Influence of fish meal quality on growth,feed conversion rate and protein digestibility in shrimp (Penaeus chinensis ) and red seabream (Pagrosomus major)

The effect of fishmeal quality on growth,feed conversion ratio and protein digestibility was studied in a growth experiment with shrimp and red seabream.The shrimp and fish were fed three diets varing in the quality of the fishmeal used in the respective feeds: low quality fish meal,good quality fish meal,and Peru fish meal.The experiment lasted for 2 months.The shrimp and fish fed the feed with good quality fish meal showed significantly better feed conversion ratio,weight gain rate,protein digestibility than the other groups.

Movement pattern of red seabream Pagrus major and yellowtail Seriola quinqueradiata around Offshore Wind Turbine and the neighboring habitats in the waters near Goto Islands, Japan

We investigated movement pattern of commercial important fish around Offshore Wind Turbine(OWT)and neighboring habitats in Goto Islands.We tagged 55 individuals of 2 fish species and released around the OWT in 2017.(27 Pagrus major from 1st Feb 2017 to 16th Mar 2017(winter),8 P.major and 20 Seriola quinqueradiata from 13th July 2017 to 13th Oct 2017(summer)).Acoustic receivers were deployed at OWT,south artificial reef(AS),trapnet(TN),north FAD(F1)and south FAD(F2)in winter and two more receivers were deployed at north artificial reef(AN)and natural reef(NR)in summer.We observed 12 P.major at OWT for a day after released in winter,majority of fish(13 individuals)were detected at TN.In summer,7 P.major were observed at OWT,1 visited TN within the day,but others disappeared.Ten S.quinqueradiata stayed at OWT longer than P.major after released and disappeared within 2 days.They mostly moved around AS,AN,NR.Residence time from K-M curve was 10 days for P.major in winter,a day in summer and 3 days for S.quinqueradiata.Both species showed low affinity for OWT as recorded low residency index despite the season.

真鲷野生群体和人工繁殖群体的同工酶遗传差异

采用水平淀粉凝胶电泳技术对采集于黄海海州湾海域的真鲷野生群体和经过 2代人工繁育的养殖群体进行了同工酶遗传变异研究。分析检测了 2个群体各 50个样本肌肉和肝脏组织的 1 3种同工酶共 2 0个基因位点 ,其中MDH_a、GPI、PGM等 1 0个位点为多态位点 ,ME和EST_b为变异程度比较高的位点。野生群体和人工繁殖群体的多态位点比例分别为 45%和 2 5% (P0 .95) ;群体平均观察杂合度分别为 0 .1 41± 0 .0 4 4和 0 .0 95± 0 .0 4 3。结果表明 ,真鲷的野生群体和养殖群体拥有较高程度的遗传变异水平 ,但是养殖群体的遗传变异水平比野生群体有一定程度的降低。养殖群体遗传变异水平的降低在一定程度上是由于亲鱼数量少所致。比较了同工酶分析和RAPD分析的结果。将此两种技术相结合在鱼类群体遗传多样性分析中具有比较实际的意义。

真鲷的营养需要及配合饲料的研究初报

本文综述了真鲷的营养需要，研究了不同植物蛋白源对真鲷生长的影响，并在此基础上设计了三种饲料配方，试验结果表明Ⅰ号饲料配方的增长率最高。

真鲷仔稚鱼微粒饲料中DHA与EPA最佳比例的研究

制备4种n-3HUFA含量相同 ,DHA和EPA含量比(m(DHA)∶m(EPA))分别为1.70∶1 ,2.00∶1,2.30∶1和2.60∶1的微粒饲料 ,探讨DHA与EPA的配比对真鲷 (Pagrusmajor)仔稚鱼生长、存活和体内相关成分的影响。30d的养殖试验结果表明 ,m(DHA)∶m(EPA)≥2.30∶1的2种微粒饲料与m(DHA)∶m(EPA)≤2.00∶1的2种微粒饲料相比 ,真鲷仔稚鱼的生长速度和成活率 ,前者明显优于后者。该比例即m(DHA)∶m(EPA)≥2.30∶1应是真鲷微粒饲料中DHA与EPA的最佳配比。养殖试验结束后 ,对仔稚鱼体内相关成分的分析结果表明 ,仔稚鱼体内DHA的含量随微粒饲料中DHA含量的增加而增大。

海水养殖真鲷弧菌病病原菌外毒素的分离、纯化及生物学活性

1996年 6月初 ,对福建省平潭县真鲷网箱养殖场发生的弧菌病进行研究 ,并确定该病病原菌为最小弧菌 (Vibrio mimicus)。采用硫酸铵沉淀、DEAE-纤维素层析及 Sephadex-G1 0 0层析等方法对最小弧菌产生的外毒素进行研究。结果表明 ,该外毒素为单一的多肽 ,分子量为 3 0 .45 6 k D,对真鲷的 L D50 为 4.48μg,对真鲷等养殖动物的溶血性最强 ,对 Vero细胞的 CD50 值为 0 .48μg,肠毒性弱阳性。该外毒素与最小弧菌产生的其他毒力因子相比 ,性质独特 ,是一类新的毒力因子 ,建议命名为 Vm-

真鲷肝脏解偶联蛋白2 (UCP2)基因及其功能的探讨

从真鲷 (Pagrusmajor)肝脏通过简并引物PCR克隆解偶联蛋白 2 (UCP2 )cDNA部分序列。该片段长6 74bp ,编码 2 2 4个氨基酸残基。推测的此部分氨基酸序列包含线粒体载体蛋白的特征结构 ,并与其它脊椎动物UCP2氨基酸序列同源性在 72 8%以上。对变温动物鱼类UCP2组织表达调控研究表明 :与哺乳类UCP2基因不同 ,真鲷UCP2基因在肝脏大量表达 ,而在腹腔肠系膜脂肪组织则仅有痕迹量表达 ,两者表达水平相差 2 0倍以上。饲料中添加 10 %绿鳕油或 48h饥饿对真鲷肝脏UCP2基因的表达水平均无显著影响 ,表明UCP2基因在脂肪含量高的鱼类肝脏表达十分稳定 ,为维持其基本功能所必需。真鲷肝脏和腹腔肠系膜脂肪组织UCP2基因表达水平的强烈反差 ,与鱼类这两种贮脂器官完全不同的氧化活性相一致 [动物学报 49(1) :110～ 117,2 0 0 3]。

真鲷肌肉生长抑素（MSTN）基因的克隆及表达分析

采用同源克隆的策略,设计了3对引物,首次分离、克隆了2820bp的真鲷肌肉生长抑素（MSTN）基因组序列,该序列在GenBank上注册（注册登录号为AY965686）.经过剪接、比较,分析了真鲷MSTN基因的序列和结构特征.真鲷的MSTN基因具有3个外显子、2个内含子,整个开放阅读框编码着384个氨基酸,第1个外显子上有一个连续11个Q氨基酸的残基,C-末端具有9个保守的半胱氨基酸及一个RVRR的蛋白酶解加工位点.在第1、第2内含子和3＇非翻译区上分别具有一个微卫星重复序列.RT-PCR分析表明,MSTN基因在真鲷不同组织中都有表达,但表达量具有明显的差异;MSTN在肌肉中表达量最高,其次是脑、小肠、头肾、鳃和性腺,心脏、眼睛、肝脏中只有极少量表达,脾脏中没有检测到MSTN的表达.

温度对秋冬季生殖真鲷胚胎发育及仔、稚鱼存活的影响

秋冬季生殖的真鲷胚胎发育的适宜水温低于２７℃而高于１５℃，最适水温在２４～１８℃范围之内；胚胎发育的生物学零度是１０．６℃，胚胎发育时间与水温呈显著的负相关关系，仔、稚鱼对降温的适应能力与其个体大小，起止温度高低正相关，而与水温的下降速度、下降幅度负相关，水温低于１５℃时容易出现仔、稚鱼大量死亡。

真鲷幼鱼对饵料中蛋白质、脂肪、碳水化合物需求量的研究

采用 9种人工配合饵料 ,研究真鲷 (Pagrusmajor(T&S) )幼鱼饵料中的蛋白质、脂肪、碳水化合物的需求量。在 4 5d的试验期内 ,蛋白质、脂肪、碳水化合物含量分别为 4 4 6 %、17 6 %、15 5 %时 ,真鲷幼鱼生长最快。饵料系数为 1 4。

600Hz方波连续音对真鲷幼鱼驯化效果研究

为了解600 Hz方波连续音对真鲷(Chrysophrys major)幼鱼的驯化效果,在实验室条件下对体长4.4～6.6 cm、体重3.0～4.8 g的南海真鲷幼鱼进行音响驯化试验,连续8 d、每天4次放声结合投饵进行驯化,1次只放声不投饵的检验试验;利用Origin软件中的Gaussion模型对试验鱼空间位置分布数据进行曲线回归分析。结果表明:对照组真鲷幼鱼在水池内基本呈随机分布;试验组真鲷幼鱼听到声音会迅速向声源靠近并聚集在诱集区内,驯化第1～8 d,真鲷幼鱼出现频次最大的区域分别距离水池中心点88.45、82.34、75.18、73.09、70.05、69.74、66.70、72.09 cm;反应时间和聚集时间呈逐渐缩短的趋势,在驯化第4、5 d起达到并维持在最佳状态,从第2 d起极显著低于对照组;停留时间和聚集率呈逐渐增加的趋势,在驯化第5 d起达到并维持在最佳状态,试验期间极显著高于对照组。表明600 Hz方波连续音对真鲷幼鱼具有明显的驯化效果。建立条件反射后,每天1次只放声不投饵,23 d后声音刺激对真鲷幼鱼不再有诱集作用。

微粒饲料中鱼油n-3HUFA的分子结构对真鲷仔稚鱼生长、存活的影响

制备 3种基本组成相同、添加不同类型鱼油的微粒饲料。将 3种微粒饲料分别投喂真鲷(Pagrusmajor)仔鱼 ,探讨了微粒饲料中鱼油n 3HUFA的不同分子结构对真鲷仔、稚鱼生长、存活的影响。 2 5d的养殖试验结果表明 ,虽然饲料 2中n 3HUFA的含量高于饲料 1中n 3HUFA的含量 ,饲料 3中n 3HUFA的含量同饲料 1中n 3HUFA的含量相等 ,但是用饲料 1投喂的真鲷仔、稚鱼的全长、成活率要优于分别用饲料 2和饲料 3投喂的真鲷仔、稚鱼的全长、成活率。而且 ,用饲料 1投喂的真鲷仔、稚鱼体内n 3HUFA和DHA的含量高于用饲料 2和饲料 3投喂的真鲷仔、稚鱼体内n 3HUFA和DHA的含量 ,这说明真鲷仔、稚鱼对天然鱼油的消化、吸收要优于对乙酯化鱼油的消化、吸收。

真鲷幼鱼的EPA、DHA需求量研究

通过向真鲷幼鱼饵料中分别添加０ ．２％ 、０．５ ％ 和１％ 的ＥＰＡ、ＤＨＡ 以及两种混合脂肪酸，以豆油为基础脂肪源研究真鲷幼鱼的ＥＰＡ、ＤＨＡ 的需求量。结果表明，饵料中缺乏ＥＰＡ、ＤＨＡ 时，真鲷幼鱼生长缓慢，成活率仅达６５ ％ ；随着ＥＰＡ 在饵料中的添加，幼鱼的成活率与增重率都有所增加，但只添加ＥＰＡ 并不能满足幼鱼的生长需要；饵料中只添加ＤＨＡ 亦能使幼鱼的成活率及增重率有所提高，ＤＨＡ 比ＥＰＡ 更有营养价值；饵料中添加ＥＰＡ、ＤＨＡ 混合脂肪酸时，幼鱼的成活率高达１００％ 。

培养条件对养殖真鲷弧菌病病原菌毒素产生的影响

研究了温度、酸碱度、气体环境、营养成分及培养时间等培养条件对真鲷病原菌最小弧菌Vm Pm毒素产生的影响。结果表明 ,温度对Vm Pm毒素的产生有显著影响 ,在 30℃培养时产量最高 ;当pH在弱碱性环境( 7.2左右 )时 ,Vm Pm毒素产量最高 ;振荡通气能极大地促进Vm Pm毒素的产生 ,显著提高其产量 ;Vm Pm毒素的产量随着培养时间的延长而逐步增加 ,到 36h即可达到最高水平 ,并维持至 72h ;改良海水营养培养基与普通海水营养培养基相比 ,更有利于毒素的产生 ,毒素产量可提高 1倍。

南海区4种鲷鱼精子的适盐性比较

研究了盐度对黄鳍鲷SparuslatusHouttuyn、平鲷Rhabdosargussarba（Forskal）、黑鲷Sparusmacrocephalus（Basilewsky）和真鲷Pagrsomusmajor（TemmincketSchlegel）4种鲷鱼精子活力的影响。对南海区4种鲷鱼精子的适盐性及其活力进行了比较，黄鳍鲷、平鲷、黑鲷和真鲷精子激活所需的最低盐度分别为8、10、＞8、＞10；激活的最适盐度则分别为21、22、25、25，与之相应的精子活动（涡动）时间分别为14．7、17．7、17．2、18．0min；在高盐条件（盐度40左右）下，黄鳍鲷精子的适应性最强，精子活力最好，其次是黑鲷、真鲷的精子，平鲷精子对高盐条件的适应性最差。

三种免疫制剂对真鲷弧菌病的免疫保护性

菌体疫苗按不同的方式对真鲷进行免疫 2周后 ,对实验鱼均具有免疫保护性 ,免疫保护性最好的免疫组 ,免疫保护率在初次免疫后高达 60 % ,强化免疫后免疫保护率可提高到80 % ;粗制LPS经去毒处理后初次免疫真鲷 ,不同浓度的LPS对实验鱼具有不同程度的免疫保护性 ,强化免疫后 ,免疫保护率均有明显的提高 ,浓度越高 ,免疫保护性越强 ,对真鲷的免疫保护率最高可达 90 % ;最小弧菌产生的外毒素经福尔马林灭活后制成毒素苗 ,这种毒素苗能产生较好的免疫保护性 ,其免疫保护率可达 80 % ,这表明外毒素不仅是最小弧菌产生的毒力因子 。

真鲷去毒相关基因cDNA序列的克隆与肝脏组成型表达分析

赤潮发生时产生的一些海洋生物毒素对人类和海洋动物的安全形成潜在的威胁甚至导致死亡.为从分子水平探讨鱼类中海洋藻毒素的去毒分子机理,采用RT-PCR法克隆了真鲷(Pagrus major)肝脏芳香烃受体核转位蛋白(ARNT)和I时相异生素代谢酶细胞色素P4501A(CYP1A)基因cDNA核心序列,同时,应用半定量RT-PCR方法,以β-肌动蛋白作为外参照,在其指数期增长的范围内研究了芳香烃受体(AHR)、ARNT、CYP1A、II时相异生素代谢酶alpha型谷胱甘肽S-转移酶(GSTA1、GSTA2)、rho型谷胱甘肽S-转移酶(GSTR)、热休克蛋白70(HSP70)基因组成型表达水平.结果发现,真鲷ARNT、CYP1A基因cDNA核心序列片段分别长438bp和908bp,分别编码146和302个氨基酸.序列同源性分析发现,真鲷与门齿鲷(Stenotomus chrysops)、石首鱼(Micropogon undulatus)ARNT基因氨基酸序列同源性高达97.2%、95.2%,与斑马鱼(Brachydanio rerio)、人、大鼠、小鼠ARNT同源性较低(77.2%～79.3%).真鲷与门齿鲷、金头鲷(Sparus auratus)、欧洲川鲽(Rhombus maximus)、欧洲海鲈(Dicentrachus labrax)CYP1A基因氨基酸序列同源性较高,为84.8%～94.0%,与斑马鱼、人、小鼠CYP1A同源性较低,为59.6%～77.8%.真鲷肝脏AHR、ARNT、CYP1A、GSTA1、GSTA2、GSTR和HSP70基因组成型表达水平分别为(25.32±6.56)%、(26.22±4.24)%、(146.5±16.06)%、(55.42±3.75)%、(48.82±10.89)%、(79.47±3.13)%、(107.42±14.34)%.

真鲷虹彩病毒自然感染杂交石斑鱼“褐龙斑”的组织病理分析

褐龙斑是雌性褐石斑鱼(Epinephelus bruneus)和雄性鞍带石斑鱼(E.lanceolatus)杂交产生的子代。作为杂交石斑鱼的新品种,国内外尚没有褐龙斑疾病的报道。2017年7月,某养殖场褐龙斑出现急性死亡,10d内累积死亡率高达80%。现场调查发现,病鱼外观无明显异常,但反应迟钝,伏底死亡。临床检查和剖检可见脾和肾严重肿大、易碎。组织病理切片观察发现,各组织中存在数量不等的嗜碱性、细胞质均一、直径为10~15 m的肿大细胞。超薄组织切片中发现,肿大细胞胞质内存在大量直径为130~150nm的虹彩病毒样颗粒。使用特异性的PCR引物,从病鱼脾、头肾等组织中均检测到真鲷虹彩病毒(Red seabream iridovirus,RSIV)的高强度感染。测定了该病毒主要衣壳蛋白(Major capsid protein,MCP)基因1362bp的全长编码区,构建了19种(株)虹彩病毒系统发育树,结果显示,该病毒属于虹彩病毒科肿大细胞病毒属RSIV类群。本研究首次描述了褐龙斑虹彩病毒病的组织病理特征,揭示了褐龙斑是RSIV新的敏感宿主,为杂交石斑鱼病毒病的诊断与防治提供了重要的参考依据。

超低温保存时间与抗冻剂浓度对真鲷精子质量的影响

研究了不同浓度的抗冻剂二甲基亚砜（DMSO）和不同保存时间对真鲷（Pagrus major）冻精质量的影响。试验结果表明，DMSO体积分数和保存时间对冻精的受精率、孵化率影响显著。15％二甲基亚砜作为抗冻剂保存10～60d的冻精受精率、孵化率与鲜精无差异，而保存360d的冻精受精率、孵化率开始出现下降。12％，18％，21％DMSO保存60d的冻精受精率差异不显著，均高于90％，而对于保存360d的冻精受精率、孵化率均显著地降低。

大菱鲆雌核发育二倍体的真鲷冷冻精子诱导及其生长评价

根据Hertwig效应,采用正交设计实验方法对真鲷(Pagrus major)冷冻精子诱导大菱鲆(Scophthal-mus maximus)减数分裂雌核发育的最佳条件进行了研究.结果表明,未经紫外线照射处理的真鲷精子与大菱鲆卵子受精后形成的胚胎,无论是否经过冷休克处理都不能孵化出膜;经剂量为64.8～72.0mJ.cm-2紫外线照射处理后的真鲷精子与大菱鲆卵子受精后形成的胚胎,初孵仔鱼表现出典型的单倍体综合征;受精和孵化水温为(14.5±0.5)℃时,大菱鲆雌核发育单倍体的冷休克二倍体化的最佳处理起始时间、处理水温和持续时间分别为受精后6.5min,-2℃和45min.至孵化后60日龄,雌核发育苗种的成活率为0.61%,仅相当于其半同胞对照的10%左右,60～180日龄两者的成活率差异不显著,均达90%以上;14月龄前,雌核发育苗种的全长和体重均比半同胞对照要低,此后雌核发育苗种由于雌性比例较高而生长速度加快,至17月龄时其全长和体重与半同胞对照基本相当.