重组人白细胞介素6的制备

我们采用本院基础医学研究所组建的ＩＬ—６工程菌Ｅ．ｃｏｉｌＤＨ５ａ（ｐＢＶ—ｈｌＬ－６），在选定的培养基及ｐＨ值下，采用３０升发酵罐进一步观察了工程菌的生长和ｒＩＬ－６的表达，确定了发酵工艺条件。在此条件下连续进行了三批次的培养试验。结果表明，工程首的生长密度达到２．５１±０．０２ｇ［干重］／Ｌ［发酵液］，ｒＩＬ—６产率为１８２．４±２．０ｍｇ／ｇ［干重］。ｒＩＬ—６以包涵体形式表达于大肠杆菌细胞中，破菌后选用非离子型去垢剂或尿素等变性剂提取包涵体中的杂蛋白，可使ｒＩＬ—６的纯度达到７０．１±１．３％，收率为７１．９±１．９％。洗涤后的包涵体，经过凝胶柱纯化和复性，ｒＩＬ—６纯度达到９５％以上，柱纯化的收率为７２．３±０．９％；采用依赖ＩＬ—６，小鼠杂交瘤细胞系７ＴＤ１及ＭＴＴ比色法测定生物活性，ｒＩＬ—６比活性达２×１０８Ｕ／ｍｇ。