EFFECTS OF TGF-β_1 ON CELLULAR PROLIFERATION ANDEXPRESSION OF TYPE Ⅲ COLLAGEN BY CULTURED RATRENAL INTERSTITIAL FIBROBLASTS

Objective To investigate the effects of TGF- β1 on proliferation and type N collagen mRNAexpression of rat renal interstitial libroblasts in vitro for elucidating the role of fibroblasts in renal interstitialfibrosis. Methods The cells were cultured in media containing various concentrations of TGF- β1. Theproliferation and the type Ⅲ collagen mRNA expression of the cells were assayed with MTT method andRT- PCR respectively. Results TGF- β1, has a stimulating proliferation effect with dose- dependence and aincreasing expression of type Ⅲ collagen mRNA with both dose- and time- dependence to the renal fibroblasts. Conclusion It is suggested that TGF- β, is involved in proliferation of renal fibroblasts and their type Ⅲcollagen mRNA expression, and may play an important role in renal interstitial fibrosis.

EFFECTS OF TGF-β_1 ON THE EXPRESSION OF PLASMINOGEN ACTIVATOR INHIBITOR TYPE 1 IN CULTURED HUMAN RENAL INTERSTITIAL FIBROBLASTS

Objective To investigate the effects of transforming growth factor-β1 (TGF-β1 ) on the expression of plasminogen activator inhibitor type 1 (PAI-1 ) mRNA in renal interstitial fibrosis in vitro. Methods Human renal interstitial fibroblasts were isolated and cultured in vitro. The cells wers stimulated by TGF-β1 with different concentration (0 to 10ng/ml ) at different time (0 to 48h). The expression of PAI-1 mRNA was assayed by RT-PCR. Results TGF-β1, had dose-dependent and time-dependent effects on the expression of PAI-1 mRNA in renal interstitial fibroblasts. Conclusion TGF-β1 may partic- ipate in renal fibrosis with inducing the expression of PAI-1 mRNA in renal fibroblasts and affecting the synthesis and degradation of extracellular matrix (ECM).

促红细胞生成素对牦牛肾间质成纤维细胞凋亡因子表达的影响

旨在探讨促红细胞生成素(EPO)对牦牛肾间质成纤维细胞(RIFs)中凋亡因子的影响。本研究首先分别采集3头4岁龄的健康牦牛和黄牛的肾脏组织,采用免疫组织化学方法和Western blot检测牦牛和黄牛肾脏中EPO的准确分布及其表达量。同时对牦牛RIFs进行原代培养鉴定,并对其进行不同药物处理来调控RIFs中EPO表达水平,检测EPO对凋亡相关基因Bax,Bcl-2,PCNA在mRNA和蛋白表达水平的影响。免疫组化学检测结果显示,EPO在牦牛和黄牛肾脏中集合管上皮细胞、肾小管上皮细胞和小管周间质成纤维样细胞中均呈阳性表达。qRT-PCR和Western blot结果显示,EPO在牦牛肾脏中的表达量显著高于黄牛(P<0.001)。随后对生成EPO的RIFs进行原代培养并调控EPO的表达,结果表明:激活组显著升高RIFs中Bcl-2和PCNA的表达,降低Bax的表达(P<0.001)。EPO抑制组显著降低RIFs中Bcl-2、PCNA的表达,上调Bax的表达(P<0.001)。综上表明,EPO在牦牛和黄牛肾脏中集合管上皮细胞、肾小管上皮细胞和小管周间质成纤维样细胞中均呈阳性表达,牦牛肾脏中的EPO高表达能够促进RIFs中Bcl-2和PCNA的表达,并降低Bax的表达,说明EPO可以在牦牛肾脏中起到抗凋亡的作用。

SMYD2介导高糖诱导小鼠肾成纤维细胞活化的机制研究

目的 探讨组蛋白赖氨酸甲基转移酶2(SMYD2)介导体外高糖环境下小鼠肾成纤维细胞(NRK-49F)活化的可能机制。方法 复制糖尿病(DM)小鼠模型,经全自动生化分析仪检测各组小鼠血糖(BG)、血肌酐(Scr)水平,经苏木精-伊红、Masson染色观察小鼠肾组织病理改变,经Western blotting检测各组小鼠肾组织纤维连接蛋白(Fibronectin)、Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、组蛋白H3赖氨酸4三甲基化(H3K4me3)、SMYD2、核转录因子-κB p65(NF-κB p65)及磷酸化NF-κB p65(NF-κB p-p65)蛋白表达,经免疫荧光检测各组小鼠肾组织α-SMA及SMYD2表达。复制体外DM细胞模型,使用正常糖(含5.5mmol/L葡萄糖)或高糖(含30.0 mmol/L葡萄糖)处理NRK-49F细胞,经Western blotting检测SMYD2、α-SMA及细胞外基质(ECM)成分蛋白表达;经CCK-8法检测SMYD2特异性抑制剂AZ505的细胞毒性;在AZ505处理/不处理的条件下,经Western blotting检测SMYD2、α-SMA、H3K4me3、Fibronectin、CollagenⅠ、NF-κB p65、NF-κB p-p65蛋白表达,经免疫荧光检测α-SMA、SMYD2及NF-κB p-p65在细胞中的表达及空间定位情况。结果 DM组血清BG、Scr水平高于NC组(P <0.05)。DM组肾组织α-SMA、Fibronectin、CollagenⅠ、SMYD2、H3K4me3、NF-κB p-p65蛋白相对表达量高于NC组(P <0.05),两组NF-κB p65蛋白相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。HG刺激不同时间点NRK-49F细胞α-SMA、Collagen I、Fibronectin、SMYD2蛋白相对表达量比较,差异均有统计学意义(P <0.05)。40μmol/L组、60μmol/L组NRK-49F细胞存活率较0μmol/L组低(P <0.05)。HG组NRK-49F细胞Fibronectin、CollagenⅠ、SMYD2蛋白相对表达量较NG组高(P <0.05),HG+AZ505(20μmol/L)组较HG组低(P <0.05)。HG组NRK-49F细胞Fibronectin、CollagenⅠ、α-SMA、H3K4me3、SMYD2蛋白相对表达量较NG组高(P <0.05),HG+AZ505组较HG组低(P <0.05)。HG组NRK-49F细胞NF-κB p-p65蛋白相对表达量较NG组高(P <0.05),HG+AZ505组较HG组低(P <0.05),各组小鼠NRK-49F细胞NF-κB p65蛋白相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论SMYD2可介导高糖诱导的NRK-49F细胞活化,其机制可能与激活NF-κB细胞信号通路有关。

终末期肾脏病患者血清FGF23与心衰及死亡发生风险的前瞻性队列研究

目的探讨终末期肾脏病(ESRD)患者成纤维细胞生长因子-23(FGF23)血清浓度与心力衰竭及全因死亡的相关性。方法采用前瞻性队列研究,纳入医院肾脏内科收治的无心衰症状的ESRD患者,采用基线问卷和体格检查、超声心动图检查、实验室检查收集患者数据,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测患者血清FGF23浓度。随访时间2年,以随访发生新发的心力衰竭(ACC/AHA stage C-D)和全因死亡为复合终点结局事件,采用Cox比例风险模型分析患者发生结局事件的危险因素,通过亚组分析和交互作用分析,进一步探讨FGF23与结局事件的关联在不同亚组中是否存在异质性。结果该研究最终纳入ESRD患者107例,平均年龄(52.00±12.51)岁,男性39(36.45%)例,中位随访时间为23个月(21,25个月),出现结局事件32(29.9%)例,其中新发心衰22(20.6%)例,全因死亡10(9.3%)例。该研究结果显示结局事件组患者血清FGF23浓度显著高于非事件组[(4.40±1.16)pmol/ml vs(3.85±0.82)pmol/ml,P<0.05]。Cox比例风险模型结果显示升高的FGF23可以增加ESRD患者发生结局事件的风险(HR=1.730,95%CI:1.164~2.570,P=0.007)。亚组分析显示FGF23水平与性别对于结局事件发生风险存在交互作用,尤其在男性ESRD患者中升高的FGF23风险更高(P_(-交互作用)<0.05)。结论升高的血清FGF23是ESRD患者发生心衰和全因死亡的独立危险因素,尤其在男性患者中风险更高。

成骨细胞代谢重编程与早期肾性骨病发生发展的研究进展

慢性肾脏病矿物质和骨骼疾病(CKD-MBD)对患者的生活质量、住院率和骨折风险有直接影响。近年来成骨细胞及骨细胞成为CKD-MBD病理生理学研究的中心,成骨细胞通过合成成纤维细胞生长因子23(FGF-23)、硬化素等,与其他器官相互作用,使骨骼成为内分泌器官。因此,成骨细胞分化失调是慢性肾脏病发病过程中重要的早期事件。本文系统讨论了成骨细胞的代谢途径及早期CKD-MBD病理状态下成骨细胞代谢重编程改变的相关机制,表明Wnt家族分泌蛋白/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)、FGF-23、尿毒症毒素、代谢性酸中毒等信号通路及代谢物异常可改变成骨细胞代谢活性,引起成骨谱系成熟障碍,进而影响骨重塑,对于解释肾性骨病病理改变及临床治疗方案提供新思路。

肿瘤和肾周脂肪组织活化蛋白-α用于透明细胞肾细胞癌危险分层的研究

目的分析成纤维细胞活化蛋白-α(FAP)在肿瘤组织和肾周脂肪组织中的表达以及用于透明细胞肾细胞癌(ccRCC)危险分层的临床价值。方法对2018年6月~2022年9月湖北医药学院附属国药东风总医院肿瘤科接受肾切除术的ccRCC病人进行回顾性横断面研究。采用免疫组化免疫组化ABC染色法检测ccRCC肾肿瘤组织(114例)、非肿瘤性肾皮质组织(68例)和肾周脂肪组织(60例)中FAP的表达。收集19例良性肾脏疾病病人肾周良性脂肪组织作为对照组,同样检测FAP表达。绘制ROC曲线分析肾周脂肪组织FAP表达对ccRCC诊断和预测远处转移的能力。结果与匹配非肿瘤性肾皮质组织相比,ccRCC组织FAP表达未上调。经受试者工作特征(ROC)曲线分析,ccRCC组织FAP阳性染色百分比具有良好的肿瘤临床分期、肿瘤大小、远处转移潜力(P<0.001),曲线下面积(AUC)分别为0.90(95%CI:0.81~0.98)、0.79(95%CI:0.66~0.92)和0.86(95%CI:0.74~0.99)。而ccRCC肾周脂肪组织FAP阳性染色百分比可预测远处转移,AUC为0.91(95%CI:0.84~0.97)。ccRCC肾周脂肪组织FAP表达染色强度(191.77±3.14 vs.188.90±2.89,P<0.001)略高于良性肾脏疾病,且肾周脂肪组织FAP染色强度对于良恶性肾脏肿瘤具有一定区分价值,AUC为0.68(95%CI:0.60~0.77)。结论肿瘤和肾周脂肪组织FAP都有望成为ccRCC风险分层的有效指标之一。

碳酸司维拉姆联合血液透析对尿毒症后肾性骨病患者的影响

目的:观察并探讨尿毒症后肾性骨病患者临床治疗过程中血液透析与碳酸司维拉姆联合应用效果及对成纤维细胞生长因子23(FGF-23)、骨形态发生蛋白7(BMP-7)的影响。方法:于2022年1月—2023年1月广州市第一人民医院南沙医院接收72例尿毒症后肾性骨病患者,运用随机数字表法给进行分组,对照组(n=36)、联合组(n=36)。其中对照组进行血液透析治疗,联合组则在血液透析基础上加用碳酸司维拉姆。比较两组临床治疗效果、骨碱性磷酸酶(BAP)、FGF-23、BMP-7、甲状旁腺激素(PTH)、C反应蛋白(CRP)、β_(2)微球蛋白(β_(2)-MG)、骨钙素(OCN)、不良反应。结果:联合组临床总有效率为91.67%,高于对照组的72.22%,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组BAP、FGF-23、BMP-7、PTH、CRP、β_(2)-MG、OCN比较,差异均无统计学意义(P>0.05);治疗后,联合组BMP-7高于对照组,BAP、FGF-23、PTH、CRP、β_(2)-MG、OCN均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);联合组胃胀气、腹泻、反胃、干呕等不良反应发生率为11.11%与对照组的16.67%比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:尿毒症后肾性骨病患者在血液透析期间联合碳酸司维拉姆治疗具有确切效果,可调节骨代谢,改善肾功能,减轻微炎症反应,安全性高,患者耐受。

成纤维细胞因子23对急性肾损伤的诊断价值研究

目的探究成纤维细胞因子23(FGF23)对急性肾损伤(AKI)的诊断价值。方法选取2022年2—7月山西医科大学第一医院重症医学科收治的105例AKI病人(AKI组)和203例非AKI病人(非AKI组)为研究对象,检测两组病人的血浆FGF23水平,并将AKI组病人根据改善全球肾脏病预后组织(KDIGO)标准分期进行亚组分析;采用Spearman相关性分析法分析FGF23浓度与各指标间的相关性;采用多因素logistic回归分析法分析AKI的危险因素;绘制受试者操作特征曲线(ROC曲线),计算曲线下面积(AUC),探究血浆FGF23水平对AKI的诊断效能。结果两组病人在年龄、身体质量指数(BMI)方面均差异无统计学意义(P>0.05);与非AKI组病人相比,AKI组的ICU住院时间、总住院时间较高(P<0.001);AKI组病人在急性生理学和慢性健康状况评价Ⅱ(APACHEⅡ)、血清肌酐、尿素、血浆FGF23水平[27(20,32)分、179(108.10,293.90)µmol/L、14.70(9.54,21.22)mmol/L、169.83(164.83,174.83)ng/L]等方面均高于非AKI组[16(12,21)分、61(48.10,77.80)µmol/L、5.53(4.03,8.05)mmol/L、139.83(124.83,156.50)ng/L](P<0.001);AKI组的肾小球滤过率、尿量均低于非AKI组(P<0.001);AKI不同分期血浆FGF23水平随分期的递增而逐渐升高(P<0.05),且1和3期、2和3期组间比较差异有统计学意义(P<0.05);Scr浓度、FGF23水平是AKI的独立危险因素;FGF23用于诊断AKI的灵敏度(87.6%)高于Scr,其特异度(90.6%)与Scr相差不大。结论FGF23是AKI的独立危险因素,对AKI有较高的诊断价值。

不同肾小球滤过率水平在血液透析治疗慢性肾功能衰竭中的对比研究

目的:探究不同肾小球滤过率水平在血液透析治疗慢性肾功能衰竭中的应用。方法:分析医院收治的110例慢性肾功能衰竭患者的临床资料,所有患者均给予血液透析机治疗,按照患者肾小球滤过率水平的不同将肾小球滤过率为<6 ml/min的患者纳入对照组,将肾小球滤过率为6~15 ml/min的患者纳入观察组,每组55例。对比两组血液透析治疗的临床疗效、治疗前后肾功能指标、外周血成纤维细胞生长因子23(FDF23),同时观察治疗期间不良反应。结果:观察组临床总有效率高于对照组,差异有统计学意义(x2=5.987,P<0.05)。两组治疗后24 h尿蛋白定量、肌酐、尿毒氮、肾小球滤过率及外周血FDF23均低于两组治疗前,且治疗后观察组24 h尿蛋白定量、肌酐、尿毒氮、肾小球滤过率及外周血FDF23均低于对照组,差异有统计学意义(t=10.445,t=20.883,t=2.662,t=2.027,t=15.856;P<0.05)。两组治疗前后、观察组治疗后与对照组治疗后尿酸、白蛋白水平相比差异无统计学意义。两组治疗期间均无明显的不良反应,且轻微的不良反应得到对症处理之后均得以恢复,尚未对随后的治疗带来不良影响。结论:慢性肾功能衰竭患者肾小球滤过率为6~15 ml/min时实施血液透析机治疗可获得显著的临床疗效,促进改善肾功能指标,调节外周血FDF23水平,且治疗期间无明显不良反应,安全性较高。

血清骨硬化蛋白、成纤维细胞因子-23、可溶性CD40配体联合检测对维持性血液透析并发心血管事件的预测价值

目的探讨血清骨硬化蛋白(SOST)、成纤维细胞因子-23(FGF-23)、可溶性CD40配体(sCD40L)联合检测对维持性血液透析(MHD)病人并发心血管事件的预测价值。方法选取2017年1月至2019年3月中国人民解放军第305医院收治的行MHD的149例病人作为研究对象,根据MHD病人有无心血管事件发生将其分为未发生组和发生组,另选取同期128例健康体检者设为对照组。比较各组SOST、FGF-23、sCD40L,找出影响MHD病人并发心血管事件的危险因素。结果MHD病人心血管事件发生率为33.56%,发生组年龄(59.11±10.74)岁、血肌酐(Scr)(849.07±156.81)μmol/L及血清SOST(119.83±22.78)pmol/L、FGF-23(569.07±92.84)ng/L、sCD40L(119.49±23.86)μg/L水平均高于未发生组和对照组,均差异有统计学意义(P<0.05),未发生组Scr(753.73±112.06)mol/L及血清SOST(86.23±16.05)pmol/L、FGF-23(439.14±78.02)ng/L、sCD40L(82.02±15.53)μg/L水平均高于对照组,均差异有统计学意义(P<0.05);MHD病人血清SOST水平与钙(Ca)呈正相关(P<0.05),血清FGF-23水平与磷(P)呈正相关(P<0.05);年龄大、收缩压高、透析时间长、高水平的尿酸(UA)、血肌酐(Scr)、胱抑素C(Cys-C)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、三酰甘油(TG)与高水平的SOST、FGF-23、sCD40L均为是影响MHD病人并发心血管事件的危险因素(P<0.05);血清SOST、FGF-23、sCD40L水平联合预测MHD病人并发心血管事件的灵敏度和曲线下面积(AUC)分别为98.00%和0.96,均高于单一指标评价(P<0.01)。结论血清SOST、FGF-23、sCD40L水平升高均是MHD病人并发心血管事件的危险因素,以上三项指标均对MHD病人并发心血管事件有较好的预测价值,但三者联合预测时的价值更高。

FGF23、orexin A、BMP-7在肾衰竭患者中的表达水平及与临床预后的关系

目的探讨成纤维细胞生长因子23(fibroblast growth factor 23,FGF23)、食欲素A(orexin A)、骨形态发生蛋白7(bone morphogenetic protein-7,BMP-7)在肾衰竭患者中的表达水平及与临床预后的关系。方法选取收治的肾衰竭患者65例为研究组,另选同期健康体检人群65例为对照组。研究对象均检测血液中FGF23、orexin A、BMP-7水平并进行比较分析;进行1年随访后,比较不同临床预后患者的临床资料,并分析FGF23、orexin A、BMP-7与肾衰竭患者临床不良预后的相关性;COX回归分析影响肾衰竭患者预后因素,分析FGF23、orexin A、BMP-7预测肾衰竭患者预后不良的接受者操作特性曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)图。结果与对照组比较,研究组FGF23、orexin A表达水平及血肌酐、尿酸、血尿素氮、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)水平较高,BMP-7表达水平较低(P<0.05);预后良好组48例,预后不良组17例,与预后良好组比较,预后不良组血肌酐、尿酸、血尿素氮、CRP、FGF23、orexin A表达水平较高,BMP-7表达水平较低(P<0.05);FGF23、orexin A与肾衰竭患者临床不良预后呈正相关,BMP-7与肾衰竭患者临床不良预后呈负相关(P<0.05);FGF23、orexin A是肾衰竭患者预后不良的独立危险因素,BMP-7是保护因素(P<0.05);FGF23、orexin A、BMP-7 AUC分别为0.920、0.697、0.849。结论肾衰竭患者FGF23、orexin A表达水平较高,BMP-7表达水平较低,对肾衰竭患者的预后具有预测价值。

三种血液净化模式对慢性肾衰竭患者血清FGF23、β2-MG、瘦素及骨代谢指标的影响

目的 探讨常规血液透析(HD)、高通量血液透析(HFHD)、组合型人工肾对慢性肾功能衰竭(CRF)患者血清成纤维细胞生长因子23(FGF23)、β2-微球蛋白(β2-MG)、瘦素以及骨代谢指标的影响。方法 选择2019年1月至2020年1月河南科技大学第一附属医院收治的105例CRF患者,随机数字表法分为3组,每组各35例,分别采用HD(HD组)、HFHD(HFHD组)、组合型人工肾(人工肾组)治疗。比较3组治疗前、治疗6个月(治疗后)肾功能、钙磷代谢以及血清FGF23、β2-MG、瘦素及骨代谢指标的差异。结果 人工肾组、HFHD组治疗后尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、尿白蛋白排泄率(UAER)、P^(3-)、甲状旁腺激素(PTH)、FGF23、β2-MG、瘦素、Ⅰ型胶原羧基端肽β特殊序列(β-CTX)水平均明显下降(P<0.05),Ca^(2+)、骨碱性磷酸酶(B-ALP)、Ⅰ型前胶原氨基端前肽(PINP)明显上升(P<0.05),HD组治疗后BUN、SCr、UAER降低(P<0.05),其它指标无明显变化(P>0.05)。人工肾组治疗后BUN、SCr、UAER、P^(3-)、PTH、FGF23、β2-MG、瘦素、β-CTX水平低于HFHD组和HD组(P<0.05),Ca^(2+)、B-ALP、PINP高于HFHD组和HD组(P<0.05)。HFHD组治疗后BUN、SCr、UAER、P^(3-)、PTH、FGF23、β2-MG、瘦素、β-CTX水平低于HD组(P<0.05),Ca^(2+)、B-ALP、PINP高于HD组(P<0.05)。结论 组合型人工肾更有助于清除FGF23、β2-MG、瘦素,改善CRF患者钙磷代谢、肾功能和骨代谢。

低氧下牦牛、黑白花牛肾间质成纤维细胞PDK1、Smad2、Caspase3等因子表达差异研究

为了比较低氧条件下不同海拔牛种肾间质成纤维细胞(RIFs)内PDK1、Smad2、Caspase3等因子的表达差异及细胞增殖差异,并进一步探究牦牛肾脏的高原低氧适应性特点,本研究采用牦牛和黑白花牛RIFs作为研究对象,低氧(1%O2)处理后,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹(WB)法检测细胞内PDK1等因子表达差异。波形蛋白(Vimentin)免疫组化染色鉴定结果显示,两种牛的原代RIFs纯度较高,可用于后续试验。低氧处理后,两种牛的RIFs内PDK1、Smad2及Caspase3的mRNA和蛋白表达均存在不同程度上调,且种属间存在显著差异(P<0.05),牦牛HIF-1α、PDK1、Smad2及Caspase3等基因表达量于24 h达到峰值,之后下调,而黑白花牛基因则随时间呈递增趋势,且牦牛RIFs低氧下增殖能力低于黑白花牛。综上所述,低氧诱导的相关转录因子表达存在差异,两种牛RIFs的增殖能力存在差异,这可能是导致低氧下黑白花牛肾纤维化程度的加深,从而产生肾源性高原疾病的原因之一。本研究为比较不同海拔牛种肾脏的低氧适应性研究提供了基础数据,为探索牦牛肾脏高原低氧适应机制提供了一定的理论依据。

基于转录组测序分析转化生长因子-β1诱导肾纤维化机制

目的:探究转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导肾纤维化的机制。方法:将TGF-β1处理和未处理的肾成纤维细胞NRK-49F进行转录组测序,采用DESeq2分析测序结果,以错误发现率低于0.05且log2FC绝对值大于1为标准筛选差异表达的基因,并对差异表达的基因进行基因本体(GO)、京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。进一步筛选差异表达基因中编码转录因子的基因,并利用单侧输尿管梗阻诱导的小鼠肾纤维化模型和高通量基因表达数据库GSE104954数据集对这些基因在肾纤维化过程中的表达进行验证。结果:TGF-β1处理6、12和24 h后,分别有552、1209和1028个差异表达基因。GO分析表明,这些差异表达基因在发育、细胞死亡和细胞迁移过程中显著富集。KEGG分析显示,在TGF-β1诱导早期(TGF-β1处理6 h)主要表现为Hippo、TGF-β、Wnt信号通路的变化,而在TGF-β1诱导晚期(TGF-β1处理24 h)主要表现为细胞外基质受体相互作用、局灶黏附和黏附分子连接等相关通路的改变。在TGF-β1处理6 h时291个上调的差异表达基因中,Snai1、Irf8、Bhlhe40、Junb、Arid5a、Vdr、Lef1、Ahr、Foxo1、Myc、Tcf7、Foxc2、Glis1等13个基因编码转录因子。在细胞模型中验证发现,TGF-β1可以诱导其中9个编码转录因子基因(Snai1、Irf8、Bhlhe40、Junb、Arid5a、Vdr、Lef1、Myc、Tcf7)的表达,其余4个基因的表达水平在TGF-β1处理后无显著变化。在动物模型验证中发现,Snai1、Irf8、Bhlhe40、Junb、Arid5a、Myc和Tcf7显著上调,而Vdr显著下调,Lef1无显著变化。在GSE104954数据集中验证发现,IRF8在糖尿病肾病患者和IgA肾病患者的肾小管间质中显著高表达,MYC在糖尿病肾病患者中高表达,而其他7个基因的表达产物与对照组相似。结论:TGF-β1诱导肾成纤维细胞基因差异表达,Irf8和Myc可能是慢性肾脏病和肾纤维化的潜在靶点。

SMYD2特异性抑制剂对高糖环境下大鼠肾成纤维细胞活化的影响及其机制

目的:明确赖氨酸甲基转移酶SMYD2(SET and MYND domain containing 2)特异性抑制剂对体外高糖(HG)环境下大鼠肾成纤维细胞(NRK-49F)活化的影响并探索其可能机制。方法:采用CCK-8法检测SMYD2特异性抑制剂LLY507对体外培养的NRK-49F细胞活力的影响。实验分组为正常糖(NG;含5.5 mmol/L葡萄糖)组、HG(含30 mmol/L葡萄糖)组、NG+LLY507(1.5μmol/L)组和HG+LLY507(1.5μmol/L)组,37℃培养48 h后收集各组细胞蛋白。采用Western blot实验检测SMYD2、组蛋白H3第4位赖氨酸三甲基化(H3K4me3)、纤维连接蛋白(fibronectin)、I型胶原蛋白(Col I)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子β1(TGF-β1)、p-Smad3、Smad3、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、核因子κB(NF-κB)p65、NF-κB p-p65、白细胞介素6(IL-6)、信号转导及转录激活因子3(STAT3)及p-STAT3蛋白水平。结果:LLY507浓度低于1.6μmol/L对NRK-49F细胞的活力无显著影响;与NG组相比,HG组SMYD2、H3K4me3、fibronectin、Col I、α-SMA、TGF-β1、p-Smad3,TNF-α、NF-κB p-p65、NF-κB p65、IL-6、p-STAT3和STAT3蛋白水平均显著升高(P<0.05);与HG组相比,HG+LLY507组SMYD2、H3K4me3、fibronectin、Col I、α-SMA、TGF-β1、p-Smad3、TNF-α、NF-κB p-p65、NF-κB p65、IL-6、p-STAT3和STAT3蛋白水平均显著降低(P<0.05)。结论:SMYD2特异性抑制剂LLY507可明显抑制HG诱导的NRK-49F细胞活化和细胞外基质分泌,其机制可能与阻断TGF-β1/Smad3、NF-κB和STAT3细胞信号通路激活相关。

血清D-D联合LDH、FGF23、SOD及Cysc检测对慢性肾衰竭的诊断价值

目的探讨血清D-二聚体(D-D)联合血清乳酸脱氢酶(LDH)、血清成纤维细胞生长因子23(FGF23)、超氧化物歧化酶(SOD)及胱抑素C(Cysc)对慢性肾衰竭的诊断价值。方法35例慢性肾衰竭患者作为研究组,同期35例健康体检者作为对照组;比较两组血清D-D、LDH、FGF23、SOD及Cysc的表达水平,采用多因素logistic回归分析D-D、LDH、FGF23、SOD及Cysc是否为慢性肾衰竭发生的影响因素,使用受试者工作(ROC)曲线分析D-D联合LDH、FGF23、SOD及Cysc检测对慢性肾衰竭的诊断价值。结果研究组血清D-D、LDH、FGF23、SOD及Cysc水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);多因素logistic回归分析发现,血清D-D、LDH、FGF23、SOD及Cysc是慢性肾衰竭发生的危险因素(P<0.05);ROC曲线显示,各项指标联合检测的曲线下面积(AUC)为0.968,高于D-D、LDH、FGF23、SOD和Cysc单项指标检测的AUC(0.882、0.868、0.725、0.836、0.811,P<0.05),各项指标联合检测的特异度和灵敏度亦高于单项指标检测(P<0.05)。结论血清D-D联合LDH、FGF23、SOD以及Cysc检测对慢性肾衰竭具有较高的诊断价值。

老年终末期肾病血液透析患者血清FGF-23、sST2水平变化及对心脏瓣膜钙化的预测价值

目的探讨老年终末期肾病(end-stage renal disease,ESRD)血液透析患者血清成纤维细胞生长因子23(fibroblast growth factor-23,FGF-23)、可溶性生长刺激表达基因2蛋白(soluble growth stimulation expressed gene2,sST2)水平变化及对心脏瓣膜钙化的预测价值。方法选取2018年6月~2021年6月新疆医科大学第七附属医院收治的106例老年ESRD血液透析患者为观察组,选取同期106例健康体检者为对照组。对比2组血清FGF-23、sST2水平,观察组随访至2022年1月,统计心脏瓣膜钙化发生率,分析心脏瓣膜钙化的影响因素及FGF-23、sST2在心脏瓣膜钙化中的交互作用,评估FGF-23、sST2预测心脏瓣膜钙化的价值。结果观察组血清FGF-23(t=35.539,P<0.001)、sST2水平(t=45.748,P<0.001)高于对照组;FGF-23及sST2高表达会增加心脏瓣膜钙化风险(OR=4.539、4.265,95%CI:2.527~8.154、2.008~9.057,均P<0.001);调整混杂因素后,FGF-23、sST2对心脏瓣膜钙化的发生存在正向交互作用,协同效应为二者单独存在产生效应之和的2.631倍(SI=2.631);FGF-23、sST2联合预测心脏瓣膜钙化的AUC大于单一指标(AUC=0.851,95%CI:0.767~0.913,P<0.001)。结论老年ESRD血液透析患者血清FGF-23、sST2水平呈异常高表达,二者在心脏瓣膜钙化中有协同作用,二者联合可有效提升预测效能。

急性肾损伤进展为慢性肾脏病的机制

急性肾损伤(AKI)是慢性肾脏病(CKD)发生和发展的重要危险因素。即使是轻微的AKI也可能产生不良后果,并可能发展为肾脏纤维化,这是所有终末期肾病的最终结果。因此,深入了解这种转变机制以阻止AKI向CKD进展至关重要。本文就AKI向CKD进展的细胞和分子机制及潜在治疗靶点的研究作一综述。

成纤维细胞生长因子23对肾性贫血的研究进展

慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)是全球公共卫生问题,发病率逐年攀升。该疾病特点是起病隐匿,不易察觉,随着肾脏逐渐衰竭,多种急慢性并发症随之而来,包括电解质紊乱、心力衰竭、贫血、矿物质代谢紊乱等。近年来有研究表明成纤维细胞生长因子23(fibroblast growth factor23,FGF23)不仅参与调节矿物质代谢,也与缺铁、炎症、红细胞生成素及低氧诱导因子有关,贫血是FGF23升高的强效驱动因素,FGF23升高与慢性肾脏病患者红细胞生成呈负相关。深入了解FGF23调控机制对治疗肾性贫血意义重大。