花生AhRRF基因的克隆与原核表达

核糖体循环因子在蛋白质合成体系中发挥着重要作用,利用电子克隆和RT-PCR技术,从花生中克隆到1个核糖体循环因子基因,命名为AhRRF(Genbank登录号KF621303)。序列分析表明,该基因开放阅读框为837 bp,编码278个氨基酸,推测编码蛋白质的分子量为30.94 k D,等电点为9.63,无信号肽序列,AhRRF编码蛋白包含4个α-螺旋、6个β-折叠和一些无规则卷曲结构。系统发生分析结果表明,AhRRF编码蛋白与蒺藜苜蓿、鹰嘴豆、大豆和菜豆的核糖体循环因子具有较高的同源性。实时荧光定量PCR结果显示,AhRRF基因在花生的叶、花、根和幼果中均有表达,但叶中表达量最高,花中最低;UV-B辐射处理1 h时叶中的表达量显著上升,为对照的3.43倍,之后开始下降,24 h时显著低于对照。将构建的重组质粒p ET28a-AhRRF转化大肠杆菌BL21(DE3),以IPTG诱导重组蛋白RRF的表达,SDS-PAGE检测表明,重组蛋白的分子量大小约为30 k D,其大小与推测的大小一致。本研究为进一步探索UV-B辐射对花生分子机理的影响奠定基础。

水稻两个frr基因的结构、转录特性及同源性分析

对水稻中两个核糖体再循环因子同源基因OsfrrA 和OsfrrB进行了鉴定与分析。这两个单拷贝基因分别位于水稻的4号和7号染色体上,且在细胞器基因组中未发现同源序列。它们在不同组织中的转录特性及其蛋白质产物的N端特征提示其翻译产物会被各自转运并分别定位于线粒体和叶绿体中,而序列上的保守性及构成性的表达则表明它们在植物生长中扮演着重要的角色。它们与其它原核及真核RRF之间在基因结构及编码序列上的异同为内共生学说提供了新的证据,也揭示了RRF在分子进化研究方面所具有的潜在价值。

蛋白质生物合成的第四步:翻译终止后复合物的解体

蛋白质合成过程一般被归纳为由合成的起始、肽链的延伸和合成的终止组成的三步曲.然而,随着对核糖体再循环因子(ribosomerecyclingfactor,RRF)在蛋白质合成过程中作用的深入研究,人们提出了蛋白质生物合成应是四步曲,这第四步就是翻译终止后核糖体复合物的解体,也就是通常说的核糖体循环再利用.简要地介绍了翻译终止后复合物解体的可能机制:核糖体再循环因子和蛋白质合成延伸因子G在核糖体上协同作用催化这一过程的完成.