中药复方制剂对rds小鼠感光细胞凋亡的干预作用研究

目的观察中药复方制剂对先天性视网膜变性小鼠视网膜感光细胞凋亡的影响。方法以黄芪等药组成复方制剂1。对先天性视网膜变性动物模型rds小鼠,采用原位末端转移酶标记(TUNEL)方法及组织病理学技术,观察复方制剂1作用后,小鼠视网膜感光细胞数量及感光细胞凋亡的变化。结果仔鼠2周时,中药组小鼠视网膜感光细胞核数与对照组相比无明显差别,两组感光细胞凋亡率分别为1.6%及6.5%,组间差异有显著性(P<0.01);4周时中药组感光细胞核数目较对照组多,差异有显著统计学意义(P<0.01),两组感光细胞凋亡率分别为3.3%及8.5%,组间差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论中药复方制剂1可以延缓rds小鼠视网膜色素变性过程中感光细胞凋亡的发展。

细胞因子Ⅱ在遗传性视网膜色素变性的转基因小鼠视网膜的表达研究

目的探讨细胞因子Ⅱ（ｃａｌｐａｉｎ Ⅱ）在视网膜色素变性过程中表达的变化，以此窥视遗传性视网膜色素变性的转基因小鼠（ ｒｄｓ 小鼠）发病的某些可能因素。方法以 Ｃ３ Ｂ 小鼠为对照，选择不同生长时期的ｒｄｓ小鼠的视网膜组织，用免疫组化方法检测Ｃａｌｐａｉｎ Ⅱ在不同生长阶段的小鼠模型视网膜中的是否表达及表达情况。结果１周即可见Ｃａｌｐａｉｎ Ⅱ在ｒｄｓ小鼠视网膜神经节细胞层的表达， ２周左右内核层也见表达， ４周后外核层也开始出现由强至弱的ｃａｌｐａｉｎ Ⅱ强阳性表达，最终至全部视网膜剩余组织中均可见ｃａｌｐａｉｎ Ⅱ的表达。结论只有高钙才能激活ｃａｌｐａｉｎ Ⅱ的表达，研究中ｃａｌｐａｉｎ Ⅱ参与了ｒｄｓ小鼠视网膜细胞的变性死亡。因此，高钙是ｒｄｓ小鼠视网膜变性的一个可能因素。

视网膜变性小鼠视网膜组织中FasL蛋白表达的动态变化

背景视网膜移植是治疗视网膜变性性疾病的新方法，但如何避免或减少视网膜移植后的免疫排斥反应是亟待解决的问题之一。目前的实验研究中常将正常C57BL／6小鼠视网膜作为供体，视网膜变性（rd）小鼠作为受体。研究表明视网膜中Fas配体（FasL）蛋白通过FasL／Fas途径诱导Fas＋炎症细胞凋亡，推测可能与视网膜移植后的免疫排斥反应密切相关。目的探讨FasL蛋白在不同鼠龄C57BL／6小鼠和rd小鼠视网膜中的表达特点，揭示小鼠视网膜的免疫特性，为视网膜移植免疫排斥反应的研究提供参考依据。方法分别将出生后（PN）-0周（出生日）、PN-1周、PN-2周、PN-3周、PN-4周的正常C57BL／6小鼠和rd小鼠处死制备眼球冰冻切片，采用免疫荧光技术摄片，并经激光扫描共焦显微镜采集图片，用图像分析软件对各鼠龄不同品系小鼠间视网膜中FasL蛋白表达的荧光强度（FI）变化进行半定量分析。结果PN．1周C57BL／6小鼠视网膜发育尚不完善，FasL蛋白在视网膜各层均呈阳性表达。PN-2、3、4周C57BL／6小鼠已发育成10层的视网膜结构，FasL蛋白在视网膜色素上皮（RPE）、内节段（IS）、外界膜（OLM）、外丛状层（OPL）、内核层（INL）、内丛状层（IPL）及节细胞层（GCL）呈阳性表达。PN-1周rd小鼠视网膜结构与同龄C57BL／6小鼠接近，FasL蛋白在视网膜各层均呈阳性表达。PN．2周至PN-4周rd小鼠视网膜中外核层（ONL）细胞随着鼠龄增大逐渐减少，FasL蛋白在RPE、OPL、INL、IPL及GCL呈阳性表达；PN-2、3、4周rd小鼠RPE中FasL蛋白表达FI值分别为184．199±16．747、186．797±7．904和184．319±18．795，均明显高于同龄C57BL／6小鼠的160．402±22．851、160．995±22．799和105．787±17．676，差异均有统计学意义（t=-3．360，P=0．002；t’=-4．277，P=0．000；t=-12．175，P=0．000）；各周龄rd小鼠与C57BL／6小鼠间视网膜IPL中FasL蛋白表达的FI值差异均无统计学意义（均P〉0．05）。结论rd小鼠随着鼠龄增加视网膜ONL细胞逐渐减少，其RPE内免疫赦免相关抗原FasL蛋白的表达强度明显高于同龄C57BL／6小鼠。