白藜芦醇多不饱和脂肪酸酯的合成

为增强白藜芦醇和多不饱和脂肪酸的稳定性和功效,采用化学法合成白藜芦醇和亚麻酸、花生四烯酸以及DHA等3种多不饱和脂肪酸的酯化产物。以草酰氯为酰化试剂,在N,N-二甲基甲酰胺催化下,将脂肪酸制成相应的酰氯,随后与白藜芦醇反应成酯,运用质谱、红外、氢谱、碳谱等测试手段确认4种白藜芦醇酯的结构。结果表明,白藜芦醇与亚麻酸反应主要生成两种单酯化产物:亚麻酸-3-白藜芦醇酯和亚麻酸-4'-白藜芦醇酯;与花生四烯酸和DHA反应主要得到三酯化产物:三花生四烯酸白藜芦醇酯和三DHA白藜芦醇酯。

白藜芦醇喹啉酸酯衍生物的合成

以白藜芦醇和2-喹啉羧酸为原料,采用缩合剂法合成白藜芦醇喹啉酸酯衍生物,通过对反应条件的优化,最佳合成工艺为:白藜芦醇与2-喹啉羧酸摩尔比为1∶10、反应温度为55℃、反应时间为5 h、溶剂为丙酮、采用二环己基碳二亚胺和4-二甲氨基吡啶为缩合剂。实验结果表明:其质谱数据为694.6([M+1]+),核磁共振氢核的化学位移符合目标分子结构特征,因此合成的目标化合物结构正确。

白藜芦醇生物素酯的制备与药效学评价

以DCC为催化剂,首次采用低温化学催化法合成白藜芦醇生物素酯。产物采用Resourse RPC反相色谱柱分离、纯化,并且运用液-质联用进行分析验证。MTT法测定产物体外对HepG2、MCF-7肿瘤细胞的抑制作用。实验结果显示:通过HPLC-MS、紫外扫描分析鉴定证实,分离得到的产物确实是白藜芦醇生物素酯,它保留了白藜芦醇原有的体外抗肿瘤活性。此种化学合成方法反应条件温和,容易控制,操作方便。合成得到的白藜芦醇生物素酯,为下一步探讨白藜芦醇的结合蛋白提供简单有效的分子工具。

分子模拟结合荧光光谱法探究BSA-多酚复合物形成机理及对多酚的保护作用

采用蛋白质内源荧光猝灭分析槲皮素(QUE)、白藜芦醇(RES)和咖啡酸β-苯乙醇酯(CAPE)同时与牛血清白蛋白(BSA)结合的可能性;通过位点Marker和分子对接技术确定结合位点;通过光稳定性试验研究BSA-多酚复合物对多酚的保护作用。结果表明:BSA可以同时结合2个或3个配体形成蛋白-多酚复合物,且多酚添加顺序影响会其结合能力。按照QUE/RES/CAPE的顺序可以较好地形成BSA-三配体复合物。分子对接和位点Marker试验确定了RES结合到Sudlow’s sites I位点,QUE部分结合到Sudlow’s sites II位点,CAPE结合位点位于结构域IA和IIA之间的疏水腔内。复合物的形成改善了游离多酚的稳定性,两配体和三配体复合物对QUE/RES/CAPE的保护作用优于单配体复合物。

TGF-β1/Smad7信号通路在白藜芦醇增强胆固醇酯水解酶表达中的作用

目的探讨TGF-β1/Smad-7信号通路在白藜芦醇增强胆固醇酯水解酶(cholesteryl ester hydrolase,CEH)表达中的作用。方法用氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,oxLDL)诱导小鼠单核巨噬细胞株RAW 264.7转化为泡沫细胞,将经泡沫化处理的巨噬细胞进行2次分组,第1次分为正常对照组、白藜芦醇组、LY2157299组和白藜芦醇+LY2157299组,第2次分为正常对照组、白藜芦醇组、Ad-Smad-7组和白藜芦醇+Ad-Smad-7组,均处理48 h,通过胆固醇流出试验检测各组巨噬细胞内胆固醇流出率,油红O染色检测细胞泡沫化情况,RT-PCR法和Western blot法检测细胞中p-Smad-7和CEH基因mRNA的转录水平及蛋白的表达水平。结果与正常对照组比较,白藜芦醇组巨噬细胞内胆固醇流出率明显升高(P<0.05),白藜芦醇+LY2157299组、LY2157299组、白藜芦醇+Ad-Smad-7组和Ad-Smad-7组胆固醇流出率均明显降低(P<0.05);白藜芦醇组巨噬细胞泡沫化程度明显下降(P<0.05),白藜芦醇+LY2157299组、LY2157299组、白藜芦醇+Ad-Smad-7组和Ad-Smad-7组巨噬细胞泡沫化程度明显增强(P<0.05);白藜芦醇组巨噬细胞中CEH基因mRNA的转录水平及蛋白的表达水平明显增强(P<0.05),p-Smad-7基因mRNA的转录水平及蛋白的表达水平明显下降(P<0.05),而白藜芦醇+LY2157299组、LY2157299组、白藜芦醇+Ad-Smad-7组和Ad-Smad-7组CEH基因mRNA的转录及蛋白的表达均明显被抑制(P<0.05),p-Smad-7基因mRNA的转录及蛋白的表达均明显增强(P<0.05)。结论白藜芦醇可能是通过TGF-β1/Smad-7信号通路来增强CEH的表达。