荷瘤小鼠脾细胞NK活性及rhIL-2和rhIFN-α2a对其活性的影响

观察文氏腹水瘤荷病不同时期小鼠阵细胞NK活性的变化，并在体外检测重组人白细胞介素-2（rhIL－2）、重组人干扰素-a2a（rhIFN－a2a）对荷瘤八天小鼠脾细胞NK活性的影响。结果显示，荷病小鼠牌细胞NK活性在荷瘤第四天已明显降低（与对照组相比P＜0．001），第八天、第十二天NK活性继续降低，但荷瘤第八天和第十二天相比，血活性无显著性差异（P＞0．05）；rhIL－2和rhIFN－a2a对荷瘤八天小鼠NK活性均有明显的增强作用；但rhIL－2对荷瘤小鼠脾细胞NK活性的增强作用明显高于rhIFN－a2a（P＜0．001）。说明荷瘤小鼠脾细胞NK活性受到明显抑制，NK活性降低可用rhIL－2或rhIFN－a2a改善，但rhIL-2明显优于rhIFN－a2a。

YPEG-rhIFN-α_(2a)修饰位点结构解析

目的对Y型PEG化重组人干扰素α_(2a)的PEG修饰位点进行了相关研究。方法首先采用HPLC SP方法对YPEG-rhIFN-α_(2a)的不同修饰位点组分进行分离;然后用TPCK胰酶酶切rhIFN-α_(2a)和YPEG-rhIFN-α_(2a),通过HPLC-RPC法分离酶切肽段,进而用质谱法(MALDI-TOF MS)解析rhIFN-α_(2a)肽段,获得rhIFN-α_(2a)完整的TPCK胰酶肽图信息;最后对比分析rhIFN-α_(2a)和YPEG-rhIFN-α_(2a)的HPLC-RPC TPCK胰酶肽图,结合N-端氨基酸序列测定法测定PEG肽段的氨基酸序列,确认YPEG-rhIFN-α_(2a)的PEG修饰位点。结果及结论结果表明,YPEG-rhIFN-α_(2a)的PEG修饰位点主要为Lys134和Lys31。

应用pET系统表达rhIFN-α2b基因的研究

目的 以构建的pET28a为表达载体,探讨人 IFN-α2b基因在pET系统中的表达。方法 合成引物,通过PCR扩增人 IFN-α2b基因并引入点突变,在不改变天然 IFN-α2b氨基酸序列的前提下,使原 IFN-α2b基因4个大肠杆菌稀有密码子改变为偏爱密码子,在起始密码子后,编码前16个氨基酸的碱基序列均成为大肠杆菌的偏爱密码子。将PCR产物次级克隆人pET28a载体,构建重组表达载pET28a-IFN-α2b。筛选正确的重组表达质粒pET28a-IFN-α2b转入感受态表达菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达,粗提并检测 IFN-α2b活性。结果 重组质粒pET28a-IFN-α2b在宿主菌 BL21(DE3)中表达出的rhIFN-α2b以可溶性蛋白形式存在于粗提上清液中,与原来 pBV889系统表达的干扰素相比,具有更高的生物学活性。结论 应用pET表达系统可表达出具有更高生物学活性的rhIFN-α2b蛋白。

抗妇炎胶囊联合重组人干扰素α2b治疗慢性宫颈炎伴人类乳头瘤病毒感染的效果

目的探讨抗妇炎胶囊联合重组人干扰素(rhIFN)-α2b治疗慢性宫颈炎(CC)伴人类乳头瘤病毒(HPV)感染的效果。方法选取我院2020年3月~2021年7月收治的90例CC伴HPV感染患者作为观察对象,按随机数字表法分为C组和O组,各45例。C组给予rhIFN-α2b治疗,O组在C组基础上增加抗妇炎胶囊。对比两组的治疗效果、阴道灌洗液炎性细胞因子及HPV载量、复发率。结果治疗后,O组的总有效率高于C组(P<0.05);O组患者阴道灌洗液中的白介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-2、IL-6、IL-17水平低于C组,IL-10水平高于C组(P<0.05)。停药后6个月,O组的HPV载量、复发率低于C组(P<0.05)。结论抗妇炎胶囊联合rhIFN-α2b可有效降低CC伴HPV感染患者的病毒载量,降低其炎症因子水平,提高治疗效果,并能降低复发率。

重组人干扰素α2a栓剂治疗宫颈高危型人乳头瘤病毒感染的疗效

目的评价重组人干扰素α2a(recombinant human interferonα2a,rhIFNα2a)栓剂治疗宫颈高危型人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染的疗效。方法以200例确诊高危型HPV阳性患者作为研究对象,随机分为观察组(患者阴道局部用rhIFNα2a栓剂,隔日1次,10次为1个疗程,连续使用3个疗程)和对照组(不使用药物),每组100例。疗程结束后6个月采用第二代杂交捕获法检测HPV病毒载量,并计算两组患者的转阴率和总有效率。结果观察组患者的转阴率和总有效率(分别为89%和94%)明显高于对照组(分别为63%和65%),且差异均有统计学意义(P<0.01)。结论rhIFNα2a栓剂局部给药治疗宫颈高危型HPV感染具有较好的疗效。