体外rhIL-1β诱导髁状突软骨细胞HSP70的表达及其意义

目的 明确热休克蛋白 70 (HSP70 )在人重组白细胞介素 - 1(rhIL - 1β)刺激下对下颌骨髁状突软骨细胞的保护作用。方法 通过原代细胞培养获得兔髁状突软骨细胞 ,在生长良好的第三代软骨细胞中分别加入不同浓度的rhIL - 1β ,并利用原位杂交及免疫组织化学技术检测rhIL - 1β处理软骨细胞后HSP70的表达变化。 结果正常髁状突软骨细胞胞浆内有HSP70蛋白弱表达 ,rhIL - 1β(10ng/ml)作用 12h后HSP70出现表达升高 ,部分细胞核内也可见表达 ,48h后信号开始减弱。HSP70mRNA的表达与蛋白表达基本一致。结论 一定浓度的rhIL -1β刺激髁状突软骨细胞可诱导HSP70的转录及蛋白合成 ,提示HSP70可能在骨关节炎症损伤中对软骨细胞起到保护作用。

rhIL-1β对四氧嘧啶型糖尿病大鼠胰腺损伤的保护作用

采用ＡＢＣ免疫组织化学染色及体视学技术，观察了白介素－１β（ｒｈＩＬ－１β）对四氧嘧啶引起的大鼠胰腺Ｂ细胞损伤的保护作用。皮下注射四氧嘧啶（１５０ｍｇ／ｋｇ）的大鼠４８ｈ后，其血浆胰岛素浓度显著下降，血糖浓度显著升高，ＡＢＣ免疫组织化学染色及体视学技术测得其胰岛素免疫反应阳性胰岛的数密度和体密度均为０。预先皮下注射ｒｈＩＬ－１β的大鼠在皮下注射四氧嘧啶（１５０ｍｇ／ｋｇ）４８ｈ后，尽管其血浆胰岛素浓度显著下降，但其血糖浓度与正常对照组相比升高不明显。与四氧嘧啶组相比较，其血糖水平显著下降，ＡＢＣ免疫组织化学染色及体视学技术测得其胰岛素免疫反应阳性胰岛的数密度和体密度值，均显著高于四氧嘧啶组。本文结果提示，ｒｈＩＬ－１β预处理对四氧嘧啶型糖尿病大鼠的胰腺损伤具有一定的保护作用。

rhIL-1β、rhIL-2和rhIL-6对体外培养海马神经胶质细胞c-fos表达的影响

采用免疫组织化学方法观察了重组人白细胞介素-1β、重组人白细胞介素-2和重组人白细胞介素-6对体外培养大鼠海马神经胶质细胞c-fos表达的影响。结果证明，培养12d的海马神经胶质细胞与重组人白细胞介素-1β（100U／ml）、重组人白细胞介素-2（200U／ml）和重组人白细胞介素-（200U／ml）一起孵育2h后出现FOS-免疫反应阳性的细胞核，随着所给剂量的逐渐加大，FOS反应阳性胞核数量也逐渐增多．图象分析的结果显示，FOS反应阳性胞核的平均光密度亦随剂量的逐渐加大而逐渐增加．本研究的结果提示：重组人白细胞介素-1β、-2及-6均能诱导体外培养大鼠海马神经胶质细胞c-fos的表达。说明三者对体外培养的海马神经胶质细胞具有生物学作用。推测c－fos表达可能是这些细胞因子发挥生物效应的重要中间途径。

Protective effect of rhIL-1β on pancreatic islets of alloxan-induced diabetic rats

AIM: To observe the protective effect of rhIL-1β on pancreatic islets of alloxan-induced diabetic rats. METHODS: Protection of rhIL-1β on pancreatic islets of alloxan-induced diabetic rats (n=5) was demonstrated with methods of immunohistochemistry and stereology. The concentration of serum glucose was measured by GOD method and that of serum insulin by RIA. RESULTS: The concentration of serum glucose increased but that of insulin decreased after administration of alloxan (150mg/kg), and the volume density and numerical density of the islets were zero. In rhIL-1β pretreated rats, although the concentration of serum insulin decreased (from 11.9±3.0mIU/L to 6.1±1.6mIU/L,P<0.05), that of glucose was at normal level compared with the control group. As compared with alloxan group, the concentration of serum glucose in rhIL-1β pretreated rats decreased (from 19.4±8.9mmol/L to 12.0±4.0mmol/L, P<0.05) and the volume density increased(0/L to. 1/L, P<0.05). CONCLUSION: rhIL-1β pretreatment may have protective effect on the islets of alloxan-induced diabetic rats.

不同剂量rhIL-1β保护γ线照射小鼠的实验研究

以60Coγ射线照射小鼠为模型，研究了rhIL－1β不同剂量对照射小鼠造血恢复的影响。结果给予不同剂量rhIL－1β（3×103u／鼠～3×105u／鼠）后可使6．5Gy照射小鼠外周血白细胞、红细胞及血小板的恢复明显加快，照后10d骨髓CFU－GM、BFU－E及BFU－Meg含量随给药剂量加大而增加。表明rhIL－1β能促进照射小鼠的造血功能恢复。

rhIL-1β保护照射小鼠免疫系统的实验研究

ｒｈＩＬ－１β保护照射小鼠免疫系统的实验研究谭筱江邬梦麒凌世淦一定剂量范围的γ射线照射机体可使机体在一定时间内免疫功能低下［１］，并出现一系列的并发症。白细胞介素－１主要是由单核巨噬细胞产生的，近年研究发现它对多种免疫活性细胞有重要调节作用。随着ＩＬ...

rhIL-1α和rhTNF-α对人成纤维滑膜细胞PGE_2受体和Gαs的影响及芍药苷的作用

目的探讨rhIL-1α和rhTNF-α对人成纤维样滑膜细胞(FLS)PGE2受体(EP2)及Gαs表达的影响及芍药苷(Pae)的作用。方法体外培养人FLS,使用不同浓度的rhIL-1α和rhTNF-α刺激人FLS,观察EP2及Gαs蛋白表达的情况,观察Pae对其的影响。采用免疫荧光标记法结合激光共聚焦显微镜分析技术检测人FLS的EP2表达,Western blot检测Gαs表达。结果 rhIL-1α(0.1、1、10μg/L)和rhTNF-α(0.2、2、20μg/L)明显降低人FLS EP2和Gαs表达,Pae(10-8、10-7、10-6、10-5mol/L)可上调人FLS的EP2和Gαs表达。结论 Pae恢复rhIL-1α和rhTNF-α刺激后EP2和Gαs的表达可能是其抑制滑膜细胞增殖和亢进分泌功能的分子机制之一。

重组人白细胞介素1β及其三种突变体生物学活性的比较

重组人白细胞介素１β及其三种突变体生物学活性的比较贾卫郭甫坤１刘雪松韩卫宁宋晓国１凌世淦１金伯泉（第四军医大学免疫学教研室，西安７１００３２１军事医学科学院基础医学研究所，北京１００８５０）白细胞介素１（ＩＬ１）为具有重要生物学活性的细胞因子，其在...

重组人白细胞介素-1β对化疗小鼠巨核系造血及存活率的影响

目的：观察重组人白细胞介素１β（ｒｈＩＬ－１β），对用细胞毒化疗药物后，机体巨核系造血功能恢复及存活率的影响。结果：①给予不同剂量ｒｈＩＬ－１β（３×１０３～３×１０５Ｕ／鼠）后小鼠腹腔注射半数致死量环磷酰胺，外周血血小板的恢复明显加快，其中以３×１０５Ｕ剂量组效果最佳；注射后５ｄ骨髓ＢＦＵ－Ｍｅｇ含量随给药剂量加大而增加。②给予不同剂量ｒｈＩＬ－１β（３×１０３～３×１０５Ｕ／鼠）后小鼠腹腔注射致死量环磷酰胺，３０ｄ存活率各用药组较对照组均有提高，其中以３×１０５Ｕ组结果最佳（Ｐ＜００５）。结论：ｒｈＩＬ－１β能促进注射半致死量环磷酰胺的小鼠巨核系造血功能恢复，并提高注射致死量环磷酰胺小鼠的３０ｄ存活率。

双向电泳分析重组人白细胞介素-1β对人牙髓细胞的影响

目的:观察rhIL-1β对培养的HDPCs产生蛋白质的影响,揭示rhIL-1β与牙髓炎的关系。方法:在HD-PCs的培养液中加入rhIL-1β,用2-DE分离HDPCs全蛋白,获得对照组和诱导组HDPCs蛋白质图谱,ImageMaster2DElit 5.0软件分析确认差异表达蛋白。结果:比较对照组和诱导组蛋白质图谱,发现了39个蛋白质点差异明显。其中15个蛋白质点在诱导组高表达,新增13个蛋白质点,7个蛋白质点低表达,4个蛋白质点仅在对照组中表达。结论:HDPCs对rhIL-1β的应答反应是一个非常复杂的过程,多种蛋白质分子涉及其中。

细胞因子rhIL—1β、rhIL—2及rhIL—6对大鼠海马神经元营养作用的研究

本工作采用显微测量、图像分析和流式细胞分析方法，研究了细胞因子ｒｈＩＬ—１β、ｒｈＩＬ－２及ｒｈＩＬ—６对新生大鼠海马培养神经元突起生长发育、胞体生长状态、神经元存活数及培养过程中蛋白总量影响。结果显示，这３种细胞因子均对海马培养神经元的突起生长，胞体发育以及发育过程中神经元的蛋白质合成具有明显的促进作用，并且在提高海马培养神经元存活、延长存活时间方面有较为显著的效应。提示白介素类细胞因子ｒｈＩＬ—１β、ｒｈＩＬ－２及ｒｈＩＬ—６对海马神经元具有营养作用。

重组人白细胞介素-1β对冷冻后小鼠桑椹胚体内外发育率的影响

本试验探讨了重组人白细胞介素－１β（ｒｈＩＬ－１β）对小鼠桑椹胚玻璃化冷冻后体内外发育的影响。结果表明：当ｒｈＩＬ－１β添加浓度为５、５０、５００ＩＵ／ｍｌ时，对解冻后的胚胎经体外培养，发育率（８７％～１００％）与对照组（９４％）相比无显著性差异（Ｐ＞００５）。而浓度提高到１０００ＩＵ／ｍｌ时，胚胎的发育受到抑制。解冻后胚胎在含有５、５０、５００ＩＵ／ｍｌ浓度的ｒｈＩＬ－１β培养液中培养３～４ｈ后移植于假妊娠３ｄ的受体鼠，移植妊娠率（８６％、１００％、８３％）高于对照组（５６％），特别是５０ＩＵ／ｍｌ处理组与对照组有极显著差异（Ｐ＜００１）。而浓度为１０００ＩＵ／ｍｌ处理组的胚胎移植妊娠率（３０％）低于对照组。试验证明，添加浓度为５～５００ＩＵ／ｍｌｒｈＩＬ－１β的培养液，对解冻后胚胎的体外发育率无影响，而且能够显著提高移植妊娠率。

rhIL 1β、rhIL 2和rhIL 6诱导体外培养大鼠海马神经元Fos表达——免疫组织化学研究

采用免疫组织化学方法， 观察了人重组白细胞介素１ （ｒｈＩＬ１β）、人重组白细胞介素２ （ｒｈＩＬ２）和人重组白细胞介素６ （ｒｈＩＬ６） 诱导体外培养大鼠海马神经元Ｆｏｓ表达。结果显示， 培养１２ ｄ 的海马神经元分别与ｒｈＩＬ１β、ｒｈＩＬ２ 和ｒｈＩＬ６ 培养２ｈ 后， Ｆｏｓ免疫反应（ＦｏｓＩＲ） 阳性细胞百分率增多。随着所给剂量增加，ＦｏｓＩＲ阳性细胞百分率明显增多。图像分析的结果显示，ＦｏｓＩＲ阳性细胞的平均光密度亦随所给剂量的增大而增加。以上结果表明， ｒｈＩＬ１β、ｒｈＩＬ２ 和ｒｈＩＬ６ 均能诱导体外培养大鼠海马神经元Ｆｏｓ表达。提示ｒｈＩＬ１β、ｒｈＩＬ２ 和ｒｈＩＬ６ 对体外培养的大鼠海马神经元具有生物学作用。推测Ｆｏｓ表达可能是ｒｈＩＬ１β、ｒｈＩＬ２ 和ｒｈＩＬ６ 等细胞因子发挥生物效应的重要中间途径。

重组人白细胞介素-1受体拮抗剂抗实验性肝纤维化作用

目的 :观察rhIL 1ra抗大鼠实验性肝纤维化的作用。方法 :以Wistar大鼠为实验观察对象 ,采用 40 5四氯化碳皮下注射 ,按每 1 0 0g体重 0 .3ml(首剂为 0 .5ml/ 1 0 0g体重 )皮下注射 ,每周 2次 ,共 1 6次 ,诱导肝纤维化模型。rhIL 1ra理组于实验第 1天开始注射四氯化碳时按每 1 0 0g体重 0 .5mg肌肉注射rhIL 1ra ,每日 1次。于实验 1 7、2 9、43、57日每组分别处死动物 6 1 0只 ,取血检测血清生化指标 ,取肝作组织学和Ⅰ、Ⅲ胶原和LN半定量分析。结果 :rhIL 1ra处理组各期大鼠血清ALT、AST及PCⅢ、CⅣ、LN及HA含量明显下降 ;实验 8周时肝纤维化程度明显减轻 ,Ito细胞增生受到抑制 ,肝组织内Ⅰ、Ⅲ型胶原和LN沉积明显减少。结论 :rhIL

IL-1β对大鼠胆碱能神经元的影响

目的 探讨 IL- 1β对大鼠胆碱能神经元的损伤作用及机制。方法 将 IL- 1β缓慢释放颗粒 (IL- 1βpellet)植入大鼠右侧 Meynert核 (nb M,基底核 ) ,复制胆碱能系统受损的动物模型 ;将不同剂量的人重组白细胞介素 - 1β(rh IL- 1β)加入培养大鼠前脑基底神经元中 ,复制 rh IL- 1β诱导神经元损伤模型 ,检测 (乙酰胆碱酯酶 ) Ach E活性和脂质过氧化物 (L PO)含量的变化。结果 IL- 1β损伤侧皮质 Ach E活性较未损伤侧、正常组及假手术组均显著降低 (P <0 .0 1)。 5 0 - 5 0 0 U/ ml rh IL- 1β可引起培养的神经元 Ach E活性明显下降 (P <0 .0 5 ) ;10 0 - 5 0 0 U/ ml rh IL-1β可引起神经元 L PO含量明显升高 (P <0 .0 1)。结论 IL- 1β慢性作用可以造成大鼠中枢胆碱能系统的损害 。

重组人白细胞介素-1受体拮抗剂在猕猴体内的药物代谢动力学研究

目的研究重组人白细胞介素-1受体拮抗剂（rhIL-1ra）在猕猴体内的药物代谢动力学特点,为后续的临床实验提供参考。方法猕猴肌肉注射3个剂量组（0.5、1.5、4.5 mg·kg-1）,中剂量组同时连续给药,高剂量组交叉静脉注射给药计算绝对生物利用度,用ELISA法测定给药后的血药浓度。结果 3个剂量组（0.5、1.5、4.5 mg·kg-1）单次肌肉注射给药后,主要药代参数如下所示：平均消除半衰期（t1/2）分别为（1.37±0.11）、（1.62±0.33）和（1.78±0.12）h,平均药时曲线下面积AUC（0~24h）依次为（2468±397）、（6446±2578）和（17 733±3702）ng·h·ml-1,清除率（CL/F）按剂量顺序依次为（0.21±0.03）、（0.28±0.16）和（0.26±0.06）L·kg-1·h-1。rhIL-1ra绝对生物利用度为（56.9±21.9）%。结论本实验报道了猕猴单次肌肉注射rhIL-1ra后呈线性药代动力学特征消除,连续给药7 d在猕猴体内基本无蓄积。

重组人白介素-1α生物学活性测定方法的建立

目的建立并优化采用D10.G4.1细胞测定重组人白介素-1α(rh IL-1α)生物学活性的方法,并用于rh IL-1α样品的检测。方法 MTT法测定rh IL-1α促进D10.G4.1细胞增殖能力,从而反映rh IL-1α的生物学活性。结果建立了D10.G4.1细胞增殖法测定rh IL-1α生物学活性的方法。优化后实验条件如下,样品稀释培养基:RPMI1640+10%FBS+0.5%T-STIM with Con A+0.05m M 2-巯基乙醇;样品上板浓度:10ng·m L-1;细胞密度:4×105个/m L;培养时间:72h;样品梯度稀释倍数4倍。利用优化后的实验条件对rh IL-1α样品活性进行3次测定,评价方法的可重复性。结果 3次实验的变异系数为5.7%,符合方法的要求,表明方法重复性好。结论建立了D10.G4.1细胞测定rh IL-1α生物学活性的方法,该方法操作简便,重复性好,可应用于rh IL-1α的生物学活性检测。

羧甲基壳聚糖对白细胞介素-1β刺激的软骨细胞增殖能力和表型的保护作用

目的评价羧甲基壳聚糖对重组人白细胞介素-1β(rhIL-1β)刺激下的软骨细胞表型、细胞增殖能力的影响,并探讨其作用机制。方法体外培养兔关节软骨细胞,用rhIL-1β刺激,同时加入不同浓度的羧甲基壳聚糖,培养24h后,通过噻唑蓝(MTT)、流式细胞仪检测细胞增殖能力,以Na235SO4蛋白掺入试验检测蛋白多糖的合成,以Greiss反应测定上清液中一氧化氮(NO)浓度,通过反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法分析软骨细胞Ⅰ、Ⅱ型胶原,蛋白多糖聚糖体(Aggrecan)及诱导性一氧化氮合酶(iNOS)mRNA的表达。结果羧甲基壳聚糖能明显拮抗IL-1β对软骨细胞增殖的抑制作用,恢复软骨细胞合成蛋白多糖的能力,减少软骨细胞NO的合成,提高Ⅱ型胶原和蛋白多糖聚糖体mRNA的表达,抑制Ⅰ型胶原、iNOSmRNA的表达,且羧甲基壳聚糖对软骨细胞的保护作用呈剂量依赖性。结论羧甲基壳聚糖能维持IL-1β刺激下的软骨细胞的增殖能力和表型。