影响试管群落中耐药大肠杆菌比例因素的研究

研究耐药菌株和敏感菌株的竞争关系,为寻找降低耐药细菌危害的方法提供理论依据。应用改良影印培养法,考察耐氨苄西林大肠杆菌菌株(G414)起始比例、益生菌种类和营养水平对人造微生物群落中G414菌落比例变化的影响。结果表明:人造群落中耐药菌株生存竞争能力大于敏感菌株(ATCC 25922),其比例在1~7 d均逐渐上升;高初始比例组的耐药菌株比例从33%上升至64%,绝对值增加31%,超过敏感菌株成为群落中的优势菌,低初始比例组从10%上升至43%;枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌在1~7 d能够显著放缓耐药株在群落中比例的升高趋势(P<0.05),蜡样芽孢杆菌除开始两天外,可极显著地降低耐药菌株的比例(P<0.01);在高(100%)、中(10%)、低(1%)营养条件下,耐药菌株比例均逐步升高,中营养水平组的比例上升最快。耐氨苄西林大肠杆菌菌株并没有因携带耐药基因而升高其在无药环境中的竞争适应度代价,反而获得了在正常营养和低营养以及多物种竞争条件下的某种竞争优势,逐步成为人造群落中的优势菌群,传播出去,可能对公共卫生安全造成较大威胁;枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌只能降低耐药菌株比例上升的趋势,而蜡样芽孢杆菌可极显著地抑制耐药菌株的生长,促使其消亡,加以开发利用,或许能降低养殖环境中某些耐药菌的数量。

一株产油脂细菌Bacillus sp.A7的分离与鉴定

采用影印平板法从食堂排污口水样中初步筛选出6株产油脂菌株,苏丹黑B染色法进行复筛,3个菌株染色后胞内蓝黑色物质较多,其中编号A7的菌株,生长较快,故将其作为实验菌株。菌株A7呈短杆状,革兰氏染色为阳性。对其部分生理生化特征进行研究:其中PHB染色、淀粉水解实验和卵磷脂实验为阳性,异染粒染色、接触酶实验、反硝化实验和荧光色素实验为阴性。经16SrDNA分子生物学鉴定,该菌属于芽孢杆菌属,暂命名为Bacillus sp.A7。对菌株A7进行扩大培养,采用盐酸水解法提取油脂,测得其油脂质量分数约为21.25%。