牛羊布鲁氏菌病虎红平板凝集试验技术要点分析

牛羊布鲁氏菌病(布病)为牛羊养殖过程中的重大传染性疾病,既是养殖场(户)在生产管理中的关键防控对象,也是我国兽医部门每年春防、秋防规定必须严格监测的疫病。为了提升当前基层兽医人员对牛羊布病的防控检测水平,提高检测结果的准确性,结合团队成员近几年在基层牛羊布病虎红平板凝集试验检测指导的经验,依据中华人民共和国卫生行业标准WS269-2019《布鲁氏菌病诊断标准》,对基层兽医技术人员在检测过程中的操作误区进行详尽剖析,并提出精细化、规范化的指导建议。旨在提升基层技术人员的操作技能,并为相关研究提供参考。

川西北牦牛布鲁氏菌病血清流行病学调查

同时采用间接ELISA、虎红平板凝集试验和试管凝集试验三种血清学方法调查川西北牦牛布鲁氏菌病血清流行情况。对1070份采自川西北阿坝州8个草地县的牦牛血清样品经三种血清学方法检测,间接ELISA检测阳性率为25.4%(272/1070),虎红平板凝集试验检测阳性率为12.7%(136/1070),而试管凝集试验检测阳性率为9.1%(97/1070)。8个县均发现阳性布鲁氏菌病血清。与间接ELISA相比,虎红平板凝集试验的相对敏感性和特异性分别为50%和100%,而试管凝集试验的相对敏感性和特异性分别为35.7%和100%。布鲁氏菌病在川西北地区广泛存在,血清学方法是检测和监测布鲁氏菌病最常用和最简便的方法,其中间接ELISA方法最为敏感。

福建省某公猪站布氏杆菌病的诊断

为了解福建省某公猪站布氏杆菌病情况,采用平板凝集试验与试管凝集试验相结合的方法以及PCR诊断方法 ,对该站50头种公猪进行布氏杆菌病诊断。经平板凝集试验筛选,检出疑似阳性血清样本14份,经试管凝集试验复检,确诊阳性血清样本4份。为进一步确诊疑似病例,采用PCR诊断方法 ,在剩下的10份疑似阳性血清样本中确诊2份。

张家口市规模化奶牛场布鲁菌病血清学检测与分析

为了查清张家口市规模化奶牛场布鲁菌病流行动态,采用虎红平板凝集试验和试管凝集试验的方法对2 680头奶牛做了布鲁菌病血清学检测。结果表明,布鲁菌病血清阳性率为0.45%,已经出现零星感染。

虎红平板凝集试验与试管凝集试验检测奶牛布鲁菌病的比较

布鲁菌病主要采用凝集试验来检测,本试验用虎红平板凝集试验和试管凝集试验对江苏海安、江都、无锡和兴化地区的660头奶牛的血清样品进行平行检测,虎红平板凝集试验的阳性检出率为9.7%,试验管凝集试验的阳性检出率为5.5%;与后者相比,虎红平板凝集试验的敏感性为100%,特异性为95.3%,符合率为95.6%。这些数据表明,江苏地区某些奶牛场存在布鲁菌感染,虎红平板凝集试验可以用于布鲁菌病初步检测。

两种诊断制品对临床样品中布鲁氏菌抗体的检测比较

本研究以国家标准《动物布鲁氏菌病诊断技术》(GB/T 18646-2018)中的试管凝集试验方法为确诊金标准,对353份临床牛、羊和猪血清样品进行确诊,然后分别采用虎红平板凝集试验抗原和抗体检测试纸条,对该353份临床血清进行检测,比较两种诊断制品在布鲁氏菌病初筛中的差异。经统计分析发现,虎红平板凝集试验抗原敏感性为100%(23/23),特异性为97.88%(323/330),与确诊结果间的Kappa值为0.86;布鲁氏菌抗体检测试纸条敏感性为100%(23/23),特异性为99.39%(328/330),与确诊结果间的Kappa值为0.95,两种方法的重复性试验结果均一致。试验结果证明,布鲁氏菌抗体检测试纸条和布鲁氏菌虎红平板凝集试验抗原都能满足布鲁氏菌病初筛的需求;由于布鲁氏菌抗体检测试纸条的储存、运输和操作的便捷性,在部分地区或特殊环境下可替代布鲁氏菌虎红平板凝集试验抗原用于布鲁氏菌病初筛。

两例小熊猫疑似布鲁菌感染的鉴别诊断

为了研究小熊猫这类野生动物是否存在布鲁菌感染,采用虎红平板凝集试验(RBPT)、试管凝集试验(SAT)及BCSP31-PCR对成都大熊猫繁育研究基地小熊猫保护研究中心产房饲养的小熊猫进行了布鲁菌病的血清学及分子生物学调查。结果表明:有2只小熊猫RBPT检测阳性,表示疑似布鲁菌感染,而进一步采用SAT及BCSP31-PCR诊断为阴性,排除了RBPT检测为阳性的2只小熊猫感染布鲁菌的可能性。说明RBPT存在假阳性结果,临床诊断此病时应结合分子生物学技术等进行鉴别诊断。

2015～2016年新疆某地区牛羊布鲁氏菌病流行病学调查与分析

目的调查分析新疆某地区2015~2016年之间家畜牛和羊布鲁氏菌病的流行情况。方法本研究用虎红平板凝集实验方法对2015~2016年期间新疆某地区11个乡镇的牛和羊进行布鲁氏菌病血清学检测,其中牛血清2877份,羊血清8049份。结果 2015~2016年,该地区牛布鲁氏菌病总阳性检出率达1.39%(40/2877),羊布鲁氏菌病达0.40%(33/8049);散养户牛阳性率3.04%(26/856)、羊阳性率1.62%(19/1176),规模养殖场牛阳性率0.69%(14/2019)、羊阳性率0.20%(14/6873)。此外,该区2016年牛羊布鲁氏菌病总体流行情况均较2015年低,即2015年牛、羊布鲁氏菌病阳性检出率分别为1.66%(25/1508)和0.5%(21/4008),而2016年牛羊该病阳性检出率分别为1.09%(15/1369)和0.29%(12/4029)。结论 2015~2016年间新疆某地区牛羊群存在布鲁氏菌病疫情,但总体发展有所好转,呈下降趋势。

玉树地区牦牛布病血清学检测

为掌握玉树牦牛感染情况和牦牛疾病综合防治提供参考依据,应用布鲁氏杆菌虎红平板凝集实验（RBPT）对采自玉树藏族自治州囊谦县、称多县、治多县、杂多县306份血清进行布鲁氏杆菌抗体的检测。结果检出阳性血清样品41份,阳性率为13.40%（3.3-17.9%）,表明玉树地区各县牦牛群中均存在布鲁氏杆菌病的感染。

试管凝集试验与虎红平板凝集试验对布鲁氏杆菌病的诊断价值

目的研究试管凝集试验与虎红平板凝集试验对布鲁氏杆菌病的诊断价值。方法于2017年1月至2019年12月将清丰县疾病预防控制中心接受布鲁氏杆菌病筛查的120例疑似布鲁氏杆菌病患者纳入研究,对血液标本进行试管凝集试验、虎红平板凝集试验,比较试管凝集试验与虎红平板凝集试验的诊断结果。结果在布鲁氏杆菌病诊断中,参照布鲁氏杆菌病综合检测结果,虎红平板凝集试验的灵敏度、阴性预测值均高于试管凝集试验,而试管凝集试验的特异度、阳性预测值均高于虎红平板凝集试验(P<0.05),试管凝集试验与虎红平板凝集试验的准确度无显著差异(P>0.05)。试管凝集试验、虎红平板凝集试验诊断结果与布鲁氏杆菌病综合检测结果之间均呈高度一致(Kappa=0.807、0.823)。结论试管凝集试验、虎红平板凝集试验在布鲁氏杆菌病诊断中具有各自优势,临床诊断时可结合两种凝集试验方法进行综合诊断,以提高诊断的准确性。

基层兽医检验室布病虎红平板凝集试验能力比对结果及影响因素分析

目的:探讨基层兽医检验室布鲁氏菌病虎红平板凝集试验正确率及影响因素。方法:新疆哈密市36个乡镇兽医检验室,共计44位检验人员参加布鲁氏菌病虎红平板凝集试验能力比对。每位检测人员分发比对样品10份,要求进行布鲁氏菌病虎红平板凝集试验操作,并且判断结果。统计比对结果的正确率,对平板反应温度、反应时间、移液操作和检验室光照等影响因素进行分析。结果:440份样品中有34份(7.73%)比对结果错误。对检验的影响因素依次为平板反应温度偏低(58.82%)、反应时间不足(20.59%)、移液操作不当(14.71%)、检验室光照不足(5.88%)。结论:平板反应温度、反应时间、移液操作、光照等因素直接影响到布鲁氏菌病虎红平板凝集试验正确率,应予以严格要求。

2016-2021年济南市平阴县布鲁菌病监测数据分析

目的探讨2016—2021年济南市平阴县布鲁菌病(布病)的发病情况及疫情动态。方法选取2016—2021年济南市平阴县布病疫点高危人群血样3648份,采用虎红平板凝集试验进行筛查,筛查阳性标本送检市疾病预防控制中心(Centers for Disease Control and Prevention,CDC)进行确诊检验,收集标本的来源(性别、年龄、标本采集时间等),对监测数据结果与流行病学特征进行统计分析。结果共检测布病疫点高危人群血样3648份,其中初筛阳性58份,济南市CDC确诊49份阳性;时间分布:2016—2018年患者数量有所下降,2019年又开始逐渐增加;性别分布:血清抗体标本阳性率男性高于女性,差异有统计学意义(P<0.05);年龄分布:在30~89岁年龄段,均检出布鲁菌阳性血清标本,主要集中在40~69岁[81.63%(40/49)];季节分布:全年3~12月份检出阳性标本,存在明显的季节分布特征,集中分布在4~11月份[89.80%(44/49)]。结论2016—2021年济南市平阴县布鲁菌病,男性发病率高,主要在夏秋冬季节发病,应提高接触人群防护意识,加强宣传教育。

5330例布鲁菌病初筛检测结果分析

目的分析北京市热带医学研究所2013–2016年布鲁菌病血清学检测结果,为该病的防治及预防提供实验室依据。方法对疑似布鲁菌病病例进行血清学检测,采用虎红平板凝集试验检测布鲁菌特异性抗体;采用卡方检验计数资料。结果 2013–2016年北京热带医学研究所热带病门诊布鲁菌病初筛患者共5330例,血清学阳性率为8.48%,男性患者阳性率为10.89%,女性为4.93%,差异有统计学意义;青中年阳性率居高,50～年龄组阳性率最高,为13.51%,10～年龄组最低,为2.79%,差异有统计学意义;7月份的阳性率最高,为11.23%,11月份的阳性率最低,为6.11%。结论北京周边地区近四年布鲁菌病血清阳性患者逐渐增多,阳性率居高不下,应引起卫生防控部门的重视,加大监控和防治力度,有效降低北京周边地区布鲁菌人群传染危害。

青海海西州地区牛羊布鲁菌氏病监测方案的研究

目的探索适合青海省海西州地区牛、羊布鲁氏菌病的监测方案,净化布鲁氏菌病。利用琥红平板凝集试验(RBPT)、全乳环状试验(MRT)和试管凝集试验(SAT)对1200份牛血清中376份奶牛血清、677份羊血清,以及376份牛奶进行检测。结果RBPT检测1200份牛血清中9份可疑,3份阳性;376份奶牛血清中3份可疑,1份阳性;其他牛6份可疑,2份阳性;677份羊血清中3份可疑。MRT检测376份奶样中5份可疑,1份阳性。SAT重复检测的20份血清中2份为阳性,RBPT与MRT结果的符合率为100%。结论三种检测方法的联合使用适合大样本的进行布鲁氏菌病的监测,为基层布鲁氏菌病的监测方案的研究提供了理论依据。

2017年某部一起布鲁氏菌病疫情分析及启示

目的通过分析某部一起布鲁氏菌病实验室检测结果,结合流调信息,探讨部队布病防治。方法采用多种方式进行深入流行病学调查,同时运用RBPT和SAT两种方法对该单位126名人员的149份血样进行布鲁氏菌抗体检测。结果检出布鲁氏菌抗体阳性11例,阳性率为8.73%,男性9例,女性2例,81.82%阳性病例为年龄35岁以下,其中有1名男性干部采集4次血液,检测结果由阴性经可疑转为阳性。结论本次疫情呈现较高发病率,严重影响官兵身心健康。部队需做好布病知识的普及和军队医护人员布病诊疗技术的培训,督促相关部门做好布病的检验检疫工作,科学规划营区,严密防控,使布鲁氏菌潜在的生物威胁得到有效控制。

虎红平板凝集试验与试管凝集试验检测人布鲁菌病抗体的应用探讨

目的观察分析在人布鲁菌病抗体中进行虎红平板凝集试验以及试管凝集试验检测效果。方法选择我疾控中心于2014年至2019年内收到的80例人布鲁菌病患者血清样品为研究对象,将所有样品按照检测方法的不同,分为对照组(40例,进行试管凝集试验检测)和观察组(40例,进行虎红平板凝集试验检测)。对两组样品在检测完成后的效果进行收集和分析。并对两组的敏感度、准确度、阳性率、阴性率以及布鲁菌检出率。结果对照组进行试管凝集试验检测后敏感度80%,准确度为82.50%,观察组进行虎红平板凝集试验检测后敏感度为100%,准确度为97.50%。观察组进行虎红平板凝聚试验检测后敏感性以及准确性明显高于对照组进行试管凝集试验检测后准确性以及敏感性(P<0.05);对照组进行试管凝集试验检测后阳性36(90.00%)例,阴性4(10.00%)例,观察组进行虎红平板凝集试验检测后阳性40(100.00%)例,阴性0例,观察组进行虎红平板凝集试验检测后检测效果明显优于对照组进行试管凝集试验检测后检测效果(P<0.05)。在布鲁菌结果方面上,观察组布鲁菌检出率为95.00%;对照组布鲁菌检出率为77.50%;观察组数据相比较对照组较高(P<0.05)。结论在人布鲁菌病抗体中采用虎红平板凝集试验检测能够提高敏感性和准确性,具有明显检测效果,在实际工作中为保证精确度,往往采用虎红平板凝集和试管凝集试验相结合检测。

布鲁氏菌病几种血清学检测方法的应用分析

目的为了探究常见的4种血清学检测方法对布鲁氏菌病的临床检测效果,提高临床血清学检测质量。方法根据我科室2016年1~12月受涉及的1 460例血清检验档案,分析琥红平板凝集法、胶体金检测法、试管凝集法、酶连免疫法这四种血清检测方法分别对布鲁氏菌病的检验敏感度和特异性。结果 1 460例血清样本中共检出布鲁氏菌病1 231例,检出率为84.32%。以检测方法对布鲁氏菌病的血清检测敏感度排序:胶体金检测﹥间接酶联免疫吸附试验﹥琥红平板凝集试验﹥试管凝集试验,其对比结果具有统计学差异性(P﹤0.05)。结论胶体金检测方法、琥红平板凝集试验、试管凝集试验、间接酶联免疫吸附试验这四种检测方式均能够检出布鲁氏菌病,但几种检测方式的侧重点和使用面不同,在检测时要根据患者具体的病情和需求确定具体的测试方式。

陕西关中地区畜间布鲁氏菌病流行现状分析

为了解2016~2019年陕西关中地区畜间布鲁氏菌病的发病特征及流行态势,对陕西关中地区的9个区县的牛、羊血清共17513份样本进行了虎红平板凝集试验和试管凝集试验。结果表明,2016~2019年布鲁氏菌病的发生逐年下降,呈季节性,多发于春夏高热季节。感染率高的地区主要集中在关中北部和西部,疫情属输入型疫病,分布范围分散,呈扩大趋势。

虎红平板凝集试验与试管凝集试验在布鲁菌病抗体检测中的应用对比

目的 探讨虎红平板凝集试验与试管凝集试验在布鲁菌病(布病)抗体检测中的应用价值。方法 选取2017年7月至2019年7月本中心366例待检的疑似布病阳性标本,全部标本均进行虎红平板凝集试验与试管凝集试验检测,以细菌培养结果为金标准,比较虎红平板凝集试验与试管凝集试验检测结果,评价两种试验方法的诊断效能。结果 虎红平板凝集试验检测布病抗体的阳性率(6.01%)与试管凝集试验(4.64%)比较差异无统计学意义;细菌培养结果显示:366例疑似布病感染者中布病抗体检测阳性患者15例,阳性率为4.10%;虎红平板凝集试验检测布病抗体的敏感度、特异度、准确度、漏诊率和误诊率分别为93.33%、97.72%、97.54%、6.67%、2.28%,试管凝集试验分别为86.67%、98.86%、98.36%、13.33%、1.14%,其中虎红平板凝集试验与试管凝集试验检测布病抗体的准确性比较差异无统计学意义。结论 虎红平板凝集试验与试管凝集试验在布病抗体检测中的准确度均较高,均可有效筛查布病患者,其中虎红平板凝集试验的敏感度较高,试管凝集试验的特异性较高,两种方法互为补充,具有重要的应用价值。

布病血清学检测RBPT与SAT一致性研究

目的寻求快速、简便、准确的布鲁杆菌病临床诊断方法。方法采用布鲁杆菌病虎红平板凝集试验(RBPT)和试管凝集试验(SAT),对疑似布鲁杆菌病患者血清进行同步检验。结果用RBPT和SAT 2种方法同时检测疑似布病患者血清524份,RBPT的阳性率为21.18%(111/524),SAT的阳性率为22.14%(116/524)。在413份RBPT阴性的血清中,有7份SAT阳性,假阳性率为1.69%。RBPT与SAT总体阳性进行比较,敏感度为93.97%,特异度为99.51%。经一致性检验,K值为0.95,2种试验方法的一致性很高;RBPT与SAT 1∶100++及以上阳性者比较,K值为0.60,2种试验方法的一致性不高。结论 RBPT的假阳性率很高,不能替代SAT用于布病临床诊断。