玫瑰蜂花粉破壁工艺优化及其醇提物生理活性比较

玫瑰蜂花粉气味芳香、口感清甜,富含多酚等活性物质,是极具营养价值和开发潜力的天然保健品。本研究以玫瑰蜂花粉为研究对象,旨在优化其酶解破壁工艺条件,并比较不同乙醇提取物的生理活性及主要成分含量,以期筛选抗炎和抗良性前列腺增生(Benign prostatic hyperplasia,BPH)活性最佳的玫瑰蜂花粉提取物。结果显示,玫瑰蜂花粉双酶解法破壁最优工艺参数是料液比为1:30、温度55℃、pH6、复合酶体系添加量2.0%(纤维素酶:复合蛋白酶=7:5),反应9 h,可得最佳破壁率为73.13%;90%乙醇提取的活性物质能显著(P<0.01)降低脂多糖诱导的RAW264.7细胞炎症因子释放水平(20μg/mL时,与造模组相比,一氧化氮、白细胞介素-6和肿瘤坏死因子-α分别降低了67.04%、16.74%、21.74%)并对BPH-1细胞活力和增殖有最明显的抑制作用,因此具有最佳的抗炎和抗BPH效果。本研究为明确玫瑰蜂花粉中的活性成分及进一步开发其深加工产品提供了理论依据。

5个月季品种花期花粉生活力观测及授粉亲和性研究

观测5个月季品种花期进程花粉萌发及花粉管伸长变化动态,探究各品种自交、自然杂交以及品种间杂交、种间远缘杂交正反交授粉亲和性。结果表明:整个花期内5个月季品种花粉萌发率在1.35%~12.50%之间,花粉管长度在13.17~17.57μm之间,随花期进程各品种花粉萌发率变化幅度较小,花粉管长度则不同程度降低,冰泉之恋花粉生活力始终最高,蓝丝带与慷慨园丁则整体较低。5个月季品种自交结实率在0%~20.0%之间仅云彩霞自交不亲和;自然杂交结实率在30.0%~60.0%之间;品种间杂交结实率在0%~40.0%之间,6组正交与3组反交不亲和;种间远缘杂交结实率在0%~33.3%之间,2种玫瑰为母本的反交组合均有结实且结实率均高于正交,各月季品种与和田沙漠玫瑰亲和性更高,8组正交不亲和。综上,5个月季品种花期以6月花粉生活力最高,自交、自然杂交、品种间正反交、种间远缘杂交正反交亲和性差异较大,受花粉生活力以及亲本组合影响。

平阴玫瑰花粉亚显微形态及品种分类研究

对平阴玫瑰24个品种的花粉亚显微形态进行了扫描电镜观察研究,并进行了主成分分析和聚类分析。结果表明,在花粉亚显微形态特征方面,各品种之间既有共性,也存在明显差别,特别是外壁纹饰的不同可作为玫瑰品种鉴别的重要依据。聚类分析将平阴玫瑰花粉分为两大类,即玫瑰系和蔷薇系,与传统形态分类结论基本一致,但也存在一定的差异。

月季‘云粉’、‘云玫’的花粉活力和柱头可授性研究

采用红四唑(TTC)染色法测定切花月季新品种云粉、云玫的花粉活力和寿命,联苯胺—过氧化氢测定柱头的可授性,显微观察其柱头的形态、颜色变化,结合田间人工授粉试验研究其育性。结果表明:(1)23℃干燥条件下,散粉4 d内花粉活力保持在50%以上,保存10 d时,花粉活力降至6%以下。(2)云粉柱头活性持续时间为3 d以上,云玫不超过2 d,强可授性持续时间云粉远远高于云玫。(3)田间试验,云粉作母本结实率均高于70%,作父本时结实率差异极显著;云玫作亲本时,结实率不超过16%,甚至不结实。可为我国自主知识产权月季品种应用于杂交育种提供科学依据。

月季花粉离体萌发液体培养基组分的优化

以月季品种‘Sorbet fruite’的花粉为材料，通过单因子试验比较了液体培养基中蔗糖及B、Ca、Mg、K对月季花粉离体萌发的影响，以此为基础利用L2，（5。）的正交试验，比较了蔗糖、Ca（NO3）2·4H2O、H3BO3对月季花粉萌发的影响。结果表明：蔗糖、Ca（NO3）2·4H2O和蔗糖×H3BO3的交互作用对‘Sorbet fruite’花粉萌发有极显著影响。适宜培养液为蔗糖20％＋H3BO3（50～100）mg/L＋Ca（NO3）2·4H2O（100～200）mg/L。在适宜的培养液中加入30％的PEG-4000，萌发率和花粉管长度均有极显著增加。

29个蔷薇属植物的孢粉学研究

采用扫描电镜技术对蔷薇属25个种及4个月季品种的花粉形态进行观察分析,探讨单叶亚属及蔷薇亚属中的芹叶组、合柱组、桂味组、月季组及月季品种之间的亲缘关系。研究表明:(1)所有被测样品的花粉都为具三孔沟的N3P4C5型单粒花粉,形状包括近球形、长球形及超长球形,其中大部分都为极轴较长的超长球形,以小檗叶蔷薇(P/E=2.29)最长。(2)在疏花蔷薇、托木尔蔷薇以及重瓣黄刺玫中发现有花粉二型现象。(3)被测样品外壁纹饰主要包括条纹、孔穴-条纹及近孔网纹3类,条纹类型主要出现在芹叶组中,而孔穴-条纹类型则为蔷薇属植物较普遍的纹饰。(4)聚类分析表明,小檗叶蔷薇与其它种亲缘较远,被测月季品种与月季组关系较近,芹叶组与合柱组关系较近,桂味组中的弯刺蔷薇与其他蔷薇的纹饰有明显区别,被单独分开。

4种栽培玫瑰花粉生活力研究

采用离体培养的方法测定了4种栽培玫瑰花粉的生活力,并考察了不同浓度蔗糖溶液对花粉萌发率的影响以及不同冷藏时间下花粉活力的变化情况。结果表明,不同玫瑰品种的花粉萌发率差异显著,‘紫枝’、‘北京单瓣白’的花粉萌发率相对较高,最高萌发率超过40%;‘平阴一号’、‘西湖一号’的花粉萌发率较低,最高萌发率仅为10%～20%。培养基中蔗糖浓度对各品种萌发率的影响差异显著;冷藏花粉的生活力随冷藏时间的延长明显下降。

部分中国传统月季花粉形态研究

利用扫描电镜观察了15个中国传统月季品种的花粉形态。结果表明：传统月季花粉为单粒花粉,呈长球形或超长球形（P/E为1.92~2.25）,大小为37.59~51.95μm×17.02~25.33μm。赤道面观椭圆形或长矩形,极面观三裂圆形,具三孔沟,沿极轴方向等间距环状分布。外壁纹饰条纹型,覆盖层具穿孔,在品种间具有相似性,但变异丰富,划分为4种类型。聚类分析结果表明,花粉大小和外壁纹饰特征在反映传统月季品种的类别上与形态分类基本一致。根据花粉形态演变规律可推断,样品中‘四面镜’可能为最原始的品种类型,‘月月粉’、‘月月红’及‘匍匐红’等品种较为进化。

不同处理对“丰花月季”花粉生活力的影响

以"丰花月季"品种为试材,采用正交实验设计,研究蔗糖、硼酸、CaCl2、MgSO4、ZnSO45个因素不同浓度对其花粉生活力的影响,以期找出最适宜"丰花月季"花粉萌发的培养条件。结果表明:蔗糖浓度对"丰花月季"花粉萌发的影响最大,其余依次为硼酸浓度、ZnSO4浓度、CaCl2浓度,MgSO4浓度的影响最小。一定浓度的蔗糖、硼酸、CaCl2对花粉的萌发有较大的促进作用,但超过一定浓度时起抑制作用,而ZnSO4浓度对花粉的萌发率影响是在一定范围内先降低后升高,MgSO4浓度对花粉的萌发影响不太明显。最适宜"丰花月季"花粉萌发的离体条件是200g/L蔗糖+100mg/L硼酸+50mg/L CaCl2+20mg/L MgSO4+40mg/L ZnSO4。

培育刺玫月季新品种的初步研究(Ⅲ)——部分亲本及杂交种的花粉形态分析

采用扫描电镜,对刺玫月季育种中使用的5个杂交亲本和3个F_1杂种花粉,进行观察和研究。通过对花粉形态的比较研究,讨论花粉败育对刺玫月季育种的影响,及亲本与杂交种在花粉外壁纹饰上的相关性。

果农职业性花粉过敏状况调查

[目的]调查引起果农职业性花粉过敏的主要致敏源,并与春季花粉过敏症相鉴别。[方法]采用流行病学问卷调查,共发放问卷300份,筛选65例花粉过敏患者进行临床症状分析及体内特异性IgE的阴、阳性对照检查。同时进行果树种植区野外植被状况及空气花粉颗粒计数的调查。[结果]果树种植区蔷薇科植物花粉在居民室内外空气中的含量明显升高;有相关临床症状且皮内试验阳性者65例。致敏率高达24%,季节性发病时间与蔷薇科植物花粉的花期同步;经过相关抗敏治疗,有效率达93%。[结论]虫媒花花粉中的蔷薇科植物花粉是引起果农职业性花粉过敏的主要致病源,从病因上与其他春季花粉相关性疾病相鉴别。

月季品种与其亲本的花色相关性分析

该文以《Modern Rose 12》的月季品种花色性状资料为基础,通过对杂交选育的月季品种群体中各种花色品种所占的百分率与其亲本群体(母本群体及父本群体)中各种花色亲本所占百分率的相关性研究,分析了7 548个月季品种的花色与其亲本花色的关系,得到如下结论:(1)各种花色品种与相同花色或同一色系的亲本之间多存在一定的正相关关系;(2)红色系品种和黄色系亲本之间、黄色系品种和红色系亲本之间多存在一定的负相关;(3)黄色系亲本对品种花色的影响相对较大;(4)粉色混合色类型的品种花色受亲本影响较小。

松花粉和松针提取物在亲脂性体外模型系统中抗氧化能力和机制的研究

目的:对松花粉和松针提取物在亲脂性抗氧化模型系统中的抗氧化能力和机制进行研究。方法:采用铜诱导的LDL氧化反应模型和Rose Bengal反应模型分别进行评价。结果:松花粉乙醇提取液具有较好的自由基链式反应阻断剂的作用,有效地推迟人血浆中低密度脂蛋白(LDL)氧化生成共轭二烯。松针乙醇提取液对LDL的保护作用优于松花粉。在Rose Bengal系统中,松花粉以清除自由基和螯合铜的两种机制抑制脂质过氧化反应的发生,而松针主要作为自由基清除剂发挥抗氧化作用。结论:松花粉和松针在两个亲脂性体外模型中均发挥很好的抗氧化能力,而抗氧化机制不尽相同。

蔷薇属植物与现代月季品种杂交亲和性研究

为培育抗寒、抗病性强、芳香的月季品种,以单瓣黄刺玫(Rosa xanthinaf.normalis)、黄刺玫(R.xanthina)、报春刺玫(R.primula)、美蔷薇(R.bella)、腺果大叶蔷薇(R.macrophylla var.glandulifera)、荷花蔷薇(R.multifloraf.carnea)等6个蔷薇属种、变种及变型和5个玫瑰品种为父本,以11个现代月季品种和香水月季(R.odorata)为母本设计72个授粉组合进行远缘杂交,统计杂交结实率及杂交种子萌发率,并采用扫描电镜技术观察了杂交亲本的花粉与柱头形态,测定花粉萌发率。结果显示:(1)除黄刺玫外,所试其他蔷薇属植物均适合作为父本材料与现代月季品种和香水月季杂交,但不同杂交组合的结实率及出苗率差异显著。(2)花粉、柱头形态对杂交亲和性无显著影响,花粉生活力对杂交亲和性有显著影响,且与杂交结实率成正相关关系。通过试验,筛选出14个亲和性较好的杂交组合、4个适宜的母本材料(香水月季、‘橘红潮’、‘金玛丽’、‘粉和平’)和6个适宜的父本材料(单瓣黄刺玫、报春刺玫、美蔷薇、腺果大叶蔷薇、荷花蔷薇、玫瑰‘大红紫枝’)。

7个月季品种花粉活力的测定

采用悬滴液发芽法测定花粉活力,研究不同蔗糖浓度、贮藏温度对7个月季品种花粉活力的影响,为月季资源评价及育种利用提供参考依据。结果表明：月季花粉在含有蔗糖15%、20%、25%的培养基中发芽能力不同,以15%蔗糖浓度下活力最高,7个品种活力为32.4%~47.1%,20%~25%蔗糖浓度下很少发芽或不发芽。常温下月季品种花粉活力从高到低依次为赤阳、桑格尔总统、荣光、粉和平、黄和平、天堂、绯扇,其中赤阳、桑格尔总统、荣光活力较强,散粉后1d花粉活力分别为47.1%、45.5%、40.2%。常温存放4d,7个品种的花粉活力分别降为7.2%、8.0%、8.2%、5.3%、5.0%、7.1%、7.0%,5d后花粉完全失活。采用0~5℃恒温冰箱冷藏的花粉活力可以保持10d。

不同试剂对玫瑰花粉破壁的影响

使用化学试剂、生物制品粗提液处理玫瑰花粉,探索一条可操作性强、对花粉内含营养物破坏程度小、对人及环境无污染、有较大推广意义的玫瑰花粉破壁途径。分别使用不同浓度的乙醇、酸、碱、H2O2、黄瓜提取液、H2O2和NaOH混和溶液处理花粉,检测玫瑰花粉的破壁率。试验结果表明,黄瓜提取液、H2O2和NaOH混和溶液对玫瑰花粉作用效果较好。黄瓜提取液对花粉具有明显的膨胀作用;使用H2O2和NaOH混和溶液处理花粉,外壁破壁率可达90%以上。

玫瑰曲奇饼干的工艺优化

研究玫瑰花粉、面粉、黄油、白砂糖和鸡蛋对曲奇饼干品质的影响,通过对曲奇饼干进行感官评定确定最佳配方。结果表明:玫瑰曲奇饼干感官评价总分均随着原料用量的增加而呈现出先增加后下降的趋势。玫瑰曲奇饼干最优配方为以面粉100%计,黄油70%、鸡蛋25%、玫瑰花粉7.5%、白砂糖40%。在最优配方下制备的玫瑰曲奇饼干品质优良,且具有玫瑰香甜味。本研究结果为拓展玫瑰花粉在曲奇饼干等产品中的开发利用提供一定技术参考。

现代月季6个品种花粉超低温保存研究

【目的】为实现月季花粉长期保存,满足杂交育种和种质资源保存需要,本文以6个现代月季品种的花粉为试验材料,研究其超低温保存技术。【方法】用扫描电子显微镜观察比较6个品种花粉形态、干燥法测定花粉自然含水量、悬滴法检测花粉活力,筛选出适宜萌发培养液,在此基础上进行了液氮保存,并研究这些因素对超低温保存效果的影响。【结果】6个品种花粉悬滴培养的适宜萌发液为15%蔗糖+0.05%硼酸。不同品种新鲜花粉萌发率不同,春季采收的新鲜花粉萌发率为8.91%~27.07%,秋季为9.95%~24.32%,6个品种春季采集的花粉萌发率均高于秋季,但3个差异显著,3个差异不显著。不同品种新鲜花粉含水量不同,春季采收的花粉含水量为9.6%~11.9%;秋季为9.2%~11.5%,4个品种春、秋两季采收的花粉含水量没有显著差异,另外2个品种春季采收的花粉含水量分别显著高于或低于秋季花粉2.4%或1.6%,含水量变化值差异不大。超低温保存后花粉萌发率变化因品种和花粉采收季节而异,6个月季品种花粉经过液氮保存1个月后萌发率为10.36%~21.28%,为新鲜花粉的59.3%~133.9%。长球形的‘金凤凰’和‘希望’,超低温保存后花粉活力有所下降;而超长球形的‘金玛丽’、‘雨果’、‘伦特娜’和‘仙境’,超低温保存后萌发率基本保持稳定。花粉含水量与花粉超低温保存前后萌发率未显著相关。【结论】不同季节采收的自然成熟散粉的6个月季品种花粉均能实现超低温保存,秋季采收的花粉液氮保存后萌发率较新鲜花粉变化较小,但是春季采收的花粉萌发率更高,更适合超低温保存。超低温保存效果与品种、新鲜花粉萌发率、花粉形状和采收季节有关。

刺梨花粉萌发的培养基筛选

为筛选刺梨花粉萌发的最佳培养基,研究了不同蔗糖浓度、硼酸浓度和Ca2+浓度对刺梨花粉萌发率的影响,进一步探讨了不同品种在最佳培养基上花粉萌发率的差异。结果表明,最佳培养基组合为200g/L蔗糖+20mg/LH3BO3+20mg/L CaCl2+10g/L琼脂;不同刺梨品种的萌发率差异较大,贵农1号、2号、5号、6号、7号花粉的萌发率分别为74.8%、54.51%、83.29%、70.92%和80.48%。

18个中国古老月季杂交结实性分析

中国古老月季是培育月季新品种重要的基因资源。分析其杂交亲和性,有助于中国古老月季品种在月季新品种选育中的应用。本研究历时4年以18个中国古老月季为亲本之一,与现代月季及少数野生蔷薇进行人工杂交授粉,统计结实及发芽率,分析其杂交结实特性。结果表明,散粉量多的品种有6个,分别为‘大富贵’、‘思春’、‘一品朱衣’、‘月月粉’、‘紫红香’、‘紫香绒’;离体花粉萌发率偏低,20%以上的品种有‘玉玲珑’、‘一品朱衣’、‘月月粉’、‘紫香绒’、‘大富贵’、‘思春’、‘葡萄红’。共配置杂交组合285个,杂交1190朵花,结实271朵,结实率为22.77%,获得4744粒种子,1833粒发芽,发芽率为38.64%。综合分析发现,‘大富贵’、‘葡萄红’、‘软香红’、‘思春’、‘一品朱衣’、‘云蒸霞蔚’、‘紫红香’、‘紫香绒’8个品种结实性较高,易获得杂交后代。