化学药品标准物质定量分析方法研究进展

目的 综述目前化学药品标准物质的定量分析方法,为药品质量监管、药物安全性评价、药品检验及研发机构的标准物质研制提供借鉴。方法 对化学药品标准物质定量分析方法的基本原理、适用范围、影响因素等进行介绍,并对不同定量方法的利弊进行分析。结果和结论 药品标准物质是药品研发、质量检测、安全监测等过程中检验检测的物质基础,是保证药品质量和保障药品标准实施的关键,而化学药品标准物质是其中占比最大的一类,其量值的准确性至关重要。在对化学药品标准物质进行定量分析时,要充分考虑各方法的适用性,选择最合适的方法。

中药化学对照品标定常见问题分析

目的:分析中药化学对照品标定过程中的常见问题,探讨相应的解决方案。方法:根据标定过程中结构鉴定、纯度分析、水分测定、残留溶剂、无机盐、定值等环节存在的不同问题进行个性化分析,分类总结。结果:通过对中药化学对照品标定过程中常见问题的分析,提出了相应的解决方案。结论:有关问题的解决为中药化学对照品的标定和使用提供了有利的技术支持。

差示扫描量热熔点分析法的应用性分析

选择不同温度段熔融的5个代表性品种、国内外不同来源的13个法定熔点标准物质作为研究对象,进行差示扫描量热法和毛细管法两种熔点分析方法的关联性研究,并进一步开展差示扫描量热熔点分析法关键参数的应用性分析。研究表明,毛细管法的熔点分析结果一般延后1~2℃;差示扫描量热熔点分析法的准确性和精密度更好,并且推荐采用10℃/min的升温速率参数,而升温起点、气体流量等方法参数影响较小。质量分析还证实,我国药典熔点标准物质已经具备国际竞争力。

基于UPLC替代对照品法测定大蒜中大蒜辣素

目的基于UPLC建立替代对照品法测定大蒜中的大蒜辣素。方法新鲜蒜泥甲醇提取物的分析采用Waters Acquity BEH C18柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm);流动相乙腈-0.1%甲酸水溶液;柱温30℃;体积流量0.3 mL/min;检测波长242 nm。结果大蒜辣素、羟苯乙酯在36.02~564.74、12.93~206.80μg/mL范围内线性关系良好(r≥0.9998),加样回收率98.8%~100.9%,定量下限1.73~2.03 mg/kg。外标法与替代对照品法测定结果无统计学差异(P>0.05)。结论该方法准确稳定,重复性好,可用于大蒜的质量控制。

替代对照品法快速确证3种抗艾滋病药物

目的：建立替代对照品法快速确证茚地那韦、利托那韦、洛匹那韦的方法.方法：以利托那韦为参比物,采用有效相对保留时间和紫外光谱相似度双指标定性分析;采用相对校正因子进行定量分析.结果：建立了三种抗艾滋病药物的紫外光谱库;茚地那韦、利托那韦和洛匹那韦的有效相对保留时间分别为：0.466～0.518,1.000和1.664～1.840;茚地那韦、利托那韦和洛匹那韦的相对校正因子分别为0.858 7,1.000 0,0.752 0.结论：该方法快速、简便,适用于药品的快速检测,可作为近红外快筛技术确证方法.

以橙皮苷为对照品的内加入法测定甘草中甘草苷和甘草酸含量

目的建立测定甘草中甘草苷和甘草酸含量的替代对照品法。方法以橙皮苷为替代对照品,通过测定甘草苷和甘草酸铵相对橙皮苷的校正因子,利用相对校正因子计算甘草中甘草苷和甘草酸的含量。色谱柱为Welch Ultimate C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.1%三乙胺溶液(用磷酸调节pH至2.5)-乙腈(梯度洗脱),流速为1.0 m L/min,检测波长为276 nm(甘草苷)、284 nm(橙皮苷)、252 nm(甘草酸铵),进样量为10μL,柱温为30℃。结果甘草苷、橙皮苷、甘草酸铵的进样量分别在0.0830~1.0381μg、0.0987~1.2337μg、0.2165~2.7063μg范围内与其峰面积(r=0.9995,0.9994,0.9997)线性关系良好;甘草苷和甘草酸铵与橙皮苷的相对校正因子的平均值分别为1.0813和0.4495;甘草苷和甘草酸的平均加样回收率分别为99.62%和98.44%,RSD分别为0.87%和1.19%(n=6)。结论该方法经济快速,可行实用,准确度高,重复性好,可用于甘草中甘草苷和甘草酸的含量测定。

替代对照品法测定当归腹痛宁滴丸中藁本内酯的含量

建立HPLC替代对照品法测定当归腹痛宁滴丸中藁本内酯的含量。采用资生堂CAPCELL PAK C_(18)色谱柱(4.6 mm×250.0 mm,5μm),以甲醇-乙腈-水(15∶35∶50)为流动相,柱温30℃,流速1.0 mL/min,丹皮酚的检测波长为274 nm,藁本内酯的检测波长为327 nm。以丹皮酚作为藁本内酯的替代对照品,在不同条件下测定相对校正因子,利用相对校正因子和替代对照品测定当归腹痛宁滴丸中藁本内酯的含量。结果显示,藁本内酯和丹皮酚进样量分别在0.106 4~2.129 0μg(r=0.999 9)和0.063 6~2.544 4μg(r=0.999 9)范围内与峰面积呈良好的线性关系(n=7),测得相对校正因子f为1.978 5,不同条件下相对校正因子的重现性良好,通过相对校正因子f计算得到当归腹痛宁滴丸中藁本内酯含量与外标法实测值之间无明显差异。本方法经济、实用、快速、高效,可用于当归腹痛宁滴丸中藁本内酯的含量测定和产品质量控制,同时可解决因对照品缺乏与不稳定而给含量测定带来的困难,极大降低了分析检测的成本。

人干扰素α2b理化对照品质控方法与质量标准研究

目的:建立人干扰素α2b(hIFN α2b)理化对照品的质控方法与质量标准。方法:使用2020年版《中华人民共和国药典》报告基因法测定hIFN α2b理化对照品的生物学活性、福林酚法测定蛋白质含量、电泳法和高效液相色谱法测定纯度、等电聚焦电泳法测定等电点、Edman降解法测定N端氨基酸序列;液质联用法测定相对分子质量,使用C4(50 mm×2.1 mm, 3.5μm)色谱柱和QTof质谱仪;液质联用法测定质量肽图和二硫键,使用C18(100 mm×2.1 mm, 1.7μm)色谱柱和QTof质谱仪;建立hIFN α2b理化对照品的质量标准;对7批由不同企业提供的理化对照品进行检测。结果:建立了hIFN α2b理化对照品的质量标准,7批hIFN α2b理化对照品的比活性为1.2×10^(8)~2.8×10^(8)IU·mg^(-1),电泳纯度均>96.0%,高效液相色谱纯度均>95.0%,等电点主区带为5.2~6.6,N端氨基酸序列为(M)CDLPQTHSLGSRRT,相对分子质量、质量肽图和二硫键测定结果均与理论值相符。结论:建立的质控方法与质量标准可以比较全面地评价hIFN α2b理化对照品的质量,各企业的理化对照品均符合质量标准的要求。

对照品替代法同时测定中药和保健食品中6种大豆异黄酮类成分的含量

目的:尝试对照品替代法在高效液相色谱法含量测定中的应用,即建立以1种成分为对照同时测定多种目标成分的含量测定方法。方法:采用HPLC-DAD-MS联用技术,通过定性和定量手段分别求得各被测成分相对于特定对照品的计算因子,从而实现以染料木素为对照,同时测定样品中大豆苷、黄豆黄苷、染料木苷、大豆苷元、黄豆黄素和染料木素6种成分的含量。色谱条件:采用Agilent Zorbax SB-C18(4.6mm×150mm,5μm)柱,柱温25℃;流动相为0.2%甲酸-乙腈,梯度洗脱;流速为1mL·min-1(DAD检测器)及0.2mL·min-1(质谱检测器)。质谱条件:ESI正离子模式检测,毛细管电压3.0kV,锥孔电压40V,源温度120℃,去溶剂温度150℃,去溶剂气(N2)流速300L·h-1,离子扫描范围m/z100～700;选定m/z255,271,285,417,433,447进行选择性离子扫描(SIM)。结果:以对照品替代法测得的结果与常规的含量测定方法测得的结果基本一致。结论:本方法经济、实用、快速、高效,可用于含大豆异黄酮类中药和保健食品中以上6种成分的含量测定和产品质量控制,同时可解决因对照品不足而给含量测定带来的困难,大大降低了分析检测的成本。

HPLC替代对照品法同时测定莪术油及其注射液中6种成分的含量

目的:建立HPLC替代对照品法同时测定莪术油及其注射液中6种成分含量。方法:本文采用HPLC方法,在不同条件下测定=牛儿酮与其他5种成分(莪术二酮、莪术醇、莪术烯、呋喃二烯及β-榄香烯)间的相对校正因子(RCF)。以上述6种成分为指标,分别利用替代对照品法和常规含量测定方法对莪术油及其注射液进行含量测定。色谱条件:采用Waters Symme-try C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-水,梯度洗脱,流速1.0 mL.min-1,柱温30℃,检测波长215 nm。结果:以替代对照品法测得的结果与常规含量测定方法结果一致。结论:本试验在高效液相液相色谱仪上使用替代对照品法同时测定了莪术油及其注射液中的6种成分的含量,结果证明,本方法经济实用,可以高效、准确地对莪术油及其注射液进行质量控制。

氢核磁共振定量法在化学对照品定值中常见问题分析

氢核磁共振定量(1H-qNMR)技术已经广泛应用于化学对照品的定值,是常用的赋值佐证方法,但在具体试验过程中会受多种因素影响。结合实际工作积累,本文讨论了内标与外标定量方法的差异,建议优先选择内标定量方法。探讨了内标选择的考虑因素,要保证内标物质的纯度以及溶解性等;称样方式及称样量对结果的潜在影响;溶剂选择以及温度影响,低温下应注意二甲亚砜的凝固点,升温时不用三氯甲烷等易挥发溶剂。对于弛豫延迟时间等关键仪器参数设置进行讨论,提出解决方法。举例阐述数据处理时的适宜积分方式以及在手动积分时的关注点。同时,依据《中华人民共和国药典》(简称《中国药典》)2020年版四部9101中分析方法验证指导原则,分析氢核磁共振定量试验方法学应考察的具体内容,充分保障其测定结果的准确性。

一测多评法测定速效救心丸中冰片的含量

目的:建立速效救心丸中异龙脑、左旋龙脑、右旋龙脑的一测多评含量测定方法。方法:采用手性毛细管柱(30.0 m×0.25 mm×0.25μm),载气为氮气,FID检测器,柱温为120℃,柱流量为1.0 mL.min-1。以正十四烷为内标物,以右旋龙脑为参照物建立其与异龙脑、左旋龙脑的相对校正因子,并进行含量测定,实现一测多评。同时与现行标准的测定结果进行比较以验证一测多评法的准确性。结果:所建立的校正因子重现性良好,采用一测多评法的测定结果与现行标准方法的测定结果基本一致。结论:所建立的方法能测定以各种冰片投料生产的速效救心丸中的冰片含量。

对照品替代法用于贯叶连翘提取物及其制剂中金丝桃素含量测定的研究

目的:研究对照品替代法在高效液相色谱法含量测定中的应用,建立以大黄素为替代物测定贯叶连翘提取物及其制剂中金丝桃素含量的方法。方法:采用HPLC-DAD和HPLC-MS,通过定性和定量手段分别求得被测成分相对于替代物的计算因子,从而实现以大黄素为替代对照品,测定样品中金丝桃素的含量。色谱条件:色谱柱,Agilent TC-C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相,10 mmol.L-1醋酸铵缓冲液(以醋酸调pH 4)-乙腈梯度洗脱系统;流速,1.0 mL.min-1;柱温,30℃;DAD检测器,检测波长284 nm。质谱条件:色谱柱,Agilent SB-C18(2.1 mm×50 mm,1.8μm);流动相,10 mmol.L-1醋酸铵缓冲液(以醋酸调pH 4)-乙腈梯度洗脱系统;流速,0.4 mL.min-1;柱温,30℃;MS-ESI正离子模式检测,去溶剂温度300℃,去溶剂气(N2)流速10 L.min-1,雾化气压力241 Pa,毛细管电压4 kV,离子扫描范围为m/z 100～600,选定m/z269.1,503.2,519.2,535.5进行选择性离子扫描(SIM)。结果:对照品替代法与常规的含量测定法测得的结果基本一致。结论:本方法经济、实用、快速、高效,可用于贯叶连翘提取物及其制剂中金丝桃素的含量测定和产品质量控制,同时可解决因对照品缺乏而给含量测定带来的困难,大大降低了分析检测的成本。

基于多元数据分析研究葛根素化学对照品定值准确性与其影响因素的相关性

目的：模拟评估葛根素化学对照品定值过程中原料纯度与有机杂质对于定值的影响，为化学对照品质量平衡法定值提供有效的技术要求。方法：在化学对照品质量平衡法定值的基础上，选择葛根素化学对照品作为主成分，同时选择其结构类似物异黄酮及黄酮类化学对照品作为相关模拟的杂质，测定相应的校正因子后，定量混合，模拟制成两类考察物：一类为主成分自99.0%、98.0%…90%纯度递减的系列考察物，另一类为不同校正因子比杂质的系列考察物，两系列模拟考察物分别进行HPLC纯度测定。结果：采用析因分析方法，确定主成分纯度在99.0%~97.0%范围内，有机杂质校正因子在0.90~1.10范围内，此两项因素对定值无显著性影响，且两者间无交互效应。结论：本试验结果对于化学对照品原料的筛选及定值具有一定的指导和参考意义。

绿色分析化学与中药检测方法

本文在学习绿色分析化学原理和基本原则的基础上,结合中药检测方法的实际,从分析样品处理、高效液相色谱和中药对照物质替代三方面分析了中药分析检测标准中可以采用的绿色化策略与方法。

HPLC用于大蒜及其制品中三种重要功效成分的同时测定

建立一种以羟苯乙酯为替代对照品,同时检测大蒜及其制品中大蒜辣素、大蒜素、二烯丙基二硫醚3种重要功效成分的高效液相色谱(HPLC)方法。采用反相C18色谱柱(250 mm×4. 6 mm,5μm),乙腈-0. 02%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,检测波长:242 nm,流速:1. 0 mL/min,柱温24℃。结果表明,通过优化流动相组成、洗脱方式、检测波长及柱温等参数,可使包括羟苯乙酯在内的4种物质在64 min内实现基线分离,并在一定质量浓度范围内呈现良好的线性关系(r≥0. 9996),不同条件下相对校正因子的重现性良好,加标回收率为98. 5%～103. 3%,定量限为2. 5～10. 0 mg/kg。该方法为开发利用药用大蒜的植物资源和完善药用大蒜质量分析体系提供了技术支持。