红花龙胆枯萎病病原菌鉴定及培养特性研究

枯萎病是红花龙胆栽培中发生最普遍,危害最严重的病害之一。为明确引起红花龙胆枯萎病的病原种类及其侵染特性,本研究采用组织分离法获得2个菌株,结合形态学特征以及ITS和Mcm7序列鉴定,2个菌株被鉴定为Clarireedia jacksonii,这是该菌在龙胆科植物上引起枯萎病的首次报道。致病性测定表明,该菌在15~35℃可侵染红花龙胆健康叶片,最佳侵染温度为25℃。生长特性研究表明,该菌最适生长温度为25℃,最适pH为5,菌丝致死温度为50℃处理10 min。

Exploring the anti-hepatoma effect and potential targets of the active components from Gentiana rhodantha Franch ex Hemsl

The screening of lead compounds in plants is an important way to develop new drugs.Gentiana rhodantha Franch ex Hemsl,belonging to genus Gentiana of Gentianaceae family,has the functions of clearing heat and drying dampness,detoxifying and purging fire,relieving cough and so on.Previous studies have shown that many compounds in G.rhodantha have antitumor activities,but the mechanism is still unclear.The purpose of this study was to investigate the anti-hepatoma activity of the compounds in G.rhodantha by using the knowledge of network pharmacology.A compound-cancer target network with 57 candidate molecules and 38 potential targets was constructed.Analysis of the models showed that the most effective compound in this plant might be compound 47(rhyncoside D)ether,and the most potential target might be GMP synthase(2vxo).We believe that the present study can provide important clues for the study of anti-hepatoma activity.

A review of phytochemistry and pharmacology perspectives of Gentiana rhodantha Franch.ex Hemsl.

Gentiana rhodantha Franch.ex Hemsl.(G.rhodantha)is a perennial herb distributed in southwest China,belonging to the Gentiana genus of Gentianaceae family.Previous research indicated that G.rhodantha contains flavonoids,anthraquinones,terpenes and other compounds,which possess the effects of antioxidant,antibacterial,and antitumor.Besides,its dry herb is used as antiphlogistic and antitussive remedy for the treatment of lung,liver,and gallbladder diseases.This review outlines the chemical constituents and biological activities of G.rhodantha,which will be useful for the further research on this plant.

红花龙胆药材的UPLC指纹图谱研究与芒果苷含量测定

目的为红花龙胆药材的质量控制提供参考依据。方法以52批红花龙胆药材为研究对象,采用超高效液相色谱(UPLC)法,以《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)》对52批药材样品进行相似度评价,并测定药材中芒果苷含量,再进行化学计量学分析[聚类分析、主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)]。结果建立了52批红花龙胆药材样品的UPLC指纹图谱,标定了17个共有峰,指认了其中6个,分别为马钱苷酸(1号峰)、新芒果苷(3号峰)、獐牙菜苦苷(5号峰)、当药苷(6号峰)、芒果苷(7号峰)与异荭草苷(9号峰)。52批药材样品的相似度均大于0.9;聚类分析结果显示,S1~S46、S48~S52聚为一类,S47单独为一类;PCA结果显示,前6个主成分的累计方差贡献率为82.928%;OPLS-DA结果显示,獐牙菜苦苷、芒果苷以及4、14、15、16号峰所代表的化学成分是影响红花龙胆药材质量差异的主要标志性成分。52批药材样品中芒果苷的含量在18.2~101.0 mg/g之间,大多符合2020年版《中国药典》规定。结论所建立的UPLC指纹图谱和化学计量学分析方法结合芒果苷含量测定方法,能较为全面地评价红花龙胆药材的质量。

基于因子分析和聚类分析的红花龙胆种子质量评价

采用相关分析、因子分析、聚类分析等方法,对30个种源的红花龙胆种子进行综合评价,为筛选适宜红花龙胆人工种植的优质种子提供参考依据。结果表明,以种荚长径、种荚宽径、种子长径、种子宽径、千粒重、发芽率评价种子质量,C4(黔西县钟山镇)最好;以发芽势、发芽指数评价种子质量,C5(观山湖区百花湖镇)最好;以发芽天数评价种子质量,C2(七星关区流沧桥)最好。相关性分析表明,红花龙胆种子特性指标和发芽特性指标之间相关性弱,种荚长径与其他指标相关性弱。因子分析表明,可以将发芽率、发芽势、千粒重等8个指标转化为彼此不相关的2个主因子(种子特性因子和发芽特性因子),累积贡献率达79.63%,以种子特性因子评价种子质量,C4(黔西县钟山镇)最好,以发芽特性因子评价种子质量C5(观山湖区百花湖镇)最好,综合评价C4(黔西县钟山镇)最好。系统聚类分析可以将实验材料分为四大类,以C4(黔西县钟山镇)为代表的第一类种子质量最好。基于因子分析和聚类分析的综合评价更适合评价红花龙胆种子质量。

红花龙胆花色素的提取及性质

以红花龙胆花瓣为材料,对其花色素进行提取及理化性质研究。结果表明:红花龙胆花色素液在可见光区的最大吸收波长为531nm;以体积分数70%乙醇溶液提取花色素的效果较好;该花色素对紫外线、高温、VC,以及H2O2和Na2SO3的耐受性较差,但葡萄糖、蔗糖和柠檬酸对色素溶液几乎无影响;Na+、Ca2+、A13+等金属盐离子对花色素的影响很小,但Fe2+对花色素具有显著增色作用;花色素在pH值小于等于3时保持红色色泽,但中性和碱性环境下其红色色泽被完全破坏。根据研究结果初步推断该花色素为含有酚羟基的花青素。

三叶青藤醇提物的急性毒性及抗炎作用研究

目的对三叶青藤醇提物的急性毒性及抗炎作用进行研究。方法三叶青藤醇提物以最大浓度及最大给药体积的药液对实验组小鼠灌胃给药,对照组给予等体积的溶媒,连续观察14 d,记录小鼠毒副反应情况。采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀法、角叉菜胶致大鼠足肿胀法观察三叶青藤醇提物的抗炎作用。结果观察14 d后,给药组与对照组全部动物健存,对照组及给药组小鼠体质量平均增长分别为38.40%,36.29%,无明显差异(P>0.05),未见任何急性毒性反应,小鼠灌胃三叶青藤醇提物的最大耐受量为3 063 mg/kg。三叶青藤醇提物对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀和角叉菜胶所致大鼠足肿胀有显著的抑制作用。结论三叶青藤醇提物毒性较小并有显著的抗炎作用。

火焰原子吸收法测定红花龙胆中重金属元素含量

为了解贵州少数民族药红花龙胆中重金属（Mn,Zn,Pb,Cu,Cr,Cd,Ni）的含量,采用HNO3HClO4（5∶1）体系消解样品,火焰原子吸收光谱法测定红花龙胆中7种重金属元素含量.结果表明：红花龙胆中Zn、Cu、Cd、Mn、Ni、Cr、Pb重金属含量分别为51.45 μg/g,9.64 μg/g,0.28 μg/g,62.79 μg/g,6.39 μg/g,5.60 μg/g,12.26 μg/g,7种重金属元素的含量大小依次为Mn＞Zn＞Pb＞Cu＞Ni＞Cr＞Cd.加标回收率在96.7％～105.2％,RSD为0.46％～2.26％,该法快速、简便、灵敏、准确,可用于红花龙胆中重金属元素的分析.

三叶青藤抗炎活性部位研究

目的筛选三叶青藤的抗炎活性部位。方法分步溶剂萃取法制备不同极性部位,采用醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性模型、大鼠棉球肉芽肿模型筛选抗炎活性部位。结果三叶青藤正丁醇提取部位和水溶液部位能显著抑制小鼠腹腔毛细血管通透性增高以及大鼠棉球肉芽肿的形成。结论正丁醇提取部位和水溶液部位为三叶青藤的抗炎有效部位。

红花龙胆的药用民族植物学及质量评价

采用药用民族植物学的文献研究和调查编目等方法对涉及红花龙胆的文献进行系统梳理,对采集和收集的样品进行鉴定;运用高效液相色谱法对采集和收集样品中的芒果苷进行含量测定.结果显示,红花龙胆分布区内的苗族、土家族及汉族等民族均将红花龙胆用作清热、消炎、止咳之草药,用于治疗肺及肝胆疾病;12批样品中的芒果苷含量平均2.8%,传统应用全草的样品含量均超过2.0%,地区之间的含量没有显著差异.研究表明,芒果苷可视为红花龙胆的药效物质基础;芒果苷限量标准的制订可为以红花龙胆为原料的新药和成药标准的提升提供参考.

四种龙胆的显微结构特征比较

为比较红花龙胆(Gentiana rhodantha)与翼萼龙胆(Gentiana pterocalyx)、滇龙胆(Gentiana rigescens)与头花龙胆(Gentiana cephalantha)的显微结构差异,用石蜡组织切片法及徒手切片法对4种龙胆的显微结构进行了研究。结果表明,红花龙胆与翼萼龙胆、滇龙胆与头花龙胆显微结构特征有明显区别。在根横切面方面,红花龙胆皮层厚,导管细胞横切口径小,无明显射线,翼萼龙胆的特征与红花龙胆的相反;滇龙胆与头花龙胆的表皮和皮层早脱,次生韧皮部发达,但滇龙胆韧皮部薄壁组织细胞较大,而头花龙胆较小。在茎横切面方面,红花龙胆中央髓约占切面的1/3,而翼萼龙胆约占切面的1/2;滇龙胆髓仅外部有散落分布的纤维束,头花龙胆髓部均可见纤维束散落分布。在叶横切面方面,红花龙胆中脉维管束较大,而翼萼龙胆较小;滇龙胆中脉维管束小,未见纤维束,头花龙胆中脉维管束大,纤维束成对位于木质部两侧。在叶表皮方面,4种植物表皮细胞径向壁波曲度与气孔指数有一定差异。根据显微结构特征可以将这4种植物区别开来。

三叶青藤醇提物对胶原性关节炎大鼠关节肿胀率和组织病理学作用的研究

目的研究三叶青藤醇提物对Ⅱ型胶原诱导的大鼠关节炎关节肿胀率和病理改变作用。方法用SD大鼠建立CIA动物模型,用三叶青藤醇提物从造模第2周开始灌胃给药,时间为4周,用毛细管放大法每周测量注射侧踝关节肿胀率,并用苏木素-伊红(HE)染色方法,观察注射侧踝关节病理组织学改变。结果三叶青藤醇提物能显著减轻胶原性关节炎大鼠的关节肿胀率,但对关节组织病理学没有明显的改善作用。结论三叶青藤醇提物对大鼠胶原性关节炎有一定抑制作用,其机制与非特异性抗炎作用有关。

三叶青藤醇提物对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响

目的:研究三叶青藤醇提物的抗炎作用。方法:采用醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性试验观察三叶青藤醇提物的抗炎作用。结果:三叶青藤醇提物能显著抑制醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高。结论:三叶青藤醇提物有显著的抗炎作用。

三叶青藤生药学研究

目的对三叶青藤进行生药学研究,为鉴别、临床应用和进一步开发利用提供参考资料。方法采用性状鉴别,显微鉴别和理化鉴别的方法。结果发现三叶青藤根的导管主要集中成一条带状;叶栅栏组织细胞通过主脉;主脉维管束外韧形,上方又有一小外韧形维管束,两维管束被一条纤维束分开,其外侧均有纤维束,呈环状;薄壁细胞中含有大量针晶和少量砂晶。结论以上特征可作为鉴别三叶青藤的参考依据。

三叶青藤正丁醇部位化学成分的研究

目的研究三叶青藤Illigera rhodantha Hance.正丁醇部位的化学成分。方法三叶青藤乙醇提取液的正丁醇部位采用Sephadex LH-20、MCI、ODS C_(18)进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果从中分离到8个化合物,分别鉴定为赤式-紫丁香酰甘油(1)、黑风藤苷A(2)、黑风藤苷(3)、阿江榄仁树葡糖苷Ⅱ(4)、β-谷甾醇(5)、没食子酸(6)、没食子酸甲酯(7)、没食子酸乙酯(8)。结论化合物1~8为首次从该植物中分离得到,化合物1~4和6~8为首次从青藤属植物中分离得到。

国产青藤属3种植物的考订

对国产青藤属3种植物作了补充和修订．报道短蕊青藤在广西和广东的新分布，大花青藤在四川的新分布；将小果青藤和柔毛青藤归入大花青藤，将绣毛青藤归入红花青藤。

红花龙胆血清药物化学初步研究

目的研究红花龙胆血清药物化学,探讨红花龙胆药效作用的物质基础。方法采用血清药物化学研究方法,在建立红花龙胆高效液相色谱(HPLC)指纹图谱的基础上,比较红花龙胆提取物、红花龙胆含药血清、空白血清HPLC指纹图谱差异,确认红花龙胆提取液灌胃后大鼠含药血清的移行成分。结果在红花龙胆含药血清中发现20个入血成分,4个为原型成分,其余16个可能为原型成分代谢产物。结论 20个入血成分可能是红花龙胆的体内直接作用物质,对其进行深入研究可能有助于阐明红花龙胆的药效物质基础及药效机制。

贵州红花龙胆资源调查及主要形态性状分析

为了更好地保护和合理利用野生红花龙胆资源，通过野外考察、标本采集、分类学鉴定及资料考证，对贵州省红花龙胆资源进行了调查，并对其29个性状进行了描述与测量。结果显示，贵州九个地州市均有红花龙胆分布，分布范围较广，但资源储量较小；红花龙胆茎分枝变异系数最大（61.08%），千粒重变异系数最小（1.38%），大部分性状的变异系数为10～20%。随着旅游业的发展及原药材的收购，野生红花龙胆资源越来越少，建议在就地保护的基础上开展迁地保护及驯化栽培。此外，红花龙胆冬季开花，花较大，红紫色，可以培育成冬季观赏花卉。

超临界二氧化碳流体萃取三叶青藤挥发油成分分析

目的采用GC-MS法分析三叶青藤挥发油成分,为其质量评价提供科学依据。方法采用二氧化碳超临界萃取法(SFE-CO2)萃取并分离三叶青藤药材中的挥发油,所提取得到的挥发油运用GC-MS进行分析,用面积归一化法确定其相对含量。结果从三叶青藤药材中提取的挥发油经GC-MS分析,共检测到84个色谱峰,通过NIST库检索一共鉴定出39个化合物的具体结构,占所提取的三叶青藤挥发油总量的56.47%(g/g),其中棕榈酸、十三烷酸、芳樟醇等在该药材挥发油中占的比例较高。结论该方法提取条件优良,初步揭示了该药材挥发性成分,对进一步研究其化学成分打下基础,为药材的质量评价提供科学参考。

红花龙胆的药学研究进展

红花龙胆(Gentiana rhodantha Franch.)为2015版《中国药典》的新增中药品种,全草入药,常用于治疗胆囊炎和肺结核等症。红花龙胆主要分布于我国西南地区,长期作为地方用药及民族药。研究表明红花龙胆中主要含口山酮类化合物。经过系统的文献研究,本文将从本草考证、化学成分、药理活性、质量评价以及常见易混伪品种等方面对红花龙胆的研究现状进行整理,为进一步开发利用提供依据。