扁刺峨眉蔷薇化学成分及其酪氨酸酶抑制活性研究

目的对扁刺峨眉蔷薇Rosa omeiensis f.pteracantha全株的化学成分和酪氨酸酶抑制活性进行研究。方法将扁刺峨眉蔷薇样品进行干燥、粉碎,采用溶剂提取法、MCI HP20柱色谱、硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、半制备RP-HPLC等方法进行分离纯化,利用1D-NMR、MS等多种现代波谱技术对化合物进行结构鉴定。并采用B16F10细胞建立酪氨酸酶抑制活性评价模型,利用多巴氧化法评价化合物对B16F10细胞中的酪氨酸酶抑制活性。结果从扁刺峨眉蔷薇75%甲醇提取物的醋酸乙酯萃取部位中共分离得到21个化合物,分别鉴定为野鸦椿酸(1)、negundonorin A(2)、覆盆子酸(3)、刺梨苷(4)、野蔷薇苷(5)、2α,3α-dihydroxy-19-oxo-18,19-seco-urs-11,13(18)-dien-28-oic acid(6)、胡萝卜苷(7)、小麦黄素(8)、8-甲氧羰基儿茶素(9)、柚皮素(10)、槲皮素(11)、3,3′-O-二甲基鞣花酸(12)、1-hydroxy-2,6-bis-epi-pinoresinol(13)、东莨菪素(14)、3-吲哚甲醛(15)、短叶苏木酚酸甲酯(16)、3,4,5-trimethoxyphenyl-(6′-O-galloyl)-O-β-D-glucopyranoside(17)、没食子酸甲酯(18)、原儿茶酸(19)、β-羟基-3-甲氧基-4-羟基苯乙酮(20)、异香草酸(21)。酪氨酸酶抑制活性筛选结果表明,在浓度40μmol/L时,化合物1~3、5、13、14、16、21有显著酪氨酸酶抑制活性(P<0.05、0.01),且抑制作用高于阳性药曲酸。在浓度20μmol/L时,化合物1、3、5、14、21具有显著的酪氨酸酶抑制活性(P<0.05、0.001)。结论21个化合物均为首次从扁刺峨眉蔷薇中分离得到,其中化合物2、6、12、15、17、20为首次从蔷薇属中分离得到;多数化合物都具有显著的酪氨酸酶抑制活性,且活性高于阳性药曲酸。扁刺峨眉蔷薇资源在用于美白功效日用品的开发方面具有较高的潜力。

金樱子根三萜类的化学成分研究

目的研究金樱子Rosa laevigata根中的化学成分。方法利用各种色谱柱对金樱子根中的化学成分进行分离纯化,并根据理化性质和光谱分析进行结构鉴定。结果从金樱子根的二氯甲烷及醋酸乙酯部位中分离得到13个三萜类成分,分别鉴定为niga-ichigosides F2（1）、野蔷薇亭（2）、阿江榄仁亭（3）、构莓苷F1（4）、蔷薇酸（5）、号角树酸3-甲酯（6）、2-乙酰基-洋委陵菜酸（7）、坡模酸（8）、2α,3α-二羟基乌苏-12,18-二烯-28-酸（9）、3β-E-feruloyl corosolic acid（10）、覆盆子酸（11）、2-O-乙酰基野鸭椿酸（12）、12,13-dihydromicromeric acid（13）。结论化合物3、6、7、9～13为首次从该植物中分离得到;化合物10、12、13为首次从蔷薇属中分离得到。

小果蔷薇根的化学成分研究

目的研究小果蔷薇Rosa cymosa根的化学成分。方法采用多种色谱方法进行分离纯化,结合波谱技术与化学方法进行结构鉴定。结果从小果蔷薇根的70%乙醇提取物中分离得到16个化合物,分别鉴定为2-乙酰基-洋委陵菜酸(1)、2-氧代-坡模酸(2)、2α,3α,19α-三羟基齐墩果烷-12-烯-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(3)、构莓苷F_1(4)、野蔷薇亭(5)、23-羟基-委陵菜酸(6)、阿江榄仁亭(7)、2α,3α,19α,23-四羟基乌苏烷-12-烯-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(8)、1β,3α,19α,23-四羟基乌苏烷-12-烯-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(9)、儿茶素(10)、3,4-二羟基苯乙醇8-O-β-D-葡萄糖苷(11)、3,4,5-三甲氧基苯酚-O-β-D-芹糖-(1→6)-O-β-D-葡萄糖苷(12)、4-羟基-3-甲氧基-1-苯基-O-(6′-O-没食子酰基)-β-D-吡喃葡萄糖苷(13)、没食子酸乙酯(14)、3,4,5-三甲氧基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷(15)、3,4,5-三甲氧基苄基β-D-吡喃葡萄糖苷(16)。结论化合物9、11~13、15、16为首次从蔷薇属植物中分离得到,化合物3、9、11~16为首次从小果蔷薇中分离得到。

HPLC-ELSD法测定不同产地、不同等级蕨麻中野蔷薇苷和刺梨苷的含量

【目的】建立HPLC-ELSD法同时测定不同产地、不同等级蕨麻中野蔷薇苷和刺梨苷含量。【方法】本实验采用色谱柱JADE-PAK ODS(250 mm×4.6 mm,5μm,ECHWAY,China),以30%乙腈-70%水为流动相,流速设置为1.0 ml/min,进样体积为20μl,柱温为30℃;ELSD检测器漂移管温度为40℃,气体压力为350 k Pa,检测信号放大倍数为8。【结果】野蔷薇苷和刺梨苷分别在34.80～754.00μg/ml(r2=0.9981)和34.23～741.65μg/ml(r2=0.9992)范围内呈现良好的线性关系;检测限和定量限分别为10.80和23.08μg/ml、14.17和28.92μg/ml;日内和日间精密度的相对标准偏差分别为0.76%和2.36%、2.06%和6.12%;稳定性RSD均小于3.40%;加样回收率分别为97.57%和99.16%,且RSD均小于5.37%。11批不同产地和等级的蕨麻药材中,野蔷薇苷的含量在0.644(g/g)‰～1.453(g/g)‰之间,刺梨苷的含量在0.312(g/g)‰～0.563(g/g)‰之间。【结论】本实验所建立的HPLCELSD方法,可以快速、简便、准确地测定出蕨麻药材中野蔷薇苷和刺梨苷的含量。来源于青藏高原产地的蕨麻药材中野蔷薇苷和刺梨苷含量更高;相同产地的蕨麻,等级越高(颗粒越饱满),野蔷薇苷和刺梨苷的含量越低。

粉团蔷薇根质量标准的研究

目的:建立金樱根基原之一的粉团蔷薇根质量控制标准。方法:性状、显微、TLC法进行定性鉴别;根据2020年版《中华人民共和国药典》方法进行检查和浸出物测定;UPLC测定粉团蔷薇根中构莓苷F1、阿江榄仁亭、野蔷薇苷含量,并以UPLC建立指纹图谱。结果:所建立的显微鉴别、薄层色谱法、UPLC含量测定和指纹图谱方法稳定可行。药材水分、总灰分及浸出物含量:水分不得过13.87%,总灰分不得过8.72%,浸出物不得少于5.08%;11个批次粉团蔷薇根中所测构莓苷F1、阿江榄仁亭、野蔷薇苷含量范围分别是0.44-12.45、0.32-3.79、1.10^8.08 mg·g^(-1),暂定本品按干燥品计算,含构莓苷F1不得少于0.35 mg·g^(-1),含阿江榄仁亭不得少于0.26 mg·g^(-1),含野蔷薇苷不得少于0.88 mg·g^(-1);同时测定了11批粉团蔷薇根药材的指纹图谱并建立了共有模式,标定共有峰15个,指认了其中的构莓苷F1、阿江榄仁亭、野蔷薇苷、蔷薇酸、委陵菜酸5个成分。结论:该研究所建方法专属性强,可从整体上对粉团蔷薇根进行鉴别和质量控制,也为最终制定金樱根药材质量标准打下基础。

高效液相色谱法测定蕨麻中刺梨苷和蕨麻苷含量

【目的】测定蕨麻中刺梨苷和蕨麻苷含量。【方法】采用氨基固相萃取小柱对蕨麻提取物进行纯化,随后采用高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)对提取物含量进行测定。HPLC流动相为甲醇∶水∶四氢呋喃∶磷酸=55∶45∶6∶0.2(v/v)。【结果】在10~160μg/ml范围内,刺梨苷和蕨麻苷线性方程相关系数大于0.9995。两个目标化合物的日内和日间精密度标准差均小于4%。刺梨苷和蕨麻苷的最低检测限分为0.1和0.2μg/ml,SPE和方法回收率均高于97%。【结论】本实验首次建立了蕨麻提取液中刺梨苷和蕨麻苷的SPE纯化,HPLC分离及含量测定方法,结果证实该方法具有良好的专属性,稳定性和准确性。

野蔷薇苷抗大鼠急性低压缺氧脑损伤作用研究

【目的】研究野蔷薇苷对急性低压缺氧诱导的大鼠脑损伤的保护作用,并探讨其可能的机制。【方法】将50只清洁级成年雄性SD(Sprague-Dawley)大鼠(体质量220~250 g),随机分为5组:正常对照组、缺氧模型组、野蔷薇苷高、低剂量组及阳性药(地塞米松)组,每组10只。连续灌胃给药3次后,除正常对照组外,其余各组均运用低压氧舱建立大鼠急性低压缺氧模型;采用生化手段检测大鼠血浆一氧化氮(nitric monoxide,NO)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性及脑组织中乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)活性;利用比重法测定大鼠脑含水量变化;采用免疫组织化学染色法检测大鼠脑组织中水通道蛋白1(aquaporin1,AQP1)和水通道蛋白4(aquaporin4,AQP4)表达情况。【结果】与缺氧模型组相比,野蔷薇苷可显著提高急性低压缺氧大鼠血浆NO含量和SOD活性(P<0.01),降低MDA含量(P<0.01),降低脑组织中LDH活性(P<0.01)和脑含水量(P<0.05),减少AQP1、AQP4阳性细胞表达数量(P<0.01)。【结论】野蔷薇苷可提升大鼠抗氧化能力,有效减轻大鼠脑水肿程度,进而保护急性低压缺氧诱导的大鼠脑损伤。