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microRNA-215对人视网膜母细胞瘤细胞生长及抑癌基因Rb1表达的调控作用 被引量:3
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作者 杨林声 王理论 杜青卫 《海南医学》 CAS 2015年第24期3592-3597,共6页
目的研究micro RNA-215(mi R-215)在视网膜母细胞瘤(RB)组织中的表达及其临床意义,并探讨其对RB细胞活力、增殖及凋亡的影响。方法采用q RT-PCR检测51例RB患者及相应癌旁组织中mi R-215的表达并分析其与患者临床病理特征的相关性。在RB... 目的研究micro RNA-215(mi R-215)在视网膜母细胞瘤(RB)组织中的表达及其临床意义,并探讨其对RB细胞活力、增殖及凋亡的影响。方法采用q RT-PCR检测51例RB患者及相应癌旁组织中mi R-215的表达并分析其与患者临床病理特征的相关性。在RB细胞中转染mi R-215类似物或mi R-215抑制物,采用噻唑蓝比色法(MTT)、溴脱氧尿苷(Brd U)细胞增殖分析、Caspase3活性检测及流式细胞仪检测细胞活力、增殖及凋亡的影响。Western blot检测视网膜母细胞瘤蛋白1(Rb1)表达变化。结果 mi R-215在RB组织中的表达水平显著高于对应的癌旁组织(P<0.01);mi R-215表达与视神经浸润(P=0.002)及分化程度(P=0.041)有关;mi R-215在RB细胞系Y79及HXO-Rb44中的表达水平显著高于其在正常视网膜血管内皮细胞ACBRI^(^(-1))81中的表达水平(P<0.01);mi R-215抑制物显著降低HXO-Rb44细胞中mi R-215的表达水平并导致细胞活力降低、增殖能力下降、胞内Caspase3活性增加及凋亡细胞百分比增加;mi R-215类似物显著升高Y79细胞中mi R-215的表达水平并导致细胞活力升高、增殖能力增强及凋亡细胞百分比降低。同时,下调HXO-Rb44细胞中mi R-215水平显著升高细胞内Rb1蛋白表达水平,过表达Y79细胞中mi R-215水平显著降低细胞内Rb1蛋白表达水平。结论 mi R-215在视网膜母细胞瘤组织中表达升高且与恶性临床病理特征相关。mi R-215可增强视网膜母细胞瘤细胞活力、增殖能力并减少细胞凋亡,并可降低细胞内Rb1蛋白表达,提示mi R-215在视网膜细胞瘤的发生发展中发挥重要作用。 展开更多
关键词 microrna-215 视网膜母细胞瘤 肿瘤生长 临床意义
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Suppressive effect of microRNA-143 in retinoblastoma 被引量:3
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作者 Li-Lun Wang Hai-Feng Hu Yan-Qin Feng 《International Journal of Ophthalmology(English edition)》 SCIE CAS 2016年第11期1584-1590,共7页
AIM: To investigate micro RNA-143 expression and effect on suppression of retinoblastoma(RB) cells. METHODS: The expression of micro RNA-143 was investigated and compared in normal human retina tissue samples and ... AIM: To investigate micro RNA-143 expression and effect on suppression of retinoblastoma(RB) cells. METHODS: The expression of micro RNA-143 was investigated and compared in normal human retina tissue samples and in RB cell lines of Y79 and Weri1. The micro RNA-143 mimics were transfected into the RB cell lines separately, and its effect on RB cell lines was detected using reverse-transcription quantitative polymerase chain reaction and Western blotting methods. RESULTS: The micro RNA-143 expression was significantly suppressed in RB cell lines. Overexpression of micro RNA-143 significantly lowered cell viability and invasion of the RB cell lines, and increased the number of apoptotic cells. Meanwhile, the Bax expression was up-regulated and much higher in the micro RNA-143 mimics transfected group than that in the negative control and the micro RNA-143 inhibitor groups. CONCLUSION: Micro RNA-143 exhibits suppressive effects in RB. The current study provides the perspective of a potential therapeutic treatment for RB. 展开更多
关键词 retinoblastoma microrna-143 PROLIFERATION INVASION APOPTOSIS
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miR-215-5p调控YY1通过TGF-β1/Smad信号通路对PCOS大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响 被引量:2
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作者 陈莹莹 齐小雪 苟元钦 《西部医学》 2023年第5期662-669,共8页
目的探究MicroRNA-215-5p(miR-215-5p)在多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠中的表达及其对卵巢颗粒细胞(GC)凋亡的影响,并分析潜在机制。方法采用脱氢表雄酮(DHEA)建立PCOS大鼠模型,分离并培养原代PCOS大鼠卵巢GC,分为对照组(control组)、sh-NC... 目的探究MicroRNA-215-5p(miR-215-5p)在多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠中的表达及其对卵巢颗粒细胞(GC)凋亡的影响,并分析潜在机制。方法采用脱氢表雄酮(DHEA)建立PCOS大鼠模型,分离并培养原代PCOS大鼠卵巢GC,分为对照组(control组)、sh-NC组、sh-YY1组、sh-YY1+LY2109761组、miR-NC组、miR-215-5p mimic组、miR-215-5p mimic+pc-NC组、miR-215-5p mimic+pc-YY1组。TUNEL法检测PCOS大鼠卵巢组织GC凋亡;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测卵巢组织/GC中miR-215-5p、阴阳-1(YY1)mRNA表达;CCK-8法和平板克隆形成实验检测细胞增殖能力;流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot检测PCOS大鼠卵巢组织/GC中YY1、转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad4蛋白表达。结果miR-215-5p在PCOS大鼠卵巢组织中低表达,YY1 mRNA和蛋白水平在PCOS大鼠卵巢组织中显著升高(P<0.05);敲低YY1或上调miR-215-5p可显著增强PCOS大鼠卵巢GC增殖能力,抑制GC凋亡,升高TGF-β1、Smad4蛋白水平(均P<0.05);TGF-β/Smad4信号通路抑制剂LY2109761可显著减弱敲低YY1对卵巢GC凋亡的抑制作用(P<0.05);在过表达miR-215-5p的基础上,上调YY1可抑制TGF-β1/Smad信号通路的激活,显著减弱miR-215-5p mimic对PCOS大鼠卵巢GC凋亡的抑制作用(P<0.05)。结论miR-215-5p在PCOS中呈低表达,过表达miR-215-5p可能通过下调YY1,激活TGF-β1/Smad信号通路,促进PCOS大鼠卵巢GC增殖并抑制其凋亡。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征 microrna-215-5p 卵巢颗粒细胞 凋亡 阴阳-1 转化生长因子-β1/Smad信号通路
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视网膜母细胞瘤miRNA-215和Rb1蛋白表达及意义 被引量:1
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作者 明媚 罗文 《青岛大学学报(医学版)》 CAS 2019年第5期586-589,594,共5页
目的 探讨视网膜母细胞瘤组织microRNA-215(miRNA-215)、视网膜母细胞瘤蛋白(Rb1蛋白)表达及其与临床病理学特征的相关性。方法 选取视网膜母细胞瘤病人65例(73眼)手术切除的癌组织及其配对的癌旁正常组织,采用RT-PCR法检测两者miRNA-21... 目的 探讨视网膜母细胞瘤组织microRNA-215(miRNA-215)、视网膜母细胞瘤蛋白(Rb1蛋白)表达及其与临床病理学特征的相关性。方法 选取视网膜母细胞瘤病人65例(73眼)手术切除的癌组织及其配对的癌旁正常组织,采用RT-PCR法检测两者miRNA-215表达、Westernblot方法检测两者Rb1蛋白水平,并分析miRNA-215与Rb1蛋白相关性及二者与病人临床病理特征的相关性及预后的关系;进行细胞转染实验,采用噻唑蓝比色法(MTT)、Caspase-3活性检测、流式细胞术分析miRNA-215类似物及miRNA-215抑制物对人视网膜母细胞瘤细胞(Y79细胞)活力、增殖及凋亡的影响。结果 视网膜母细胞瘤肿瘤组织中miRNA-215的表达水平显著高于癌旁组织,Rb1蛋白表达水平显著低于癌旁组织,差异有显著性(t=-14.14、92.80,P<0.01)。分化型肿瘤组织中miRNA-215表达低于未分化型,Rb1蛋白表达高于未分化型;伴随神经浸润和淋巴结转移病人肿瘤组织中miRNA-215表达高于未出现神经浸润和淋巴结转移病人,Rb1蛋白表达低于未出现神经浸润和淋巴结转移病人(t=-55.30~344.30,P<0.05)。细胞转染结果显示,miRNA-215类似物能显著升高Y79细胞中miRNA-215的表达水平并导致细胞活力升高、增殖能力增强及凋亡细胞百分比降低,同时显著降低细胞内Rb1蛋白表达水平;miRNA-215抑制物则显著降低Y79细胞中miRNA-215的表达水平并导致细胞活力降低、增殖能力下降、胞内Caspase-3活性增加及凋亡细胞百分比增加,同时升高细胞内Rb1蛋白表达水平,差异有显著性(F=148.5~3938.0,P<0.01)。结论 视网膜母细胞瘤组织中miRNA-215和Rb1蛋白表达与临床病理学特征相关,可作为视网膜母细胞瘤预后的监测指标。 展开更多
关键词 视网膜母细胞瘤 miRNA-215 视网膜母细胞瘤蛋白质 病理学 临床
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下调miR-215-5p对TGF-β诱导的人肺成纤维细胞IMR-90增殖抑制作用观察 被引量:2
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作者 杜伟 郭丽娜 庞席宁 《山东医药》 CAS 2018年第40期15-19,共5页
目的探讨下调miR-215-5p对TGF-β诱导的人肺成纤维细胞IMR-90增殖的影响及其机制。方法将体外培养的IMR-90细胞分为对照组、TGF-β组、TGF-β+NC inhibitor组、TGF-β+miR-215-5p inhibitor组。对照组细胞正常培养; TGF-β组给予10 ng/... 目的探讨下调miR-215-5p对TGF-β诱导的人肺成纤维细胞IMR-90增殖的影响及其机制。方法将体外培养的IMR-90细胞分为对照组、TGF-β组、TGF-β+NC inhibitor组、TGF-β+miR-215-5p inhibitor组。对照组细胞正常培养; TGF-β组给予10 ng/m L的TGF-β处理细胞; TGF-β+NC inhibitor组和TGF-β+miR-215-5p inhibitor组细胞先采用NC inhibitor或者miR-215-5p inhibitor转染细胞,24 h后加入10 ng/m L的TGF-β处理细胞。采用MTT法检测各组在转染后24、48、72、96 h的细胞增殖能力;流式细胞术检测转染48 h后细胞周期变化情况;荧光定量PCR和Western blotting法检测转染48 h后各组细胞cyclin D1、RB1和α-SMA的表达。结果转染后48、72、96 h,TGF-β组细胞增殖能力高于对照组(P均<0. 05),TGF-β+miR-215-5p inhibitor组细胞增殖能力低于TGF-β+NC inhibitor组(P均<0. 05)。与对照组相比,TGF-β组G1期细胞比例降低,S期细胞比例升高(P均<0. 05);与TGF-β+NC inhibitor组相比,TGF-β+miR-215-5p inhibitor组G1期细胞比例增加,S期细胞比例降低(P均<0. 05)。与对照组相比,TGF-β组cyclin D1、α-SMA的表达升高,RB1的表达降低(P均<0. 05);与TGF-β+NC inhibitor组相比,TGF-β+miR-215-5p inhibitor组cyclin D1、α-SMA的表达降低,RB1的表达升高(P均<0. 05)。结论下调miR-215-5p对TGF-β诱导的人肺成纤维细胞IMR-90增殖具有抑制作用。该作用可能原因为下调miR-215-5p能够抑制RB1表达进而下调cyclin D1,阻碍TGF-β诱导的肺成纤维细胞的周期转换进而抑制肺成纤维细胞的增殖;同时,下调miR-215-5p也能够抑制α-SMA的表达阻碍TGF-β诱导的肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化。 展开更多
关键词 miRNA-215-5p 肺纤维化 细胞增殖 细胞周期蛋白 视网膜母细胞瘤基因1 Α-平滑肌肌动蛋白
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