白藜芦醇保护脑缺血/再灌注损伤与自噬关系的研究

目的研究白藜芦醇(resveratrol,Res)预处理对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤后自噬的影响,探讨Res保护局灶性脑缺血/再灌注损伤的作用机制。方法将64只SD♂大鼠随机分成4组,假手术组(S组)、模型组(M组)、Res低剂量(15 mg.kg-1)干预组(R1组)和Res高剂量(40 mg.kg-1)干预组(R2组),用线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,缺血2 h,再灌注24 h后,观察大鼠神经功能评分;透射电镜法观察神经元的超微结构及其内自噬空泡数量的变化;免疫组化法检测LC3的蛋白表达;RT-PCR法分别检测LC3和Beclin 1的mRNA表达。结果与M组相比,Res可明显减轻大鼠脑缺血/再灌注损伤的神经功能评分(P<0.05);使自噬泡数量明显增加;上调缺血皮质区脑组织LC3和Beclin 1蛋白及mRNA的表达(P<0.05)。结论 Res对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤后神经元有保护作用,其机制可能与其诱导自噬的生成,上调LC3和Beclin 1的表达有关。

银杏叶提取物在大鼠脑缺血再灌注损伤中的保护作用

目的:研究银杏叶提取物(GbE)对大鼠脑缺血再灌注损伤皮质内自由基、氨基酸动态平衡的影响及其对原代培养的大鼠海马神经元内游离钙离子浓度([Ca^(2+)]i)的影响和特征。方法:采用高压液相色谱仪测量大鼠大脑皮质中氨基酸(Glu、Asp、GABA、Gly)的浓度;MDA和GSH-Px采用TBA法测量,SOD采用嘌呤法测量。使用显微荧光检测系统检测单个原代培养的海马神经元内游离钙离子浓度([Ca^(2+)]i)的变化和特征。结果:与非治疗组比较,GbE各浓度治疗组的缺血大脑皮质内Glu、Asp和MDA含量在各时间观察点(缺血3h、缺血再灌注1h和缺血再灌注2h)均明显降低(P<0.01或P<0.05),而SOD和GSH-Px含量则在各时间观察点均明显升高(P<0.01或P<0.05);GbE 10mg/kg、15mg/kg治疗组缺血大脑皮质内的GA-BA和Gly含量在各时间观察点均有所降低(P<0.05)。与GbE 5mg/kg治疗组比较,GbE 10mg/kg、15mg/kg治疗组大脑皮质内的Glu、Asp和MDA含量在各时间观察点较低(P<0.05),而GABA、Gly、SOD和GSH-Px含量则较高(P<0.05);GbE 10mg/kg治疗组与15mg/kg治疗组之间差异无显著性。当向原代培养的神经元同时给予谷氨酸1×10^(-5)mol/L和GbE 25μg/ml 20s时所诱导的〔Ca^(2+)〕i明显低于单独使用谷氨酸1×10^(-5)mol/L所诱导的[Ca^(2+)]i变化,其峰值明显下降,且?

参麦注射液主要成分与卒中关联的网络药理作用机制和实验验证

参麦注射液是传统中药红参与麦冬的复方制剂,具有益气固脱、养阴生津、生脉等功效。除对心脏和免疫功能疾病的防治外,对缺血性卒中也有明显疗效,其可协同降压药、溶栓药等西药,改善脑缺血预后。两味主药中,红参可保护血管内皮细胞,抗脂质过氧化和清除自由基,麦冬亦可通过保护血管内皮细胞,增强免疫力和耐缺氧能力。

钩藤总碱抗实验性脑缺血的作用

目的 观察钩藤总碱 (Rhynchophyllatotalalkaloids,RTA )对脑缺血损伤的影响并对其作用机制作初步探讨。方法 采用小鼠断头张口喘气模型 ,大鼠大脑中动脉缺血 2h/再灌注 2 2h模型 ,神经病学评分 ,脑梗死范围及脑组织水含量变化 ,观察对脑缺血 /再灌注损伤的影响 ;通过测定大鼠脑组织中一氧化氮合酶 (nitricoxidesynthase,NOS)、超氧化物歧化酶 (superoxidedisumtase ,SOD)活性及丙二醛 (malon dialdehyde ,MDA)含量的变化 ,并经原位末端标记法观察对脑细胞凋亡的影响以探讨药物作用的机制。结果 RTA可延长小鼠张口喘气时间 ,降低大鼠脑缺血 /再灌注后神经病学评分及梗死范围 ,降低脑组织MDA、NOS含量及升高SOD活性 ,RTA还能减少神经细胞的凋亡。结论 RTA对脑缺血 /再灌注损伤有保护作用 ,其作用与抑制NOS活性 ,提高SOD活性 ,减少神经细胞脂质过氧化损伤和抑制神经细胞凋亡有关。

β-细辛醚对缺糖缺氧再灌注损伤原代大鼠海马神经元的保护作用

目的:探讨β-细辛醚对缺糖缺氧再灌注损伤原代海马神经元的保护作用及其机制。方法:利用MTT法检测缺糖缺氧再灌注诱导的原代大鼠海马神经元的细胞活力,用分光光度法检测caspase-3的活性,用Western blotting法检测p-JNK和Bcl-2的蛋白表达,RT-PCR检测Bcl-2和caspase-3 mRNA表达。结果:与正常对照组比较,缺糖缺氧再灌注损伤组细胞活力明显下降,caspase-3活性明显升高,p-JNK蛋白表达和caspases-3 mRNA表达显著升高,Bcl-2蛋白表达显著降低,差异有统计学意义(均P<0.05)。与缺糖缺氧再灌注损伤组比较,不同剂量β-细辛醚预处理组抑制了这些指标的改变(均P<0.05)。结论:β-细辛醚通过抑制JNK介导的线粒体通路抑制缺糖缺氧再灌注诱导的原代海马神经元凋亡。

PI3K/Akt和JAK2/STAT3信号转导通路在SO_2抗大鼠肢体缺血再灌注致急性肺损伤中的作用

目的:探讨PI3K/Akt和JAK2/STAT3信号转导通路在二氧化硫(SO2)抗肢体缺血再灌注(I/R)致急性肺损伤中的作用。方法:应用双大腿根部绑扎止血带复制大鼠双后肢缺血再灌注肺损伤模型。在再灌注前20 min腹腔注射Na2SO3/Na HSO3;在再灌注前1 h静脉注射Stattic或LY294002。应用TUNEL、ELISA、Western blot等方法检测细胞凋亡、细胞因子表达及相关信号通路蛋白表达的情况。结果:与对照组相比,I/R组的MDA及MPO含量、肺系数、细胞凋亡指数、细胞因子表达以及p-STAT3、p-Akt蛋白的水平均显著增高;当应用Na2SO3/Na HSO3后,上述反映肺损伤的各项指标均下降。Western blot检测结果显示I/R后,肺组织中p-STAT3和p-Akt蛋白的水平均明显增加。而应用Na2SO3/Na HSO3后,p-Akt蛋白的水平继续增加,但p-STAT3蛋白的水平却减少(P<0.05)。结论:JAK2/STAT3和PI3K/Akt信号通路都参与了SO2抗肢体缺血再灌注致急性肺损伤的作用。JAK2/STAT3通路的活化,能够使I/R损伤加重;相反,PI3K/Akt信号通路的活化,可以使I/R损伤减弱。此外,JAK2/STAT3和PI3K/Akt信号通路之间存在交互作用。

人参总皂甙对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

从病理生理，生化和超微结构方面研究表明，人参皂甙增加缺血再灌注脑血流量，减少钙积累，减轻脑水肿，延长双侧锁骨下和颈总动脉结扎后自主呼吸和脑电活动时间并促进再灌时的恢复，改善再灌注早期心脏功能，减轻超微结构损伤，降低缺血再灌注期间的死亡率。

姜黄素对大鼠肝缺血再灌注早期肝组织一氧化氮表达的影响

目的:探讨姜黄素对大鼠肝脏缺血再灌注早期损伤微循环的影响.方法:将大鼠随机分为假手术组、对照组和实验组(姜黄素40mg/kg,2次给药).通过检测再灌注早期1、3h血清转氨酶水平、肝组织中一氧化氮(nitricoxide,NO)、一氧化氮合酶(nitricoxide synthase,NOS),诱导型一氧化氮合酶(inducible nitricoxide synthase,iNOS)mRNA及内皮型一氧化氮合酶(endothelium nitricoxide synthase,eNOS)mRNA水平,以及肝组织病理学检查来评价姜黄素对大鼠肝脏缺血再灌注早期损伤微循环的影响.结果:相对于对照组,姜黄素可降低大鼠肝脏缺血再灌注早期损伤1、3h血清谷丙转氨酶(ALT)的水平(603.8U/L±64.5U/Lvs758.1U/L±114.7U/L,837.1U/L±33.3U/Lvs1012.7U/L±119.8U/L,均P<0.01)和谷草转氨酶(AST)的水平(605.7U/L±65.7U/Lvs779.5U/L±124.3U/L,849.6U/L±36.0U/Lvs1027.8U/L±139.8U/L,均P<0.01);改善肝组织病理学损害;减少肝脏缺血再灌注早期损伤1、3h肝组织由iNOS产生的NO蛋白水平(0.455±0.056vs0.594±0.087,0.492±0.040vs0.671±0.079,均P<0.01);降低肝脏缺血再灌注早期损伤1、3h肝组织iNOSmRNA的表达强度(0.426±0.075vs0.569±0.073,0.527±0.066vs0.702±0.089,均P<0.01).结论:姜黄素可通过减轻肝组织中由iNOS产生的NO生成,来改善肝缺血再灌注早期损伤中微循环的紊乱,从而减少对肝缺血再灌注肝实质细胞的损伤.

氟伐他汀对高脂血症兔心肌缺血再灌注损伤心肌局部细胞间粘附分子-1的影响

目的:研究氟伐他汀对高脂血症兔心肌缺血再灌注损伤心肌局部细胞间粘附分子-1(ICAM-1)表达的影响。方法:30只高脂喂养的日本大耳白兔随机分为3组(n=10):缺血再灌注组;氟伐他汀组,缺血再灌注前3 h,氟伐他汀10 mg·kg-1口服给药;假手术组。实验中监测心电图及心功能,实验完毕取心肌组织,Evans蓝及氯化三苯基四氮唑(TTC)染色测心肌梗死程度,逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)测心肌局部ICAM-1 mRNA表达。结果:缺血再灌注后,与缺血再灌注组相比,氟伐他汀组心肌局部ICAM-1mRNA表达降低(P<0.01),心肌梗死程度降低(P<0.01),心功能显著改善。结论:ICAM-1mRNA表达增高是心肌缺血再灌注损伤的重要因素,氟伐他汀短期预治疗可降低ICAM-1 mRNA表达,降低心肌梗死程度,改善心功能。

岛状皮瓣缺血-再灌注损伤后组织结构的变化及地塞米松的保护性作用

目的:研究岛状皮瓣缺血-再灌注损伤后组织学,阐明中性粒细胞在这一过程中的作用及地塞米松的保护作用。方法:wistar大鼠等分为地塞米松治疗组与生理盐水对照组。观察组织学改变。结果:治疗组皮瓣成活面积明显增加。光镜显示:皮瓣组织学改变轻。透射电镜发现中性粒细胞坏死数量较小,凋亡数量较多,皮瓣毛细血管结构较完整。扫描电镜显示:血管通畅,中性粒细胞活化程度轻,与血管壁粘附现象少见。对照组皮瓣组织学改变重;光镜显示:术后1天即可见皮瓣内血管有大量血栓形成,皮瓣中性粒细胞浸润数量多;透射电镜显示皮瓣毛细血管结构不完整,内皮细胞坏死,脱落,皮瓣中有较多数量的坏死中性粒细胞,少见凋亡的中性粒细胞,3天时中性粒细胞数量明显减少,但皮瓣中有大量溶酶体分布。扫描电镜显示血管附壁血栓形成多,血管内中性粒细胞活化程度重,与血管壁粘附现象多见。结论:地塞米松保护皮瓣与其减少中性粒细胞坏死数量,增加其凋亡水平有关。

NF-κB对肠缺血再灌注肝损伤P-选择素表达和中性粒细胞浸润的作用

目的:探讨核转移因子-κB(NF-κB)在肠缺血再灌注肝损伤发病机制中的作用及其对P-选择素(P-selectin)表达和中性粒细胞浸润的影响．方法:Wistar大鼠24只随机分成对照(Control 组)、肠缺血再灌注(I／R组)和脯氨酸二硫代氨基甲酸酯(PDTC)治疗组(PDTC组),每组8只．I／ R和PDTC组大鼠行肠系膜上动脉夹闭1 h再灌注2 h．PDTC组于手术前1 h给予20 g／L PDTC 100 mg／kg ip．观察肝组织病理学及其肝功能变化,检测血清IL-6,肝组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)和髓过氧化物酶(MPO)水平．免疫组化法观察肝组织P-selectin和NF-κB表达并采用Western blot法检测肝NF-κB的水平．结果:肠缺血再灌注诱发了肝损伤,表现为肝水肿、出血和炎性粒细胞浸润．与对照组相比,I／R组血清ALT、AST、IL-6水平明显升高 (143．16±53．02至192．31±42．09 U／L,P<0．05; 387．46±78．74至507．56±96．26 U／L,P<0．01; 22．51±6．10至42．85±7．35 ng／L,P<0．01)．肝组织SOD活性降低、MPO含量明显升高(244．87 ±25．11至173．21±16．60 U／mgprot,P<0．01; 2．36±0．56至4.32±0．77 U／g,P<0．01);肝组织的P-selectin和NF-κB表达增强．采用PDTC 预处理,与I／R组相比,肝损伤程度减轻,血清ALT(128．63±38．94 U／L)、AST(462．86± 60．84 U／L)以及IL-6(28．08±7．55 ng／L)水平明显降低(P<0．01,P<0．05,P<0．05);肝脏氧化损伤及白细胞浸润减弱,表现为肝组织SOD活性升高(253．45±25．21 U／mgprot,P<0．01)、MPO 含量降低(3．58±0．49 U／g,P<0．05),同时伴有肝组织中的P-selectin和NF-κB表达减弱．结论:肠缺血再灌注诱发肝损伤,伴有明显的中性粒细胞浸润和肝组织P-selectin的表达增强,NF-κB的活化在此损伤过程中起重要作用． PDTC通过抑制NF-κB活性对肠缺血再灌注肝损伤起保护作用．

缺血预处理对大鼠大脑皮质晚期糖基化终末产物受体和Toll样受体4的影响

目的观察脑缺血预处理(CIP)对大鼠大脑皮质晚期糖基化终末产物受体(RAGE)和Toll样受体4(TLR4)的表达变化。方法将108只SPF级SD健康雄性大鼠随机分为CIP组、缺血再灌注(I/R)组和假手术组(Sham组),每组36只;大鼠建立大脑中动脉栓塞模型后,每组随机选6只于再灌注1d时处死,采用TTC法检测脑梗死体积,之后于再灌注后12h,1、2、3和7d共5个时间点处死大鼠,每个时间点6只,通过RT-PCR法测定RAGE和TLR4mRNA表达。结果 CIP组大鼠在12h、1、2、3和7d的神经功能行为缺损评分较I/R组明显减低(P<0.05,P<0.01)。CIP组1d脑梗死体积明显低于I/R组[(19.04±1.65)%vs(34.55±4.78)%,P<0.05]。CIP组和I/R组RAGE、TLR4mRNA表达均显著高于Sham组(P<0.05),均于1d时达高峰,随再灌注时间延长,两者表达逐渐下降,CIP组较I/R组表达均明显降低(P<0.05)。结论 CIP可使大脑产生缺血耐受,其机制可能与下调I/R损伤时RAGE和TLR4的表达有关。

Kupffer细胞与肝脏缺血再灌注损害的研究进展

全身80%-90%的巨噬细胞为位于肝血窦内的Kupffer细胞(KC).KC激活后将诱发TNF-α、前列腺素、一氧化氮及氧自由基等各种炎症细胞因子的大量形成,除导致自身功能形态发生改变外,还直接影响邻近的肝细胞,血管内皮细胞以及位于血窦腔内的中性粒细胞等多种细胞,进而启动热缺血或冷缺血后肝脏的缺血再灌注损害(ischemia reperfusion injury,IRI).本文拟就KC与肝脏IRI的关系进行综述,以期为IRI的防治寻求到适宜的治疗靶点及途径.

骨骼肌缺血再灌注后NO分泌量的变化

目的研究骨骼肌缺血再灌注后NO分泌量的变化及其意义。方法制备免单侧后肢骼总动脉和股浅动脉两组不同平面的急性缺血模型，分别在骼总动脉缺血6h（Ⅰ组）和股浅动脉缺血12h（F组），及两组再灌注后1h、3h、6h和12h，进行大小腿骨骼肌超微结构观察和NO分泌量及缺血肢体股动脉血流量测定。结果两组缺血期末肌细胞无明显破坏，再灌注后肌组织的损伤程度不仅取决于缺血时间，更与缺血平面即缺血严重程度有关。NO分泌量明显影响动脉血流量，再灌往后NO回升速度取决于缺血的严重程度，缺血严重，NO值回升慢，血流量恢复也慢。结论NO值可以反应骨骼肌细胞的功能状态。

缺血—再灌注损伤对大鼠心肌中氨基酸的影响及牛磺酸的保护作用

使用大鼠离体作功心脏缺血一再灌注损伤模型,观察心肌内游离氨基酸含量的变化以及牛磺酸(Taurine,Tau)对心脏的影响.发现再灌注损伤使心肌内所测17种游离氨基酸含量除Cys外部减少,其中Tau降低最显著.20 mmol·L^(-1)Tau能改善心脏的再灌注损伤,表现为:在再灌注期间促进心脏机械功能的恢复,减少室性心律失常的发生率,减少LDH与CK从心肌中漏出,减少脂质过氧化作用与钙的积聚以及减少心肌内游离氨基酸的丢失.提示:外源性Tau能够改善心脏的缺血一再灌注损伤.

血管紧张素转化酶抑制剂对缺氧再复氧大鼠心肌细胞超微结构的保护作用

观察到血管紧张素转化酶仰制剂卡托普利和依那普利拉对缺氧再复氧和模拟缺血再灌注所致大鼠心肌细胞超微结构的损伤具有保护作用。两种血管紧张素转化酶抑制剂均能明显减轻心肌细胞超微结构损伤，尤其是线位体的损伤。

枸杞多糖对脑缺血再灌流小鼠学习、记忆的影响

本文采用结扎小鼠双侧颈总动脉１ｈ，同时在距尾尖１ｃｍ处剪断其尾放血数滴，继之再灌流２４ｈ，造成小鼠全脑缺血再灌流的损伤。观察枸杞多糖对脑缺血再灌流小鼠学习、记忆能力的影响。结果表明，枸杞多糖可显著提高脑缺血再灌流小鼠的学习、记忆能力，并促进其学习、记忆能力的恢复。

银杏黄酮对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的 观察银杏黄酮对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用。方法 采用离体大鼠心脏Langendorff灌流 ,低灌缺血 40min ,再恢复常速灌流 30min ,造成心肌缺血再灌流损伤。利用该模型观察银杏黄酮对缺血再灌流心肌心缩力 (ST)、左室内压 (LVP)、心率 (HR)、冠脉流出量 (CBF)、冠脉流出液中乳酸脱氢酶 (LDH)、心肌丙二醛 (MAD)含量及超氧化物歧化酶 (SOD)活性的变化。结果 银杏黄酮 15mg/L和 30mg/L可改善缺血再灌注所致心肌收缩力及左室内压的降低 ,减少LDH释放量及心肌MAD生成量 ,并提高SOD活力。结论 银杏黄酮对离体心脏缺血再灌注有保护作用 ,其作用与直接清除自由基外 ,亦可能与SOD活性的维持有关。

甘草总黄酮对大鼠肠缺血再灌注损伤的保护作用

目的研究甘草总黄酮对大鼠肠缺血再灌注损害的保护作用。方法采用线栓法建立大鼠肠系膜上动脉缺血再灌注模型 ,并用 3种不同剂量的甘草总黄酮灌服后 ,测定缺血 2h再灌 2 4h血清和肠组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶 (SOD)、一氧化氮 (NO)、一氧化氮合酶 (NOS)的含量或活性。结果甘草总黄酮能明显降低血清和肠组织中的MDA、NO含量 ,提高体内SOD的活性。结论甘草总黄酮有抗氧化作用。

NT-3转染骨髓间充质干细胞对脑缺血再灌注的机制研究

目的研究神经营养素-3(neurotrophin-3,NT-3)转染的骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对脑缺血再灌注损伤的作用机制。方法制作脑缺血再灌注损伤模型,将60只大鼠根据注射物不同分为3组:生理盐水对照组、BMSCs组和NT-3+BMSCs组(n=20),观察不同时间3组大鼠的神经学功能评分、脑组织光镜观察、TUNEL法检测神经元细胞的凋亡及丙二醛含量情况。结果 BMSCs+NT-3组移植后大鼠神经学功能评分较BMSCs组低,而BMSCs组较NS组较低,两组间比较均有统计学意义(P<0.05);BMSCs+NT-3组脑组织光镜观察细胞形态学变化最轻;BMSCs组神经元凋亡较NS组减少,BMSCs+NT-3组的神经元凋亡数量较BMSCs组减少,两组间比较均有统计学意义(P<0.05);NS组丙二醛(MDA)含量明显高于BMSCs组(P<0.05);而BMSCs+NT-3转染组明显低于BMSCs组(P<0.05)。结论大鼠BMSCs经NT-3转染后相互促进,移植于急性脑缺血再灌注损伤通过减缓神经元细胞凋亡、降低丙二醛含量抑制自由基的脂质过氧化反应进行修复。