补阳还五汤合参芪地黄汤化裁调控VEGF-C/VEGFR3通路抑制淋巴管新生对糖尿病肾病小鼠的保护作用

目的基于调控VEGF-C/VEGFR3通路抑制淋巴管新生探讨补阳还五汤合参芪地黄汤化裁对糖尿病肾病(DKD)小鼠的保护作用及机制。方法将24只雄性db/db小鼠随机分为模型组、中药组(补阳还五汤合参芪地黄汤化裁,生药量24.44 g·kg-1)和西药组(厄贝沙坦,13.5 mg·kg-1),每组8只,另外取8只db/m小鼠作为对照组。灌胃给药,每日1次,连续12周。检测小鼠血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、尿白蛋白/肌酐比值(ACR)及肾脏指数;采用HE、Masson染色法观察肾脏组织病理变化;免疫组化法检测肾脏组织纤连蛋白(FN)、Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)、波形蛋白(Vimentin)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子β1(TGF-β1)、血管内皮生长因子受体3(VEGFR3)、血管内皮生长因子C(VEGF-C)、淋巴管内皮透明质酸受体1(LYVE-1)、平足蛋白(PDPN)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)的表达;Western Blot法检测肾脏组织ColⅠ、Vimentin、α-SMA、TGF-β1、VEGFR3、VEGF-C、LYVE-1、TNF-α、IL-1β蛋白表达;Real-time PCR法检测肾脏组织FN、ColⅠ、TGF-β1、VEGF-C、VEGFR3、TNF-α、IL-1βmRNA表达。结果与对照组比较,模型组小鼠的血清FBG、TG、TC、ACR水平及肾脏指数均明显升高(P<0.05);肾小球肥大,系膜外基质增加,基底膜增厚,囊腔变窄,肾小管上皮细胞变性、坏死,间质有大量炎性细胞浸润,肾小管萎缩,纤维化水平明显升高(P<0.05);肾间质中FN、ColⅠ、Vimentin、α-SMA、TGF-β1、VEGFR3、LYVE-1、TNF-α、IL-1β蛋白表达,胞质中VEGF-C蛋白表达及肾小管毛细血管周围VEGFR3、PDPN蛋白表达均明显上调(P<0.05);肾脏组织中ColⅠ、Vimentin、α-SMA、TGF-β1、VEGFR3、VEGF-C、LYVE-1、TNF-α、IL-1β蛋白表达均明显上调(P<0.05);肾脏组织中FN、ColⅠ、TGF-β1、VEGF-C、VEGFR3、TNF-α、IL-1βmRNA表达水平均明显升高(P<0.05)。与模型组比较,中药组小鼠的血清TG、TC、ACR水平均明显降低(P<0.05);肾脏组织损伤有不同程度好转,炎性细胞浸润有一定程度减轻,纤维化水平明显降低(P<0.05);肾间质中FN、ColⅠ、Vimentin、α-SMA、TGF-β1、VEGFR3、LYVE-1、TNF-α、IL-1β蛋白表达,胞质中VEGF-C蛋白表达及肾小管毛细血管周围VEGFR3、PDPN蛋白表达均明显下调(P<0.05);肾脏组织中ColⅠ、Vimentin、α-SMA、TGF-β1、VEGFR3、VEGF-C、LYVE-1、TNF-α、IL-1β蛋白表达均明显下调(P<0.05);肾脏组织中FN、ColⅠ、TGF-β1、VEGF-C、VEGFR3、TNF-α、IL-1βmRNA表达水平均明显降低(P<0.05)。结论补阳还五汤合参芪地黄汤化裁可降低DKD小鼠肾脏组织炎症及纤维化水平,其机制可能与调控VEGF-C/VEGFR3通路抑制淋巴管新生有关。

分型辨治儿童腺样体肥大简况

儿童腺样体肥大可归属"鼾眠""鼻窒""鼻渊""鼻鼽""窠囊""颃颡""乳蛾""咳嗽""痰核"范畴,与肺、脾、肾、痰阻热盛有关。基本证型有肺脾气虚、肺肾阴虚、气血瘀阻、痰瘀互结、少阳不利、肝郁脾虚、外感风热、肺热血瘀等。临床以异功散合玉屏风散、六味地黄丸合苍耳子散、金匮肾气丸、补中益气丸、补阳还五汤、小柴胡汤合龙胆泻肝汤、二陈汤、银翘散、四逆散及自拟方剂对症治疗,能有效避免手术带来的并发症,保留儿童腺样体的免疫功能,改善患儿的生活质量。亦有按病程-时期等辨治。小儿多正虚,寒凉碍阳,损伤脾胃,宜少用。

补阳还五汤合参芪地黄汤化裁含药血清对高糖诱导人肾小管上皮细胞株间充质转化的影响及机制研究

目的:观察补阳还五汤合参芪地黄汤化裁含药血清对肾小管上皮细胞间充质转化及Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的影响。方法:10只SD大鼠随机分为空白血清组和中药血清组,中药血清组给予补阳还五汤合参芪地黄汤化裁灌服,空白血清组灌以同等体积的饮用水,连续灌胃7d。成功制备空白血清和中药血清,培养人近端肾小管上皮细胞(human proximaltubular epithelial cell line,HK-2),细胞增殖检测试剂盒(cell counting kit-8,CKK8)筛选空白血清及中药血清最佳干预浓度,以及最佳干预时间。将HK-2细胞分为正常组(葡萄糖5.5 mmol/L+10%空白血清)、对照组(葡萄糖5.5 mmol/L+10%中药血清)、模型组(葡萄糖30 mmol/L+10%空白血清)、中药组(葡萄糖30 mmol/L+10%中药血清),显微镜下观察各组细胞形态学变化,免疫荧光法检测钙黏附蛋白-E(E-cadherin)和α-平滑肌肌动蛋白(smooth muscle actin alpha,α-SMA)表达,Western blot法检测Wnt4及β-catenin的表达。结果:CCK8筛选出最佳空白血清和中药血清干预浓度均为10%,最佳干预时间为48 h,与正常组比较对照组HK-2形态、E-cadherin和α-SMA的表达以及Wnt4和β-catenin的表达量比较差异均无统计学意义(P>0.05);与正常组比较模型组HK-2细胞变成长梭形,细胞间隙变大,E-cadherin表达减少,而α-SMA表达增多,Wnt4及β-catenin的表达量明显增多,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较中药组HK-2细胞形态及密度有一定逆转,E-cadherin表达增多,而α-SMA表达减少,Wnt4及β-catenin的表达量均显著减少,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:补阳还五汤合参芪地黄汤化裁含药血清可以改善高糖诱导的HK-2细胞株的间充质转化,并与抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。

辨证治疗高血压病临床观察

目的:探讨辨证治疗高血压病的临床疗效。方法:260例高血压病患者中肝阳上亢证98例,治以清肝泻火、平肝潜阳,方用龙胆泻肝汤合天麻钩藤饮(方药组成:龙胆草10 g,栀子10 g,黄芩12 g,天麻20 g,钩藤15 g,生石决明20 g,川牛膝20 g,杜仲15 g,夜交藤30 g,甘草5 g)治疗;肝肾阴虚证102例,治以滋补肝肾、平肝潜阳,方用杞菊地黄丸(方药组成:枸杞子20 g,熟地黄25 g,山药30 g,牡丹皮10 g,菊花15 g,生龙骨、生牡蛎各20 g,杜仲15 g,川牛膝15 g,桑寄生20 g,甘草6 g)治疗;痰湿内盛证20例,治以祛痰化湿、升清降浊,方用半夏白术天麻汤加减(方药组成:制半夏12 g,白术15 g,天麻10 g,石菖蒲10 g,远志12 g,郁金15 g,陈皮12 g,竹茹15 g,茯苓20 g,薏苡仁15 g,甘草6 g)治疗;瘀血内停证15例,治以益气养血、化瘀通络,方用血府逐瘀汤合补阳还五汤(方药组成:柴胡10 g,黄芪20 g,当归12 g,川芎9 g,桃仁9 g,红花9 g,地龙20 g,川牛膝20 g,川续断20 g,杜仲12 g,甘草6 g)治疗;肾阳虚衰证25例,治以温补肾阳,方用金匮肾气丸合右归丸(方药组成:制附子9 g,肉桂6g,熟地黄20 g,山茱萸12 g,山药20 g,泽泻10 g,牡丹皮12 g,茯苓15 g,仙茅12 g,淫羊藿15 g,甘草6 g)治疗。结果:通过中医辨证治疗260例患者中显效221例占85%,有效26例占10%,无效13例占5%,有效率为95%。结论:辨证治疗高血压病疗效显著。

补阳还五汤合参芪地黄汤化裁对Ⅲ-Ⅳ期糖尿病肾病的临床疗效及肾小管损伤的保护作用

目的观察补阳还五汤合参芪地黄汤化裁治疗气阴两虚、络脉瘀阻证糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)Ⅲ-Ⅳ期患者临床疗效及对肾小管损伤的保护作用。方法将132例符合纳入标准的DKD患者分为对照组和中药组,各66例。对照组给予西医基础治疗并联合恩格列净片,中药组在对照组基础上联合补阳还五汤合参芪地黄汤化裁方,两组患者连续用药12周。观察两组患者临床疗效,比较两组患者治疗前后中医证候积分、糖尿病生存质量特异性量表(diabetes specific quality of life scale,DSQL)评分、糖脂代谢指标、肾功能指标、肾小管损伤指标、炎症因子的表达及不良反应的发生率。结果中药组的总有效率(87.93%)明显高于对照组(75.00%)(P<0.05)。治疗后,两组患者的中医证候积分、DSQL评分、糖脂代谢指标、肾小管损伤指标、炎症因子的表达显著降低,血白蛋白(albumin,ALB)明显升高(P<0.05),以中药组的中医证候积分、DSQL评分、肾小管损伤指标、炎症因子的表达降低更明显(P<0.05)。此外,与治疗前相比,治疗后对照组血尿素氮(urea nitrogen,BUN)、血肌酐(creatinine,Scr)无明显差异(P>0.05),而中药组BUN、Scr明显降低(P<0.05);治疗后两组比较,BUN、Scr差异有统计学意义(P<0.05)。两组不良反应发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论补阳还五汤合参芪地黄汤化裁治疗DKD的疗效确切,可有效地降低患者尿蛋白排泄,调节糖脂代谢紊乱,抑制炎症因子表达,改善肾脏损伤,延缓DKD进展,且安全性良好。

补阳还五汤合参芪地黄汤化裁对糖尿病肾病小鼠肾小管间质纤维化的作用及机制研究

目的研究补阳还五汤合参芪地黄汤化裁对糖尿病肾病小鼠肾小管间质纤维化的作用及机制。方法取8只db/m小鼠作为对照组,16只db/db小鼠随机分为模型组和中药组,给予补阳还五汤合参芪地黄汤化裁干预12周,留尿,检测各组小鼠尿白蛋白/肌酐比值(albumin/creatinineratio,ACR);取肾组织,进行苏木素-伊红(HE)、高碘酸希夫(PAS)和天狼猩红(Pmicrosirius-Red)染色,检测肾组织病理损伤和纤维化程度;采用免疫组化法检测肾组织α-平滑肌肌动蛋白(α-smoothmuscle actin,α-SMA)和E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达;采用qRT-PCR法检测肾组织Ⅲ型胶原(collagen-Ⅲ,Col-Ⅲ)和纤黏蛋白(fibronectin,FN) mRNA表达;采用Westemblotting法检测肾组织Col-Ⅲ、FN、α-SMA、E-cadherin及Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达。结果与模型组比较,中药组小鼠ACR水平明显降低(P<0.05);肾脏病理损伤和纤维化减轻;α-SMA蛋白在肾间质的表达减少,E-cadherin蛋白在肾小管上皮细胞的表达增加;肾组织Col-Ⅲ和FNmRNA表达水平明显降低(P<0.05);肾组织Col-Ⅲ、FN、α-SMA、Wnt4、磷酸化糖原合酶激酶3β(phosphorylated glycogen synthase kinase 3β,p-GSK3β)、β-catenin和转化生长因子-β1 (thansforminggrowthfactor-β1,TGF-β1)蛋白表达水平显著降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论补阳还五汤合参芪地黄汤化裁可以减轻糖尿病肾病小鼠的肾组织病理损伤,减轻肾小管间质纤维化程度,其机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路及其介导的肾小管上皮细胞向间充质转化有关。