大黄酸和罗格列酮对db/db糖尿病小鼠代谢紊乱和肾脏损伤的作用比较

目的 :比较大黄酸和罗格列酮对糖尿病db/db小鼠代谢紊乱和肾脏损伤的作用 ,探讨大黄酸防治糖尿病肾病的机制。 方法 :实验小鼠分四组 :db/m正常小鼠对照组 ;db/db糖尿病小鼠对照组 ;db/db糖尿病小鼠大黄酸 [1 2 0mg/ (Kg·d) ]治疗组 ;db/db糖尿病小鼠罗格列酮 [4mg/ (Kg·d) ]治疗组。连续灌胃 1 2周 ,于实验末比较各组体重、血糖和血脂水平。PAS染色、免疫荧光分析肾小球病理形态学改变。电镜分析线粒体数目形态改变。Real timePCR分析脂肪和肌肉组织过氧化物酶体增生物激活受体γ(PPARγ)、胰岛素抵抗因子 (resistin)和脂肪酸转运体 (FAT/CD36 )mRNA表达。 结果 :大黄酸和罗格列酮治疗均可明显降低db/db小鼠血糖水平。大黄酸治疗还可明显减轻体重 ,降低血胆固醇和三酰甘油水平 ,改善高脂血症 ;而罗格列酮治疗则增加小鼠体重 ,提高血胆固醇和低密度脂蛋白水平。组织学显示 ,db/db小鼠肾小球肥大 ,系膜区扩张 ,系膜基质增加 ,大量纤维连接蛋白 ;同时肾小管线粒体数目减少 ,体积增大 ,嵴结构不清。大黄酸和罗格列酮治疗后均可明显改善上述肾脏病理改变 ,但对线粒体的作用大黄酸较罗格列酮更为明显。db/db小鼠肌肉和脂肪组织PPARγ和resistin的表达均明显下降 ,FAT/CD36表达增加。

大黄酸和辛伐他汀对db/db糖尿病小鼠脂代谢紊乱和肾脏保护作用的比较

目的比较大黄酸和辛伐他汀对糖尿病db/db小鼠脂代谢紊乱的影响以及它们对糖尿病肾病肾脏损伤的保护作用。方法8周龄的db/db和db/m小鼠分为四组Adb/m正常对照组;Bdb/db糖尿病对照组;Cdb/db糖尿病大黄酸[150mg/(kg.d)]治疗组;Ddb/db糖尿病辛伐他汀[20mg/(kg.d)]治疗组;于不同治疗时间测定各组体重、血糖、血脂(胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、载脂蛋白E)、血肌酐、24h尿白蛋白水平。肾组织病理切片行HE、PAS染色,采用图像分析软件对肾小球病理形态学改变进行半定量分析。免疫组化观察肾组织转化生长因子(transforminggrowthfactor-β,TGF-β)以及纤维粘连蛋白(fibronectin,FN)的表达。结果治疗12周时大黄酸治疗组血糖较糖尿病对照组下降、体重减轻,治疗8周时大黄酸和辛伐他汀治疗组血胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白以及载脂蛋白E较糖尿病对照组均明显下降,二组疗效无明显差异。治疗8周时大黄酸组24h尿白蛋白排泄较糖尿病对照组均有明显下降(P<0.05),而辛伐他汀组在治疗12周时尿白蛋白排泄方有所下降。治疗12周时大黄酸组肾脏肥大、基质增生明显改善,辛伐他汀组肾组织病理也有所改善,但大黄酸治疗组效果更加明显。大黄酸组肾组织TGF-β、FN表达较糖尿病对照组有明显下降(P<0.05),辛伐他汀治疗组TGF-β、FN表达较糖尿病对照组有所下降但无显著性差异(P>0.05)。结论大黄酸治疗后明显降低db/db小鼠血糖,减轻体重,而辛伐他汀对于血糖和体重无明显影响;大黄酸和辛伐他汀均能够改善2型糖尿病模型db/db小鼠的脂代谢紊乱,二者疗效无明显差异;大黄酸降低尿白蛋白排泄量以及稳定肾功能的作用比辛伐他汀更加明显;大黄酸减少肾小球肥大以及细胞外基质增生的作用比辛伐他汀更为显著;大黄酸对TGF-β、FN表达的下调作用也明显强于辛伐他汀;大黄酸是一种不同于辛伐他汀的新的降低血脂、治疗糖尿病肾病的药物。

大黄酸和苯那普利联合治疗db/db糖尿病小鼠的疗效观察

目的:观察大黄酸和苯那普利对糖尿病db/db小鼠肾脏损伤的保护作用,比较二者疗效的差别,同时探讨大黄酸联合苯那普利治疗2型糖尿病肾病的疗效。方法:8周龄的db/db和db/m小鼠分为五组:A:db/m正常小鼠对照组;B:db/db糖尿病小鼠对照组;C:db/db糖尿病小鼠大黄酸[150mg/(kg·d)]治疗组;D:db/db糖尿病小鼠苯那普利[10mg/(kg·d)]治疗组;E:大黄酸[150mg/(kg·d)]联合苯那普利[10mg/(kg·d)]治疗组。于不同治疗时间(4周、8周、12周)测定各组体重、血糖、血脂(胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白)、血肌酐、24h尿白蛋白水平。肾组织病理切片行HE、PAS染色,采用图像分析软件对肾小球病理形态学改变进行定量分析。免疫病理观察肾组织转化生长因子(transforminggrowthfactor-β,TGF-β)以及纤维粘连蛋白(fibronectin,FN)的表达,并行半定量评分。结果:大黄酸组在治疗8周时体重、血糖、胆固醇、低密度脂蛋白、24h尿白蛋白排泄较糖尿病对照组均有明显下降(P<0·05),治疗12周时肾小球肥大、基质增生较糖尿病对照组明显改善,TGF-β、FN在肾小球中表达下调;苯那普利组治疗8周时24h尿白蛋白排泄较糖尿病对照组明显下降(P<0·05),治疗12周同样可减轻肾组织病变;大黄酸联合苯那普利组治疗第4周就能明显降低胆固醇、减轻尿白蛋白排泄,并且在治疗12周时血肌酐水平较糖尿病对照组明显下降(P<0·05),肾小球肥大以及基质增生较糖尿病对照组改善更为明显,同时TGF-β以及FN的表达下调更为显著。结论:大黄酸可改善db/db小鼠的肥胖程度、降低血糖、脂代谢紊乱,同时能降低尿白蛋白的排泄、改善肾功能,明显减轻db/db小鼠的肾脏病变;苯那普利同样可降低尿白蛋白排泄,改善肾功能,减轻肾组织病理改变。大黄酸和苯那普利联合治疗较单独用药更早的降低尿白蛋白排泄和改善血脂水平,同时改善肾功能和减轻肾组织病变的疗效也更加明显,大黄酸和苯那普利联合治疗疗效明显优于二者单独用药。

Ⅱ型糖尿病肾病模型db/db小鼠血浆的代谢组学研究

目的采用基于核磁共振的代谢组学技术研究糖尿病肾病模型db/db小鼠血浆中小分子代谢物的变化。方法用核磁共振技术检测db/db小鼠(6只)和db/m小鼠(6只)血浆中的小分子代谢物,应用模式识别技术对积分数据进行正交偏最小二乘辨别(OPLS-DA)分析及相关性分析,利用MATLAB软件做相关系数图。结果统计分析结果显示,与对照组db/m小鼠相比,试验组db/db小鼠血浆中葡萄糖和氧化三甲胺(TMAO)的含量升高,多种氨基酸含量下降。结合代谢途径分析发现,糖尿病肾病小鼠体内存在氨基酸代谢异常和能量代谢异常,肾脏受到损伤。结论本文所采用的基于核磁共振的代谢组学技术能全面客观地反映糖尿病肾病小鼠血浆中的代谢物变化,潜在的代谢标志物分析及代谢途径探讨将为临床诊断及机制研究提供新思路。

石斛合剂对db/db小鼠糖尿病肾病水代谢的调节

目的观察石斛合剂对db/db糖尿病肾病小鼠水代谢相关指标的影响。方法选用8～9周龄雄性db/db小鼠,按空腹血糖及体质量随机分成模型组、六味地黄丸组、石斛合剂低、高剂量组,db/m小鼠为正常组。除模型组和正常组灌生理盐水外,其余各组灌胃相应的药物,连续给药8周。实验期间,分别于第0周、4周、8周测定各组空腹血糖(FBG),实验结束后测定血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)含量,观察肾病理变化,并用免疫荧光和Western-blot法检测AQP2、AQP3的表达。结果与模型组比较,石斛合剂低、高剂量组和六味地黄丸组干预8周后,都可以显著降低db/db小鼠的空腹血糖,并降低血清中Scr和BUN(P<0.05或P<0.01);模型组AQP2、AQP3的蛋白表达较正常组明显升高(P<0.01),石斛合剂高剂量组可下调AQP2、AQP3的异常高表达(P<0.05或P<0.01)。结论石斛合剂能有效改善db/db糖尿病小鼠的高血糖和肾功能,其对糖尿病肾病的防治作用可能与调节水通道蛋白的表达相关。

脐带间充质干细胞来源的凋亡小体和外泌体治疗db/db小鼠糖尿病肾病的临床效果

目的探讨脐带间充质干细胞来源的凋亡小体(UCMSCs-ABs)和脐带间充质干细胞来源的外泌体(UCMSCs-Exos)治疗db/db小鼠糖尿病肾病(DN)的临床效果。方法将20只db/db小鼠随机分为db/db模型组、脐带间充质干细胞(UCMSCs)组、UCMSCs-ABs组、UCMSCs-Exos组,每组5只,分别尾静脉注射生理盐水、UCMSCs、UCMSCs-ABs、UCMSCs-Exos,以5只db/m小鼠为对照,设为db/m组。在治疗第6周行腹腔葡萄糖耐量试验(IPGTT),治疗第7周行腹腔胰岛素耐量试验(IPITT)。治疗8周后,观察小鼠血糖、糖化血红蛋白(HbA1c)、胰岛素、体重、肾脏/体重指数、尿素氮(BUN)、血肌酐、24 h尿量、24 h尿蛋白定量变化情况,留取肾脏组织观察病理变化。结果与db/m小鼠相比,db/db小鼠出现了显著的DN病理变化。UCMSCs、UCMSCs-ABs和UCMSCs-Exos治疗后小鼠血糖水平降低,肾脏功能改善,基底膜增厚和系膜基质增多改善,鲍曼囊腔横截面积和肾小球横截面积减小,肾小球系膜区及肾间质胶原沉积减少,且UCMSCs-Exos的治疗效果更明显。结论UCMSCs、UCMSCs-ABs和UCMSCs-Exos可以改善db/db小鼠的DN损伤,且UCMSCs-ABs的作用更为显著。

红芪多糖对db/db小鼠肾组织血管内皮生长因子、色素上皮细胞衍生因子表达的影响

目的探讨红芪多糖(HPS)对糖尿病肾病(DN)db/db小鼠肾脏的保护机制。方法以12周龄雄性db/m小鼠10只作为正常组,同周龄雄性db/db小鼠50只随机分为HPS高、中、低剂量组和依那普利组、模型组,每组10只。HPS高、中、低剂量组分别给予HPS 400、200和100mg/(kg·d)灌胃;依那普利组给予依那普利10mg/(kg·d)灌胃;模型组、正常组给予等量生理盐水灌胃;各组均连续灌胃8周。采用免疫组织化学法和免疫印迹法检测各组小鼠肾组织血管内皮生长因子(VEGF)与色素上皮细胞衍生因子(PEDF)蛋白表达;RT-PCR法检测各组小鼠肾组织VEGF与PEDF mRNA表达。结果模型组较正常组VEGF mRNA及蛋白表达均上调(P<0.01),PEDF mRNA及蛋白表达均下调(P<0.01);与模型组比较,除HPS低剂量组外(P>0.05),其余各给药组VEGF mRNA及蛋白表达均下降(P<0.05或P<0.01),PEDF mRNA及蛋白表达均上升(P<0.05或P<0.01)。结论 HPS可通是过调节db/db小鼠肾组织中VEGF、PEDF蛋白和mRNA的表达,从而起到保护DN小鼠肾脏的作用。