柱前衍生化法测定复方氨基酸注射液(18AA-Ⅱ)中氨基酸的含量

目的建立复方氨基酸注射液(18AA-Ⅱ)的柱前衍生化含量分析方法。方法以邻苯二甲醛联合9-芴甲基氯甲酸酯(OPA-FMOC)进行在线衍生,采用Zorbax Eclipse-AAA柱,以40 mmol/L NaH_(2)PO_(4)溶液(pH7.8)为流动相A,乙腈-甲醇-水(45:45:10)为流动相B,梯度洗脱,检测波长338、262 nm,柱温40℃。结果各氨基酸之间分离度良好,线性相关系数均不小于0.9994,平均回收率99%~103%,重复性RSD均小于2%。结论该法稳定、准确、高效,可为复方氨基酸注射液的含量测定和质量评估提供参考,并首次报道了OPA-FMOC衍生分析法中赖氨酸峰面积重复性不佳的优化方法。

核糖核酸Ⅱ对老年晚期非小细胞肺癌患者生存期及免疫功能的影响

目的观察注射用核糖核酸Ⅱ(简称核Ⅱ)对美国东部肿瘤协作组(ECOG)评分>2分的老年晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者的生存期及免疫功能的影响。方法将99例ECOG评分超过2分的老年晚期NSCLC患者随机分为核Ⅱ组(50例)和对照组(49例),核Ⅱ组患者静脉滴注核Ⅱ200 mg、每日1次,对照组患者采用最佳支持治疗。结果治疗后核Ⅱ组患者CD3+,CD4+,CD56+,CD4+/CD8+表达的提升明显高于对照组(P<0.05);核Ⅱ组患者咳嗽、发热、乏力及恶液质的发生率低于对照组(P>0.05);核Ⅱ组KPS评分升高比例明显高于对照组(P<0.05),体重明显增加(P<0.05);核Ⅱ组患者的无进展生存期(PFS)延长(P<0.05),总生存期(OS)延长无统计学意义(P>0.05)。结论核Ⅱ可提高ECOG评分>2分的晚期NSCLC老年患者的免疫力,减轻其相关症状,改善生活质量,增加体重,延长患者的无进展生存期,但对延长总生存期无临床意义。

老年患者使用核糖核酸Ⅱ的疗效观察

目的探讨老年患者使用注射用核糖核酸Ⅱ的疗效。方法分析50例老年患者静脉使用注射用核糖核酸Ⅱ前后免疫指标的变化、患者的主观感觉及呼吸道感染的几率。结果治疗期间,50例患者中有2例患者出现轻度头晕而终止治疗,48例患者主观感觉良好,呼吸道感染的几率明显减少。治疗后免疫指标IgG、IgA、IgM、CD3、CD4、CD8都有所提高,达到或接近正常水平,与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论老年患者使用注射用核糖核酸Ⅱ疗效好,不良反应少。

注射用核糖核酸Ⅱ安全性医院集中监测研究

目的开展注射用核糖核酸Ⅱ上市后安全性再评价研究。方法采用医院集中监测方法,选取我院2016年7月至2017年3月使用注射用核糖核酸Ⅱ的住院患者1 800例,从患者的一般信息、临床诊断、用药信息、不良反应/不良事件(ADR/ADE)信息进行统计分析。结果纳入的1 800例患者中,发生4例ADR,不良反应发生率为0.22%,属于偶见不良反应。临床表现为头晕、心悸、皮疹、恶心等。结论注射用核糖核酸Ⅱ不良反应发生率较低,安全性良好。

血管紧张素Ⅱ1型受体基因表达的稳定性研究

目的：探讨血管紧张素 Ⅱ（ＡｕｇⅡ）、环磷酸腺苷（ｃＡＭＰ）对 ＡｎｇⅡ１型（ＡＴ１）受体信使核糖核酸（ｍＲＮＡ）表达的稳定性及心肌细胞蛋白代谢的影响。 方法：３天以内 ＳＤ乳鼠原代培养的心肌细胞，分为对照组（不加刺激因子）、Ａ组（加入放线菌素 Ｄ ５μｇ／ｍｌ）、Ｂ组（加人Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ及ＩＢＭＸ各３０μｍｏｌ／Ｌ）；Ｃ组（加入放线菌素Ｄ ５ μｇ／ｍｌ、Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ及ＩＢＭＸ各３０ μｍｏｌ／Ｌ），与刺激因子作用后，提取细胞ＲＮＡ，逆转录多聚酶链反应测定ＡＴ１受体ｍＲＮＡ含量。 结果：ＡＴ１受体ｍＲＮＡ半衰期约在 ４．９ 小时，ＡｕｇⅡ、放线菌素Ｄ单独或共同作用心肌细胞 ６ 小时ＡＴ１受体ｍＲＮＡ的表达无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。Ｂ组ＡＴ１受体ｍＲＮＡ的表达与对照组比较具极显著性差异（Ｐ＜０．０１）。ＡｎｇⅡ、Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ＋ＩＢＭＸ分别或共同作用心肌细胞 １４４小时，使其蛋白含量分别为对照的 １３３． ３％（与对照比有显著性差异，Ｐ＜０．０５）、９２．８％（与对照比无显著性差异，Ｐ＞０．０５）和１０５．０％（与对照比无显著性差异，Ｐ＞０．０５）。 结论：ＡｎｇⅡ不改变ＡＴ１受体ｍＲＮＡ的稳定性，ｃＡＭＰ?

我院注射用核糖核酸Ⅱ使用情况分析

目的:了解我院辅助用药核糖核酸Ⅱ注射液的用药情况,促进我院辅助用药的合理化。方法:分析我院去年全年核糖核酸Ⅱ注射液使用的基本情况,按科室5%抽查病历数,并分析用药合理性。结果:抽查的163份病历中有82份用药不合理,不合理使用率为50%,主要存在的问题为无指征用药。结论:我院核糖核酸Ⅱ注射液临床应用存在很多问题。

核糖核酸Ⅱ致过敏性休克1例

本文报告1例面神经瘫痪患者使用甲磺酸倍他啶片、血塞通注射剂和核糖核酸Ⅱ治疗后,发生呼吸困难、四肢麻木并抽搐、手指挛缩、口唇青紫,前臂和颈项出现大片荨麻疹,脉搏细速,血压30/20 mmHg。停用核糖核酸Ⅱ后继续使用甲磺酸倍他啶、血塞通,患者未再出现过敏性休克。因而核糖核酸Ⅱ所致过敏性休克的诊断成立。

注射用核糖核酸Ⅱ细菌内毒素检查法研究

目的:建立注射用核糖核酸Ⅱ的细菌内毒素检查方法。方法:按《中国药典》2015年版四部通则进行实验和结果判断。结果:注射用核糖核酸Ⅱ稀释至1. 0mg·mL^(-1)时对细菌内毒素检查无干扰,细菌内毒素限值为0. 5 EU·mg^(-1)。对3批注射用核糖核酸Ⅱ进行常规检查,结果均符合规定。结论:所建立的细菌内毒素检查法可用于注射用核糖核酸Ⅱ的细菌内毒素检查。

丹参酮ⅡA磺酸钠治疗急性脑梗塞的临床研究

目的:探讨丹参酮ⅡA磺酸钠注射液治疗急性脑梗塞的临床疗效。方法:将89例急性脑梗塞患者随机分为治疗组和对照组,对照组44例常规给予溶栓、神经保护治疗。治疗组45例在常规治疗的基础上给予丹参酮ⅡA磺酸钠注射液治疗,两组都治疗14d。结果:治疗组总有效率达86.7%,对照组为61.4%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05),且治疗组无明显不良反应发生。结论:丹参酮ⅡA磺酸钠注射液用于急性脑梗塞治疗效果显著,值得临床推广。

注射用核糖核酸Ⅱ上调p53诱导人白血病细胞凋亡

目的研究注射用核糖核酸Ⅱ诱导人白血病细胞系K562和KG1a细胞凋亡的作用。方法以K562和KG1a细胞为研究对象,采用CCK-8法检测注射用核糖核酸Ⅱ对细胞增殖的影响;流式细胞术检测细胞凋亡率的变化;Hoechst33258染色观察细胞核形态;免疫印迹技术检测p53及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和cleaved caspase-3的表达。结果以100~300 mg·L^(-1)注射用核糖核酸Ⅱ处理K562和KG1a细胞12、24、48 h后,CCK-8检测结果显示K562和KG1a细胞的增殖降低,抑制率明显增高,并呈时间剂量依赖性;100、150、200mg·L^(-1)注射用核糖核酸Ⅱ处理K562和KG1a细胞24 h后,FCM结果显示细胞凋亡率随药物剂量增加而增高;Hoechst33258染色观察到细胞核出现染色质浓缩聚集、染色加深等凋亡指征;Western blot结果显示,注射用核糖核酸Ⅱ上调p53、Bax和cleaved caspase-3的表达,下调Bcl-2表达。结论注射用核糖核酸Ⅱ通过上调p53,调控Bcl-2/Bax的表达,激活caspase-3诱导人白血病K562和KG1a细胞凋亡。

注射用核糖核酸Ⅱ通过活性氧介导的PI3K/Akt信号通路诱导人白血病细胞KG1a凋亡

目的 研究注射用核糖核酸Ⅱ诱导人急性骨髓白血病细胞系KG1a细胞凋亡与PI3K/Akt信号通路和活性氧(ROS)的关系。方法 流式细胞术(FCM)检测细胞周期和细胞内的ROS水平;免疫印迹法(Western blot)检测PI3K/Akt信号通路相关蛋白p-PI3K、p-Akt、p-MDM2、p21和周期相关蛋白cyclin D1、CDK4的表达;加入抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)后,检测p-PI3K、p-Akt和p53蛋白表达变化。结果 FCM结果显示,注射用核糖核酸Ⅱ可将KG1a细胞阻滞在G 0/G 1期,且ROS介导了细胞周期的阻滞;FCM检测ROS结果显示,KG1a细胞内ROS水平均随药物浓度增加而升高;Western blot结果显示,注射用核糖核酸Ⅱ下调p-PI3K、p-Akt、p-MDM2和cyclin D1、CDK4的表达,上调p21的表达;与仅用注射用核糖核酸Ⅱ相比,经NAC预处理后再使用注射用核糖核酸Ⅱ,明显上调了磷酸化PI3K和Akt的表达,下调了p53的表达。结论 注射用核糖核酸Ⅱ通过ROS介导的PI3K/Akt信号通路,诱导人急性骨髓白血病细胞系KG1a细胞凋亡。

血清CTX-Ⅱ浓度评价透明质酸联合倍他米松关节腔内注射治疗膝骨关节炎的临床疗效

目的:观察血清CTX-Ⅱ浓度与透明质酸联合倍他米松关节腔内注射治疗膝骨关节炎临床疗效的相关性。方法:69例随机分为两组,HA+GC组(39例)和单独HA组(30例)。所有OA患者均予以非甾类抗炎药物(NSAIDs)和改变骨关节炎病情药物(DMAODs)治疗。关节腔内注射药物后1、3、6个月后重复观察以上项目进行疗效评价和生化检查。结果:①HA组与HA+GC组一般情况和基线特征组间差异无统计学意义(P>0.05);②骨关节炎治疗前后总体生存质量的比较:HA组与HA+GC组治疗前后总体生存质量均明显改善,HA+GC组与单用HA组相比较,在SF-36评分生理健康(PCS)方面第1、6个月患者对病情总体的VAS评分以及第1、3个月医生对病情总体的VAS评分要优于HA组(P<0.01),而在SF-36评分心理健康(MCS)方面第3个月患者对病情总体的VAS评分以及第6个月医生对病情总体的VAS评分方面与HA组差异无显著性。③骨关节炎治疗前后血清CTX-Ⅱ水平和炎症指标的比较:HA组与HA+GC组治疗前后血清CTX-Ⅱ水平、ESR、CRP均明显下降,HA+GC组与单用HA组相比较,血清CTX-Ⅱ水平下降明显,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:HA+GC联合使用要较单独使用HA在缓解疼痛、改善功能、提高总体生存质量方面有明显的优势,GC的加用并不增加软骨破坏,相反可以通过拮抗滑膜炎起到了保护软骨的作用,CTX-Ⅱ可以作为OA关节损害程度及疾病预后标记物,也可以作为疗效评价的指标之一。

晚期乳腺癌化疗后应用核糖核酸Ⅱ注射液的疗效及对外周血T细胞亚群的影响分析

目的:探讨晚期乳腺癌新辅助化疗后应用核糖核酸Ⅱ注射液的疗效及对外周血T细胞亚群水平的影响。方法:回顾性分析2015年10月~2018年10月我院收治的80例晚期乳腺癌化疗患者的临床资料,将38例单纯采用常规化疗的作为对照组,将42例在化疗基础上联合核糖核酸Ⅱ注射液治疗的作为观察组。对比两组临床疗效、化疗前后免疫功能水平及外周血T细胞亚群水平。结果:观察组临床缓解率并不优于对照组,差异没有统计学意义(P>0.05);观察组化疗6个周期后IgA、IgG、IgM水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组化疗6个周期后CD4^+、CD8^+、CD69水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:乳腺癌化疗后应用核糖核酸Ⅱ注射液并不能提高临床疗效,但是可以增强机体免疫能力,提高外周血T细胞亚群水平,从而达到降低副反应发生的目的,值得推广。

我院注射用核糖核酸Ⅱ临床使用的综合干预效果分析

目的:探讨综合干预模式对注射用核糖核酸Ⅱ临床使用的干预效果,为肿瘤治疗辅助药管理提供参考。方法:通过建立评价标准、病历点评、成立肿瘤治疗辅助药管理工作组、药物与处方权分级、超说明书用药审批、加强考核和培训、临床药师参与等方式,干预注射用核糖核酸Ⅱ的临床使用;并对我院2015年4-6月(干预前)、2015年7-9月(第1次干预后)、2015年10-12月(第2次干预后)、2016年1-3月(第3次干预后)注射用核糖核酸Ⅱ的使用情况进行统计分析。结果:干预前我院注射用核糖核酸Ⅱ的合理使用率仅为77.34%,第1次、第2次、第3次干预后分别上升至83.25%、83.64%和95.12%,与干预前比较差异均有统计学意义(P<0.05)。不合理使用类型包括适应证不适宜、疗程不适宜、用法用量不适宜和联合用药不适宜等,分别由干预前的2.96%、4.93%、13.79%和0.99%下降至第3次干预后的1.63%、0、3.25%和0。注射用核糖核酸Ⅱ的使用率由干预前的8.81%下降至第3次干预后的3.93%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:多种干预方法相结合的综合干预模式,可促进注射用核糖核酸Ⅱ的合理使用,建议进一步研究和评价该模式对其他肿瘤治疗辅助药的干预效果。

舒血宁注射液、丹红注射液、丹参酮ⅡA磺酸钠注射液治疗冠心病不稳定性心绞痛的临床疗效分析研究

目的:对舒血宁注射液、丹红注射液、丹参酮ⅡA磺酸钠注射液3种药物治疗冠心病不稳定性心绞痛的临床疗效进行分析比对研究,在常规治疗剂量下选择出副作用小、临床疗效较为显著的药物,为临床治疗冠心病不稳定性心绞痛的药物选择提供临床依据。方法:将90例冠心病不稳定性心绞痛患者分为舒血宁注射液组、丹红注射液组、丹参酮ⅡA磺酸钠注射液各30例,以上90例患者均常规口服治疗冠心病不稳定性心绞痛的基础药物。3组药物输液方法每日1次,疗程2周,疗程结束后比较3组患者冠心病不稳定性心绞痛临床症状改善情况和心电图变化及C反应蛋白的变化情况。结果:2周疗程结束后舒血宁注射液组的不稳定性心绞痛临床症状改善率66.67%,丹红注射液组的不稳定性心绞痛临床症状改善率80%,丹参酮ⅡA磺酸钠注射液组的不稳定性心绞痛临床症状改善率70%,丹红注射液组在改善冠心病不稳定型心绞痛的症状与舒血宁注射液组和丹参酮ⅡA磺酸钠注射液组比较差异有统计学意义,舒血宁注射液组和丹参酮ⅡA磺酸钠注射液组2组在改善冠心病不稳定性心绞痛临床症状方面比较差异无统计学意义;丹红注射液组(66.67%)在改善心电图总有效率方面与舒血宁注射液组(50%)和丹参酮ⅡA磺酸钠注射液组(53.33%)比较差异有统计学意义,舒血宁注射液组与丹参酮ⅡA磺酸钠注射液组比较差异无统计学意义);3个治疗组治疗后与治疗前比较差异有统计学意义,3个治疗组治疗后比较差异无统计学意义。结论:丹红注射液治疗冠心病不稳定性心绞痛的疗效优于舒血宁注射液和丹参酮ⅡA磺酸钠注射液,能使患者在治疗中受益最大,值得在临床中推广应用。

氨基酸分析仪测定复方氨基酸注射液(18AA-Ⅱ)中游离氨含量

目的:建立复方氨基酸注射液(18AA-Ⅱ)中游离氨含量的氨基酸分析仪检测方法。方法:采用钠离子型磺酸基强酸性阳离子交换树脂为填充剂的色谱柱,流动相B1~B5梯度洗脱,流速0.45 ml·min^(-1),柱温57℃;茚三酮溶液柱后衍生,衍生温度135℃;进样量5μl。以此方法对国家评价性抽验的154批样品游离氨含量进行测定,并用顶空气体测定仪测定上述样品的残氧量。结果:氨(NH_(3))与样品中其他组分分离度良好,无其他色谱峰干扰。在0.681~13.625μg·ml^(-1)范围内,氨(NH_(3))的浓度与峰面积的线性关系良好(r=0.9997);定量限约为0.341μg·ml^(-1),检测限约为0.170μg·ml^(-1);平均加样回收率为99.29%(RSD=0.23%,n=9)。154批样品中游离氨含量变化较大,不同厂家产品的游离氨含量与残氧量存在一定相关。结论:该方法操作简便,重复性、稳定性及准确性良好,可用于测定复方氨基酸注射液(18AA-Ⅱ)中游离氨的含量。

HPLC法测定复方氨基酸注射液(18AA-Ⅱ)中的醋酸根含量

建立了高效液相色谱法(HPLC)测定复方氨基酸注射液(18AA-Ⅱ)中的醋酸根含量的分析方法。采用Titank C_(18)色谱柱(4. 6 mm×250 mm,5μm),以10 mmol/L磷酸氢二铵溶液(含有18 mmol/L 1-辛烷磺酸钠,用磷酸调节pH值至1. 98)为流动相A,以乙腈为流动相B,进行梯度洗脱,流速为1. 0 mL/min,检测波长为205 nm,进样量为100μL,柱温为4℃。结果表明,醋酸根峰与样品中的相邻峰能达到良好分离。经方法学验证,本法可为分析复方氨基酸注射液(18AA-Ⅱ)中的醋酸根含量提供检测依据。

Stability and degradation of hydroxysafflor yellow A and anhydrosafflor yellow B in the Safflower injection studied by HPLC-DAD-ESI-MS^n

Safflower is a popular Chinese medicinal plant and Safflower injection is extensively used for the clinical treatment of cerebrovascular and cardiovascular diseases. In this study, HPLC-DAD-ESI-MSn was utilized to study the stability and degradation of the two major but chemically unstable bioactive compounds hydroxysaffior yellow A and anhydrosaffior yellow B, in Safflower injection. The impact of light irradiation, temperature, and pH on the stability of these two compounds were studied. The results showed that hydroxysafflor yellow A and anhydrosafflor yellow B could degrade at high temperature （〉60 ℃） or extreme pHs （pH ≤ 3.0 or 〉7.0）, but not under light irradiation. The common degradation product was p-coumaric acid. Chemical structures of the other degradation products were characterized by LC-MS. Hypothetical degradation pathways were proposed. In addition, ADP-induced platelet aggregation tests showed that the degradation of anhydrosaffior yellow B could reduce the anticoagulation activities of Safflower injection. Our results suggest that temperature and pH are critically important for the preparation and storage of Safflower injection.

不同产地丹参水溶性成分和脂溶性成分指纹图谱测定及相关性研究

目的 分析不同产地丹参水溶性成分和脂溶性成分指纹图谱的变化情况,研究丹参脂溶性成分含量与水溶性成分含量之间的相关性。方法 采用HPLC法测定不同产地丹参水溶性成分、脂溶性成分的指纹图谱以及主要成分的含量,运用SPSS统计软件分析丹参成分变化情况。结果 丹参脂溶性成分和水溶性成分指纹图谱随产地不同而变化,丹参脂溶性成分含量与水溶性成分含量高低无内在关系。结论 建议制订丹参丹酚酸类成分含量,作为适用于丹参类注射液用的丹参药材标准,以区别于供复方丹参片等制剂用的丹参。

反相高效液相色谱法测定抗菌2号注射液中咖啡酸的含量

目的 测定抗菌 2号注射液中咖啡酸的含量。方法 采用HPLC法 ,色谱柱 :ZORBAXSB C18柱 ( 4 .6mm× 15 0mm ,5 μm)。流动相 :甲醇 - 0 .0 1mol/L磷酸二氢钠 三乙胺 ( 114∶385∶1)用磷酸调pH值至 3.5 ,检测波长 32 3nm ,柱温 4 0℃。 结果 咖啡酸在 6～ 5 4 μg之间呈良好的线性关系 ,r =0 .9998,平均回收率为 10 1.5 2 % ,RSD为 1.1% (n =6 )。 结论 本方法简便、准确、专属性强 。