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Phylogeny of Ptychostomum (Bryaceae,Musci) inferred from sequences of nuclear ribosomal DNA internal transcribed spacer (ITS) and chloroplast rps4 被引量:2
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作者 Chen-Ying WANG Jian-Cheng ZHAO 《Journal of Systematics and Evolution》 SCIE CSCD 北大核心 2009年第4期311-320,共10页
The phylogeny of Ptychostomum was first spacer (ITS) region of the nuclear ribosomal (nr) DNA DNA rps4 sequences. Maximum parsimony, maximum undertaken based on analysis of the internal transcribed and by combinin... The phylogeny of Ptychostomum was first spacer (ITS) region of the nuclear ribosomal (nr) DNA DNA rps4 sequences. Maximum parsimony, maximum undertaken based on analysis of the internal transcribed and by combining data from nrDNA ITS and chloroplast likelihood, and Bayesian analyses all support the conclusion that the reinstated genus Ptychostomum is not monophyletic. Ptychostomum funkii (Schwagr.) J. R. Spence (≡ Bryum funkii Schwaigr.) is placed within a clade containing the type species of Bryum, B. argenteum Hedw. The remaining members of Ptychostomum investigated in the present study constitute another well-supported clade. The results are congruent with previous molecular analyses. On the basis of phylogenetic evidence, we agree with transferring B. amblyodon Mull. Hal. (≡ B. inclinatum (Brid.) Turton≡ Bryum archangelicum Bruch & Schimp.), Bryum lonchocaulon Mull. Hal., Bryum pallescens Schleich. ex Schwaigr., and Bryum pallens Sw. to Ptychostomum. 展开更多
关键词 Bryum molecular phylogeny nuclear ribosomal DNA internal transcribed spacer sequences Ptychostomum rps4 sequences.
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Molecular Cloning,Genomic Organization and Functional Analysis of the Ribosomal Protein S30(RPS30) Gene from Arachis hypogaea 被引量:1
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作者 WU Qi WANG Xiuzhen +2 位作者 TANG Yueyi WANG Zhiwei WANG Chuantang 《Journal of Donghua University(English Edition)》 EI CAS 2019年第3期267-276,共10页
The ribosomal proteins are crucial for the maintenance of ribosomal translational efficiency and fidelity.In the study,we characterized the ribosomal protein S30(RPS30)gene from Arachis hypogaea that has been isolated... The ribosomal proteins are crucial for the maintenance of ribosomal translational efficiency and fidelity.In the study,we characterized the ribosomal protein S30(RPS30)gene from Arachis hypogaea that has been isolated through Genefishing analysis during defense responses to Ralstonia solanacearum.The cDNA of RPS 30 contained a 189 base pair(bp)open-reading frame encoding 62 amino acids.The genomic DNA consists of 272 bp containing two exons and one 83 bp intron.The RPS 30 mRNA transcript was mainly expressed in roots and leaves.The expression level of the RPS 30 mRNA transcripts was up-regulated sharply 6 h after bacterial challenge and was 12 times greater than that of the control group.The phylogenetic analysis for genes encoding proteins showed that RPS30 were conserved within dicotyledonous and monocotyledonous plants.d S extremely exceeded d N in all branches of the tree(d N/d S<1.0),indicating that functional constraint have acted on RPS 30 throughout evolution. 展开更多
关键词 ribosomal protein S30(rps30) ARACHIS HYPOGAEA Ri Hua 1 PURIFYING selection
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RPS6亚基肽段抑制S180肿瘤细胞的分子机制
3
作者 蒲帝宏 叶姿妤 +4 位作者 周丽倩 刘欣岚 鲁艳 侯怡铃 丁祥 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期32-38,共7页
为探究核糖体蛋白RPS6亚基肽段对S180肿瘤细胞基因表达的影响及抑制肿瘤细胞的关键分子和信号通路,以S180荷瘤小鼠为模型,用RPS6亚基肽段处理S180荷瘤小鼠,对S180肿瘤细胞进行Illumina测序获得差异表达的基因,并对这些差异基因进行GO和K... 为探究核糖体蛋白RPS6亚基肽段对S180肿瘤细胞基因表达的影响及抑制肿瘤细胞的关键分子和信号通路,以S180荷瘤小鼠为模型,用RPS6亚基肽段处理S180荷瘤小鼠,对S180肿瘤细胞进行Illumina测序获得差异表达的基因,并对这些差异基因进行GO和KEGG分析。基因表达结果显示,RPS6亚基肽段会导致mt-Cytb、mt-Nd1、Rpl13基因表达降低,阻碍S180肿瘤细胞的氧化磷酸化过程。GO分析结果显示,RPS6亚基肽段抑制肿瘤细胞关键门类集中于质膜和质膜外侧组成成分的变化及免疫反应调节和免疫细胞的激活。差异基因结果显示,RPS6亚基肽段通过增强PRL/PRLR信号,上调Uchl1基因表达,诱导肿瘤细胞周期停滞。KEGG通路富集分析结果显示,穿孔素(PRF1)和颗粒酶B(GZMB)表达诱导细胞凋亡,同时自然杀伤细胞(natural killer cell,NK)介导的细胞毒性与NF-κB信号通路信号增强,IFN-γ和TNF-α表达上调共同参与RPS6亚基肽段作用下的S180肿瘤细胞凋亡,抑制S180肿瘤细胞增殖。RPS6亚基肽段导致S180肿瘤细胞细胞周期停滞,并诱导自然杀伤细胞介导的细胞毒性及NF-κB信号通路的上调导致S180肿瘤细胞凋亡,为RPS6亚基肽段在抗肿瘤研究的应用提供一定的理论依据。 展开更多
关键词 核糖体蛋白rps6 小分子多肽 RNA-Seq测序 差异表达基因 NF-κB信号通路
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埃博霉素(Epothilones)的PKS/NRPS杂合基因簇 被引量:6
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作者 黎志凤 Etienne Nguimbi +1 位作者 李越中 刘巍峰 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期511-515,共5页
埃博霉素是由粘细菌纤维堆囊菌产生的一类具有促微管聚合活性的大环内酯类化合物。埃博霉素生物合成的多酶复合体是一个由多个功能模块组成 ,同时含有多聚酮合酶 (PKS)和非核糖体肽合成酶 (NRPS)的大操纵子。根据同位素标记试验结果和... 埃博霉素是由粘细菌纤维堆囊菌产生的一类具有促微管聚合活性的大环内酯类化合物。埃博霉素生物合成的多酶复合体是一个由多个功能模块组成 ,同时含有多聚酮合酶 (PKS)和非核糖体肽合成酶 (NRPS)的大操纵子。根据同位素标记试验结果和合成酶全基因簇功能的推测 ,埃博霉素的生物合成包括聚酮链的引发、链合成的起始和噻唑环的形成、链的延伸和转移、链合成的终止释放和环化、及产物的后修饰 5个阶段。埃博霉素的PKS NRPS杂合基因簇是开展组合生物合成研究的良好材料。 展开更多
关键词 埃博霉素 多聚酮合酶 非核糖体肽合成酶 基因簇 组合生物合成 抗癌药
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牛樟芝非核糖体多肽合成酶基因(AcNRPS)的克隆与鉴定 被引量:1
5
作者 原晓龙 胡唐阁然 +5 位作者 赵能 陈剑 陈中华 王娟 杨宇明 王毅 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2017年第1期14-19,共6页
胶霉毒素属于真菌天然次生代谢产物epipolythiodioxopiperazine(ETP)家族,具有免疫抑制剂、抗真菌等多种生物活性,是由非核糖体多肽合成酶(NRPSs)催化合成。从牛樟芝(Antrodia camphorata)基因组中挖掘出非核糖体多肽合成酶基因(AcNRPS,... 胶霉毒素属于真菌天然次生代谢产物epipolythiodioxopiperazine(ETP)家族,具有免疫抑制剂、抗真菌等多种生物活性,是由非核糖体多肽合成酶(NRPSs)催化合成。从牛樟芝(Antrodia camphorata)基因组中挖掘出非核糖体多肽合成酶基因(AcNRPS,NCBI登录号为KX430967),克隆获取其全长cDNA,并对其进行生物信息学分析和表达谱分析。结果显示AcNRPS基因cDNA全长6 687 bp;与其DNA序列比对发现AcNRPS基因含有12个内含子;其开放阅读框编码2 229个氨基酸残基,BLAST比对发现其含有2个A-C-T结构域,底物需2个氨基酸;系统发育树结果显示AcNRPS与其他合成产物为胶霉毒素的NRPS基因聚为一类,其可合成胶霉毒素类化合物;表达谱分析显示,以葡萄糖和土豆蛋白胨作为碳、氮源的培养基能够有效促进牛樟芝NRPS基因的表达。 展开更多
关键词 牛樟芝 非核糖体多肽合成酶(Nrpss) 克隆 表达
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RPS15a基因在胃癌中高表达
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作者 刘勇攀 石定 叶水凤 《浙江临床医学》 2014年第5期689-690,共2页
目的:研究核糖体蛋白S15a(ribosomal protein S15a RPS15a)基因在胃癌及癌旁组织中表达差异,为进一步了解胃癌发生、发展的分子机制提供帮助。方法应用荧光定量PCR等方法进一步验证该基因在胃癌及癌旁组织中的表达差异,并在多种肿... 目的:研究核糖体蛋白S15a(ribosomal protein S15a RPS15a)基因在胃癌及癌旁组织中表达差异,为进一步了解胃癌发生、发展的分子机制提供帮助。方法应用荧光定量PCR等方法进一步验证该基因在胃癌及癌旁组织中的表达差异,并在多种肿瘤细胞中的表达量进行比较。结果该基因在胃癌组织中的表达量高于其对应的癌旁组织,但在多种肿瘤细胞中的表达量无显著差异。结论 RPS15a基因在胃癌中呈高表达,说明其可能与细胞恶性生物学行为相关。在多种肿瘤细胞中表达量无显著差异,推测其可能在恶性肿瘤中的高表达具有普遍性。 展开更多
关键词 核糖体蛋白S15a基因 胃癌 定量PCR
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Reversed-phase fused-core HPLC modeling of peptides 被引量:3
7
作者 Matthias D'Hondt Bert Gevaert +5 位作者 Sofie Stalmans Sylvia Van Dorpe Evelien Wynendaele Kathelijne Peremans Christian Burvenich Bart De Spiegeleer 《Journal of Pharmaceutical Analysis》 SCIE CAS 2013年第2期93-101,共9页
Different fused-core stationary phase chemistries(C18,Amide,Phenyl-hexyl and Peptide ES-C18) were used for the analysis of 21 structurally representative model peptides.In addition,the effects of the mobile phase co... Different fused-core stationary phase chemistries(C18,Amide,Phenyl-hexyl and Peptide ES-C18) were used for the analysis of 21 structurally representative model peptides.In addition,the effects of the mobile phase composition(ACN or MeOH as organic modifier;formic acid or acetic acid,as acidifying component) on the column selectivity,peak shape and overall chromatographic performance were evaluated.The RP-amide column,combined with a formic acid-acetonitrile based gradient system,performed as best.A peptide reversed-phase retention model is proposed,consisting of 5 variables:log SumAA,log Sv,clog P,log nHDon and log nHAcc.Quantitative structure-retention relationship(QSRR) models were constructed for 16 different chromatographic systems.The accuracy of this peptide retention model was demonstrated by the comparison between predicted and experimentally obtained retention times,explaining on average 86% of the variability.Moreover,using an external set of 5 validation peptides,the predictive power of the model was also demonstrated.This peptide retention model includes the novel in-silico calculated amino acid descriptor,AA,which was calculated from log P,3D-MoRSE,RDF and WHIM descriptors. 展开更多
关键词 peptides Fused-core(core-shell core-enhanced poro-shell HALO s) stationary phases rp-HPLC peptide retention model In-silico amino acid descriptor
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RP-HPLC法分析重组人胰高血糖素类多肽-1(7-36)肽图谱 被引量:4
8
作者 廖海明 吕英英 +1 位作者 盛龙生 徐康森 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期24-26,共3页
目的:建立重组人胰高血糖素类多肽-1(7-36)[rhGLP-1(7-36)]胰蛋白酶或V_8蛋白酶肽图分析方法。方法:酶解缓冲液分别为1%碳酸氢铵缓冲液(pH7.8)和磷酸盐缓冲液(pH7.8),酶与底物的比例为1∶10,酶解时间分别为3h和6h。采用ODS柱(250mm×... 目的:建立重组人胰高血糖素类多肽-1(7-36)[rhGLP-1(7-36)]胰蛋白酶或V_8蛋白酶肽图分析方法。方法:酶解缓冲液分别为1%碳酸氢铵缓冲液(pH7.8)和磷酸盐缓冲液(pH7.8),酶与底物的比例为1∶10,酶解时间分别为3h和6h。采用ODS柱(250mm×4.6 mm,5μm),以三氟醋酸-水(0.1∶100)为流动相A,三氟醋酸-水-乙腈(0.1∶5∶95)为流动相B。胰蛋白酶洗脱梯度:0-30min,流动相A与B的比例为80:20→55:45。V_8蛋白酶洗脱梯度:0-8min,流动相A与B的比例为99:1→95:5;8-55 min,比例为95:5→48:52。流速:1.0mL·min^(-1),检测波长214nm,柱温:37℃。结果:无论用胰蛋白酶或V_8蛋白酶酶解rhGLP-1(7-36),控制好酶与底物的比例及酶解的时间,都可以得到重现性好的稳定的肽图。结论:本方法可用于重组人胰高血糖素类多肽-1(7-36)胰蛋白酶和V_8蛋白酶肽图分析,简便,可行。 展开更多
关键词 胰高血糖素 GLP-1 多肽 胰蛋白酶 rp-HPLC法 流动相 底物 酶解 酶洗 检测波长
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应用RP-HPLC分析基因工程人表皮生长因子肽谱 被引量:5
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作者 张翊 饶春明 丁锡申 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 1996年第3期129-131,共3页
用DTT还原rhEGF中的二硫键,并用碘乙酰胺封闭巯基,用TPCK处理的胰蛋白酶消化rhEGF,经RP-HPLC分析,发现不同工程菌生产的rhEGF存在结构的细微差别。该法具有灵敏度高、重现性好等优点,适用于基因工程产品肽谱的常规检定。
关键词 重组 人表皮生长因子 肽谱 基因工程 研制
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菜籽多肽稳定性及RP-HPLC分离制备高抗氧化活性(ORAC)组分研究 被引量:3
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作者 王玉梅 张晶 +2 位作者 谢慧慧 陈静宜 王立峰 《中国食物与营养》 2015年第5期36-39,共4页
菜籽多肽是菜籽蛋白的降解物,性质与蛋白质类似,其稳定性受到很多环境因素的影响,进而影响多肽的生物活性。研究多肽的稳定的环境条件可为其利用与加工提供参数。本试验研究菜籽多肽的稳定性,试验得出:在加热温度60℃、pH6.0~8.... 菜籽多肽是菜籽蛋白的降解物,性质与蛋白质类似,其稳定性受到很多环境因素的影响,进而影响多肽的生物活性。研究多肽的稳定的环境条件可为其利用与加工提供参数。本试验研究菜籽多肽的稳定性,试验得出:在加热温度60℃、pH6.0~8.0的条件下菜籽多肽较稳定,肠液中菜籽多肽稳定性优于人工胃液中。丙三醇、蔗糖和D-果糖对菜籽多肽的稳定性具有保护作用。进一步纯化菜籽多肽主要可收集6个组分,其中组分5显示较强的抗氧化性,其ORAC值为1744.29μmol/L TE/(g样品)。 展开更多
关键词 菜籽多肽 ORAC 稳定性 rp-HPLC 分离纯化
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RP-HPLC法测定酪蛋白水解物中ACE抑制肽的含量 被引量:5
11
作者 赵勇 胡志和 +3 位作者 孙振刚 武文起 冯永强 薛璐 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期54-58,共5页
目的:为了建立定量检测酪蛋白水解物中的血管紧张素转换酶(ACE)抑制肽的反相高效液相色谱(RP-HPLC)方法。方法:酪蛋白先经过胃蛋白酶水解、再经过胰蛋白酶水解,用风味蛋白酶和离子交换树脂对水解物先后进行脱苦和脱盐处理。建立... 目的:为了建立定量检测酪蛋白水解物中的血管紧张素转换酶(ACE)抑制肽的反相高效液相色谱(RP-HPLC)方法。方法:酪蛋白先经过胃蛋白酶水解、再经过胰蛋白酶水解,用风味蛋白酶和离子交换树脂对水解物先后进行脱苦和脱盐处理。建立标准品十肽酪氨酸-谷氨酰胺-赖氨酸-苯丙氨酸-脯氨酸-谷氨酰胺-酪氨酸-亮氨酸-谷氨酰胺-酪氨酸(YQKFPQYLQY)的RP-HPLC检测方法,运用外标法测定酪蛋白水解物中的ACE抑制肽YQKFPQYLQY的含量。结果:标准品十肽YQKFPQYLQY质量浓度在2.5~4.5mg/m L(R2=0.95496)范围内与峰面积呈良好的线性关系。酪蛋白水解物中所含十肽质量分数为4.96694%±0.00131%。结论:本液相检测方法操作简便、快速,适用于ACE抑制肽YQKFPQYLQY的定量检测分析。 展开更多
关键词 酪蛋白 水解物 血管紧张素转换酶抑制肽 定量检测 反相高效液相色谱法(rp-HPLC)
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柱前衍生RP-HPLC法测定林蛙皮胶原蛋白肽中18种氨基酸含量 被引量:5
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作者 邱芳萍 王长周 季晓枫 《长春工业大学学报》 CAS 2012年第5期583-587,共5页
采用柱前衍生反相高效液相色谱(RP-HPLC)法,测定林蛙皮胶原蛋白肽(LWT)中18种氨基酸的含量。色谱柱为Ultimate○RAA氨基酸分析专用色谱柱(4.6×250mm,5μm);衍生试剂为异硫氰酸苯酯(PITC);流动相A:0.1moL/L醋酸钠溶液(pH6.5)和乙腈... 采用柱前衍生反相高效液相色谱(RP-HPLC)法,测定林蛙皮胶原蛋白肽(LWT)中18种氨基酸的含量。色谱柱为Ultimate○RAA氨基酸分析专用色谱柱(4.6×250mm,5μm);衍生试剂为异硫氰酸苯酯(PITC);流动相A:0.1moL/L醋酸钠溶液(pH6.5)和乙腈按93∶7的比例混合,流动相B:水-乙腈=20∶80,流速为1.0mL/min,进行梯度洗脱;检测波长为254nm。结果显示,18种氨基酸的分离效果良好,氨基酸浓度与峰面积呈良好的线性关系;定量得到LWT中Glu,Gly,Lys,Leu等18种氨基酸的含量。 展开更多
关键词 柱前衍生 rp HPLC法 林蛙皮胶原蛋白肽 氨基酸含量
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RP-HPLC纯化碱性疏水肽的条件优化
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作者 陆旋 《浙江化工》 CAS 2015年第10期51-54,共4页
本研究对象碱性疏水12肽粗品因组分复杂,经反相高效液相色谱纯化后其纯度仅有70%,因此,本研究从纯化过程中的进样量以及梯度方式两个方面进行条件优化,最终可得纯度为96.4%的碱性疏水12肽。
关键词 rp-HPLC 碱性疏水肽 纯化
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五谷虫抑菌活性多肽RP-HPLC分离与纯化方法研究 被引量:2
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作者 王敏 褚夫江 +3 位作者 巫春旭 刘文彬 金小宝 朱家勇 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期567-571,共5页
旨在建立一种五谷虫抑菌活性多肽分离纯化的方法,为研究其药用价值提供实验依据。通过匀浆、过滤、加热、离心后利用超滤膜超滤获得分子量在30 ku以下的蛋白多肽,采用凝胶过滤层析系统初步分离并筛选出抑菌活性峰,以RP-HPLC建立该活性... 旨在建立一种五谷虫抑菌活性多肽分离纯化的方法,为研究其药用价值提供实验依据。通过匀浆、过滤、加热、离心后利用超滤膜超滤获得分子量在30 ku以下的蛋白多肽,采用凝胶过滤层析系统初步分离并筛选出抑菌活性峰,以RP-HPLC建立该活性峰的分离纯化方法。结果显示,凝胶过滤层析法分离并且筛选出两个具有抑菌活性组分S2和S3;RP-HPLC色谱法确定了S2具有7个峰和S3具有4个峰;该方法稳定性、精密度、重复性实验的保留时间与峰面积的RSD值均小于5%;6批样品RP-HPLC图谱相似度值大于0.99;采用RPHPLC能快速分离五谷虫抑菌活性多肽,且该方法稳定、可靠、重复性好。 展开更多
关键词 五谷虫 抑菌肽 rp-HPLC 分离 纯化
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RP-HPLC法测定重组人胰高血糖素类多肽-1(7-36)原料及其制剂的肽含量和有关物质 被引量:2
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作者 吕英英 廖海明 +1 位作者 盛龙生 徐康森 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期187-189,共3页
目的:建立重组人胰高血糖素类多肽-1(7-36)[rhGIP-1(7-36)]原料及制剂的肽含量和有关物质的RP-HPLC测定方法。方法:采用ODS柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以0.2 mol·L-1硫酸钠缓冲液(用乙醇胺调节pH至2.3)-乙腈(82:18)为流动相A,50... 目的:建立重组人胰高血糖素类多肽-1(7-36)[rhGIP-1(7-36)]原料及制剂的肽含量和有关物质的RP-HPLC测定方法。方法:采用ODS柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以0.2 mol·L-1硫酸钠缓冲液(用乙醇胺调节pH至2.3)-乙腈(82:18)为流动相A,50%乙腈为流动相B,调整流动相的比例[A-B(55:45)]使主峰的保留时间在20-25 min,流速为1.0 mL·min-1,检测波长214 nm,柱温为45℃。结果:线性范围为0.6-18.6μg,制剂平均回收率为96.01%,原料和制剂精密度试验RSD分别为0.15%和0.25%,最低检测限6.25 ng。结论:本方法可用于rhGLP-1(7-36)原料及其制剂的肽含量和有关物质的测定,具有准确、简便、快速、灵敏的特点。 展开更多
关键词 rp-HPLC法 重组人胰高血糖素类多肽-1(7-36) 有关物质 含量测定 色谱条件 多肽
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Challenges and advances in genome mining of ribosomally synthesized and post-translationally modified peptides (RiPPs) 被引量:4
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作者 Zheng Zhong Beibei He +1 位作者 Jie Li Yong-Xin Li 《Synthetic and Systems Biotechnology》 SCIE 2020年第3期155-172,共18页
Ribosomally synthesized and post-translationally modified peptides(RiPPs)are a class of cyclic or linear peptidic natural products with remarkable structural and functional diversity.Recent advances in genomics and sy... Ribosomally synthesized and post-translationally modified peptides(RiPPs)are a class of cyclic or linear peptidic natural products with remarkable structural and functional diversity.Recent advances in genomics and synthetic biology,are facilitating us to discover a large number of new ribosomal natural products,including lanthipeptides,lasso peptides,sactipeptides,thiopeptides,microviridins,cyanobactins,linear thiazole/oxazole-containing peptides and so on.In this review,we summarize bioinformatic strategies that have been developed to identify and prioritize biosynthetic gene clusters(BGCs)encoding RiPPs,and the genome mining-guided discovery of novel RiPPs.We also prospectively provide a vision of what genomics-guided discovery of RiPPs may look like in the future,especially the discovery of RiPPs from dominant but uncultivated microbes,which will be promoted by the combinational use of synthetic biology and metagenome mining strategies. 展开更多
关键词 Natural products ribosomally synthesized and posttranslationally modified peptides RiPPs Genome mining Metagenome mining Synthetic biology
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真菌源非核糖体肽类药物生物合成及代谢工程 被引量:1
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作者 陈锡玮 张华然 邹懿 《合成生物学》 CSCD 北大核心 2024年第3期571-592,共22页
真菌源非核糖体肽类(NRP)药物因其活性优异、结构多样而备受关注。至今美国食品药品监督管理局(FDA)已批准了数十种真菌NRP药物,包括环孢菌素、头孢菌素和棘白菌素等重磅药物。这些NRP药物均由非核糖体肽合成酶(NRPS)催化形成,其多样化... 真菌源非核糖体肽类(NRP)药物因其活性优异、结构多样而备受关注。至今美国食品药品监督管理局(FDA)已批准了数十种真菌NRP药物,包括环孢菌素、头孢菌素和棘白菌素等重磅药物。这些NRP药物均由非核糖体肽合成酶(NRPS)催化形成,其多样化的结构域和模块数量决定了产物骨架的多样性,从而为天然源活性NRP的开发提供了广阔的空间。此外,骨架结构上的特殊后修饰过程往往为NRP药物提供了强效的药效基团,进一步扩充了NRP结构与活性的多样性。本文综述了真菌NRP药物的研究进展,主要涵盖药物活性、生物合成途径、酶学机理和代谢工程改造等。深入了解真菌NRP药物生物合成途径不仅有助于理解相关的酶学组装机制,还有望为新型真菌NRP药物及其衍生物的深度开发提供重要的指导和参考。 展开更多
关键词 真菌非核糖体肽 非核糖体肽合成酶 生物合成 酶学组装机制 代谢工程
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枯草芽孢杆菌高效分泌表达盒的构建和应用
18
作者 韩瑞 初文琴 刘振 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期9-17,共9页
该工作旨在研究枯草芽孢杆菌表达系统中不同元件之间的适配性,从而构建高效蛋白分泌载体,并进一步应用于提高壳聚糖酶Csn21c的胞外表达量。首先,构建包含不同启动子(P43、P_(shuttle09))、核糖体结合位点(RBS1、RBS5)和信号肽(Snpr B、S... 该工作旨在研究枯草芽孢杆菌表达系统中不同元件之间的适配性,从而构建高效蛋白分泌载体,并进一步应用于提高壳聚糖酶Csn21c的胞外表达量。首先,构建包含不同启动子(P43、P_(shuttle09))、核糖体结合位点(RBS1、RBS5)和信号肽(Snpr B、Spho D、Symz C)的12个质粒,并以分别以3种蛋白(琼胶酶Ag WH50C、壳聚糖酶Csn21c和脂肪酶Lip15)为指示蛋白比较不同元件组合的蛋白分泌水平,发现载体p P435Y*K(P43-RBS5-Symz C)和p P095P*K(P_(shuttle09)-RBS5-Spho D)优于其他载体。相较原载体(p P431N*K),载体p P435Y*K能使琼胶酶Ag WH50C酶活性提高184.25%,脂肪酶Lip15酶活性提高52.8%,壳聚糖酶Csn21c酶活性提高164.62%。最后,通过比较5种不同培养基,确定了TB培养基为壳聚糖酶Csn21c的最适发酵培养基,使用TB培养基壳聚糖酶Csn21c的最高酶活力达到21.14 U/m L,较LB培养基的酶活力提高了128.31%。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 分泌 启动子 核糖体结合位点 信号肽 壳聚糖酶
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非核糖体肽合成酶体系设计和改造研究进展
19
作者 黄婷 温赛 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期315-324,I0013,I0014,共12页
自然界中,微生物合成肽类化合物一般通过核糖体途径合成核糖体肽,而非核糖体肽(nonribosomal peptide,NP)是一类不通过核糖体途径、由非核糖体肽合成酶(nonribosomal peptide synthetase,NRPS)催化合成的肽类化合物。非核糖体肽合成酶... 自然界中,微生物合成肽类化合物一般通过核糖体途径合成核糖体肽,而非核糖体肽(nonribosomal peptide,NP)是一类不通过核糖体途径、由非核糖体肽合成酶(nonribosomal peptide synthetase,NRPS)催化合成的肽类化合物。非核糖体肽合成酶是一种模块化、线性化组装的酶,以类似流水装配线的方式发挥作用。它们产生的次生代谢物多肽通常具有非常复杂的结构,其中有许多是具有重要药理意义的天然产物。NRPS的模块化性质导致其可以通过模块重组实现产物多样化,基于这个发现,科学家们对其进行了深入研究,以期通过人为改造和重构等方式产生更多更有价值的产物。该文集中介绍近年来通过NRPS人工改造和重组等方式生产多肽的研究,为未来发现和生产新的生物活性化合物提供思路。 展开更多
关键词 非核糖体肽合成酶 腺苷化结构域 非核糖体肽合成酶改造 缩合结构域 模块化结构
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丝状真菌转录因子调控非核糖体肽合成酶介导的次级代谢产物合成研究进展
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作者 白晓轩 张极峰 +2 位作者 李婧 李奥 刘士平 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第17期445-453,共9页
丝状真菌(Filamentous fungi)产生的次级代谢产物(Secondary Metabolites,SM)广泛应用于生物医药、生物防治及食品等领域。大多数SM的生物合成与非核糖体肽合成酶(Nonribosomal peptide synthetase,NRPS)的催化密切相关,故NRPS的表达调... 丝状真菌(Filamentous fungi)产生的次级代谢产物(Secondary Metabolites,SM)广泛应用于生物医药、生物防治及食品等领域。大多数SM的生物合成与非核糖体肽合成酶(Nonribosomal peptide synthetase,NRPS)的催化密切相关,故NRPS的表达调控对SM的生物合成至关重要。为了深入了解丝状真菌NRPS基因簇的表达调控模式,本文就通路特异性和全局性两种转录因子调控丝状真菌NRPS介导SM生成的研究进展进行了综述,以期深化对丝状真菌中转录因子调控NRPS介导的SM生成机制的认识,为丝状真菌天然产物的开发提供参考依据。 展开更多
关键词 转录因子 丝状真菌 非核糖体肽合成酶(Nrps) 次级代谢产物 生物合成
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