环指蛋白14通过抑制HNF1α促进肝癌细胞增殖与侵袭转移

目的研究环指蛋白14(ring finger protein 14,RNF14)对肝癌细胞增殖与侵袭转移能力的影响,并探讨RNF14在肝癌发生、发展中的作用机制。方法利用基因表达谱交互式分析网站(Gene Expression Profiling Interactive Analysis,GEPIA;http://gepia.cancer-pku.cn)与Western blot实验分析正常人肝细胞与肝癌细胞间RNF14的表达差异;应用Transwell小室迁移与侵袭实验研究过表达和敲低RNF14对肝癌细胞(Hu7、7404)运动迁移能力的影响;通过CCK-8增殖实验、克隆形成实验及裸鼠皮下成瘤实验体外、体内共同验证RNF14对肝癌细胞7404增殖能力的影响;通过免疫共沉淀实验检测RNF14与肝细胞核因子1α(hepatocyte nuclear factor-1alpha,HNF1α)之间的相互作用。结果GEPIA与Western blot实验结果显示:RNF14在肝癌组织和肝癌细胞中的表达分别显著高于癌旁组织和正常肝细胞(P<0.05)。Transwell侵袭迁移实验结果显示:过表达RNF14后,肝癌细胞Hu7的迁移与侵袭能力显著高于阴性对照组(P<0.05),同样地,敲低RNF14后,肝癌细胞7404的迁移与侵袭能力显著低于阴性对照组(P<0.05)。CCK-8增殖实验、克隆形成与皮下移植瘤实验结果证明:敲低RNF14能够显著抑制肝癌细胞的增殖(P<0.05)。免疫共沉淀实验结果显示:RNF14与HNF1α之间存在相互结合,且RNF14能够下调HNF1α的表达。结论RNF14能够通过抑制抑癌因子HNF1α的表达,增强肝癌细胞的增殖与侵袭转移能力,从而在肝癌的发生、发展中起到重要作用。