧尺骨1cm骨缺损模型,自体红骨髓(au-tologous red bone marrow,ARBM)接种于骨诱导活性材料(Os...目的研究带蒂筋膜瓣作为膜材料应用于膜引导性骨再生技术修复骨缺损的过程中血管化进程及成骨效果方法24只5月龄新西兰大白兔雌雄不限,制备双侧尺骨1cm骨缺损模型,自体红骨髓(au-tologous red bone marrow,ARBM)接种于骨诱导活性材料(Osteoinductive absorbing material,OAM)制备组织工程骨。将非细胞型组织工程复合物植入骨缺损区,右侧单纯可吸收生物膜包裹设为A组,左侧带血运深筋膜瓣包裹设为B组。各组在4、8、12、16周后进行X线检查、光密度比值测量、大体观察和组织学检查、交界区血管图像计量分析,将数据作统计学处理,用以比较骨缺损修复情况。结果X线片、大体形态和组织学观察显示,植入物内部血管的长入、骨小梁及软骨组织形成的数量和速度、成熟骨结构的形成、骨干结构的重塑、骨髓腔的再通、植入物的吸收降解,筋膜瓣组均明显优于生物膜组。光密度比值测量显示,术后8、12、16周两组间比较及同组内各时间点间比较差异均有统计学意义(P<0.05),术后4、8、12、16周,骨修复交界区单位面积内血管再生面积筋膜瓣组明显多于生物膜组,差异有统计学意义(P<0.05)。从术后12周,筋膜瓣组随着成熟骨结构形成,血管结构减少或消失。结论带血运筋膜瓣具有明显的促组织工程骨血管化作用并通过促血管化而促进成骨并具备膜引导性骨再生(guided bone regeneration,GBR)技术的骨修复特点,即早期促进外骨痂生长。展开更多
基金the National Natural Science Foundation of China,No.30970758,31271060the National Science and Technology Support Program of China,No.2011BAI14B04,2012BAI16B02the Natural Science Foundation of Chongqing in China,No.cst-c2012jjA10103
文摘Bone marrow mesenchymal stem cell transplantation is an effective treatment for neonatal hy- poxic-ischemic brain damage. However, the in vivo transplantation effects are poor and their survival, colonization and differentiation efficiencies are relatively low. Red or near-infrared light from 600-1,000 nm promotes cellular migration and prevents apoptosis. Thus, we hypothesized that the combination of red light with bone marrow mesenchymal stem cell transplantation would be effective for the treatment of hypoxic-ischemic brain damage. In this study, the migra- tion and colonization of cultured bone marrow mesenchymal stem cells on primary neurons after oxygen-glucose deprivation were detected using Transwell assay. The results showed that, after a 40-hour irradiation under red light-emitting diodes at 660 nm and 60 mW/cmz, an increasing number of green fluorescence-labeled bone marrow mesenchymal stem cells migrated towards hypoxic-ischemic damaged primary neurons. Meanwhile, neonatal rats with hypoxic-ischemic brain damage were given an intraperitoneal injection of 1 x 106 bone marrow mesenchymal stem cells, followed by irradiation under red light-emitting diodes at 660 nm and 60 mW/cm2 for 7 successive days. Shuttle box test results showed that, after phototherapy and bone marrow mesenchymal stem cell transplantation, the active avoidance response rate of hypoxic-ischemic brain damage rats was significantly increased, which was higher than that after bone marrow mesenchymal stem cell transplantation alone. Experimental findings indicate that 660 nm red light emitting diode irradiation promotes cells, thereby enhancing the contribution ic-ischemic brain damage. the migration of bone marrow mesenchymal stem of cell transplantation in the treatment of hypox-
基金Supported by National Nature Science Foundation of China(No.3027049) the Funds for Key Sci-tech Research Projects of GuangdongProvince [YUE KEJIBAN(2000)25 YUE CAIQI 2001(367) ,2003(209)] and of the Army[01Z054]
文摘目的探讨炎症条件的动物输注贮存红细胞对巨噬细胞(BMDMs)的调节作用以及贮存红细胞输注与细菌感染引发炎症反应的关系。方法将6~8周龄成年雄性C57BL/6小鼠[(18~22)g/只]40只随机均分为实验组和实验对照组(对照组),均通过动物尾静脉注射铜绿假单胞菌200μL/只,并使用吸入式麻醉剂异氟烷(1%~3%)麻醉后,通过小鼠眼后静脉丛,实验组输注鼠源贮存悬浮红细胞(>14 d)400μL/只、对照组每只输注等量新鲜悬浮红细胞(贮存<24 h);于输注后2、4、8 h脱就猝死各结束2组小鼠生命5只,摘取鼠肝,体外培养铜绿假单胞菌感染(200μL/只)小鼠的股骨、胫骨骨髓来源的BMDMs,流式细胞术检测BMDMs中分化簇86(CD86)、分化簇197(CD197)[巨噬细胞1型(M1)基因特异性标志物]、分化簇209(CD209)[巨噬细胞2型(M2)基因特异性标记]表达水平,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测小鼠肝脏F4/80、M1、M2基因表达水平,并使用SPSS17.0统计学软件分析数据。结果实验组与对照组BMDMs中CD86和CD197的表达(%)分别为8688±1.01 vs 79.24±2.65、38.59±3.73 vs 25.95±0.86(P<0.05),CD209(%)为23.88±2.23 vs 21.91±3.58(P>0.05)。输注红细胞后2、4 h,小鼠肝F4/80基因表达水平实验组和对照组分别为1.83±0.11 vs 0.75±0.06、0.46±0.06 vs 0.33±0.06(P<0.05),8 h后分别为0.33±0.03 vs 0.35±0.05(P>0.05);输注红细胞2、4、8 h,小鼠肝M1基因中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因表达水平实验组和对照组分别为3.44±0.20 vs 2.46±0.08、9.25±0.55 vs 2.67±0.12、2.80±0.08 vs 2.39±0.01,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)分别为1.69±0.22 vs 1.13±0.03、1.44±0.24 vs 0.96±0.09、1.31±0.05 vs 0.96±0.06,单核细胞趋化蛋白1(MCP1)分别为4.96±0.08 vs 4.28±0.27、4.63±0.04 vs 2.07±0.09、2.28±0.19 vs 1.33±0.03(P<0.05);M2基因中精氨酸1(Arg1)基因表达水平实验组和对照组分别为0.81±0.21 vs 0.82±0.18、0.66±0.11 vs 0.58±0.09、0.39±0.17 vs 0.37±0.15,甘露糖受体C型2(Mrc2)分别为0.99±0.91 vs 0.97±0.08、0.98±0.12 vs 1.02±0.11、0.59±0.19 vs 0.57±0.08,重组蛋白163(CD163)分别为1.75±0.20 vs 1.69±0.18、0.22±0.02 vs 0.21±0.01、0.04±0.01 vs 0.03±0.01(P>0.05)。结论实验小鼠输注贮存红细胞明显促进其肝脏组织巨噬细胞朝向M1表型的极化。
文摘目的探讨重组人胰岛素样生长因子-1(recom b inan t hum an insu lin-like grow th factor 1,rh IGF-1)/珊瑚羟基磷灰石(cora lline hydroxyapatite,CHA)/自体红骨髓(au togeneous red bone m arrow,ARBM)复合构建重组人工骨修复骨缺损的能力。方法成年中国家兔54只,随机分为3组,每组18只。制成双侧桡骨干11 mm骨-骨膜全层缺损模型,每组动物双侧缺损分别随机植入两种不同材料,形成自体对照的实验组和对照组。1组:实验组(A组,植入CHA/ARBM/rh IGF-1)和对照组(B组,植入CHA/ARBM);2组:实验组(C组,植入CHA/rh IGF-1)和对照组(D组,植入CHA);3组:实验组(E组,植入取自对侧相应缺损骨段的自体骨)和对照组(F组,缺损旷置)。于术后2、4、8和12周行X线片观察、计算机图像分析、组织学观察和生物力学检测,比较各组修复骨缺损能力。结果A组在各时间点X线片及计算机图像分析均优于其它各组,差异有统计学意义(P<0.01)。组织学观察A组12周时可形成均匀致密的板层骨,整个过程与自体骨移植后组织形态学变化基本相似。12周抗弯生物力学测试,A组和E组间差异无统计学意义(P>0.05),但显著优于其它各组(P<0.01);C组和D组各时间点差异无统计学意义(P>0.05),成骨效果低于A、B和E组。12周时F组缺损未修复。结论CHA/ARBM/rh IGF-1重组后可协同实现骨再生、骨传导和骨诱导三重促成骨功效,可替代自体骨移植,成为一种新型的复合活性人工骨。
文摘目的研究带蒂筋膜瓣作为膜材料应用于膜引导性骨再生技术修复骨缺损的过程中血管化进程及成骨效果方法24只5月龄新西兰大白兔雌雄不限,制备双侧尺骨1cm骨缺损模型,自体红骨髓(au-tologous red bone marrow,ARBM)接种于骨诱导活性材料(Osteoinductive absorbing material,OAM)制备组织工程骨。将非细胞型组织工程复合物植入骨缺损区,右侧单纯可吸收生物膜包裹设为A组,左侧带血运深筋膜瓣包裹设为B组。各组在4、8、12、16周后进行X线检查、光密度比值测量、大体观察和组织学检查、交界区血管图像计量分析,将数据作统计学处理,用以比较骨缺损修复情况。结果X线片、大体形态和组织学观察显示,植入物内部血管的长入、骨小梁及软骨组织形成的数量和速度、成熟骨结构的形成、骨干结构的重塑、骨髓腔的再通、植入物的吸收降解,筋膜瓣组均明显优于生物膜组。光密度比值测量显示,术后8、12、16周两组间比较及同组内各时间点间比较差异均有统计学意义(P<0.05),术后4、8、12、16周,骨修复交界区单位面积内血管再生面积筋膜瓣组明显多于生物膜组,差异有统计学意义(P<0.05)。从术后12周,筋膜瓣组随着成熟骨结构形成,血管结构减少或消失。结论带血运筋膜瓣具有明显的促组织工程骨血管化作用并通过促血管化而促进成骨并具备膜引导性骨再生(guided bone regeneration,GBR)技术的骨修复特点,即早期促进外骨痂生长。
