益赛普(rhTNFR-Fc)治疗强直性脊柱炎疗效观察

目的:观察应用益赛普(rhTNFR-Fc)治疗强直性脊柱炎(AS)的临床疗效,并对其安全性进行评估。方法:益赛普25mg+1ml灭菌注射用水,上臂皮下注射,2次/W,疗程为12周。病情控制后可加用抗风湿药物(DMARDs)持续治疗。结果:37例AS患者经过12周治疗后,患者总体评价(PGA)、BASDAI及BASFI评分平均值均明显下降,晨僵时间、夜间背痛(VAS)、脊柱痛(VAS)、指-地距等临床症状及体征均有明显改善,以上指标与治疗前比较差异具有显著性均有统计学意义(P<0.05),而枕-墙距与治疗前比较有所改善,但差异无统计学意义(P>0.05),治疗后患者的红细胞沉降率(ESR)、C-反应蛋白(CRP)等实验室指标均有明显下降,差异显著有统计学意义(P<0.05),治疗期间有7例患者发生了与治疗相关的不良事件,发生率18.92%,所有患者均未出现肝、肾功能异常,未发生严重的不良反应,安全性评估较好。结论:应用益赛普(rhTNFR-Fc)治疗活动期AS可以迅速改善或缓解患者的临床症状和体征,临床疗效显著,不良反应少,有较高的安全性和良好的耐受性。

重组人肿瘤坏死因子受体-Fc融合蛋白质控方法和标准的研究

目的 建立重组人肿瘤坏死因子受体 Fc融合蛋白质控方法和质量标准。方法 用中和TNF α生物学活性的方法测定重组人肿瘤坏死因子受体 Fc融合蛋白效价 ,用胰蛋白酶酶切分析肽图 ,用ELISA方法分别测定蛋白A、残留宿主细胞蛋白残留量和重组人肿瘤坏死因子受体 Fc融合蛋白含量。结果 建立了重组人肿瘤坏死因子受体 Fc融合蛋白的生物学活性、肽图分析、残留蛋白A等质控方法和质量标准。结论 建立的方法和质量标准已用于重组人肿瘤坏死因子受体

重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白对脂多糖致大鼠急性肺损伤的保护作用

目的:探讨重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白(rhTNFR:Fc)对脂多糖(LPS)致大鼠急性肺损伤的保护作用及其机制。方法:建立大鼠急性肺损伤模型,随机分为对照组、rhTNFR:Fc组、LPS组和rhTNFR:Fc+LPS组。给药后记录各组大鼠死亡情况,测定肺组织湿重/干重比,HE染色观察肺组织病理学改变,检测血清TNF-α含量及其生物活性。结果:LPS注射后大鼠死亡率及肺湿重/干重比显著高于对照组(P<0.05),HE染色可见大鼠肺间质充血、水肿,大量炎性细胞浸润,血清TNF-α含量及生物活性增高;rhTNFR:Fc+LPS组大鼠死亡率降低,肺组织病理损伤明显减轻,血清TNF-α生物活性显著低于LPS组(P<0.05)。结论:rhTNFR:Fc通过中和TNF-α,降低TNF-α生物活性,有效减轻LPS引起的大鼠急性肺损伤。

重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白治疗中、重度寻常性银屑病81例临床观察

目的评价皮下注射用重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白(商品名:益赛普)治疗中、重度寻常性银屑病的临床疗效。方法采用多中心、开放临床试验,对81例中、重度寻常性银屑病患者给予益赛普25mg皮下注射,2次/周,共治疗12周。结果 81例患者治疗12周后银屑病皮损面积和严重程度指数(PASI)、医生对病情的整体评分(PGA)、皮肤病生活质量指数(DLQI)和患者10cm视觉模拟评分(VAS)与基线相比均有显著改善(P<0.001)。结论益赛普是治疗中、重度寻常性银屑病的一种安全、有效的方法。

重组人肿瘤坏死因子受体融合蛋白体外对佐剂性关节炎大鼠T淋巴细胞功能的影响

目的研究重组人肿瘤坏死因子受体融合蛋白(rhT-NFR:Fc)体外用药对佐剂性关节炎(AA)大鼠T淋巴细胞增殖及T细胞亚群比例的影响。方法完全弗氏佐剂(CFA)免疫SD大鼠诱导AA模型,分离培养胸腺及肠系膜淋巴结淋巴细胞,rhTNFR:Fc(10、1、0.1、0.01、0.001μg/ml)体外给药,氚标记的胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法检测rhTNFR:Fc对胸腺T淋巴细胞增殖的影响,流式细胞术检测总Th细胞(CD4+/CD3+)、活化Th细胞(CD4+/CD25+)、CD4+/CD25+/Foxp3+Treg细胞及CD4+/CD62L+未活化Th细胞比例。结果 rhTNFR:Fc组能不同程度的抑制胸腺T淋巴细胞的异常增殖,对CD4+/CD3+总Th细胞比例无显著影响,可以明显降低异常活化的CD4+/CD25+Th细胞比例(P<0.01,P<0.05),明显提高下降的CD4+/CD25+/Foxp3+Treg细胞、CD4+/CD62L+未活化Th细胞比例(P<0.05,P<0.01)。结论 rhTNFR:Fc对AA大鼠的治疗作用可能与其抑制T淋巴细胞增殖、调节T细胞亚群比例有关。

重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白联合甲氨蝶呤治疗中重度斑块型银屑病临床观察

目的观察重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体一抗体融合蛋白联合甲氨蝶呤（MTX）治疗中重度斑块型银屑病的临床疗效及安全性。方法选取2009年8月至2012年8月来我院皮肤科进行治疗的中重度银屑病患者90例，采用抽签随机法分为研究组和对照组各45例。对照组患者每周一次口服甲氨蝶呤10mg；研究组患者每周二次皮下注射重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体一抗体融合蛋白，每次25mg，每次间隔3～4天，同时口服甲氨蝶呤10mg，每周一次。结果两组治疗4、8、12周后的PASI50、PASI75和PASI90比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）；两组均无严重不良反应。结论重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体一抗体融合蛋白联合甲氨蝶呤治疗中重度斑块型银屑病能够更好的控制病情，无严重不良反应。

重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体抗体融合蛋白联合甲氨蝶呤治疗类风湿关节炎50例临床观察

目的观察重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体抗体融合蛋白(rh TNFR:Fc)联合甲氨蝶呤(MTX)治疗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的临床疗效及安全性。方法 100例活动期RA患者采用抽签随机法分为两组各50例,MTX组采用MTX 15 mg/w治疗;联合治疗组采用MTX 15 mg/w加rh TNFR:Fc每次50 mg治疗。观察用药前及用药后2、4、8、12、24周患者肿胀关节数、疼痛关节数、压痛关节数、晨僵时间、医生和患者评价、疾病活动分数评分及血沉(ESR)、超敏C反应蛋白(CRP)、类风湿因子、抗环瓜氨酸太抗体水平。结果治疗24周后,联合治疗组的ACR改善率明显优于对照组(P<0.05);两组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 MTX联合rh TNFR:Fc治疗RA疗效显著,不良反应发生率也不高。

重组Ⅱ型肿瘤坏死因子受体抗体融合蛋白对野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压的作用及机制研究

目的:观察早期应用重组Ⅱ型肿瘤坏死因子受体抗体融合蛋白(rhTNFR-Fc)对野百合碱(monocrotaline,MCT)诱导的大鼠肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension,PAH)的作用,并探讨其机制。方法:成年雄性SD大鼠24只,随机分为正常对照组(C组)、rhTNFR-Fc组(R组)、MCT模型组(M组)、MCT+rhTNFR-Fc组(M+R组)。建立MCT诱导的PAH模型,测定各组平均肺动脉压(mPAP)、右心肥厚指数,检测各组肺小动脉血管管壁厚度占血管外径的百分比(WT%),应用ELISA法测定各组肺组织匀浆白介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)水平,Western blot法测定肺组织核因子-κB(NF-κB)蛋白水平。结果:①M组大鼠mPAP、右心肥厚指数及WT%值较C组显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05),rhTNFR-Fc可抑制MCT诱导的大鼠mPAP的升高(P<0.05)及肺小动脉管壁的增厚(P<0.05);②M组大鼠肺组织匀浆中IL-6、TNF-α水平与C组比较明显增高,差异有显著性(P<0.05),rhTNFR-Fc可抑制MCT诱导的PAH大鼠肺组织中IL-6、TNF-α的表达(P<0.05);③M组大鼠肺组织中NF-κB表达与C组比较显著增加(P<0.05),rhTNFR-Fc可抑制MCT诱导的PAH大鼠肺组织中NF-κB的表达增加(P<0.05)。结论:rhTNFR-Fc可能通过抑制NF-κB信号通路的激活及IL-6、TNF-α等炎症因子的表达防治MCT诱导的大鼠PAH。

重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白联合芍药苷对人滑膜细胞增殖的影响及部分机制

目的观察重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白(rhTNFR:Fc)与芍药苷(Pae)联合应用对人成纤维样滑膜细胞(FLS)增殖的影响,探讨其对肿瘤坏死因子受体(TNFR)信号通路的调节作用。方法经知情同意,收集行髋关节置换术患者正常滑膜组织,采用组织块培养法对人滑膜细胞进行培养。取第3代人FLS,用肿瘤坏死因子α(TNF-α,20μg/L)刺激,分别用rhTNFR:Fc(10 mg/L)、Pae(10-5mol/L)及二者联合干预。MTT法检测人FLS的增殖反应,免疫组化法半定量分析肿瘤坏死因子受体1(TNFR1)、肿瘤坏死因子受体相关因子2(TRAF2)、肿瘤坏死因子受体相关死亡结构蛋白(TRADD)在FLS中的表达情况。结果 rhTNFR:Fc与Pae联合用药对FLS增殖的抑制作用优于rhTNFR:Fc和Pae单独给药组。rhTNFR:Fc、Pae及联合用药均能明显下调FLS中TNFR1和TRAF2表达,上调TRADD表达;与单独用药相比,联合用药能进一步上调TRADD表达,而对TNFR1和TRAF2的表达无明显影响。结论 rhTNFR:Fc和Pae联合用药对人FLS增殖的抑制作用优于单独给药,其作用机制可能与调节TRADD有关。

重组人肿瘤坏死因子受体融合蛋白抗类风湿性关节炎机制研究

目的:探讨重组人肿瘤坏死因子受体融合蛋白(rhTNFR:Fc)对胶原诱导的Wistar大鼠类风湿性关节炎(CIA)动物模型的滑膜细胞凋亡影响。方法:模型随机分为阴性对照组、阳性对照组和rhTNFR:Fc组。rhTNFR:Fc组按17.5μg·kg(-1)每d皮下注射(ih)1次;阴性对照组ih等量0.9%氯化钠溶液;阳性对照组每d ih甲氨蝶呤(MTX),31 d后抽取膝关节滑液以ELISA法测IL-1β、TNFα水平;缺口末端标记法(TUNEL)标记检测凋亡。结果:TUNEL标记显示阴性对照组、阳性对照组、rhTNFR:Fc组的凋亡细胞分别为(2.1±0.9)%、(3.9±0.5)%和(4.4±0.8)%。阳性对照组和rhTNFR:Fc组膝关节滑液IL- 1β、TNF-α水平显著下降。结论:本试验首次阐明了rhTNFR:Fc可诱导CIA大鼠滑膜细胞的凋亡。抗类风湿性关节炎机制可能通过诱导滑膜细胞凋亡,最终减轻CIA大鼠的关节炎症。

rhTNFR：Fc对兔正畸微种植体周围炎骨结合影响的研究

目的:评价注射用重组人Ⅱ型TNF受体-抗体融合蛋白(tumour necrosis factor FC fusion protein,rhTNFR:Fc)(商品名:益赛普)对兔正畸微种植体周围炎骨结合的影响。方法:选用新西兰兔12只,随机分为模型对照组和治疗组。分别在兔下颌无牙区植入正畸微种植体,采用钢丝结扎法建立实验性微种植体周围炎模型,结扎56d,治疗组给予rhTNFR:Fc(剂量1.1mg/kg·d-1)1周,模型对照组给予等量生理盐水,两组在造模后第63天,行免疫组化染色来比较种植体周围TNF-α表达情况;CBCT技术及McNeal's染色法对种植体周围炎周围骨吸收及骨修复状态进行观察。结果:造模后63d,治疗组TNF-α较对照组减少(P<0.05),影像学检查及McNeal's染色结果显示治疗组骨吸收程度轻于对照组。结论:rhTNFR:Fc可影响微种植体周围炎骨结合过程。

注射用重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白治疗寻常型银屑病的疗效观察

目的:评价注射用重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白(商品名:益赛普)治疗中重度寻常型银屑病患者的疗效。方法:对我院2011年1月至2014年3月,诊断为中重度寻常型银屑病患者42例,其中益赛普组20例,阿维A组22例,按银屑病面积和严重程度指数(PASI)对疗效进行评分。结果:42例患者均完成治疗,治疗12周后,益赛普组PASI30、PASI60、PASI90的比例高于阿维A组,差异具有统计学意义(<0.05)。结论:抗肿瘤坏死因子靶向治疗中重度寻常型银屑病有效。

重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白对油酸致大鼠急性肺损伤的保护作用

目的:探讨重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白(rh TNFR:Fc)对油酸致大鼠急性肺损伤的保护作用。方法:72只SD大鼠随机分为生理盐水组(对照组)、油酸组(OA组)和rh TNFR:Fc干预组,分为0.5、2、4、6 h亚组;OA组:尾静脉注射油酸0.04 m L/kg造成急性肺损伤,采集外周血、支气管肺泡灌洗液(BALF)及肺组织标本。rh TNFR:Fc干预组:第1、4天皮下注射rh TNFR:FC 0.6 mg/只,第7天注射油酸0.04 m L/kg,采集标本。对照组:尾静脉注射等量生理盐水并收集标本。肺组织HE染色,测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量、BALF多形核白细胞(PMN)计数;计算肺组织湿/干质量比、肺泡通透指数(LPI)。结果:OA组显微镜下肺间质充血、水肿,大量炎性细胞浸润,rh TNFR:Fc组肺损伤介于OA组和对照组之间;OA组大鼠血清TNF-α含量、BALF中PMN百分比、肺湿/干质量比、LPI均显著高于rh TNFR:Fc干预组和对照组(P<0.05)。结论:rh TNFR:Fc通过中和TNF-α,降低TNF-α生物活性,减少肺组织液渗出,对油酸引起的大鼠急性肺损伤有一定的保护作用。

44例rhTNFR:Fc治疗类风湿关节炎发生肺结核风险研究

目的:了解与DMARDs(抗风湿药)相比,rhTNFR:Fc(重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白)治疗类风湿关节炎发生肺结核的风险。方法:收集2015年9月至2017年9月大理大学第一附属医院352位类风湿关节炎患者的临床资料,按治疗药物分为DMARDs组(308例)和rhTNFR:Fc组(44例),对治疗24周和48周后的肺结核发病情况统计分析。结果:治疗24周和48周后,DMARDs组和rhTNFR:Fc组肺结核发病率及陈旧性肺结核复发率差异无统计学意义。结论:研究未发现rhTNFR:Fc相比DMARDs使类风湿关节炎患者肺结核发病风险增高。

益赛普联合柳氮磺吡啶治疗强直性脊柱炎患者的效果

目的:观察注射用重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白(益赛普)联合柳氮磺吡啶治疗强直性脊柱炎患者的效果。方法:选取2020年1—12月该院收治的188例强直性脊柱炎患者进行前瞻性研究,按随机数字表法分为对照组和观察组各94例。对照组采用柳氮磺吡啶治疗,观察组在对照组基础上联合益赛普治疗,两组均连续用药6个月。比较两组治疗前后疼痛程度[视觉模拟评分法(VAS)]评分、病情严重程度[Bath强直性脊柱炎功能指数(BASFI)、Bath强直性脊柱炎病情活动指数(BASDAI)]评分、血清炎性因子[C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]水平,以及不良反应发生率。结果:治疗1、3、6个月后,两组VAS评分均低于治疗前,且观察组治疗3、6个月后VAS评分均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,两组BASFI和BASDAI评分均低于治疗前,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,两组血清CRP、IL-6和TNF-α水平均低于治疗前,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:益赛普联合柳氮磺吡啶治疗强直性脊柱炎患者可降低疼痛程度、病情严重程度和血清炎性因子水平,效果优于单纯柳氮磺吡啶治疗。

重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白联合甲氨蝶呤治疗活动性类风湿关节炎的疗效和对骨代谢的影响

目的 评估重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白（商品名益赛普）联合甲氨蝶呤治疗活动性类风湿关节炎（RA）的临床疗效、放射学改变和安全性.方法 30例中重度活动性RA患者应用益赛普（25 mg皮下注射,每周2次）联合甲氨蝶呤（15 mg口服每周）治疗.应用美国风湿病学会（ACR）20/50/70疗效标准和28个关节的疾病活动度评分（DAS28）评估临床疗效,应用改良的Sharp评分标准评价关节腔狭窄和关节侵蚀.结果 治疗24周时达到ACR20、50、70标准的有效率分别为90%、76.67%和46.67% DAS28由基线的6.41±0.61降至3.65±1.26（P＜0.01）,36.67%的RA患者达到疾病缓解或低度活动状态 欧洲抗风湿病联盟（EULAR）中等应答率和优良应答率分别为60%和36.67% 健康状况问卷评估逐渐减低,由基线的1.12降至0.36（P＜0.01） 90%患者双手腕X线片无放射学进展.不良反应与以往报道相似.结论 益赛普联合甲氨蝶呤治疗RA能够显著减低疾病活动度、改善关节功能以及延缓放射学进展,且耐受性良好 值得进行大样本的随机对照研究.

急性心肌梗死大鼠肿瘤坏死因子α表达与室性心律失常的关系

目的 研究肿瘤坏死因子α（TNF-α）对急性心肌梗死大鼠室性心律失常发生的影响.方法 将240只雄性Wistar大鼠随机（随机数字法）分为假手术组（Sham组）、急性心肌梗死组（AMI组）和TNF-α拮抗剂-重组人肿瘤坏死因子受体融合蛋白组（rhTNFR：Fc组）.Sham组开胸后不结扎冠状动脉;AMI组开胸后结扎冠状动脉左前降支（LAD）,建立急性心肌梗死模型;rhTNFR：Fc组结扎前24 h腹腔注射rhTNFR：Fc 10 mg/kg.于结扎前10 min和结扎后10 min,20 min,30 min,60 min,3 h,6 h,12 h,记录心电图,观测各组自发和程序电刺激诱发的室性心律失常;通过免疫组化和实时荧光定量PCR,检测各组结扎前后各时间点心肌TNF-α蛋白和mRNA的表达水平.数据处理采用方差分析和直线相关分析.结果 AMI组和rhTNFR：Fc组LAD结扎10 min后心肌TNF-α的蛋白及mRNA表达开始增多,20～30 min时达到高峰,然后逐渐下降.室性心律失常发牛的时间窗与TNF-α表达的时间窗基本一致.与AMI组相比,rhTNFR：Fc组心肌TNF-α蛋白表达及窜性心律失常发生率均较低（P〈0.05）,但TNF-α mRNA无明显差异.Sham组整个实验过程中无明显变化.结论 大鼠急性心肌梗死时,心肌表达的TNF-α能促进室性心律失常的发生.

重组人Ⅱ型TNF-α受体-抗体融合蛋白对胶原诱导性关节炎模型大鼠关节滑膜细胞NF-κB信号表达的影响

目的:探讨重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白(rhTNFR∶Fc)对胶原诱导性关节炎(CIA)模型大鼠关节滑膜细胞NF-κB信号表达的影响。方法:将40只6周龄的雌性Wistar大鼠按照随机数表法随机分为空白组、模型组、醋酸泼尼松对照组和rhTNFR∶Fc治疗组,每组10只。制备CIA模型,以Western blotting法检测关节滑膜细胞NF-κB/P65、p-ⅠκBα表达的情况。结果:rhTNFR∶Fc治疗组和醋酸泼尼松对照组可下调CIA大鼠滑膜细胞NF-κB/P65、p-ⅠκBα的表达,与模型组比较均有显著性差异(P<0.05)。结论:rhTNFR∶Fc可通过降低CIA大鼠关节滑膜细胞NF-κB/P65、p-ⅠκBα蛋白表达以达到缓解炎症的作用。

rhTNFR:Fc对离体大鼠心脏心肌梗死后快速室性心律失常的影响

目的:观察重组人肿瘤坏死因子受体融合蛋白(rhTNFR:Fc)对体外大鼠心脏急性缺血梗死后快速室性心律失常发生的影响,进一步探讨心肌急性缺血后心律失常机制及TNF-α在其中的作用。方法:将45只雄性大鼠随机分为3组,分别为对照组、急性心肌梗死组、急性心肌梗死加rhTNF:Fc组。Langenoff灌流大鼠体外心脏,结扎后2组大鼠的左前降支冠状动脉,记录心脏表面心电图,急性缺血0.5h后给予S1S2程序电刺激诱发室性心动过速或心室颤动,比较各个组间发生率的差异。结果:急性心肌梗死组出现室性心律失常的发生率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。急性心肌梗死加rhTNF:Fc组与急性心肌梗死组相比,心室颤动或室性心动过速发生率显著降低(P<0.01)。对照组与急性心肌梗死加rhTNF:Fc组差异无统计学意义。结论:特异性肿瘤坏死因子拮抗剂rhTNF:Fc能降低体外大鼠心脏急性心肌梗死后恶性心律失常的发生率。