rhIL-24蛋白诱导THP-1细胞分泌炎症性因子和肿瘤细胞凋亡作用的研究

目的:探讨rhIL-24蛋白诱导THP-1细胞分泌炎症性因子和肿瘤细胞凋亡的意义,为临床肿瘤的基因治疗奠定基础。方法:RT-PCR扩增人源性成熟肽IL-24基因,构建重组质粒pQE30/hIL-24,在大肠埃希菌M15中表达重组蛋白。SDS-PAGE和蛋白质印迹法对表达的产物鉴定,镍-琼脂糖凝胶层析柱纯化蛋白,尿素梯度透析法复性,ELISA法和FCM法检测rhIL-24蛋白诱导THP-1细胞分泌IL-6、TNF-α炎症性细胞因子和THP-1凋亡。结果:在大肠埃希菌中表达的rhIL-24蛋白与预期值相一致。纯化并复性后的rhIL-24蛋白能诱导THP-1分泌炎症性因子,蛋白浓度28μg/mL作用THP-1细胞,细胞因子的分泌量达到峰值,rhIL-24蛋白作用THP-1细胞18h,分泌量达到峰值。THP-1细胞随着rhIL-24浓度的增加凋亡率不断增加,28μg/mL达到峰值。结论:rhIL-24蛋白诱导THP-1分泌炎症性因子和细胞凋亡,说明rhIL-24诱导肿瘤细胞凋亡和免疫刺激抗肿瘤的协同效应得到验证。