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rhTNFα D11a对S180肉瘤的体内抗肿瘤作用 被引量:7
1
作者 刘丽 赵建增 +2 位作者 谢宝书 冷爱军 占志 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第2期88-89,92,共3页
rhTNFαD11a是利用基因工程技术制备的一种新型TNF。体外在极低浓度下对多种人源性和鼠源性肿瘤细胞均有明显的细胞毒作用,与原型rhTNFα相比,其活性高10倍以上;在小鼠和猴子体内进行的急性毒性和慢性毒性试验表... rhTNFαD11a是利用基因工程技术制备的一种新型TNF。体外在极低浓度下对多种人源性和鼠源性肿瘤细胞均有明显的细胞毒作用,与原型rhTNFα相比,其活性高10倍以上;在小鼠和猴子体内进行的急性毒性和慢性毒性试验表明:其毒性比原型rhTNFα低约7倍。本文研究了rhTNFαD11a在荷瘤小鼠体内的抗肿瘤作用,结果表明:瘤内注射1×104U的rhTNFαD11a,70%的动物肿瘤完全消失,其余动物肿瘤极显著减小,且发生组织重度坏死;注射1×103U,10%的动物肿瘤完全消失,90%的肿瘤不同程度地减小,肿瘤组织坏死程度以轻、中度为主;注射1×102U的动物肿瘤无明显减小,但生长率均显著低于对照组。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子 抗肿瘤作用 rhtnf
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pRL-hTNF/JM103工程菌发酵和rhTNFα表达的研究 被引量:2
2
作者 张振龙 许丽峰 +8 位作者 张琰平 刘德郁 邓宛明 樊晓翔 陈梅娣 窦金福 宋比天 倪道明 李昌本 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 1998年第1期14-17,共4页
为便于下游中试规模生产,采用温度敏感型启动子PRPL构建rhTNFα工程菌,并对影响工程菌发酵培养和表达的因素进行了初步研究。结果显示,采用RTB培养基,50℃热水快速升温,诱导培养4~4.5h,湿菌体收获率和表达量均达到较高水平;50... 为便于下游中试规模生产,采用温度敏感型启动子PRPL构建rhTNFα工程菌,并对影响工程菌发酵培养和表达的因素进行了初步研究。结果显示,采用RTB培养基,50℃热水快速升温,诱导培养4~4.5h,湿菌体收获率和表达量均达到较高水平;50L发酵罐连续发酵3批,14000r/min连续离心,菌体收获率湿重达16.gg/L培养物,rhTNFα表达量占菌体总蛋白的10.5%,活性达1.35×107U/mg蛋白。. 展开更多
关键词 人肿瘤坏死因子 发酵 表达 工程菌
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重组人肿瘤坏死因子-α(rhTNFα)工程菌高密度发酵研究 被引量:4
3
作者 李民 徐皓 +2 位作者 周逸明 杨如燕 陈常庆 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第10期443-446,454,共5页
报道了 rh TNFα重组菌发酵条件及高密度、高表达发酵的研究。首先研究了营养成份对其生长和表达的影响 ,确定了半合成发酵培养基 ;筛选出了 rh TNFα生长和表达的最适宿主菌 E.coli YK5 37;研究了影响高表达的几个关键因素 ,建立了该... 报道了 rh TNFα重组菌发酵条件及高密度、高表达发酵的研究。首先研究了营养成份对其生长和表达的影响 ,确定了半合成发酵培养基 ;筛选出了 rh TNFα生长和表达的最适宿主菌 E.coli YK5 37;研究了影响高表达的几个关键因素 ,建立了该类型重组菌的诱导表达条件。结果表明限制发酵过程中乙酸积累、控制在指数生长期进行诱导、持续诱导时间不超过 5 h是实现高密度、高表达发酵的关键条件。采用半经验补料流加公式 ,在 NBS Bio Flo30 0 0型 5 L 发酵罐中利用恒溶氧 -补料培养批技术 ,限制甘油浓度在 5 g/ L,可使 E.coli YK5 37/ p SB- TR最终菌体密度和 rh TNFα的产量分别达到 A6 0 0 12 6和 8.4g/ L。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子 高密度发酵 rhtnfΑ 工程菌
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rhTNFα加rhIL-2诱导小鼠CNE3细胞凋亡和抑制增殖的体内实验研究 被引量:4
4
作者 焦伟 刘时才 +1 位作者 莫祥兰 黄振录 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2001年第7期549-551,共3页
目的:研究重组人肿瘤坏死因子(rhTNF-α)对鼻咽癌细胞敏感性、重组人白细胞介素-2(rhIL-2)协同抗瘤效应及抗瘤机理。方法:利用我室建立的鼻咽癌细胞株(CNE3)制成的裸鼠鼻咽癌模型,rhTNFα通过与rhIL-2配伍瘤内注射以观察... 目的:研究重组人肿瘤坏死因子(rhTNF-α)对鼻咽癌细胞敏感性、重组人白细胞介素-2(rhIL-2)协同抗瘤效应及抗瘤机理。方法:利用我室建立的鼻咽癌细胞株(CNE3)制成的裸鼠鼻咽癌模型,rhTNFα通过与rhIL-2配伍瘤内注射以观察移植瘤超微结构及免疫组织化学的改变,探讨其作用机理。结果:鼻咽癌裸鼠移植瘤经治疗后出现坏死、体积缩小、甚至消失;超微结构观察凋亡细胞缩皱,核内异染色质边集;免疫组化研究发现:rhTNF-α有下调(突变型)p53和增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达,其可能与rhTNF-α的抗癌机理有关;rhIL-2能增强rhTNF-α的抗瘤作用。结论:rhIL-2增强rhTNF-α的抗瘤机理可能与IL-2诱导癌细胞表达TNF受体作用有关,该研究为临床在鼻咽镜下进行TNF局部治疗提供实验依据。 展开更多
关键词 重组人肿瘤坏死因子α 白细胞介素-2 鼻咽癌细胞株 裸鼠 抑瘤效应 rhtnfΑ RHIL-2
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重组人肿瘤坏死因子(rhTNF-α)国家标准品的研制 被引量:4
5
作者 王军志 高凯 饶春明 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1999年第4期295-298,共4页
目的:建立符合WHO重组细胞因子要求,用于rhTNF质量控制的国家标准品.方法:用NIBSC提供的国际标准品为标准,采用L929细胞体外活性测定系统,按统一方案组织了4家实验室,对这批rhTNF-α国家标准品(批号960508)的效价进行协作标定.结果:经... 目的:建立符合WHO重组细胞因子要求,用于rhTNF质量控制的国家标准品.方法:用NIBSC提供的国际标准品为标准,采用L929细胞体外活性测定系统,按统一方案组织了4家实验室,对这批rhTNF-α国家标准品(批号960508)的效价进行协作标定.结果:经统计学分析,均数的95%可信区间为3289~4266IU/支,单次测定的95%标准值范围为1735~8087IU/支.这批国家标准品效价确定为3500IU/支.4种不同温度存放27个月的样品,效价测定结果表明其效价稳定.结论:这批rhTNF-α经统一协作,质量可靠,效价稳定,可用作国家标准品使用. 展开更多
关键词 rhtnf 标准化 生物学活性 肿瘤坏死因子
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rhTNF-α对鼻咽癌CNE3细胞p53及p21^(WAF1/CIP1)蛋白表达的影响 被引量:1
6
作者 焦伟 邓卓霖 +2 位作者 黄振录 丁志敏 刘时才 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第10期1104-1105,共2页
关键词 肿瘤坏死因子α 鼻咽肿瘤 P53 P21^WAF1/CIP1 rhtnfΑ CNE3细胞
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rhTNFα表达条件的优化与中试发酵 被引量:4
7
作者 陈宜顶 闫长伟 +1 位作者 王联结 刘丽 《微生物学免疫学进展》 2003年第2期12-15,共4页
为了确定出rhTNFα最佳表达条件 ,实验利用正交试验设计方法 ,对rhTNFα工程菌的进行发酵培养和 4 2℃热诱导 ,此后借助蛋白凝胶电泳分析软件对各组样品的凝胶电泳图片定量分析 ,利用方差分析对影响TNF基因工程菌对目的产物表达的几个... 为了确定出rhTNFα最佳表达条件 ,实验利用正交试验设计方法 ,对rhTNFα工程菌的进行发酵培养和 4 2℃热诱导 ,此后借助蛋白凝胶电泳分析软件对各组样品的凝胶电泳图片定量分析 ,利用方差分析对影响TNF基因工程菌对目的产物表达的几个重要的条件进行了优化 ,并最终确定出 pH7.5、培养温度 2 7℃、培养时间 4 .5h、诱导时间 5h的最佳表达条件。在该条件下进行中试发酵TNF的表达产物占到了菌体总蛋白的 6 0 %左右 ,且大部分以可溶形式存在。 展开更多
关键词 TNF 表达条件 正交试验设计 中试发酵
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rhIL-1α和rhTNF-α对人成纤维滑膜细胞PGE_2受体和Gαs的影响及芍药苷的作用 被引量:1
8
作者 戴杏 郭晓蓉 魏伟 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2014年第8期1110-1115,共6页
目的探讨rhIL-1α和rhTNF-α对人成纤维样滑膜细胞(FLS)PGE2受体(EP2)及Gαs表达的影响及芍药苷(Pae)的作用。方法体外培养人FLS,使用不同浓度的rhIL-1α和rhTNF-α刺激人FLS,观察EP2及Gαs蛋白表达的情况,观察Pae对其的影响。采用免疫... 目的探讨rhIL-1α和rhTNF-α对人成纤维样滑膜细胞(FLS)PGE2受体(EP2)及Gαs表达的影响及芍药苷(Pae)的作用。方法体外培养人FLS,使用不同浓度的rhIL-1α和rhTNF-α刺激人FLS,观察EP2及Gαs蛋白表达的情况,观察Pae对其的影响。采用免疫荧光标记法结合激光共聚焦显微镜分析技术检测人FLS的EP2表达,Western blot检测Gαs表达。结果 rhIL-1α(0.1、1、10μg/L)和rhTNF-α(0.2、2、20μg/L)明显降低人FLS EP2和Gαs表达,Pae(10-8、10-7、10-6、10-5mol/L)可上调人FLS的EP2和Gαs表达。结论 Pae恢复rhIL-1α和rhTNF-α刺激后EP2和Gαs的表达可能是其抑制滑膜细胞增殖和亢进分泌功能的分子机制之一。 展开更多
关键词 rhIL-1α rhtnf 成纤维样滑膜细胞 PGE2受体 Gαs蛋白 芍药苷
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重组人肿瘤坏死因子α(rhTNFα)衍生物的纯化及检定 被引量:1
9
作者 徐春晓 倪道明 +2 位作者 王春荣 张振龙 邓婉明 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 1999年第4期213-215,共3页
采用热处理、盐析和离子交换层析技术对新型人肿瘤坏死因子α衍生物 (命名为hTNFD)蛋白进行了纯化 ,纯化后的纯度大于 96 % ,回收率为 43.8% ,纯化倍数为 6 .4倍。经L92 9细胞测活结果表明 ,hTNFD的比活可达 1.0 1× 10 1 0 U mg ,... 采用热处理、盐析和离子交换层析技术对新型人肿瘤坏死因子α衍生物 (命名为hTNFD)蛋白进行了纯化 ,纯化后的纯度大于 96 % ,回收率为 43.8% ,纯化倍数为 6 .4倍。经L92 9细胞测活结果表明 ,hTNFD的比活可达 1.0 1× 10 1 0 U mg ,比原型TNFα活性提高 46 5倍 ,整个纯化工艺简单、稳定 ,易于放大 ,显示出较好的临床应用前景 , 展开更多
关键词 衍生物 比活 纯化 rhtnfΑ 抗肿瘤药物
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rhTNF瘤内注射致膀胱癌的超微结构改变 被引量:1
10
作者 靳风烁 方玉华 +2 位作者 邓晓洪 江军 张大春 《实用肿瘤学杂志》 CAS 1994年第4期55-56,共2页
FNF是迄今所知抗肿瘤作用最强的细胞因子,体内外实验均表明TNF对多数肿瘤具有杀伤或细胞抑制(cytostasis)作用。但因其剂量依赖性毒副作用,加之生物半衰期短,全身应用难以在局部达到有效浓度而限制了临床应用。增加应用剂量常引起寒战... FNF是迄今所知抗肿瘤作用最强的细胞因子,体内外实验均表明TNF对多数肿瘤具有杀伤或细胞抑制(cytostasis)作用。但因其剂量依赖性毒副作用,加之生物半衰期短,全身应用难以在局部达到有效浓度而限制了临床应用。增加应用剂量常引起寒战、高热、低血压、甚至发生恶液质等严重副作用。目前对TNF的研究侧重于分子修饰,改变应用策略等方面,以提高疗效,减少不良反应。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 肿瘤坏死固子 rhtnf 超微结构
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冷冻切除联合rhTNF-α在恶性脑胶质瘤中的应用价值探讨 被引量:1
11
作者 胡伟康 梁柱楼 李红利 《安徽医学》 2014年第6期821-823,共3页
目的探讨冷冻切除联合rhTNF-α在恶性脑胶质瘤中的临床应用价值。方法选择颅内胶质瘤患者90例,随机分为两组,每组45例。对照组使用冷冻治疗,观察组在对照组的基础上联合使用rhTNF-α,比较两组患者治疗后新增语言、运动及记忆力障碍比例... 目的探讨冷冻切除联合rhTNF-α在恶性脑胶质瘤中的临床应用价值。方法选择颅内胶质瘤患者90例,随机分为两组,每组45例。对照组使用冷冻治疗,观察组在对照组的基础上联合使用rhTNF-α,比较两组患者治疗后新增语言、运动及记忆力障碍比例,治疗不良反应及治疗前及治疗后6个月肿瘤体积的变化。结果观察组治疗后新增语言、运动及记忆力障碍的比例均显著低于对照组(P<0.05),观察组发生发热和头痛的比例显著低于对照组(P<0.05)。治疗6个月后,两组肿瘤体积均较治疗前显著缩小(P<0.05),且观察组小于对照组(P<0.05),观察组2年生存率高于对照组。结论冷冻治疗联合使用rhTNF-α治疗脑胶质瘤,在减少单纯冷冻治疗不良反应的同时,提高治疗效果延长患者生存时间,值得临床推广。 展开更多
关键词 冷冻治疗 rhtnf 恶性 脑胶质瘤
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FCA包裹rhTNF对结肠癌裸鼠移植瘤的抑制作用 被引量:1
12
作者 黄显凯 张胜本 饶本强 《重庆医学》 CAS CSCD 2000年第1期1-2,共2页
目的:探讨增强TNF抗结肠癌作用的方法。方法:建立人结肠癌裸小鼠移植瘤模型,观察FCA包裹rhTNF对移植瘤体积、瘤重及抑瘤率等变化的影响。结果: FCA包裹rhTNF对人结肠腺癌裸小鼠移植瘤体积、瘤重、生长及抑瘤率... 目的:探讨增强TNF抗结肠癌作用的方法。方法:建立人结肠癌裸小鼠移植瘤模型,观察FCA包裹rhTNF对移植瘤体积、瘤重及抑瘤率等变化的影响。结果: FCA包裹rhTNF对人结肠腺癌裸小鼠移植瘤体积、瘤重、生长及抑瘤率等抑制作用均较rhTNF明显增强;对裸小鼠体重及全身情况的影响较单用thTNF明显减轻。结论:FCA增强rhTNF的抗结肠癌作用、减轻rhTNF的副作用,可能与FCA包裹后使rhTNF在肿瘤灶内持续缓慢释放、半衰期延长有关。 展开更多
关键词 重组肿瘤坏死因子 结肠肿瘤 rhtnf FCA 抑制作用
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冷冻联合rhTNF-α对C6大鼠脑胶质瘤细胞的凋亡诱导和增殖抑制作用
13
作者 黄宽明 冯艳琴 +3 位作者 涂汉军 李新建 袁先厚 王伦长 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期299-301,383,共4页
目的探讨冷冻联合rhTNF-α对C6大鼠脑胶质瘤细胞凋亡的影响及对肿瘤生长的抑制作用。方法建立大鼠脑胶质瘤模型,待肿瘤长至第15天,随机将荷瘤鼠分为4组:G1、G2、G3、G4分别为盐水组、冷冻治疗组、rhTNF-α治疗照组及联合治疗组,同时分... 目的探讨冷冻联合rhTNF-α对C6大鼠脑胶质瘤细胞凋亡的影响及对肿瘤生长的抑制作用。方法建立大鼠脑胶质瘤模型,待肿瘤长至第15天,随机将荷瘤鼠分为4组:G1、G2、G3、G4分别为盐水组、冷冻治疗组、rhTNF-α治疗照组及联合治疗组,同时分别行相应的治疗。于治疗后第15天取材,以TUNEL法与流式细胞仪联合检测肿瘤细胞的凋亡,采用免疫组化观察PCNA的表达,计算抑瘤率。结果联合治疗组肿瘤细胞凋亡情况与其他各组相比有显著差异(P<0.01),PCNA的表达明显减少(P<0.01),且该组对肿瘤生长的抑制率(60.38%)明显大于冷冻组(42.69%)和TNF-α组(21.68%),且大于理论抑瘤率(55.11%)。结论冷冻和rhTNF-α对C6大鼠脑胶质瘤细胞的生长均有抑制作用,同时可诱导其凋亡,两者联用抗肿瘤作用进一步加强,具有协同作用,可能成为胶质瘤治疗的一种新策略。 展开更多
关键词 神经胶质瘤/治疗 冷冻疗法 rhtnf 协同作用
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联合应用rhTNF和环磷酰胺治疗胶质瘤大鼠的效果及其机制
14
作者 秦丽娟 谷艳婷 +6 位作者 张田 王艳蕾 张一兵 贾永森 周洪霞 张志勇 薛一雪 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2013年第18期2977-2979,共3页
目的:探讨联合应用rhTNF和环磷酰胺治疗胶质瘤大鼠的效果及其可能机制。方法:制备胶质瘤大鼠模型,动态监测经颈总动脉给予rhTNF后的血肿瘤屏障开放程度。给予rhTNF 120 min再给予CTX后,ELISA法测定胶质瘤组织内CTX的含量。观察分别给予r... 目的:探讨联合应用rhTNF和环磷酰胺治疗胶质瘤大鼠的效果及其可能机制。方法:制备胶质瘤大鼠模型,动态监测经颈总动脉给予rhTNF后的血肿瘤屏障开放程度。给予rhTNF 120 min再给予CTX后,ELISA法测定胶质瘤组织内CTX的含量。观察分别给予rhTNF、CTX和rhTNF(120 min)+CTX的胶质瘤大鼠的生存时间。结果:给胶质瘤大鼠注射rhTNF后,血肿瘤屏障开放程度增加,于120 min达最大后开始减小。给予rhTNF 120 min再给予CTX后,胶质瘤组织内CTX含量明显高于单独给予CTX组。与其他组相比,rhTNF(120 min)+CTX能明显延长胶质瘤大鼠的生存时间。结论:胶质瘤大鼠给予rhTNF 120 min时血肿瘤屏障开放程度最大,此时进入胶质瘤组织的CTX含量最多。 展开更多
关键词 胶质瘤 血肿瘤屏障 rhtnf CTX
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rhTNFα与IL-2联合瘤内注射致鼻咽癌移植瘤超微结构的改变
15
作者 焦伟 莫维光 梁莹 《陕西医学杂志》 CAS 北大核心 2001年第4期202-203,F003,共3页
应用 CNE- 3鼻咽癌细胞株作为靶细胞 ,建立鼻咽癌裸鼠移植瘤模型 ,探讨rh TNFα与 IL- 2联合瘤内注射对鼻咽癌裸鼠移植瘤形态学的影响。结果显示 :单独应用rh TNFα早期鼻咽癌细胞缩小 ,异染色质增多和出现凋亡小体 ,联合应用后癌细胞... 应用 CNE- 3鼻咽癌细胞株作为靶细胞 ,建立鼻咽癌裸鼠移植瘤模型 ,探讨rh TNFα与 IL- 2联合瘤内注射对鼻咽癌裸鼠移植瘤形态学的影响。结果显示 :单独应用rh TNFα早期鼻咽癌细胞缩小 ,异染色质增多和出现凋亡小体 ,联合应用后癌细胞改变出现时间早、程度重 ,表现为内质网扩张 ,核固缩 ,核碎裂 ,癌细胞坏死及淋巴细胞反应。提示rh TNFα和 IL- 2有不同程度协同杀伤鼻咽癌细胞的作用 ,促使癌细胞趋向死亡。该研究为临床术前 rh 展开更多
关键词 鼻咽癌 移植瘤 超微结构 rhtnfΑ 白细胞介素2
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rhTNF-α联合IL-2对急性髓细胞白血病患者骨髓体外净化的研究
16
作者 张丽 李秀珍 +5 位作者 高清平 陈伦华 陈友华 敖绪斌 仲照东 谢燕 《浙江医学》 CAS 2001年第3期134-137,共4页
目的 探讨重组人肿瘤坏死因子α(rhTNF -α)联合白细胞介素2(IL-2)对急性髓细胞白血病 (AML)骨髓体外净化的作用。 方法 rhTNF -α(1000u/ml)和IL-2(500u/ml)联合 ,对17例AML患者骨髓体外净化培养1~3d,用甲基纤维素半固体培养法测定粒 ... 目的 探讨重组人肿瘤坏死因子α(rhTNF -α)联合白细胞介素2(IL-2)对急性髓细胞白血病 (AML)骨髓体外净化的作用。 方法 rhTNF -α(1000u/ml)和IL-2(500u/ml)联合 ,对17例AML患者骨髓体外净化培养1~3d,用甲基纤维素半固体培养法测定粒 -巨噬细胞集落 (CFU -GM)、白血病祖细胞 (CFU -L)形成 ,并以免疫组化法测定CD33、CD38和CD34阳性表达率的变化。结果 (1)rhTNF-α对8例正常人和17例患者的CFU -GM均有明显的抑制作用 ,而与IL -2联合作用对CFU-GM则无明显影响 ;(2)单用rhTNF-α或IL-2与患者骨髓共同孵育1d和3d,CFU -L形成率均有所下降 ,但至孵育3d后 ,尚残余20%、6%的白血病克隆 ,不能完全根除CFU-L;而两者联合作用3d后 ,CFU -L抑制率达100% ;(3)17例AML患者骨髓经rhTNF-α、IL-2净化培养3d后 ,白血病细胞CD33、CD38和CD34阳性表达率发生了明显变化。 结论 (1)单用rhTNF -α或IL-2净化效果不理想 ;(2)rhTNF-α联合IL-2对CFU -L有选择性杀伤作用 ,而对正常CFU -GM无明显影响 ,净化效果较好 ;(3)白血病细胞CD33、CD38、CD34阳性率的变化可间接评价AML骨髓净化效果。 展开更多
关键词 急性髓细胞白血病 rhtnfΑ 肿瘤坏死因子α 白细胞介素2 骨髓净化 骨髓移植
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rhTNF-α对昆明种小鼠艾氏腹水癌细胞杀伤作用的研究
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作者 王建峰 张焕峰 +1 位作者 周丽莉 赵鹏 《河南肿瘤学杂志》 1996年第3期173-175,共3页
昆明种小鼠腹腔接肿艾氏腹水癌细胞,3天后腹腔注射重组肿瘤坏死因子(rhTNF-α),隔日1次,共4次。用药后第7日两剂量组小鼠腹水癌细胞平均浓度分别为1.3±0.2×10(10)/L、1.6±0.2×... 昆明种小鼠腹腔接肿艾氏腹水癌细胞,3天后腹腔注射重组肿瘤坏死因子(rhTNF-α),隔日1次,共4次。用药后第7日两剂量组小鼠腹水癌细胞平均浓度分别为1.3±0.2×10(10)/L、1.6±0.2×10(10)/L,比对照组2.5±0.4×10(10)/L大幅度降低(P<0.01)。苔盼兰染色结果两实验组腹水中瘤细胞平均死亡率分别为46±6.1%、43±5.6%,比对照组19±3.7%显著升高(P<0.01)。用药小鼠平均存活时间分别为23±3.2天、19±3.3天,比对照组13±3.6天有所延长。提示rhTNF-α对艾氏腹水瘤细胞有杀伤作用。 展开更多
关键词 rhtnf 癌细胞杀伤作用 动物实验 艾氏腹水癌
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Effect of rhTNF-α on Mitochondrial Transmembrane Potential and Motility of Human Sperm in vitro by Flow Cytometry and Computer Aided of Semen Analysis 被引量:1
18
作者 Jiang BIAN Wei CHEN +3 位作者 Xian-kun GUO Cheng-liang XIONG Yan ZHANG Yong NEP 《Journal of Reproduction and Contraception》 CAS 2005年第2期89-98,共10页
To evaluate effect of recombined human tumor necrosis factor (rhTNF- α) on mitochondrial transmembrane potential and motility of human sperm in vitro Methods Semen samples for study were obtained from 40 health men... To evaluate effect of recombined human tumor necrosis factor (rhTNF- α) on mitochondrial transmembrane potential and motility of human sperm in vitro Methods Semen samples for study were obtained from 40 health men (average age 26 ± 1.2 years) with normal semen analysis. Sperm suspension with computer aided of semen analysis (CASA) technique; 2) were stained in the presence of 10 μg/ml Rh123 and PI, mitochondrial transmembrane potential of those was analyzed by flow cytometry (FCM). Results Significant differences were found between experimental groups and control groups on viability, straight line velocity, curvilinear velocity, average path velocity, progressive motility of human sperm and number of sperm with normal mitochondrial transmembrane potential (P〈0.01) expect final concentration 30 pg/ml group (P〉0. 05). Sperm motility lowed with increasing rhTNF-α concentration and incubating time (P〈0. 01). Number of sperm with normal mitochondrial transmembrane potential decreased with increasing rhTNF-α concentration and incubating time (P〈0.01). Conclusion rh TNF-α can decrease human sperm motility function in vitro, which can interfere the function of human sperm mitochondrial transmembrane potential and may inhibit sperm mitochondrial enzymatic activities. 展开更多
关键词 HUMAN SPERM mitochondrial transmembrane potential rhtnf
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转基因蓝藻制备α型重组人肿瘤坏死因子衍生物 被引量:8
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作者 王捷 刘凤龙 +3 位作者 吴锦银 施定基 江悦华 郭勇 《中国海洋药物》 CAS CSCD 1998年第1期4-6,共3页
应用DNA重组技术将a型重组人肿瘤坏死因子衍生物(recombinanthumantumornecrosisfactora,rhTNFa)cDNA插到穿梭质粒PDC-8上,构建成穿梭表达载体PDC-TNF,转入鱼腥藻... 应用DNA重组技术将a型重组人肿瘤坏死因子衍生物(recombinanthumantumornecrosisfactora,rhTNFa)cDNA插到穿梭质粒PDC-8上,构建成穿梭表达载体PDC-TNF,转入鱼腥藻PCC-71220中进行表达。 展开更多
关键词 转基因植物 蓝藻 制备 rhtnfΑ 肿瘤坏死因子
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重组人突变型471TNF-α及野生型TNF-α的表达及活性初步鉴定 被引量:4
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作者 李瑶琛 孔令洪 +3 位作者 王一理 尚宁宽 耿宜萍 司履生 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期14-16,29,共4页
目的 采用原核表达系统 ,表达人突变型 471TNF α蛋白 ,并检测其生物学活性。方法 采用PCR技术扩增突变型 471TNF α及野生型TNF αcDNA片段 ,克隆入中间载体pUCm T中 ,并测序证实。以限制性内切酶切下目的片段 ,克隆入pBV2 2 0中 ,... 目的 采用原核表达系统 ,表达人突变型 471TNF α蛋白 ,并检测其生物学活性。方法 采用PCR技术扩增突变型 471TNF α及野生型TNF αcDNA片段 ,克隆入中间载体pUCm T中 ,并测序证实。以限制性内切酶切下目的片段 ,克隆入pBV2 2 0中 ,转入大肠杆菌DH5α ,温度诱导表达野生型及突变型 471TNF α蛋白。初步纯化蛋白后 ,采用MTT法评估两者对L92 9细胞的杀伤作用。结果 ①获得了测序正确的野生型TNF α及突变型 471TNF α的cDNA克隆 ;②构建了正常人野生型TNF α及突变型 471TNF α重组表达质粒 ;③经温度诱导 ,TNF α及突变型 471TNF α蛋白均获得了表达 ;④初步的生物学活性研究表明 ,突变型 471TNF α蛋白的杀伤作用显著高于野生型。结论 突变型 471TNF α的生物学活性优于野生型TNF α ,为进一步开展TNF 展开更多
关键词 TNF-Α 突变体 蛋白表达
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