牛羊布鲁氏菌病虎红平板凝集试验技术要点分析

牛羊布鲁氏菌病(布病)为牛羊养殖过程中的重大传染性疾病,既是养殖场(户)在生产管理中的关键防控对象,也是我国兽医部门每年春防、秋防规定必须严格监测的疫病。为了提升当前基层兽医人员对牛羊布病的防控检测水平,提高检测结果的准确性,结合团队成员近几年在基层牛羊布病虎红平板凝集试验检测指导的经验,依据中华人民共和国卫生行业标准WS269-2019《布鲁氏菌病诊断标准》,对基层兽医技术人员在检测过程中的操作误区进行详尽剖析,并提出精细化、规范化的指导建议。旨在提升基层技术人员的操作技能,并为相关研究提供参考。

5种虎红平板凝集检测试剂盒应用效果评价

为评价常见市售虎红平板凝集试验(RBT)试剂盒的试验特性,选取基层动物疫病预防控制机构常用的5种试剂盒,以布鲁氏菌竞争酶联免疫吸附试验(cELISA)结果为相对金标准,分别对60份阳性、50份阴性布鲁氏菌病羊血清进行检测。结果显示,5种RBT试剂检测结果敏感性为70%~91.67%,特异性为94%~100%,符合率为81.82%~92.73%,与布鲁氏菌cELISA检测方法的Kappa值介于0.64~0.86。其中有2种RBT试剂检测结果与cELISA检测结果无统计学差异。研究结果为基层动物疫病预防控制机构选择适合的筛检试剂建立了参考方法,为进一步提高布鲁氏菌流行情况估计和布鲁氏菌病疫病净化效果评估等工作的准确性提供了可靠的技术支持。

酰胺基多孔有机聚合物/玫瑰红改性光致抗菌棉织物

为解决光致抗菌织物上光敏剂(PS)聚集诱导引起的猝灭(ACQ)效应,通过在棉织物上原位合成一种含二苯甲酮结构的酰胺基多孔有机聚合物(POP-CF),并吸附孟加拉玫瑰红(RB),制备成抗菌棉织物(RB@POP-CF)。结果表明:POP-CF的BET比表面积为28.914 m2/g,孔径为3.407 nm;其对RB主要以物理吸附为主,最大吸附量为5.22 mg/g;RB在POP-CF孔中的分散吸附显著降低了ACQ效应,在模拟阳光照射下,二苯甲酮结构与RB分子协同高效地产生活性氧(ROS),达到4.18 mg/L;10 min内可杀死99.88%的大肠埃希菌和99.99%的金黄葡萄球菌。

准均相光催化剂制备及其在交叉脱氢偶联反应中的应用

以甲基丙烯酸甲酯(MMA)和对氯甲基苯乙烯(VBC)为单体,偶氮二异丁脒盐酸盐(AIBA)为引发剂,通过乳液聚合制备温敏聚合物材料P(MMA-co-VBC x%)。通过接枝反应将玫瑰红(RB)引入到P(MMA-co-VBC x%)中,得到上临界溶解温度(UCST)型准均相聚合物催化剂P(MMA-co-VBC x%)-RB y%。使用1H NMR、FTIR和GPC表征了P(MMA-co-VBC x%)和P(MMA-co-VBC x%)-RB y%的结构,分析了温敏材料和准均相催化剂的UCST行为,并以N-芳基四氢异喹啉(THIQ)和硝基甲烷(NM)的交叉脱氢偶联反应(CDC)为模型,研究了准均相催化剂的催化性能和回用性能。结果表明,P(MMA-co-VBC x%)的T cp(浊点)随VBC含量增加而下降,准均相催化剂P(MMA-co-VBC x%)-RB y%的T cp随RB含量增加而下降,在乙醇-水体积比为4∶1时,两类聚合物的响应温度位于40~60℃;P(MMA-co-VBC x%)-RB y%具有较好的溶解-析出性能,溶解-析出循环5次时,回收率>90%;在催化THIQ和NM的反应中,P(MMA-co-VBC x%)-RB y%的催化活性与均相催化剂RB相当,且适用于其他衍生物的反应,降温可回收催化剂,重复使用5次,催化活性无明显下降。

虎红超分子体系在共振光散射光谱法测定氯霉素含量中的应用研究

虎红是一种阴离子型生物染色素,在酸性条件下游离的羧基可以和药物分子中的羟基通过氢键相互作用形成超分子体系,用于共振光散射光谱法的定量分析。本实验以氯霉素为应用对象,详细考察了实验条件对虎红-氯霉素超分子体系共振光散射强度的影响,获得最佳测试条件:虎红溶液浓度为4.9×10^(-4)mol·L^(-1),体积1.5 mL,盐酸体积1.0 mL,氯霉素浓度和体积分别为100μg·mL^(-1)和1.0 mL。方法学考察显示,氯霉素浓度在0-10μg·mL^(-1)范围内线性良好(y=3343.5x+21.857,R^(2)=0.9958),检出限为0.0015μg·mL^(-1),氯霉素加标样品2.0、2.5、3.0μg·mL^(-1)准确度考察,平均回收率分别为100.4%、100.5%和100.3%,相对标准偏差分别为1.4%、1.1%和1.9%(n=5)。该方法用于氯霉素滴眼液实际样品含量测定,获得标示量百分含量平均值为100.0%,RSD%为1.9%(n=6)。反应机理研究表明氯霉素和虎红的最佳结合摩尔比为1:2(mol/mol)。上述结果表明本实验开发的基于虎红超分子体系的共振光散射光谱法为氯霉素定量分析提供一种含量测定方法。

SYMPHONY^(■)琼脂与孟加拉红琼脂用于霉菌检测的比较研究

文章选取通过ISO 16140-2:2016标准验证,同时获得IFNOR认证BKR23/11-12/18的SYMPHONY^(■)琼脂与国标法孟加拉红琼脂进行标准定量菌株的计数一致性确定,并对比不同时间下菌落的生长形态,以确定SYMPHONY^(■)琼脂的计数准确性和判读优势。结果表明,SYMPHONY^(■)琼脂与孟加拉红琼脂均处于标准定量菌株的质控范围内,并且从菌落形态上来看,SYMPHONY^(■)琼脂抑制菌落过快生长的作用显著优于孟加拉红琼脂培养基,可以更好地减少判读误差,提高计数准确性。

两种分光光度法测定马来酸氯苯那敏的含量

建立了两种快速、直接的分光光度法检测马来酸氯苯那敏含量。方法是基于在Clark-Lubs缓冲溶液中,马来酸氯苯那敏能与赤藓红B(方法 A)或孟加拉玫瑰红(方法 B)之间发生反应,引起体系的吸光度发生变化。通过测量体系在560 nm和577 nm处的吸光度变化值,得到的结果显示,方法 A即赤藓红B体系在560nm处的吸光度差值与1.00~10.00 mg·L^(-1)浓度范围内马来酸氯苯那敏呈线性关系(ΔA=0.125C+0.028 3,相关系数为0.999 6),检出限为0.222 8 mg·L^(-1)。方法 B即孟加拉玫瑰红体系在577 nm处的吸光度差值与1.00~16.00 mg·L^(-1)浓度范围内马来酸氯苯那敏呈线性关系(ΔA=0.086 1C-0.012 8,相关系数为0.999 2),检出限为0.3571 mg·L^(-1)。

饮料和糖果中5种非法添加色素的检测

采用聚酰胺吸附法提取样品溶液的色素,用乙醇-氨水-水混合溶液解吸,用高效液相色谱-二极管阵列检测器测定。采用ODS柱分离,以甲醇和硫酸铵溶液为流动相进行洗脱,在520nm波长处检测。亮黑、荧光素钠、红色2G、荧光桃红和孟加拉玫瑰红的质量浓度在1.0～10.0mg/L范围内与其色谱峰面积的线性关系良好(r=0.999),在1、2、5mg/kg添加水平时的平均回收率在82.95%～95.43%范围内,RSD值在1.99%～5.95%范围内。方法检出限为1.0mg/kg。该方法准确度高,分离效能好,结果稳定可靠,适合于饮料和糖果中亮黑、荧光素钠、红色2G、荧光桃红和孟加拉玫瑰红的测定。

曲霉HD_1的分离及其对染料脱色特性的研究

曲霉ＨＤ１的分离及其对染料脱色特性的研究李孱白景华文艺辉陈怀新（湖北大学生命科学系，武汉４３００６２）李林（华中农业大学微生物系，武汉４３００７０）关键词虎红；偶氮染料；曲霉；脱色；降解．高效的染料脱色菌是解决染料对环境污染的基础和关键．虽然已有许...

乳化剂OP存在下蛋白质与虎红的超分子显色反应研究及分析应用

在pH2．36～3．29的Britton．Robinson缓冲介质中，在乳化剂OP存在条件下，虎红与蛋白质发生超分子显色反应形成红色的超分子复合物，该超分子复合物的最大吸收波长为565nm，而试剂的最大吸收波长为568nm，紫移了3nm。在565nm处考察了多种蛋白质的响应情况，结果表明测定牛血清白蛋白（BSA）、人血清白蛋白（HSA）及γ-球蛋白（IgG）时具有高灵敏度，它们的表观摩尔吸光系数E565和桑德尔灵敏度s分别为1．836×10^6、2．213×10^6、2．932×10^6L·mol^-1·cm^-1，和0．036、0．031、0．061μg／cm，其线性范围分别为2～36、2～36和2～40mg／L。除阴、阳离子表面活性剂外，其余大部分物质不干扰蛋白质的测定。所拟方法应用于新鲜人尿液和人血清中总蛋白的测定，结果与考马斯亮蓝G-250法基本一致。

光化学法诱导大鼠冠状动脉血栓模型的建立和应用

目的建立光化学法诱导大鼠冠状动脉血栓致心肌梗死模型。方法大鼠分为激光和化学单独刺激组、联合刺激组和重组葡激酶处理组,通过注射光敏剂四氯四碘荧光素二钠(虎红)后激光照射冠状动脉形成血栓致心肌梗死动物模型,比较各组血管栓塞程度以及心电图Ⅱ导联ST段高度变化选择出最佳模型。并用该模型评价重组葡激酶溶栓作用效果。结果相对于单独刺激组,联合刺激组心脏激光照射处均出现明显损伤病灶。HE染色心肌细胞肿胀,排列紊乱,动静脉内均见血栓。心电图出现不同程度心律失常,ST段抬高。其中注射40 mg.kg-1虎红后照射15 min心律失常出现时间较早,心电图ST段抬高幅度高、维持时间长,而且死亡率低,为本研究中最佳光化学法冠状动脉血栓模型。重组葡激酶处理组能够部分溶解动静脉血管内血栓,减小血栓面积(P<0.01),抑制ST段抬高(P<0.05～0.01)。结论该文建立了最佳光化学法诱导大鼠冠状动脉血栓模型,适于溶栓药物研发评价。

虎红-牛血清白蛋白共振光散射光谱研究及其分析应用

基于在pH3.0的BR缓冲溶液中蛋白质的加入使虎红的共振光散射信号增强,建立了一种蛋白质测定的新方法。详细地探讨了pH、染料用量、表面活性剂、离子强度、共存物质等对信号的影响。牛血清白蛋白浓度在0～4.0μg/mL范围内与体系散射强度呈线性关系,检出限为0.01718μg/mL。该方法用于合成样品中牛血清白蛋白的测定,结果满意。

聚乙烯醇治疗和预防干眼病的药效学研究

目的观察聚乙烯醇(PVA)对干眼病的预防和治疗作用及聚乙烯醇的眼部停留时间。方法应用角膜虎红染色,对家兔干眼模型以1%虎红染色液滴眼0.1 mL后5 min,用0.9%氯化钠溶液冲洗结膜囊,在裂隙灯下计数着色点,根据着色点数判断等级指数(M);Schirmer实验,在暗室条件下,对家兔干眼模型用2%利多卡因0.1 mL滴眼局麻5 min后,吸干余泪,4 min后置新华滤纸于下睑中部1/3处,5 min后取出滤纸,测量湿长。角膜的光镜、电镜等方法应用于家兔干眼模型研究PVA对干眼病的预防和治疗作用及聚乙烯醇的眼部停留时间。结果虎红染色结果显示各治疗组与预防组的等级指数均为正值,与对照组比较均有显著性差异(P<0.05);Schirmer实验显示各治疗组与预防组与对照干眼相比较,差异均有显著性(P<0.01);PVA滴眼液与对照组比较能显著提高药物在兔眼内的停留时间(P<0.01);病理切片检查显示经PVA滴液眼治疗后,其眼角膜基底细胞生长活跃,呈高柱状,上皮细胞剥脱所形成的缺损区已被新生上皮细胞覆盖,细胞排列较规则,即干眼损坏得到修复。结论PVA滴眼液可作为泪液代用品,用于干眼病的治疗与预防。

玫瑰红光催化漂白硫酸盐蔗渣浆的研究

采用正交实验研究了玫瑰红用量、NaOH用量、反应时间和浆浓4因素对玫瑰红光催化单线态氧漂白硫酸盐蔗渣浆的影响,分别得出白度、高锰酸钾值、粘度和返黄值的最佳条件。

孟加拉玫瑰红诱导的激光所致大鼠缺血性视神经病变模型制作

目的:视神经损伤是以视网膜神经节细胞的轴突损害为主要特征,所以研究缺血性视神经病变模型以抑制视神经节细胞损伤对于人类治疗致盲性眼病具有重大意义。方法:大鼠60只,双眼分别为孟加拉玫瑰红注射实验组、孟加拉玫瑰红注射+激光实验组、激光实验组和空白对照组,用25g/L乌拉坦10mL/kg麻醉,ip。结果:用孟加拉玫瑰红尾部注射和单纯激光的方法均不能产生视网膜缺血。用孟加拉玫瑰红诱导后,用激光的方法可以成功制作缺血性视神经病变模型,并在闪光VEP、视网膜血液供应、光镜、电镜、定量观察等方面都有相应的改变。

虎红光度法测定硫酸卡那霉素

在pH3.6的Britton-Robinson(B-R)介质中,虎红与硫酸卡那霉素相互作用,使虎红褪色,最大吸收峰在546 nm处,且吸光度差值与硫酸卡那霉素浓度呈线性相关,在最佳条件下,硫酸卡那霉素在0.0～0.8μg/mL范围内遵守比尔定律,表观摩尔吸光系数ε546=8.98×104L.mol-1.cm-1。据此建立了一种测定硫酸卡那霉素含量的新方法。将方法应用于硫酸卡那霉素滴眼液和注射液的测定,结果满意。

0.8%黄精多糖滴眼液对干眼症的实验研究

目的 观察 0 8%黄精多糖滴眼液对实验性干眼症模型的治疗效果。方法 将实验性干眼症日本大耳白兔随机分为空白对照组 (模型组 )、受试药物组 (治疗组 )和阳性药物对照组 (对照组 ) ,分别用溶媒、 0 8%黄精多糖滴眼液和泪然滴眼液治疗。观察SchirmerI试验和角膜结膜虎红染色点数 ,每周1次 ,共 5周。结果 各组模型动物SchirmerI试验滤纸湿长度和角结膜虎红染色点数分别在用药 2周后和3周后差异有显著性 ,治疗组在用药 2周后SchirmerI试验滤纸湿长明显增加 ,用药 3周后虎红染色点数减少。结论 0 8%黄精多糖滴眼液对实验性干眼症有明显疗效。

正确认识和应用布鲁氏菌虎红平板凝集试验

布鲁氏菌病是一种由布鲁氏菌引起的全球常见细菌性人兽共患病。在开展布鲁氏菌病诊断、监测、防控等相关工作时,虎红平板凝集试验(rose bengal test,RBT)是最常用的布鲁氏菌抗体检测方法。但是,在实际应用过程中,因对布鲁氏菌抗体特点及RBT特性等缺乏充分理解,导致RBT检测结果被“误用”的情况时有发生。本文将从动物感染布鲁氏菌后产生抗体的种类和特点,抗体凝集反应中存在的“前带现象”和非特异性反应,RBT抗原酸化和标准化对其检测性能的改善,RBT阳性结果需“确证”的起因及“误用”,在不同临床条件下如何使用RBT和解释检测结果等方面作一综述。充分认识和理解RBT的特性,以及在不同临床情形下正确使用RBT及其检测结果,不但可以降低布鲁氏菌病诊断成本,而且还能极大发挥RBT在布鲁氏菌病防控中的作用。

松花粉和松针提取物在亲脂性体外模型系统中抗氧化能力和机制的研究

目的:对松花粉和松针提取物在亲脂性抗氧化模型系统中的抗氧化能力和机制进行研究。方法:采用铜诱导的LDL氧化反应模型和Rose Bengal反应模型分别进行评价。结果:松花粉乙醇提取液具有较好的自由基链式反应阻断剂的作用,有效地推迟人血浆中低密度脂蛋白(LDL)氧化生成共轭二烯。松针乙醇提取液对LDL的保护作用优于松花粉。在Rose Bengal系统中,松花粉以清除自由基和螯合铜的两种机制抑制脂质过氧化反应的发生,而松针主要作为自由基清除剂发挥抗氧化作用。结论:松花粉和松针在两个亲脂性体外模型中均发挥很好的抗氧化能力,而抗氧化机制不尽相同。

绿茶提取物清除单线态氧的作用及抗脂质过氧化效应

光敏化剂玫瑰红光照后产生单线态氧（＾１Ｏ２），以Ｎ，Ｎ－二甲基－４－亚硝基苯胺（ＤＭ－ＮＡ）被漂白作用测定＾１Ｏ２的产生及清除。绿茶提取物（ＧＴＥ）可以清除光敏氧化反应系统产生的＾１Ｏ２，在起始阶段作用更显著，随ＧＴＥ浓度增加清除作用加强。新配制的ＧＴＥ溶液清除＾１Ｏ２的效果较陈旧溶液为佳。ＧＴＥ可以防护单线态氧造成的红细胞膜及微粒体脂质过氧化作用，达到一定浓度进可以完全抑制丙二醛的产生。