黄鳝性腺自然逆转过程中vasa基因的表达分析

本研究采用RNA反义探针原位杂交技术,对vasa基因在黄鳝(Monopterusalbus)性腺发育过程中的表达情况进行了分析。结果表明:vasamRNA在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期卵母细胞的胞质中均匀分布,在Ⅳ、Ⅴ期卵母细胞中vasamRNA有向胞质外周皮层迁移集中的趋势,但不明显;退化的卵粒也呈现vasamRNA阳性反应;在Ⅲ、Ⅳ期卵巢的被膜中检测到带有vasa阳性信号的细胞,这些细胞可能是待向精原细胞分化、迁移到卵巢被膜上的原始生殖细胞(Primordialgermcell,PGC),在性逆转过程中这些PGC可能由卵巢被膜迁移到精小叶中并发育成精子;在成熟精巢中,vasa在精原细胞和初级精母细胞中表达。进一步采用碱性磷酸酶染色法分析黄鳝卵巢及精巢后发现:在卵巢中,除了卵母细胞外,卵巢被膜中也检测到了带有碱性磷酸酶阳性信号的细胞;在成熟精巢中,只在生殖腺囊内的雄性生殖细胞中检测到碱性磷酸酶,而精巢被膜中没有检测到带有碱性磷酸酶阳性信号的细胞。本研究结果初步表明:黄鳝的雄性生殖细胞可能起源于雌性阶段卵巢被膜中的原始生殖细胞[动物学报51(3):469-475,2005]。

pH对黄鳝消化酶活性的影响研究

研究了pH对黄鳝（Monopterus albus）消化道内蛋白酶、胰蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶的活性影响。结果表明，pH会影响黄鳝消化道内消化酶的活性，在pH6．5～10．0范围内，随着pH的升高，酶活性逐渐增加．但pH继续升高到一定值后，则会逐渐降低。其蛋白酶的适宜pH为8．5～9．0，胰蛋白酶的适宜pH为8．0～8．5，淀粉酶的适宜pH为7．0～8．0，脂肪酶的适宜pH为7．0～7．5。

黄鳝对饲料中胆碱的需要量

用添加胆碱含量为0、0 1%、0 3%、0 5%、0 8%、1 0%、1 2%、1 5%和2 0%(均为质量分数)的配合饲料,在水泥池中(2m×6m×0 8m)饲养黄鳝,试验时间为90d。结果表明,随着饲料中胆碱含量的增加,黄鳝的生长加快,饲料系数降低,肝体指数减小;当饲料中胆碱添加量为0 8%～1 2%时,黄鳝的生长率最高,饲料系数最低,肝体指数、肝脏脂肪含量较小,与用动物饵料养殖的效果基本接近。这表明黄鳝饲料中胆碱的添加量不应少于0 8%,以0 8%～1 2%为宜。

两种不同体色黄鳝的染色体组型

采用PHA和秋水仙素活体注射法,首次对洞庭湖区两种不同体色黄鳝进行肾细胞染色体标本制备,并对其染色体数目及组型进行比较分析.结果表明,两种不同体色黄鳝的染色体数目相同,2N =24,且全部为端部着丝粒染色体;但两种不同体色黄鳝的染色体相对长度存在一定差异：黄鳝A的染色体相对长度为11.45±0.06～6.15±0.03,黄鳝B的染色体相对长度为11.53±0.01～5.23±0.09.试验结果为进一步研究洞庭湖区黄鳝种质资源的遗传多样性提供了基础性资料.

免疫多糖(酵母细胞壁)对黄鳝免疫保护力的增强作用

在饲料中添加不同剂量的免疫多糖(酵母细胞壁),连续投喂经注射接种嗜水气单胞菌(Aeromonashydrophila)脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)的黄鳝(Monopterus albus)28 d后,通过测定供试黄鳝的增重量、血清中凝集抗体效价、溶菌酶活性、谷丙转氨酶活性(SGPT)、血清总蛋白含量、白细胞吞噬活性以及活菌攻毒后的免疫保护率(RPS),探讨了将LPS作为免疫原、免疫多糖作为免疫刺激剂结合使用对受免黄鳝免疫保护力的增强作用。结果表明,用添加100.0 mg/kg免疫多糖的饲料投喂受免黄鳝,不仅可以提高受免黄鳝对A.hydrophila LPS的免疫应答水平,也可以增强黄鳝的非特异性免疫力和抵抗A.hydrophila人工感染的能力,同时也证明了在饲料中添加免疫多糖对黄鳝的生长速度和肝脏功能均无不良影响。

硫酸铜等4种药物对黄鳝鱼种的急性毒性试验

选用4种常用药物对黄鳝进行急性致毒试验。根据24 h半致死浓度TLm24的大小来判断药物对黄鳝的毒性大小。结果显示,可将其由高到低排列如下:硫酸铜>敌百虫>溴氯海因>二氧化氯。并根据TLm24和TLm48计算了各种药物的使用安全浓度。此4种药物的安全浓度分别为2.1 mg/L,2.27 mg/L,3.07 mg/L,4.6 mg/L。

黄鳝体内寄生虫生态学研究进展

我国对黄鳝体内寄生虫的种类、种群组成及其分布的差异、寄生虫寄生部位及危害、在黄鳝种群中的感染分布、感染的关联程度和生活史等生态学进行了广泛的研究.就黄鳝体内寄生虫生态学研究的若干重要方面进行综述.

黄鳝内脏铁型超氧化物歧化酶的纯化

经丙酮分级沉淀,DEAE-琼脂糖离子交换层析和Sephacry1S-200凝胶过滤,从黄鳝内脏中分离纯化获得铁超氧化物歧化酶(Fe-SOD),并对其部分性质进行分析鉴定。获得该酶的比活力为1500U mg,提纯倍数为368 5,回收率为24 7%。该酶最大紫外吸收波长为280nm。聚丙烯酰胺凝胶电泳和等电点聚焦电泳结果表明纯化酶蛋白呈一条带,测得该酶分子量约为87kD,亚基分子量约为14 5kD;等电点为pH7 1。

甜菜碱对黄鳝消化酶活性的影响

采用不同甜菜碱添加量(0.0、0.5、1.0、1.5、2.0、3.0、5.0g/100g)的饲料进行了黄鳝(Monopterus albus)的养殖试验,以了解甜菜碱对黄鳝消化酶活性的影响。结果表明,饲料中添加不同含量甜菜碱对黄鳝蛋白酶、胰蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶的活性会产生影响,随着甜菜碱在饲料中添加量的增加,4种消化酶的活性均呈上升的趋势,且当其添加量达到1.5g/100g及以上时,4种消化酶活性增加显著。因此饲料中添加适量的甜菜碱能提高黄鳝对饲料的消化能力。

黄鳝消化酶活性的研究

研究了黄鳝胃、肠道、肝脏等消化器官内蛋白酶、胰蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶的活性。结果表明,蛋白酶在不同消化组织的活性大小从高到低依次为胃>前肠>后肠>肝脏;胰蛋白酶的活性从高到低依次为前肠>胃>后肠>肝脏;淀粉酶的活性从高到低依次为后肠>前肠>肝脏>胃;脂肪酶的活性从高到低依次为后肠>肝脏>前肠>胃。

几种寄生虫在黄鳝体内寄生的研究

1997～2002年对四川地区黄鳝寄生虫的感染情况作了调查分析,结果表明:在四川地区,黄鳝感染隐藏新棘虫、胃瘤线虫幼虫和锯缘叶形吸虫的感染率高且感染强度较大,并随地区、季节和体长的不同而有一定的差异。这几种寄生虫在黄鳝种群内呈聚集分布,负二项分布系数分别为k棘=0 1519、k线=0 1748、k吸=0 1782。黄鳝的肥满度与感染寄生虫的种类和强度不显著相关。

黄鳝的红细胞观察及其DNA含量

利用光学显微镜、透射电子显微镜、扫描电子显微镜首次对黄鳝红细胞进行系统观察.结果表明:成熟红细胞呈椭圆形,红细胞平均长、短径分别为(13.05±1.85)μm、(8.95±1.08)μm,平均体积为(547.29±26.07)μm3,红细胞核位于细胞中央,近椭圆形,核平均长、短径分别为(4.45±0.75)μm、(3.60±0.48)μm,平均体积为(30.29±2.07)μm3;黄鳝红细胞核的DNA含量平均为3.25pg.

黄鳝主要病害及其防控技术研究进展

黄鳝(Monopterus albus Zuiew)是中国重要的淡水养殖鱼类之一,2016年全国黄鳝养殖总产量为38.61万t。随着黄鳝养殖规模的不断扩大,病害日趋严重,迄今研究发现的黄鳝病害主要有细菌病、寄生虫病和真菌病,尚未见有病毒病的报道。黄鳝的细菌病主要有出血性败血症、烂尾病、肠炎、溃烂病等,寄生虫病有20余种。重点分析了寄生虫感染规律,主要介绍了细菌性病、寄生虫病等病害的防治技术。

黄鳝饲料蛋白质需求量的研究

为确定黄鳝(Monopterus albus)对饲料蛋白质的需求量,试验分7组,每组4个重复。每个重复放养初始体重为(17.1±0.2) g的幼鳝25尾,分别以鱼粉和酪蛋白为主要蛋白源,配制蛋白质含量为32.74%(T1)、38.50%(T2)、42.26%(T3)、48.35%(T4)、52.65%(T5)、57.87%(T6)和62.31%(T7)的7种等能不等氮饲料,养殖期为60d。以生产性能、蛋白质保留率和生理生化指标等综合评价确定蛋白质的需求量。结果:(1)随饲料蛋白质含量升高,饲料系数呈先降低后升高;增重率(WGR)、特定生长率(SGR)、蛋白保留率(PRR)与蛋白质效率(PER)先升高后降低;饲料蛋白质含量57.87%组获得最好的生长性能, 52.65%组蛋白质保留率最高。(2)随饲料蛋白质含量升高,黄鳝血清中尿素氮(BUN)含量升高,谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)的活性先降低后保持稳定,总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)及血糖(GLU)含量降低;丙二醛(MDA)含量呈现先降低后升高的趋势,在52.65%时最低。(3)随饲料蛋白质含量升高,黄鳝肝胰脏、胃和肠蛋白酶活性先显著上升后呈缓慢上升趋势;肝胰脏脂肪酶活性先显著下降后呈缓慢下降趋势,胃和肠脂肪酶活性各试验组之间无显著性差异;胃淀粉酶活性无显著差异,肝胰脏和肠呈先显著下降后缓慢降低的趋势。综上:当饲料蛋白质含量低时,黄鳝会加大摄食量满足蛋白质需求,在饲料蛋白质含量过高时,氧化应激增加,黄鳝通过降低摄食量减少蛋白质摄入。以WGR、PER、SGR及饲料系数(FCR)为评价指标确定幼鳝对饲料蛋白质的适宜需求量为48.51%—52.60%。

未产卵雌性黄鳝的性转变

为探讨产卵是否为雌性黄鳝(Monopterus albus Zuiew)性转变的必经过程,研究分析了实验室内从受精卵或幼苗开始养殖至不同时间段的黄鳝性腺组织学状况,采用性腺活检技术跟踪了34月龄雌性黄鳝性腺发育变化,并以免疫组织化学方法探讨了黄鳝不同发育状态性腺中增殖细胞核抗原(PCNA)的分布。在养殖过程中,实验黄鳝没有出现产卵现象或者繁殖行为。在5月龄黄鳝中,间性占比13.3%,雄性占比20.0%;在12月龄(1龄)黄鳝中,雄性占比17.6%;34月龄(3龄)黄鳝中,间性占比12.8%,雄性占比8.5%。通过性腺活检技术对36条34月龄雌性黄鳝性腺发育变化进行了为期1个月的跟踪研究,结果表明,16.7%的雌性黄鳝发生了性转变,性腺发育到间性阶段。黄鳝间性早期性腺生殖褶增厚,部分细胞呈现明显PCNA免疫阳性,包括间质细胞、精原细胞和初级精母细胞。上述结果提示,产卵并非雌性黄鳝发生性转变的必经过程;黄鳝性转变初期,性腺结构变化包括生殖褶中间质细胞和精原细胞的发生和增殖。