产朊假丝酵母固态发酵麻疯树饼粕产菌体蛋白的研究

利用产朊假丝酵母作为发酵菌株,以提油后的麻疯树饼粕作为培养基,采用固态发酵方式生产菌体蛋白。控制培养基湿度在75%的条件下发酵3d,饼粕中的粗蛋白含量达到最大值35.26%。与未发酵麻疯树饼粕相比,发酵后饼粕的粗蛋白含量提高了48.65%;总氨基酸和必需氨基酸分别提高了17.60%和18.73%,特别是缬氨酸和赖氨酸提高非常明显;饼粕中的粗蛋白体外消化率由3.08%增加到38.91%。发酵后麻疯树饼粕的营养效价得到了较大幅度的提高。

胶体金免疫层析检测犬、猫抗狂犬病病毒IgG抗体的研究

目的建立检测犬、猫抗狂犬病病毒(RV)IgG抗体的胶体金免疫层析方法。方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金用以标记SPA,同时将重组RVN蛋白、抗SPA抗体分别包被至硝酸纤维素膜的检测线与质控线上,制备一种检测犬、猫抗RVIgG抗体的胶体金检测卡,进行了特异性和灵敏度试验,并与ELISA同时检测临床样品、统计结果。结果 GICA试纸条检测灵敏度为0.5IU/mL,与犬瘟热病毒、犬细小病毒等阳性血清无交叉反应,并与ELISA相比,两者的符合率为94.6%。结论成功建立了检测犬、猫抗RVIgG抗体的通用型胶体金免疫层析方法 ,该方法灵敏度高,特异性强,检测速度快,操作简便,可广泛应用于基层。

古尼虫草人工培养物的营养成份含量分析

古尼虫草无性型——古尼拟青霉(Paecilomyces gunnii Liang) 在不同培养条件下,菌丝体干重、蛋白质、氨基酸及维生素含量均有明显差异。在25℃下Ⅱ号培养基菌丝体干重比Ⅰ号培养基高40％以上;蛋白质含量,Ⅱ号培养基高达10.58％,约为对照的1.5倍,为冬虫夏草(Cordyceps sinensis(Berk.)Sacc.)的57％;菌丝体氨基酸含量为冬虫夏草全草和子座的1.5倍以上,维生素E平均含量高达2000mg/100g鲜菌丝体干重以上;维生素C的含量也高于一般粮食和蔬菜,烟酸的含量为酵母的50倍。

血清同型半胱氨酸、超敏C-反应蛋白、载脂蛋白E与脑血管疾病相关性的研究

目的探讨血清同型半胱氨酸(Hcy)、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)、载脂蛋白E(ApoE)与脑血管疾病的关系。方法选择脑血管疾病患者82例,分为两组,其中脑梗死组45例,脑出血组37例,正常对照组50例,测定其血清同型半胱氨酸、超敏C-反应蛋白、载脂蛋白E水平。结果脑梗死组和脑出血组血清Hcy和hs-CRP均有不同程度增高,与正常对照组比较均有显著性差异(P<0.01),ApoE也升高,但差异无统计学意义(P>0.05)。以上指标在脑梗死组与脑出血组的差异无统计学意义(P>0.05),疾病组hs-CRP水平与Hcy水平呈正相关(r=0.465,P<0.01)。结论血清Hcy和hs-CRP升高与脑血管病相关。

TNFα增加血管内皮细胞通透性与其激活P38 MAPK和黏附因子重新分布有关

目的 研究肿瘤坏死因子 (TNFα)对血管内皮细胞通透性的影响及其机理。方法 采用生物素标记白蛋白的酶联免疫吸附法测定人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)单细胞层的通透性 ;免疫荧光、激光共聚焦显微镜和蛋白免疫印迹等方法测定血管内皮黏附因子 (VEcadherin)的分布 ;功能性激酶试验测定有丝分裂原激活蛋白激酶 (MAPK)的活性 ,SB2 0 2 190 (P38抑制剂 )与PD980 5 9(ERK抑制剂 )复合物用于其活性的抑制实验。结果 与对照组比较 ,TNFα明显增加血管内皮细胞的通透性、降低细胞膜VEcadherin的表达 ,诱导P38和ERKMAPK的活性 (P <0 .0 5 )。有趣的是SB2 0 2 190明显降低了TNFα对血管内皮通透性和细胞膜VEcadherin表达的作用 ,而PD980 5 9不能阻止TNFα产生的上述作用。结论 TNFα增加血管内皮细胞的通透性是通过激活P38MAPK信号系统进而抑制VEcadherin在细胞膜的表达和重新分布。

复合酶制剂对蓝狐不同生长期蛋白质消化和代谢的影响

在蓝狐不同生长期日粮中 ,分别添加不同剂量的复合酶制剂 ,利用饲养试验、消化代谢试验等实验手段 ,从营养学角度探讨复合酶制剂对蓝狐蛋白质消化和代谢的影响。研究结果表明 :复合酶制剂能有效提高蛋白质的消化率和代谢率。育成期 ,同对照组相比 ,III组粗蛋白 (CP)消化率和代谢率分别提高了 13 0 5 % (P <0 0 1)和 13 2 8% (P <0 0 5 ) ,在 6组中最高 ;长冬毛期 ,II组粗蛋白的消化率和代谢率最高 ,同对照组相比 ,分别提高了 10 4 3% (P <0 0 5 )和 10 0 9% (P <0 0 5 ) ;复合酶制剂对蓝狐消化、代谢的影响与其剂量有关 ,适宜剂量的复合酶制剂 ,均能有效提高蓝狐对蛋白质的消化、代谢机能 ,可在蓝狐养殖业中推广应用。从蓝狐养殖的经济效益分析 ,育成期复合酶的适宜添加剂量为 0 6 % ;而长冬毛期的适宜剂量为 0 4 %。

邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯对雄性大鼠激素相关基因表达水平的影响

目的:探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯(DEHP)对雄性大鼠睾丸中激素相关基因表达水平的影响,为研究DEHP生殖毒性提供科学依据。方法:40只5周龄雄性SPF级SD大鼠,随机分为对照组(玉米油)、DEHP低剂量组(100 mg/kg)、DEHP中剂量组(500mg/kg)和DEHP高剂量组(1 5 00 m g/kg),每组10只,每天灌胃染毒1次,每周5次,连续染毒6周。于末次染毒24 h后处死动物,实时荧光定量PCR法测定睾丸组织内类固醇快速调节蛋白(StAR)、3β-羟基类固醇脱氢酶(3-HSD)、17-羟基类固醇脱氢酶(17-HSD)、促性腺激素释放激素(GnRH)及雌激素受体(ERα、ERβ)的基因表达水平。结果:与对照组比较,、β基因表达水平在DEHP各剂量组均明显升高,差异均具有统计学意义(P<0.01或P<0.05);17β-HSD基因表达水平在DEHP高剂量组升高(P<0.01),而低剂量组和中剂量组则无明显改变(P>0.05);ERα基因表达在DEHP高剂量组升高(P<0.01);ERβ基因表达在DEHP低剂量组和中剂量组下降(P<0.01),但在DEHP高剂量组升高(P<0.01);GnRH基因表达水平在DEHP中剂量组和高剂量组均显著下降,差异具有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论:DEHP染毒可引起雄性大鼠激素相关基因表达水平改变,干扰雄性激素的合成,可能导致生殖障碍。

清热凉血法对特发性血小板减少性紫癜血小板相关抗体和膜糖蛋白特异性自身抗体的影响

目的:观察清热凉血法对血小板相关抗体、血小板膜糖蛋白自身特异性抗体的影响,探讨中药疗效的作用机理。方法:将60例特发性血小板减少性紫癜患者随机分为治疗组30例、对照组30例,治疗组采用清热凉血法中药煎剂,对照组服用维血宁颗粒,两组疗程均为3个月,并检测两组治疗前后血小板相关抗体(PAIgA、PAIgG、PAIgM)和膜糖蛋白(GPⅡb/Ⅲa、GPⅠb/Ⅸ)特异性自身抗体的水平。结果:治疗组与对照组均能够有效的降低血小板PAIgA、PAIgG含量(P<0.01),且治疗组效果优于对照组(P<0.05);治疗后两组PAIgM均下降,但与治疗前相比无明显差异(P>0.05);治疗后两组膜糖蛋白特异性自身抗体阳性率均降低,治疗组治疗后与治疗前对比有明显差异(P<0.05),对照组治疗后与治疗前对比无显著差异(P>0.05)。结论:清热凉血法能够有效地降低血小板表面PAIgA、PAIgG的含量及血浆中血小板膜糖蛋白特异性抗体。

老年肺癌患者外周血CD44表达及其临床意义

目的 :探讨老年肺癌患者外周血淋巴细胞中粘附分子CD4 4表达及其临床意义。方法 :用流式细胞术定量检测 6 6例老年肺癌患者外周静脉血中CD4 4水平 ,与正常人及慢性支气管炎患者进行相互对照 ,并通过自身对照分析手术前后或化疗前后的变化 ,应用统计学分析比较。结果 :老年肺癌组外周血CD4 4含量为 5 83 5 2± 18 6 4 ,明显高于正常人组 (42 8 37±14 2 5 ,P <0 0 1)及慢性支气管炎组 (44 2 6 3± 15 32 ,P <0 0 1) ,且手术前或化疗前的肺癌患者外周血CD4 4的表达也明显高于手术后或化疗后 (P <0 0 1或P <0 0 5 )。CD4 4的表达水平与患者病理类型不呈相关性 (P >0 0 5 ) ,但与临床分期和组织学分级相关 (P <0 0 1或P <0 0 5 )。结论 :外周血淋巴细胞中CD4 4含量可作为老年肺癌患者诊断的参考指标 ,其表达水平的变化可为临床判断患者疗效。

微流控芯片技术在生命科学研究中的应用及发展

通过对微流控系统的微流量控制器件、微流量控制电路和辅助器件的原理、方法和特点进行介绍,了解微流控芯片技术在生命科学领域的应用及前景。重点阐述微流控芯片技术在蛋白质分析、免疫分析、DNA分析和测序以及生物细胞研究中的应用情况。以微流控芯片为核心的微分析系统将取代当前化学分析实验室的很多设备,使化学分析进入医院病房、生物制品生产现场以及家庭。

应用组织芯片探讨纤维连接蛋白和抑癌基因p53以及Ezrin表达与喉癌生物学行为的关系

目的 探讨纤维连接蛋白 (fibronectin ,Fn)、抑癌基因p5 3和 p81(Ezrin蛋白 )在喉癌中表达 ,及其与喉癌流行病史、病理学分级、临床TNM分期和预后等生物学行为的关系。方法 应用组织芯片技术进行免疫组织化学链霉抗生物素蛋白 过氧化物酶连接法 (streptavidin peroxidaseconjugatedmethod ,SP法 )染色检测 1992～ 2 0 0 0年中手术治疗的 85例喉鳞状细胞癌中FN、p5 3和p81等因子的表达 ,结合临床相关因素进行统计分析。结果 85例中 6例的组织芯片样本中肿瘤细胞较少或无肿瘤细胞。Fn染色 70例中 38例为阴性或低度阳性 ,32例为强阳性 ,在肿瘤T分级中Fn表达有统计学差异 (P <0 0 5 ) ,患者吸烟、性别、年龄、肿瘤组织学分级、肿瘤临床分期、淋巴结转移、生存率等Fn表达无统计学差异。p81阳性细胞比率范围 0 %～ 10 0 % ,平均 5 3 7% ,中位数 5 8 7% ,87 3% (6 9/ 79)有阳性表达。以中位数为界分为 p81高、低表达组 ,两组T分级、临床早晚期、生存率有统计学差异 (P <0 0 5 ) ,但与患者吸烟、性别、年龄、肿瘤组织学分级及淋巴结转移的差异无显著性(P >0 0 5 )。p5 3染色 79例中 37例阳性 (46 8% ) ,平均染色比率为 2 1 6 % ,范围 0～ 90 3% ,中位数为5 9%。p5 3蛋白阳性表达与患者吸烟、性别。

基于分子印迹的蛋白质识别研究进展

分子印迹技术是制备具有分子识别能力聚合物的技术,因具有构效预定性、特异识别性和广泛实用性三大特性,而在分离纯化、生物化学、生物药学以及医学等诸多领域具有广阔的应用前景。综述了蛋白质分子印迹技术的起源和发展、印迹聚合物的制备、印迹效果评价及在各个领域的应用,并对其应用前景进行了展望。

低密度脂蛋白诱导动脉平滑肌细胞表达MIP-1α mRNA

目的 探讨天然和氧化低密度脂蛋白 (n LDL ,ox LDL)能否诱导培养的兔主动脉平滑肌细胞表达巨噬细胞炎性蛋白 (MIP) 1αmRNA。方法 将培养的兔主动脉平滑肌细胞暴露于n LDL、ox LDL后 ,分别用原位分子杂交法及逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测其MIP 1αmRNA的表达。结果 培养的兔主动脉平滑肌细胞能表达低水平的MIP 1αmRNA ,天然及氧化低密度脂蛋白能增强平滑肌细胞表达MIP 1αmRNA ,组间差异有极显著性意义 (P <0 0 1)。结论 n LDL和ox LDL通过诱导平滑肌细胞表达MIP 1α 。

产酱香芽孢杆菌几种发酵产物的测定

[目的]测定产酱香芽孢杆菌发酵产物中总酸、氨基酸态氮、粗蛋白的含量。[方法]采用滴定法及凯氏定氮法对芽孢杆菌发酵产物中总酸、氨基酸态氮、粗蛋白含量进行测定。[结果]经发酵后样品总酸含量在发酵中期明显增加,后期缓慢下降;氨基酸态氮含量持续增加;粗蛋白含量逐渐减少。[结论]采用滴定法及凯氏定氮法可快速对产酱香芽孢杆菌代谢产物含量进行测定。

PA、Hs-CRP、CRP与早产儿胎龄和胎膜早破的关系

目的:探讨早产儿血清前白蛋白(PA)、超敏C反应蛋白(Hs-CRP)、C反应蛋白(CRP)水平与早产儿出生时胎龄和有无胎膜早破及胎膜早破时间的关系。方法:对出生48h以内、胎龄及出生史明确的早产儿80例,分别于生后24～48h内检测血清PA、Hs-CRP、CRP水平;同时摘记早产儿的临床相关资料,包括胎龄、有无胎膜早破及胎膜早破时间。结果:在不同出生胎龄(<32周、32～33+6周、34～36+6周)的早产儿组间,血清PA、Hs-CRP、CRP水平的差异均无统计学意义(P>0.05)。在无胎膜早破及胎膜早破<6h、6～24h、>24h分娩的4组间,PA浓度的差异均无统计学意义(P>0.05);Hs-CRP、CRP水平的差异有统计学意义(P<0.05～P<0.01),胎膜早破>24h组血清Hs-CRP和CRP均高于其他各组(P<0.05～P<0.01)。结论:早产儿血清PA、Hs-CRP、CRP水平与早产儿的出生胎龄无关;Hs-CRP和CRP水平与胎膜早破时间长短有关,胎膜早破>24h血清Hs-CRP和CRP水平明显增高;PA水平与有无胎膜早破和胎膜早破时间长短均无关。

视网膜脱离患者血清及视网膜下积液蛋白质结构分析

目的探讨视网膜脱离患者血清及视网膜下积液（ＳＲＦ）蛋白质结构改变。方法首次用ＦＴＲａｍａｎ和ＦＴＩＲ光谱及利用相关峰积分的半定量方法对视网膜脱离患者血清及ＳＲＦ的蛋白质结构变化进行研究。结果发现患者血清与健康人血清的两种光谱非常相似，他们均有酰胺Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ，但患者ＳＲＦ的芳香族基团的谱峰明显高于血清。结论视网膜脱离患者ＳＲＦ的芳香族结构明显改变，可能引起视网膜脱离。

急性冠状动脉综合征患者巨噬细胞集落刺激因子变化及其与氧化低密度脂蛋白关系

目的 :观察冠心病不同类型患者中巨噬细胞集落刺激因子 (MCSF)水平的变化及其与氧化低密度脂蛋白 (ox LDL)之间的关系 ,进一步探讨急性冠状动脉综合征预测的炎症指标。 方法 :采用酶联免疫法检测急性冠状动脉综合征组 (n =46)、稳定性心绞痛组 (n =45)和正常对照组 (n =40 )血浆MCSF及ox LDL水平。 结果 :3组血清MCSF、ox LDL的水平。血清MCSF和ox LDL水平在急性冠状动脉综合征组均显著高于稳定性心绞痛组和正常对照组 (P均 <0 0 0 1) ;稳定性心绞痛组血清MCSF和ox LDL水平均显著高于正常对照组 (P <0 0 5和 <0 0 0 1)。急性冠状动脉综合征组MCSF水平与ox LDL呈显著正相关 (r=0 571,P <0 0 0 1)。 结论 :急性冠状动脉综合征患者血清MCSF和ox LDL水平均明显升高 ,且两者呈显著正相关。从临床角度提示MCSF和ox LDL可能相互作用 ,促进了急性冠状动脉综合征的发生。

缩短凯氏定氮法消化时间的探讨

将过氧化氢溶液应用于凯氏定氮法的消化过程中，消化时间由原来的2．5～3h缩短至1h。试验结果表明，此方法快速简便、精密准确。

普罗布考对兔动脉粥样硬化模型主动脉凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1表达的研究(英文)

目的观察普罗布考对兔动脉粥样硬化模型高胆固醇血症、主动脉内皮功能及LOX-1表达的影响。方法新西兰大白兔随机分为正常对照组(普通饮食,6只),高脂饮食组(高脂饮食,10只)及普罗布考组(高脂饮食+普罗布考200mg/kg·d,10只)。实验开始前及第12周分别耳缘静脉采血测定血清总胆固醇。第12周处死动物,取胸主动脉,制备离体胸主动脉环对乙酰胆碱的反应以检查内皮功能,RT-PCR与免疫印迹检测凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)基因与蛋白质表达水平。结果普罗布考可以显著降低兔动脉粥样硬化模型血清总胆固醇浓度;防止高脂血症兔胸主动脉对乙酰胆碱引起的内皮信赖性舒张(E-DR)反应明显降低;以及下调模型动脉主动脉明显增强了LOX-1表达。结论兔动脉粥样硬化模型内皮功能损伤的机制与LOX-1表达增强有关,普罗布考保护内皮功能可能的机制是下调LOX-1表达的作用。

524例2型糖尿病患者血脂分析

目的：了解2型糖尿病患者血脂异常的特点及可能的影响因素.方法：对524例在院2型糖尿病患者的甘油三脂（TG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白（LDL-C）、高密度脂蛋白（HDL-C）、糖化血红蛋白（HbA1C）、尿微量白蛋白（Alb）等进行测定,并进行分析.结果：2型糖尿病血脂异常患病率为58.4 % ,且以HDL降低,TG升高为主,其次TC升高,LDL升高最少;HbA1C、Alb 对血脂影响不明显.结论：2型糖尿病合并脂代谢异常的患病率高可能是2型糖尿病病人易发生心脑血管并发症的重要原因.