黄刺玫果提取物体外抗氧化活性研究

为比较黄刺玫果醇提物不同极性萃取部分的体外抗氧化活性。以抗坏血酸为阳性对照,采用DPPH自由基清除法、邻苯三酚自氧化法和邻二氮菲亚铁法,测定果实提取物不同极性萃取部分对DPPH自由基(DPPH·)、超氧阴离子自由基(O2^-·)、羟基自由基(·OH)的清除能力;采用亚硝酸钠^-硝酸铝方法测定总黄酮含量,福林^-酚方法测定多酚含量。结果表明:黄刺玫果醇提物的不同极性萃取物均有一定的抗氧化能力,并且在一定质量浓度范围内,清除自由基的能力与其质量浓度呈正相关性。其中乙酸乙酯部分对DPPH·、·OH、O2^-·的清除能力最强,IC_(50)分别是18.52、737.00、605.50μg/mL。总黄酮含量和多酚含量测定结果表明,乙酸乙酯部分总黄酮含量和多酚含量最高,分别为15.51%和26.59%。不同极性部分中总黄酮和多酚所起的抗氧化作用相当(R^2_(黄酮)在0.98~0.37之间,R^2_(多酚)在0.98~0.37之间)。果实粗提物乙酸乙酯萃取部分是一种很有潜力的抗氧化剂,可以进一步开发利用为抗氧化保健食品。

黄刺玫果实醇提物抗血栓作用及其机制研究

目的研究黄刺玫果实醇提物的抗血栓作用并探究其作用机制。方法 (1)将不同浓度的黄刺玫果实醇提物分别加入大鼠富血小板血浆中,用多功能血小板聚集仪测定ADP诱导血小板的最大聚集率。(2)将小鼠随机分为高、中、低三个剂量组,连续给药5 d,注射角叉菜胶诱导小鼠尾静脉血栓,分别在24 h和48 h后测量黑尾长度。(3)体外测定不同浓度黄刺玫果醇提物组血浆凝血酶时间(PT)、凝血酶时间(TT)、部分凝血酶原时间(APTT)。(4)在0,4,8,24 h时,分别称量黄刺玫果实醇提物高、中、低剂量(60,30,15 mg/ml)组,空白对照组和尿激酶阳性对照组的家兔全血凝块质量,计算全血凝块溶解率。结果(1)与空白对照组比较,高、中、低剂量黄刺玫果醇提物组血小板最大聚集均明显减少(P<0.01)。(2)与空白组比较,黄刺玫提取物高、中剂量组小鼠相对黑尾长度及相对黑尾长度抑制率明显减少(P<0.05)。(3)与空白组比较,黄刺玫果醇提物组正常人血浆APTT,PT,TT时间均显著延长(P<0.01)。(4)与空白组比较,在4,8,24 h时,黄刺玫果醇提取物高、中剂量组的全血凝块溶解率均显著增加(P<0.01)。结论黄刺玫果实醇提物具有抗凝和抑制实验性血栓形成的作用。

黄刺玫果挥发性成分的SPME-GC/MS分析

采用顶空固相微萃取(HS-SPME)和气相色谱质谱联用(GC-MS)技术对黄刺玫果挥发性化学成分进行分离鉴定,用色谱峰面积归一化法确定各组分的相对含量.从黄刺玫果挥发性物质中分离出了58个组分,鉴定出了50个组分,并测定了各组分相对含量,包括3-甲基丁醛(6.44%),异戊醇(16.57%),己醇(6.43%),乙酸异戊酯(3.33%),乙酸己酯(6.02%),丁酸异戊酯(5.33%),己酸异戊酯(13.18%),2-甲基-2-丁烯酸异戊醇酯(11.22%),2-甲基丁酸异戊酯(4.08%),戊酸异戊酯(4.08%)等.通过对黄刺玫果挥发性成分的研究,为黄刺玫资源的进一步开发利用提供了参考依据.

大孔树脂纯化黄刺玫果中总黄酮的工艺研究

目的研究大孔树脂分离纯化黄刺玫果中总黄酮的工艺条件及参数。方法采用静态吸附解吸法考察8种大孔树脂对黄刺玫果中总黄酮的吸附和解吸性能,筛选树脂型号;以总黄酮的含量为指标考察各因素对D101大孔树脂纯化黄刺玫果中总黄酮的影响。结果选用D101型大孔吸附树脂,最佳工艺条件为:上样液料液比为1∶12,最大上样量为2.6 g生药/g树脂,用3BV的70%乙醇进行洗脱,解吸率达95%,总黄酮回收率为72%。经上述工艺纯化后黄刺玫果提取物中总黄酮含量为24.87%。结论该方法简单可行,分离效果好,可为工业生产提供参考。

黄刺玫果中总黄酮的提取工艺研究

目的采用乙醇提取法探究刺玫果中总黄酮的最佳提取工艺。方法以芦丁做对照,采用紫外可见分光光度法测定总黄酮的含量。以总黄酮含量为指标,通过单因素实验考察提取时间、料液比、乙醇浓度、温度对提取的影响;并在单因素实验的基础上,采用正交试验设计法,考察温度、提取次数、乙醇浓度、料液比4个因素。结果乙醇浓度对总黄酮含量有显著影响,提取次数影响最小。最佳提取工艺为:10倍量70%乙醇,80℃回流3次,每次回流1.5 h。结论该提取方法操作简便,结果准确可靠,为进一步研究黄刺玫果中总黄酮提取工艺提供理论依据。

Box-behnken设计优化黄刺玫果总黄酮纯化工艺研究

目的:研究大孔树脂纯化黄刺玫果总黄酮的工艺条件。方法:在单因素实验的基础上,采用Box-behnken设计优化纯化工艺,以总黄酮回收率、总黄酮纯度以及总评归一值为指标,考察上样流速、上样浓度和解吸液浓度3个因素对纯化效果的影响。结果:获得了大孔树脂D101纯化黄刺玫果总黄酮的最优条件:提取液100mL以3.0mg/mL的浓度、2.8BV/h的流速进行上样,用3BV的50%乙醇进行解析,解吸流速为3BV/h,此工艺的的平均回收率为91.27%,经纯化后提取液中总黄酮含量从3.72%提高到50.89%。结论:通过Box-behnken设计优化获得的纯化工艺操作简便,稳定可靠,为黄刺玫果总黄酮的开发提供理论支持。

野生黄刺玫果高效液相色谱指纹图谱研究

目的:以山西省野生黄刺玫果为主,建立黄刺玫果的高效液相色谱指纹图谱,为黄刺玫果的质量控制提供有效方法。方法:采用Inertsil ODS-SP(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长为254 nm,柱温为25℃;采用"中药指纹图谱相似度评价系统(2004 A版)"确定共有峰,进行模式分析及相似度计算。结果:该色谱条件下黄刺玫果各成分色谱峰得到较好的分离,经方法学验证,该方法具有良好的精密度、稳定性和重现性。10批样品指纹图谱中共标定了12个共有峰,各批次样品成分类型基本一致。结论:该方法简便准确,灵敏度高,重复性好,可作为黄刺玫果的质量控制和评价方法。

基于^(1)H NMR代谢组学技术的黄刺玫果实抗衰老作用研究

目的:采用^(1)H NMR代谢组学方法,探讨黄刺玫果实对D-半乳糖致衰老模型大鼠的干预作用。方法:皮下注射D-半乳糖(400 mg/kg)致大鼠亚急性衰老,考察黄刺玫果实提取物(1.6、3.2、6.4 g/kg)的抗衰老作用。造模30d后采集大鼠血清,检测血清生化指标SOD(superoxide dismutase)、 LPO(lipid peroxide)及Hyp(hydroxyproline)水平,并进行^(1)H NMR代谢组学检测,结合多元统计分析研究黄刺玫果实提取物高、中、低剂量的抗衰老作用。结果:与模型组相比,黄刺玫果实提取物可显著升高血清SOD(P<0.01)、Hyp(P<0.01)水平,降低LPO(P<0.05,P<0.01)水平。与对照组相比,模型组大鼠血清中13种差异代谢物发生显著(P<0.05,P<0.01)性变化。给予黄刺玫后,高剂量组可显著(P<0.05,P<0.01)回调脂质、精氨酸、甘油酯、氧化三甲胺、甘氨酸、丙氨酸及N-乙酰糖蛋白7种代谢物,中剂量组可显著调节氧化三甲胺、N-乙酰糖蛋白、亮氨酸3种代谢物,而低剂量组仅显著回调磷脂酰胆碱。三组药效指数(EI)由大到小分别为高剂量组、中剂量组、低剂量组,表明高剂量组的抗衰老效果最佳。结论:黄刺玫果实可能通过调节氧化应激、促进胶原蛋白合成,以及调节氨基酸代谢、肠道菌群代谢等途径延缓衰老。

ZTC1+1Ⅱ天然澄清剂用于黄刺玫果醇提液的纯化研究

目的:研究ZTC1+1Ⅱ天然澄清剂纯化黄刺玫果醇提液的最佳工艺。方法:实验通过ZTC1+1Ⅱ澄清剂A、B的加入顺序、澄清剂用量、醇提液料液浓度比、温度、搅拌速度等影响因素,在单因素分析的基础上应用正交试验设计优化澄清条件,通过紫外分光光度计检测总黄酮含量,优选最佳纯化工艺。结果:优选出的最佳工艺条件是:料液浓度比为1∶2,在温度恒为50℃时按2%B+1%A澄清剂用量,以先加B组份后加A组份的次序以100 r/min的搅拌速度进行。结论:ZTC1+1Ⅱ天然澄清剂可用于纯化黄刺玫果醇提液。

黄刺玫果提取物对小鼠急性酒精性氧化应激反应的影响

目的探讨黄刺玫果提取物对小鼠急性酒精氧化应激损伤的抗氧化作用。方法将小鼠随机分为5组,分别为空白对照组,模型组,黄刺玫果提取物低、中、高剂量组,采用50%乙醇经口灌胃造模,测定血清和肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、蛋白质羰基含量。结果乙醇氧化模型造模成功,中剂量组、大剂量组小鼠血清中SOD、GSH、MDA、蛋白质羰基与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);中剂量组、大剂量组小鼠肝组织中SOD、GSH、MDA、蛋白质羰基与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论黄刺玫果提取物对小鼠急性酒精性氧化应激反应具有抗氧化作用,为黄刺玫果开发功能性食品提供实验依据。