甲状旁腺激素(1-34)对老年股骨颈骨折合并骨质疏松症患者的疗效

目的:探究甲状旁腺激素(1-34)联合空心钉在老年股骨颈骨折合并骨质疏松症患者中的临床疗效。方法:选取2020年7月至2021年7月济源市人民医院收治的老年股骨颈骨折合并骨质疏松症患者80例,随机分为观察组和对照组,各40例。对照组患者给予空心钉治疗,观察组患者采用甲状旁腺激素(1-34)联合空心钉治疗。观察并比较两组患者骨折愈合时间、出院时间、疼痛评分、髋关节功能评分、骨密度水平及生活质量评分。结果:观察组患者骨折愈合时间、出院时间短于对照组,疼痛评分低于对照组,髋关节功能评分及骨密度水平高于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:甲状旁腺激素(1-34)联合空心钉治疗方案应用于老年股骨颈骨折合并骨质疏松症患者可获得较好的临床疗效,相较于单用空心钉治疗,患者康复的时间更短,治疗后疼痛症状缓解显著,髋关节功能及骨密度水平改善效果好。

血清miR-34a及Ang-1水平变化与新生儿呼吸窘迫综合征患儿预后关系研究

目的探讨血清微小核糖核酸-34a(miR-34a)及血管生成素-1(Ang-1)水平变化与新生儿呼吸窘迫综合征(NRDS)患儿预后关系。方法选取2020年1月至2022年12月邯郸市中心医院收治的NRDS患儿178例作为研究对象,纳入NRDS组,另外选取健康新生儿178例作为对照组。比较两组血清miR-34a及Ang-1水平变化。以新生儿确诊NRDS为起点,根据预后情况将患儿分为生存组(n=140)和死亡组(n=38),采用Logistic回归模型分析影响NRDS患儿死亡的相关因素,并用受试者工作特征曲线(ROC)分析血清miR-34a、Ang-1对NRDS患儿死亡的预测价值。结果NRDS组血清miR-34a表达水平高于对照组,Ang-1水平则低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。死亡组剖宫产占比、凶险型前置胎盘占比、白细胞计数、C-反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、肌钙蛋白-Ⅰ、SNAPPEⅡ评分及血清miR-34a表达水平高于生存组,Ang-1水平则低于生存组,差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析模型显示,血清miR-34a表达水平、SNAPPEⅡ评分、IL-6水平偏高,Ang-1水平偏低均是影响NRDS患儿死亡的危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清miR-34a及Ang-1单项预测NRDS患儿死亡的AUC(95%CI)分别为0.770(0.702~0.830)、0.808(0.742~0.863),采用LogP模式拟合联合诊断,结果显示联合诊断AUC(95%CI)为0.887(0.815~0.939),高于任一单项检测(P<0.05)。结论NRDS患儿血清miR-34a高表达,Ang-1则低表达,且两者均是NRDS患儿死亡的危险因素,对NRDS患儿不良预后具有较好的预测价值。

双模板剂调控SAPO-34对1-丁烯催化裂解的影响

利用水热合成法,通过调控模板剂吗啡啉和四乙基氢氧化铵物质的量比[n(MOR)∶n(TEAOH)]合成出不同SAPO-34分子筛。采用XRD、SEM、NH_(3)-TPD等测试方法对合成样品进行表征,并考察其在1-丁烯催化裂解制丙烯反应中的催化性能。结果表明,双模板剂相比单模板剂制得的SAPO-34分子筛具有不同的酸性和颗粒尺寸,适宜的[n(MOR)∶n(TEAOH)]可以协同SAPO-34分子筛有更弱的酸强度和B酸酸位,从而抑制裂解过程中氢转移反应的发生。当n(MOR)∶n(TEAOH)=2.0∶0.5时可以最大程度的提升丙烯产率和选择性,在1-丁烯催化裂解制丙烯中具有最高的丙烯产率和丙烯选择性,分别为37.03%和45.78%,可以有效应用于1-丁烯催化裂解反应。

调脾安肠方对裸鼠结肠癌肝转移灶miR-34a-5p、Notch1/NF-κB表达的影响

目的探讨调脾安肠方对裸鼠结肠癌肝转移(colorectal cancer liver metastasis,CLM)灶组织中MicroRNA-34a-5p(miR-34a-5p)及其靶基因Notch1/核转录因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)通路表达的影响。方法选取30只雄性Balb/c裸鼠随机分为空白组、模型组、中药组,每组10只。脾脏原位注射HCT-116人结肠癌细胞(细胞数约为1×107个/mL)法构建CLM模型。中药组在CLM造模完成2周后开始调脾安肠方(2 g/mL,每日0.2 mL)灌胃2周,空白组和模型组同期予等体积0.9%生理盐水灌胃。苏木素—伊红染色观察肝转移灶病理组织形态;蛋白免疫印迹法测定肝转移灶Notch1、NF-κB p65蛋白水平;实时荧光定量PCR测定肝转移灶miR-34a-5p及Notch1、NF-κB p65 mRNA水平。结果与模型组比较,中药组裸鼠镜下病理转移灶面积明显减小,核分裂像减少,提示调脾安肠方抑制了结直肠癌细胞在肝脏的定植和迁移。与空白组比较,模型组肝转移灶中miR-34a-5p含量显著降低(P<0.01),Notch1、NF-κB p65蛋白表达升高(均P<0.05),Notch1、NF-κB p65的mRNA表达显著升高(均P<0.01)。与模型组比较,中药组Notch1蛋白及mRNA表达降低(P<0.05),NF-κB p65的mRNA表达显著降低(P<0.01)。miR-34a-5p与Notch1 mRNA在结肠癌肝转移灶组织中表达水平呈负相关(r^(2)=0.8845,P<0.05),Notch1与NF-κB p65在结肠癌肝转移灶组织中mRNA表达水平呈显著正相关(r^(2)=0.9291,P<0.01)。结论中药复方调脾安肠方能抑制裸鼠结肠癌肝转移灶形成,其机制可能与通过抑癌基因miR-34a-5p靶向负性调节Notch1/NF-κB通路表达有关。

不同尿白蛋白排泄率2型糖尿病患者微小RNA-34a、缺氧诱导因子-1α水平及意义

目的 分析不同尿白蛋白排泄率(AER)水平的2型糖尿病(T2DM)患者微小RNA-34a(miR-34a)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)水平及意义。方法 选取90例T2DM患者纳入T2DM组,另选取同期门诊体检的90名健康成年体检者纳入对照组。根据AER水平的不同,将T2DM组患者分为正常组、微量组和大量组,每组30例。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测各组血清HIF-1α含量,并采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测各组血清miR-34a表达水平。比较各组血糖、血清HIF-1α、血清miR-34a水平和AER水平,分析T2DM患者AER水平与血清miR-34a水平、血清HIF-1α水平的相关性,并分析miR-34a与HIF-1ɑ的关系。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,计算曲线下面积(AUC),评估HIF-1α、miR-34a对T2DM的预测价值。结果 正常组、微量组、大量组T2DM患者的AER、血清HIF-1α、血清miR-34a、血糖水平高于对照组健康体检者,且微量组水平高于正常组,大量组水平高于微量组,差异均有统计学意义(P<0.05)。相关性分析结果显示,T2DM患者AER水平与血清HIF-1α水平、血清miR-34a水平均呈正相关(r=0.75、0.73,P<0.05),且血清HIF-1α水平与血清miR-34a水平呈正相关(r=0.55,P<0.05)。ROC曲线显示,HIF-1α、miR-34a对T2DM有较高的预测价值,AUC分别为0.991、0.934。结论 T2DM患者尿白蛋白含量越高,病情越严重,且其血清HIF-1α水平与血清miR-34a水平呈正相关,提示miR-34a、HIF-1α是T2DM病情的影响因素,且对T2DM有较高的预测价值。

miR-34a-5p通过靶向IMP3、PD-L1对乳腺癌细胞生物学行为的影响

目的探究miR-34a-5p通过靶向胰岛素样生长因子ⅡmRNA结合蛋白3(IMP3)、程序性死亡配体-1(PD-L1)表达对乳腺癌细胞生物学行为的影响。方法利用Human Protein Atlas和GEPIA在线分析TCGA数据库和GTEx项目中乳腺癌及正常组织IMP3、PD-L1的表达水平、患者的预后生存期;qRT-PCR、Western blot检测160例患者乳腺癌组织及癌旁正常组织中miR-34a-5p、IMP3、PD-L1 mRNA与蛋白表达;Pearson检验分析miR-34a-5p分别与IMP3 mRNA、PD-L1 mRNA的相关性;免疫组化检测患者乳腺癌及正常组织IMP3、PD-L1、白细胞分化抗原44变异体6(CD44v6)的表达,分析IMP3、PD-L1表达水平与患者临床病理参数的关系;靶基因预测、双荧光素酶报告实验验证miR-34a-5p对IMP3、PD-L1的靶向调控作用。MCF7细胞分为control组、miR-NC组、miR-34a-5p组、miR-NC+pcDNA-NC组、miR-NC+IMP3组、miR-NC+PD-L1组、miR-34a-5p+pcDNA-NC组、miR-34a-5p+IMP3组和miR-34a-5p+PD-L1组,采用MTT法、克隆形成、划痕、Transwell小室实验测定细胞增殖活力、迁移、侵袭能力;Western blot检测IMP3、PD-L1、CD44v6、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9、E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平。结果生物数据库显示乳腺癌组织IMP3、PD-L1表达水平越高,患者生存期越短(P<0.05);qRT-PCR、Western blot结果显示,乳腺癌组织miR-34a-5p表达水平明显低于正常组织,IMP3、PD-L1 mRNA与蛋白表达水平明显高于正常组织,miR-34a-5p表达分别与IMP3 mRNA、PD-L1 mRNA呈明显负相关(P<0.05);免疫组化结果显示,乳腺癌组织IMP3、PD-L1、CD44v6呈阳性表达,且IMP3、PD-L1表达越高,TNM分期越晚,肿瘤分化程度越低、越容易发生淋巴结和远处转移(P<0.05);双荧光素酶实验验证了miR-34a-5p对IMP3、PD-L1的靶向调控作用;与control组和miR-NC组相比,miR-34a-5p组的细胞活力、单克隆形成数目、划痕愈合率、细胞侵袭数目、IMP3、PD-L1、CD44v6、MMP-2、MMP-9蛋白表达明显降低,E-cadherin蛋白表达明显升高,与miR-NC+pcDNA-NC组相比,miR-NC+IMP3组和miR-NC+PD-L1组细胞活力、单克隆形成数目、划痕愈合率、细胞侵袭数目、IMP3、PD-L1、CD44v6、MMP-2、MMP-9蛋白表达明显升高,E-cadherin蛋白表达明显降低,与miR-34a-5p+pcDNA-NC组相比,miR-34a-5p+IMP3组和miR-34a-5p+PD-L1组细胞活力、单克隆形成数目、划痕愈合率、细胞侵袭数目、IMP3、PD-L1、CD44v6、MMP-2、MMP-9水平升高,E-cadherin水平降低(P<0.05)。结论miR-34a-5p能够通过靶向调控IMP3、PD-L1表达抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移、侵袭和上皮间质化(EMT)。

子宫肌瘤患者超声弹性成像参数及血清miR-34a、sFlt-1表达及诊断价值

目的:探究经腹部超声弹性成像参数子宫动脉搏动指数(PI)、阻力指数(RI)、弹性应变力比值(SR)及血清miR-34a、sFlt-1在子宫肌瘤患者中的表达及诊断价值。方法:选取2021年4月-2022年4月本院收治的子宫肌瘤患者50例为子宫肌瘤组,正常体检健康女性50例为对照组,分析两组超声参数、miR-34a、sFLt-1、SR水平;观察miR-34a、sFLt-1与临床特征及与子宫肌瘤发病关系;探究经腹部超声弹性成像参数、miR-34a、sFLt-1对子宫肌瘤的诊断价值。结果:子宫肌瘤组PI、RI、miR-34a低于对照组,sFLt-1及SR高于对照组,且子宫肌瘤组中有阴道不规则出血患者血清miR-34a、sFLt-1表达异常更高(均P<0.05);miR-34a与子宫肌瘤发病率呈负相关,sFLt-1与子宫肌瘤发病率呈正相关;腹部超声弹性成像参数、血清miR-34a及sFLt-1均对子宫肌瘤有一定诊断价值,但各指标联合检测价值更高,曲线下面积0.901,诊断敏感度91.4%、特异性94.1%。结论:子宫肌瘤患者PI、RI、SR、miR-34a、sFLt-1均异常,miR-34a、sFLt-1与子宫肌瘤发病具相关性;腹部超声弹性成像参数联合血清miR-34a、sFLt-1检测对子宫肌瘤有较高诊断价值。

rhPTH(1-34)对糖皮质激素性骨质疏松症的防治作用

目的建立糖皮质激素性骨质疏松症(GIOP)大鼠模型及其提取骨髓间充质干细胞(BMSCs),联合Micro-CT和生物学技术检测rh PTH(1-34)对GIOP的防治作用。方法 SPF级SD雌性大鼠随机均分为正常对照组、甲强龙组(模型组)、甲强龙+生理盐水组(空白对照组)和甲强龙+rh PTH(1-34)组(试验组)。分别对股骨近端行Micro-CT检查、组织病理染色,测定Wnt10b、β-catenin蛋白表达;提取模型BM-SCs,经rh PTH(1-34)干预后,行ALP和茜素红染色。结果在Micro-CT中,试验组与模型组相比,前者BV/TV、Tb.Th、Tb/N降低,Tb/sp升高(P<0.05)。ROI三维重建可见试验组骨小梁骨质改善,局部性修复;茜红素染色中,试验组可见骨小梁密度较模型组高、骨小梁形态较好,骨组织中Wnt10b、β-catenin表达较模型组增加(P<0.05);GIOP大鼠模型提取BMSCs予BMP-2诱导,经rh PTH(1-34)干预后,ALP和茜素红染色结果提示试验组成骨增强(P<0.05)。结论 rh PTH(1-34)可通过增强Wnt/β-catenin信号通路中成骨因子Wnt10b、β-catenin防治GIOP,改善微观骨性结构。

载rhPTH(1-34)纳米缓释纤维促成骨作用的体外研究

目的:制备载甲状旁腺相关肽(rhPTH(1-34))的电纺丝缓释纤维,研究其缓释效果及对成骨细胞增殖、分化的影响。方法:制备含rhPTH(1-34)电纺丝缓释纤维(PLLA/rhPTH(1-34)),扫描电镜(SEM)观察其形貌。紫外分光光度法测定释放速率。噻唑蓝法(MTT)测定PLLA/rhPTH(1-34)对小鼠前成骨细胞(MC3T3-E1)的增值活性,碱性磷酸酶(ALP)测定其分化。结果:含模型药物的电纺丝缓释纤维体外有效释放21d,PLLA/rhPTH(1-34)缓释纤维促进细胞的增殖作用明显(P<0.05),并能显著促进细胞的分化(P<0.05)。结论:PLLA/rhPTH(1-34)缓释纤维可以有效缓释药物,并能促进MC3T3-E1DE增殖、分化。

rhPTH1-34对成骨细胞增殖及BMP-7、BMP-9基因表达的影响

目的研究重组人甲状旁腺激素1-34(rhPTH1-34)对成骨细胞增殖及BMP-7、BMP-9基因表达的影响。方法通过不同剂量的重组人甲状旁腺素(rhPTH1-34)(0、10-11、10-10、10-9、10-8、10-7mol/L)间歇性(24 h/周期,前12 h rhPTH1-34干预)刺激体外培养的成骨细胞,用噻唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖能力,RT-PCR法检测成骨细胞BMP-7、BMP-9基因的表达。结果间歇性小剂量rhPTH1-34可明显促进成骨细胞的增殖能力及增强BMP-7、BMP-9基因的表达。结论间歇性小剂量rhPTH1-34可促进成骨细胞增殖,可能与BMP-7、BMP-9基因表达相关。

rhPTH(1-34)诱导角质形成细胞蛋白酪氨酸激酶差异表达蛋白的筛选

目的利用蛋白芯片技术,筛选重组人甲状旁腺素(1-34)[rh PTH(1-34)]作用角质形成细胞后,156种蛋白酪氨酸激酶中的差异表达蛋白。方法培养Ha Ca T角质形成细胞株,rh PTH(1-34)诱导细胞,经过总蛋白质提取、BCA蛋白质定量、酪氨酸磷酸化抗体检测、图象和数据采集,筛选出差异蛋白,最后对所得数据进行分析。结果 156种蛋白中,rh PTH(1-34)组与空白对照组比较,20种蛋白表达差异2倍以上,其中16种显著上调,分别为:Csk,Dtk,Eph A4,Eph A5,Eph B2,Eph B3,Erb B4,FAK,Insulin R,LTK,PDGFR-α,ROS,Tie-1,Tie-2,Tyk2,TYRO10;4种显著下调,分别为:EGFR,JAK3,ALK,Eph B1。其中与银屑病相关的EGFR,JAK3,Tyk2,Eph A4主要涉及角质形成细胞增殖、分化,调节T细胞介导的炎症反应。结论 rh PTH(1-34)可影响Ha Ca T细胞内一组蛋白酪氨酸激酶的表达,其中EGFR,JAK3,Tyk2,Eph A4与银屑病的发病机制密切相关,值得进一步深入探讨。

基于miR-34a-5p/SIRT1通路探讨壮医药线点灸治疗偏头痛模型大鼠的作用机制

目的观察壮医药线点灸对偏头痛模型大鼠脑组织miR-34a-5p/SIRT1通路的影响,探讨其治疗偏头痛的作用机制。方法40只SPF级雄性SD大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、点灸组、点灸+EX-527组、点灸+生理盐水组,每组8只。皮下注射硝酸甘油制备偏头痛大鼠模型,点灸组、点灸+EX-527组和点灸+生理盐水组予壮医药线点灸“脐环穴”(3穴、6穴、9穴、12穴)、“合谷”(双)、“太冲”(双)干预,点灸+EX-527组腹腔注射EX-527(5 mg/kg),点灸+生理盐水组腹腔注射生理盐水(5 mg/kg),空白对照组和模型对照组仅固定,不干预,每日1次,共14次。对大鼠进行行为学评分,ELISA测定血清降钙素基因相关肽(CGRP)、核因子(NF)-κB、肿瘤坏死因子(TNF)-α含量,qPCR检测中脑组织miR-34a-5p、沉默信息调节因子(SIRT)1、NF-κB p65 mRNA表达,Western blot检测中脑组织SIRT1、Ac-NF-κB p65、NF-κB p65、TNF-α蛋白表达,HE染色、TUNEL染色分别观察中脑组织神经细胞形态和细胞凋亡情况。结果与空白对照组比较,模型对照组大鼠行为学评分升高(P<0.01),血清CGRP、NF-κB、TNF-α含量增加(P<0.01),中脑组织miR-34a-5p、NF-κB p65 mRNA表达升高(P<0.01),SIRT1 mRNA和蛋白表达降低(P<0.01),NF-κB p65、Ac-NF-κB p65和TNF-α蛋白表达升高(P<0.01);与模型对照组比较,点灸组大鼠行为学评分降低(P<0.05),血清CGRP、NF-κB、TNF-α含量减少(P<0.05),中脑组织miR-34a-5p、NF-κB p65 mRNA表达降低(P<0.05),SIRT1 mRNA和蛋白表达升高(P<0.05),NF-κB p65、Ac-NF-κB p65和TNF-α蛋白表达降低(P<0.05);与点灸组比较,点灸+EX-527组大鼠行为学评分升高(P<0.05),血清CGRP、NF-κB、TNF-α含量增加(P<0.05),中脑组织miR-34a-5p、NF-κB p65 mRNA表达升高(P<0.05),SIRT1 mRNA和蛋白表达降低(P<0.05),NF-κB p65、Ac-NF-κB p65和TNF-α蛋白表达升高(P<0.05)。各组大鼠中脑组织形态未见异常,无明显细胞凋亡。结论壮医药线点灸可抑制偏头痛模型大鼠中脑组织miR-34a-5p表达,促进SIRT1表达,使NF-κB p65去乙酰化,降低血清CGRP、NF-κB、TNF-α含量,从而调控炎症反应,发挥治疗偏头痛作用。

间歇性应用rhPTH(1-34)对兔下颌骨骨折愈合的影响

目的:研究间歇性应用重组人甲状旁腺素[rhPTH(1-34)]对兔下颌骨骨折的治疗作用。方法:健康新西兰大白兔24只,体重1.9～2.1kg。在下颌骨体部造成1.5mm×10mm的部分骨折模型,随机分成A、B 2组,每组12只(雌雄不限)。A组分别于术后第2天间隔天数行术区局部rhPTH(1-34)30μg/(kg.d)注射,B组不做处理。于术后不同时间点行X线片、骨密度、HE染色和免疫组织化学染色观察,以及测定血清钙素水平。结果:术后20d各组骨密度达峰值,A组骨密度高于B组(P<0.05)。术后A组骨折愈合处colⅡ蛋白分泌较B组增多(P<0.05)。术后7、20及30d各组血清骨钙素水平均较对照组明显增高(P<0.05)。结论:以30μg/(kg.d)剂量注射rhPTH(1-34)可安全有效促进兔下颌骨骨折模型骨折愈合。

重组人甲状旁腺素(1-34)诱导过表达EGFR的角质形成细胞中差异表达转录因子的筛选

目的利用转录组测序技术,筛选重组人甲状旁腺素(1-34)[rhPTH(1-34)]影响角质形成细胞(KC)内表皮生长因子受体(EGFR)表达的差异转录因子,以探讨rhPTH(1-34)治疗银屑病的机制。方法慢病毒转染培养的HaCaT细胞,使之过表达EGFR。rhPTH(1-34)组加入0.01μmol/L rhPTH(1-34),空白组加入等量DMEM溶液。抽提两组细胞RNA,用紫外吸收测定法和变性琼脂糖凝胶电泳法进行RNA产量和质量检测。合成cDNA,实时定量PCR扩增,对文库有效浓度进行准确定量。上机测序,对所得数据进行处理和分析。用DESeq2软件分析两组数据之间的差异,以|log_2foldchange|≥1且P<0.05作为筛选条件对测序结果进行分析。结果rhPTH(1-34)组和空白组共表达的基因数目12455个,rhPTH(1-34)组单独表达421个,空白组单独表达461个。rhPTH(1-34)组与空白组比较,差异基因共185个,其中108个上调,77个下调。下调中,|log_2foldchange|最高的5个差异转录因子为ZNF525、ZNF774、ZNF576、ZBTB42和POU4F1(P<0.05)。其中ZNF774、POU4F1主要涉及Notch2、MAPK信号通路的调节。结论rhPTH(1-34)抑制KC增殖可能与下调ZNF525、ZNF774、ZNF576、ZBTB42、POU4F1表达有关。其中ZNF774、POU4F1可能与KC增殖相关。

p38MAPK在低能ESW和间歇rhPTH1-34促进ROB成骨的信号转导中的作用

[目的]探讨低能体外冲击波(ESW)和间歇人重组甲状旁腺素(rhPTH1-34)刺激引起的体外培养大鼠成骨细胞(ROB)成骨的细胞内信号转导中p38MAPK的作用。[方法]分别用有效的低能ESW刺激和间歇rhPTH1-34作用于ROB,并设立加入p38MAPK抑制剂SB203580组,来观察ROB增殖、成骨指标及Western Blot检测的p38MAPK磷酸化激活变化。[结果]p38MAPK抑制剂SB203580能明显抑制120次0.18 mJ/mm2ESW刺激引起的ROB细胞增殖和成骨作用(P<0.05);但不能明显抑制10-11mol/L间歇rhPTH1-34刺激引起的体外培养ROB细胞增殖及成骨作用(P>0.05)。ESW应力刺激可促进p-p38MAPK表达,但间歇rhPTH1-34不能促进p-p38MAPK表达。[结论]适当的ESW应力刺激可通过激活p38MAPK促进体外培养ROB增殖和成骨;但p38MAPK并不参与10-11mol/L间歇rhPTH1-34刺激引起的ROB细胞增殖和成骨的细胞信号转导。

rhPTH(1-34)对大鼠类固醇性骨质疏松治疗作用研究

目的:观察重组人甲状旁腺激素rhPTH(1-34)对大鼠类固醇性骨质疏松的治疗作用。方法:应用皮下注射醋酸泼尼松龙注射液的方法建立类固醇性骨质疏松模型。给予皮下注射5、10、20μg·kg^(-1)·d^(-1) rhPTH(1-34)治疗12w。观察骨组织形态,计量骨密度、骨生物力学和骨代谢相关的血尿生化指标,综合评价rhPTH(1-34)对大鼠类固醇性骨质疏松的治疗效果。结果:皮下注射醋酸泼尼松龙注射液,骨体积和成骨表面显著下降,骨吸收表面显著升高,表明形成了类固醇骨质疏松。不同剂量的rhPTH(1-34)对大鼠股骨骨密度(BMD)均有显著增加。在股骨生物力学特征方面,rhPTH(1-34)中、高剂量组的最大位移(du)显著升高,高剂量组的衰竭功(U)升高;在股骨骨形态计量学方面,不同剂量的rhPTH(1-34)对骨体积均显著升高,矿化沉积率均显著升高,肋骨宽度(O.Th)均显著下降,骨重建时间(δ)均显著缩短等;在血清和尿生化指标方面,不同剂量的rhPTH(1-34)对骨钙素(BGP)均显著升高,尿羟脯氨酸/肌苷均显著下降,中、高剂量组对尿Ca显著下降。结论:rhPTH(1-34)对大鼠类固醇性骨质疏松具有显著的治疗作用。

EBV下调miR-34c促进鼻咽癌细胞增殖、迁移的作用及机制研究

目的:探究爱泼斯坦-巴尔病毒(EBV)下调miR-34c促进鼻咽癌细胞增殖、迁移、侵袭的作用及机制。方法:采用qPCR检测EBV阴性鼻咽癌SUNE1、CNE2、HK1细胞和EBV阳性C666-1细胞中miR-34c表达水平。构建miR-34c模拟物以分析miR-34c对鼻咽癌细胞生物学功能的影响。使用CCK-8、划痕愈合试验以及Transwell细胞侵袭试验检测鼻咽癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。Western blotting测定细胞中迁移、侵袭相关蛋白以及Erk1/2信号通路蛋白的表达水平。结果:miR-34c在EBV阳性C666-1细胞表达下调(P<0.05)。CCK-8结果显示,miR-34c组C666-1细胞在16、24、48 h的活力明显低于EBV组(P<0.01)。划痕试验和Transwell试验结果显示,与miR-34c组比较,EBV组C666-1细胞迁移和侵袭能力均明显增强(P<0.01)。Western blotting结果显示,与miR-34c组比较,EBV组C666-1细胞迁移和侵袭相关蛋白Vimentin、Snail、MMP-2、MMP-3及Erk1、Erk2蛋白表达均明显升高(P<0.01)。结论:miR-34c在EBV阳性鼻咽癌细中表达下调,EBV下调miR-34c可增强鼻咽癌细胞增殖、侵袭和迁移能力及激活Erk1/2信号通路。

rhPTH(1-34)间断刺激对人根尖牙乳头干细胞增殖及成牙成骨分化的影响

目的:探讨重组人甲状旁腺素(1-34)[rh PTH(1-34)]对人根尖牙乳头干细胞(SCAPs)增殖和成牙成骨分化潜能的影响。方法:酶消化法原代培养SCAPs,分别用完全培养基、1×10^(-12)、1×10^(-11)、1×10-10、1×10-9、1×10^(-8)mol/L rh PTH(1-34)条件培养液间断性刺激SCAPs,碱性磷酸酶(ALP)检测法筛选最佳诱导浓度,CCK8法检测rh PTH(1-34)对SCAPs增殖的影响,实时定量RT-PCR检测rh PTH(1-34)作用于SCAPs后其成牙/成骨分化指标的变化。结果:1×10-8mol/L rh PTH(1-34)间断性刺激能显著提高SCAPs的ALP活性;CCK8结果显示rh PTH(1-34)间断性作用于SCAPs后,其增殖能力无明显改变(P>0.05);rh PTH(1-34)间断性刺激可增强SCAPs中骨钙素(OCN)、Osterix、Runt相关转录因子2(RUNX2)、牙本质涎蛋白(DSP)等基因的表达(P<0.05)。结论:rh PTH(1-34)间断刺激对人SCAPs的增殖无明显影响,但可促进其成牙/成骨向分化。

国产rhPTH1-34治疗绝经后骨质疏松症的有效性和安全性:随机对照、多中心临床研究

目的 以原研特立帕肽和鲑鱼降钙素为阳性对照,观察国产基因重组人甲状旁腺素氨基端1-34片段(recombinant human parathyroid hormone N-terminal 1-34 fragment,rhPTH1-34)治疗绝经后骨质疏松症的有效性和安全性。方法 纳入绝经后骨质疏松症女性214例,按照1∶1∶1∶0.5比例,随机分为4组:rhPTH1-3420μg组(n=59)及40μg组(n=62)分别每天注射国产rhPTH1-3420及40μg;降钙素组(n=61)给予鼻喷鲑鱼降钙素200 IU;特立帕肽组(n=32)给予原研特立帕肽注射20μg/d;疗程均为24周。观察治疗前后腰椎(L1-4)和髋部骨密度(bone mineral density,BMD)的变化率,骨转换生化指标的变化率,包括血清Ⅰ型前胶原N-端肽(procollagen typeⅠN-terminal propeptide,P1NP)和Ⅰ型胶原交联C-末端肽(β-cross linked C-telopeptide of typeⅠcollagen,β-CTX),以及药物治疗的安全性。结果 治疗24周后,rhPTH1-3420μg及40μg组L1-4 BMD较基线分别增加3.42%和4.82%,特立帕肽组L1-4 BMD增加3.66%(均P<0.05),rhPTH1-34治疗组间骨密度变化率无明显差异;降钙素组腰椎骨密度变化率为-0.01%,骨密度无明显增加(P>0.05)。国产及原研特立帕肽的疗效均优于鼻喷降钙素组。国产与原研rhPTH1-3420μg组治疗24周使血清P1NP分别升高534.22%和277.86%,使β-CTX水平分别升高247.88%和202.25%(均P<0.001),P1NP增幅大于β-CTX。国产与原研rhPTH1-34组的安全性较好。结论 每天皮下注射20μg国产rhPTH1-34治疗24周能够显著提升腰椎BMD,促进骨形成,疗效及安全性与原研特立帕肽相当,且优于降钙素鼻喷剂。

牙周洁刮治疗对中重度慢性牙周炎患者龈沟液中IL-34、MCP-1水平的影响

目的探讨牙周洁刮治疗对中重度慢性牙周炎患者龈沟液中白介素-34(IL-34)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)水平的影响。方法选取2019年1月至2021年1月来我院诊治的82例中度和重度慢性牙周炎患者作为研究对象。按照随机数字表进行分组,将患者分为观察组(41例)和对照组(41例)。对照组患者采用常规药物治疗,观察组采用牙周洁刮治疗。比较两组治疗疗效、治疗前后牙周指数[菌斑指数(PI)、龈沟出血指数(BI)、牙周袋探诊深度(PD)、临床附着丧失(CAL)]及龈沟液中炎症因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、IL-34、MCP-1]水平;采用Pearson分析中重度牙周炎患者IL-34、MCP-1水平与牙周指数的相关性。结果观察组患者治疗的有效率为95.12%,明显高于对照组患者治疗的78.05%(P<0.05);治疗后,观察组PD、CAL、BI、PI和龈沟液中TNF-α、IL-6、IL-34、MCP-1水平显著低于对照组(P<0.05);经Pearson分析显示,中度和重度牙周炎患者龈沟液中IL-34、MCP-1水平与PD、CAL、BI、PI均呈正相关(P<0.05)。结论牙周洁刮治疗能改善中重度慢性牙周炎患者的临床指标,其作用机制可能与降低龈沟液中IL-34、MCP-1细胞因子水平有关。