NON-AQUEOUS REVERSED PHASE HPLC WITH LOW-WAVELENGTH UV DETECTION FOR TRIGLYCERIDE ANALYSIS

Glycerides are first separated to classes of triglycerides(TGs), diglycerides(DGs) and monoglycerides(MGs) by normal phase HPLC on silica gel column. Individual triglyceride separation is then achieved by non-aqueous reversed phase(NARP) HPLC on C_(18) column with UV detection at 215nm.

Reversed-Phase HPLC Analysis of Steviol Glycosides Isolated from Stevia rebaudiana Bertoni

High Performance Liquid Chromatography (HPLC) experiments have been performed on nine steviol glycosides namely rebaudioside A, steviolbioside, stevioside, rubusoside, rebaudioside B, rebaudioside C, rebaudioside D, rebaudioside F, and dulcoside A isolated from the leaves of Stevia rebaudiana using Reversed-Phase (RP) column. Using RP-HPLC method, the individual retention times for nine naturally occurring ent-kaurane diterpene glycosides of S. rebaudiana reported in JECFA have been determined at four different temperatures: 20℃, 40℃, 60℃, and 79℃. Also, calculated the relative retention times of the eight steviol glycosides steviolbioside, stevioside, rubusoside, rebaudioside B, rebaudioside C, rebaudioside D, rebaudioside F, and dulcoside A against the major steviol glycoside rebaudioside A. HPLC results suggested that temperatures 40℃ and 60℃ would be ideal conditions for better separation of steviol glycosides.

Characters of the Plateau of Methanol Increment in Frontal Analysis in Reversed Phase Liquid Chromatography

With insulin methanol water, and the ion pairing agent, hydrochloric acid and trifluroacetic acid (TFA), the character of the first plateau (FP) on the elution curve of frontal analysis in reversed phase liquid chromatography (RPLC) was investigated by on line UV spectrometry and identified with nuclear magnetic resonance (NMR) spectrometry and mass spectrometry. The profile of the FP is the same as that of a usual elution curve of methanol in frontal analysis (FA). When the insulin concentration was limited to a certain range, the height of the FP was found to be proportional to the insulin concentration in mobile phase and its length companying to shorten. The FP profile on the intersection of two tangents reflects the components of the microstructure in the depth direction of the bonded stationary phase layer and the desorption dynamics of the displaced components. The displaced methanol was quantitatively determined by NMR and on line UV spectrometries. TFA with high UV absorbance can not be used as an ion pairing agent for the investigation of the FP in RPLC, but it can be used as a good marker to investigate the complicated transfer process of components in the stationary phase in RPLC. A stoichiometric displacement process between solute and solvent was proved to be valid in both usual and FA in RPLC. From the point of view of dynamics of mass transfer, the solutes can only contact to the surface of stationary phase in usual RPLC, while solute can penetrate into it in FA of RPLC. The solvation of insulin in methanol and water solution as an example indicating the usage of the FP in the FA was also investigated in this paper.

离子对SPE-HPLC法检测生物检材中的百草枯

目的建立生物检材中百草枯的简便、快速、灵敏、可靠的高效液相色谱分析方法。方法生物检材酶解后,用以十二烷基三甲基溴化铵和十二烷基硫酸钠预处理过的C18固相柱萃取,HPLC/DAD进行分析。结果回收率81%～94%,检出限为1ng·mL-1,线性范围50ng·mL-1～1mg·mL-1,结论此方法适用于中毒生物检材中百草枯的检测。

益母草注射液HPLC指纹图谱研究

目的:建立益母草注射液 HPLC 指纹图谱分析方法。方法:应用反相 HPLC 离子对色谱法,采用 Aichrom Bond-AQ-C_(18)(5 μm,4.6 mm×250 mm)色谱柱,以0.1 mol·L^(-1)磷酸二氢钠溶液(用0.1 mol·L^(-1)磷酸氢二钠溶液调 pH 至5.5)为流动相,流速1.0 mL·min^(-1),检测波长242 nm。结果:通过指纹图谱相似度评价软件,对16批益母草注射液的 HPLC 指纹图谱进行了相似度计算,结果均大于0.9。结论:该方法简单可行,可用于益母草注射液的质量评价。

RP-HPLC法对乳制品中主要牛奶蛋白的分离及定量测定

建立一种基于反相高效液相色谱(RP-HPLC)的分析方法,对牛奶及其乳制品进行定量分析。此方法可一次分离牛奶及乳制品中的7种主要蛋白成分(κ-CN、αs2-CN、αs1-CN、β-CN、α-La、β-LgB、β-LgA),解决了加工后乳制品中变性蛋白定量不准确的问题和κ-CN、αs2-CN以及乳清蛋白中α-La、β-LgB和β-LgA难以分离的困难。各组分分离度均大于1,达到基线分离,回收率达88.9%～97.1%,相对标准偏差为0.8%～5.1%。该方法不需对样品进行离心,在测定清蛋白组分时,也不需提前去除优势蛋白酪蛋白,与传统的检测方法相比,具有准确、灵敏和快速等特点,可用于牛奶及其乳制品的质量控制和定量检测。

反相离子对HPLC法测定天仙子中的生物碱及TLC法鉴别天仙子和南天仙子

本文用离子对ＨＰＬＣ法测定了天仙子中莨菪碱和东莨菪碱的含量。莨菪碱和东莨菪碱的样品量与峰面积积分值的线性范围分别为０．２４４５～０．７３３２μｇ，ｒ＝０．９９９５和０．１８６４～０．５５９２μｇ，ｒ＝０．９９９９；平均回收率分别为：９８．８２％，ＲＳＤ＝３．４１％（ｎ＝５）和９７．８６％，ＲＳＤ＝１．８５％（ｎ＝５）。样品被处理后，所得色谱图分离度好，无干扰。并用ＴＬＣ法对天仙子（含中亚天仙子）和南天仙子进行了鉴别。为评价天仙子的真伪优劣提供了科学依据。

反相离子对HPLC法测定洋金花类生药中的东茛菪碱和阿托品

洋金花为茄科曼陀罗属植物白曼陀罗Datura metel等多种植物的花,具平喘止咳、镇痛、解痉功效,其主要成分为东莨菪碱和阿托品。洋金花商品药材中混有多种曼陀罗属植物的花,通过药材的成分分析对药材鉴定是有参考价值的。有关这类成分的分离及含量测定方法较多。

环境样品中生物可利用态镉的反相离子对-HPLC-荧光检测

A novel reserved\|phase ion\|pair liquid chromatographic method using hexadecyltrimethylammonium bromide（HTMAB） as an ion\|pair reagent for separating the complexes of metal and 8\|hydroxyquinoline\|5\|sulphonic acid（HQS） coupled with on\|line fluorescence detection has been developed. The chromatographic behavior of metal\|HQS complexes in the proposed system was systematically investigated.When the C\-\{18\} column modified by HTMAB and the suitable mobile phase coupled with fluorescence detection（\%λ\%\-\{ex\}=388 nm; \%λ\%\-\{em\}=518 nm） were employed, the detection limit of cadmium is 7.72 ng/mL with an injection volume of 20 μL, and the linear range of calibration curve for cadmium is 50\800 ng/mL. It was successfully applied to determination of bio\|available cadmium in polluted soils of China. Moreover, the possible species of Cd\|HQS on the column has been investigated by log\|log plot analysis.

灯笼果中噻菌灵的RP-HPLC-PDA残留分析

目的:建立反相高效液相色谱-二极管阵列检测器测定灯笼果中杀菌剂噻菌灵残留的分析法。方法:色谱柱为Shim-pack VP-ODS(150mm×4.6mm),检测波长为299nm,流动相为pH6.8的乙腈-0.02mol/L磷酸缓冲溶液(70:30,V/V),流速为0.6mL/min,进样量20μL。结果:噻菌灵在0.10～90.0μg/mL范围内与峰面积成良好线性关系(r=0.9995),检测限为0.05μg/mL,噻菌灵的回收率为87.9%～102.6%,相对标准偏差为0.98%～2.79%。结论:该方法操作简便快速,可作为灯笼果中噻菌灵含量监测的控制方法。

反相离子对HPLC法测定博士止咳露中多个成分的含量

采用反相离子对高效液相色谱法同时测定博士止咳露中盐酸苯肾上腺素、磷酸可待因、盐酸伪麻黄碱的含量。色谱柱为 Ｋｒｏｍａｓｉｌ Ｃ１８ 柱，流动相为含５ ｍ ｍｏｌ／ Ｌ 辛烷磺酸钠的甲醇 水乙酸（４０∶６０∶２） ，检测波长２４５ ｎｍ ，柱温４５ ℃。在此色谱条件下，三组分均获良好分离，平均回收率为９７６４ ％ ，９７６７ ％ 和９９９０ ％ ， Ｒ Ｓ Ｄ 分别为１４７ ％ ，１０３ ％ 和０４０ ％ 。

三联吡啶RP-HPLC法测定锌、铜、钴和镍

A new method has been developed for separation and determination of zinc,copper,cobalt and nickel based on their colour chelates with 6,6″-dimethyl-4′-phenyl-2,2′:6′,2″-terpyridine（TPY） by ion pair high performance liquid chromatography in a reversed phase mode.The suitable conditions are the methanol-water（80:20,V/V） containing 10mmol/L NaH2PO4-H3PO4 buffer solution（pH=5.0） and 3.0mmol/L sodium dodecyl sulfonate as mobile phase,on a Symmetry C18 column（3.9mmID×150mm）,the flow rate of the mobile phase is 1.0mL/min.Spectrophotometric detection was made at 340nm.The detective limits are 0.05,0.10,2.00 and 0.50ng/mL respectively.The method has good selectivity and sensitivity.It has been applied to the separation and determination of zinc,copper,cobalt and nickel in human hair and tobacco and the result is satisfied.

奶粉中三聚氰胺HPLC、IC分析方法的比对

采用反相离子对色谱法、亲水相互作用色谱法及阳离子交换色谱法测定奶粉中三聚氰胺的含量。奶粉样品前处理采用水-乙酸提取后过RP柱和甲酸提取后乙腈沉淀两种方法,反相离子对色谱法采用C18柱和10mmol/L庚烷磺酸钠与10mmol/L柠檬酸的缓冲溶液-乙腈(85:15,V/V)的流动相;亲水相互作用色谱法采用HILIC柱和20mmol/L甲酸胺-乙腈(10:90,V/V)的流动相;阳离子交换色谱法采用IonPac CS17阳离子交换柱和6mmol/L硫酸的流动相。流速1.0mL/min,检测波长240nm。结果表明,3种方法测定三聚氰胺在0.1～25.0mg/L范围内线性均很好(r=1.0000),样品加标回收率在93.91%～99.96%范围内。3种方法中,反相离子对色谱法对三聚氰胺的响应值最高,阳离子交换色谱法则能用最短的时间检测出三聚氰胺,而亲水相互作用色谱法在假阳性的判断上可作为其他两种方法的补充。

HPLC法测定注射用亚锡喷替酸中喷替酸的含量

目的：以四丁基硫酸氢铵为离子对试剂，采用离子对反相高效液相色谱法测定注射用亚锡喷替酸中喷替酸的含量。方法：采用SunFireTM C18色谱柱（4.6 mm ×150 mm，5μm），流动相为0.05 mol· L-1醋酸钠缓冲液（pH4.5）-甲醇（95∶5），内含5 mmol· L-1四丁基硫酸氢铵，流量1.0 mL· min-1，检测波长360 nm。结果：喷替酸在1.6～8μg范围内线性良好（ r＝0.9998）；平均加样回收率为99.1％， RSD为1.1％（ n＝9）；不同批号的注射用亚锡喷替酸中喷替酸的含量为100.1％～102.9％。结论：本方法简便、准确，重复性好，适用于注射用亚锡喷替酸的质量控制。

HPLC电化学检测法测定制药厂废水中硫脲和硫

本文建立了反相离子对液相色谱-电化学检测法同时测定制药厂废水中的硫脲和硫.流动相为10%甲醇+2.0mmol/L四丁基溴化铵(TBABr)+0.02ommol/L EDTA·2Na+0.01mol/LNaH_2PO_4缓冲溶液(pH5.5),流速为1ml/min,柱温40℃,检测电位.5V(vs,Ag/AgCl).工作曲线的线性范围是0—120,μg/ml,检出限为硫脲18μg/L、硫1.5μg/L.样品测定的回收率在97—104%范围内.

兔血中α－第二丁基对羟基苄醇的反相HPLC分析

α－第二丁基对经基苄醇是正在开发的新型中枢神经系统抑制药物和脑内显影剂。本文建立了该药物的反相高效液相色谱体内分析方法，测定兔血中药物浓度。用无水乙醇沉淀血浆蛋白兼提取药物，浓缩挥干，流动相溶解残渣进样，内标法定量。方法：快速、线性好、选择性强。最小检出量５ｎｇ，回收率９７．６９±４．７９％，日内和日间精密度为２．５３％和３．９３％。血中内源性杂质均不干扰测定。

PTC-氨基酸的HPLC分析

本文综述了氨基酸分析方法的发展,比较了各种方法的优缺点,着重系统地阐述了迅速发展的PTC氨基酸反相HPLC分析新方法的优越性、分析条件和应用。

标准曲线定量法在农药的HPLC中应用

利用 HP1 1 0 0的化学工作站 ,进行了一系列试验和比较。主要操作要点有 :当严格控制各项色谱条件的情况下 ,将曲线存储在仪器中 ,然后即可得到试验结果。得出的结论是 :标准曲线定量法和单点校正法 ,两者的结果无显著性差异。

RP-HPLC法测定甘肃油松针叶中绿原酸含量

目的:运用RP-HPLC法建立绿原酸分析方法。方法:采用Waters 1525液相色谱附二极管阵列检测器与紫外检测器,Waters ODS C18柱(3.9 mm×150 mm,4μm),流动相:2.5 mmol/L四丁基溴化铵水溶液-乙腈(87∶13),检测波长:325 nm,流速:1 mL/min;柱温:25℃。结果:绿原酸线性范围为0.41-41μg/mL,r=0.999 9,样品平均回收率为99.81%,RSD为1.49%。结论:本方法简便、准确可靠,适用于松针叶及成分复杂且含量低的常绿植物中绿原酸含量测定。

呱仑酸钠血药浓度HPLC测定方法研究

目的 :建立水溶性药物呱仑酸钠血药浓度的高效液相色谱分析方法。方法 :以对二甲氨基苯甲醛为内标 ,在比较了固相萃取、离子对萃取及沉淀蛋白 -脱水法等 3种预处理方法的基础上 ,采用沉淀蛋白 -脱水法预处理兔血浆样品 ,分析柱为 μBondapakC18柱 (2 5 0mm× 4 6mm ,10 μm) ,流动相为 pH 7 0的 0 0 1mol·L-1磷酸盐缓冲液 -甲醇 (5 0∶5 0 ) ,流速1mL·min-1,在 2 93nm波长处检测 ,按内标法定量。结果 :血药浓度线性范围为 0 1～ 10 0mg·L-1(r=0 9997) ,最低检测浓度为 0 0 2mg·L-1(S/N >3) ,萃取回收率在 79 5 %～ 86 4% (n =5 ) ,分析方法回收率在 93 1%～ 95 5 % (n =5 ) ,日内和日间RSD分别为 1 2 %～ 1 8%和 1 9%～ 3 1% (n =5 )。结论 :本法简便、准确、精密度高、重现性好 。