网织红细胞计数试剂盒研制

目的 研制适用于手工计数及质量控制的网织红细胞计数试剂盒。方法 以固定后保存的鸡红细胞作Ret计数的参比液,将富含Ret的人胎盘血经中性红预处理后戊二醛固定,经参比计数法定值后保存,作为网织红细胞参比计数的质控物。二者分装后组成试剂盒。结果 该试剂盒可以参比计数法直接计数网织红细胞绝对值,与Miller窥盘法计数结果差异无显著意义(t=1.93,t_(0.05)=2.045,P>0.05),提高了精密度和检测速度;同时用其质控物进行室内质量控制,网织红细胞计数平均cv13.6％。该试剂盒于4℃保存,至少稳定一年。结论 本试剂盒改进了网织红细胞绝对值计数的方法,为临床开展回顾性质量控制提供了良好的质控材料。

网织红细胞计数质控物的研制

本室采取给兔注射苯肼,人为使兔贫血,获得富含网织红细胞(reticulocyte,Ret)的兔血。经7mmol/L中性红活体染色后,用0.5％戊二醛固定细胞,试制Ret计数质控物。质控物制片后,用14mmol/L中性红复染,常规Ret计数质控。本文质控物标定值为:RBC(x±2S)=(2.65±0.15)×10^(12)/L,CV=2.8％;Ret(x±2S)=(169.80±42.40×10~9/L,CV=12.5％。经6个月稳定性观察结果显示,此质控物4℃保存半年,稳定性好,适用于常规计数Ret的室内室间质量评价。

紫芸解毒止痛酊中红花的质量控制及其促骨髓间充质干细胞增殖的作用

目的对紫芸解毒止痛酊(ZYD)中的关键药材红花进行DNA条形码和HPLC化学质量控制,并探究羟基红花黄色素A(HSYA)在促骨髓间充质干细胞(BMSCs)细胞增殖中的作用。方法采用ITS2 DNA条形码技术鉴定中药材红花并分析其与近缘物种的序列差异;HPLC法测定5个批次的ZYD中HSYA的含量;CCK-8法测定BMSCs的细胞相对增殖率。结果 ZYD中红花的ITS2序列与NCBI数据库结果一致,系统进化树构建后发现其与近缘物种各自聚类成分支;5个批次的HSYA含量分别为23. 72±0. 44、24. 49±0. 15、25. 23±0. 51、23. 52±0. 21、23. 44±0. 42μg·m L^-1(n=6),RSD分别为1. 87%、0. 65%、2. 06%、0. 89%、1. 82%;与对照组比较,CCK-8法检测到ZYD、HSYA、红花提取液(HH)组分处理BMSCs 48 h后细胞的相对增殖率均大于100%,有显著促进细胞增殖的作用。结论 ITS2 DNA条形码和HSYA可作为ZYD中关键药材红花质量控制的重要指标,ZYD、HH的促BMSCs细胞增殖作用与HSYA的成分功效有关。